穿心莲通过阻滞电压调控的钙通道和抑制钙离子内流引起子宫松弛

穿心莲的粗提取物可预防狗因再灌注损伤引起的心肌缺血,该作用与其在心肌缺血再灌注过程中降低 Ca~(2+)超载有关。因而推测该植物可影响钙介导的收缩反应并引起平滑肌松弛。在该项研究中作者证实了穿心莲可阻滞电压调控的钙通道并抑制经雌二醇处理的大鼠子宫平滑肌 Ca~(2+)内流。实验用该植物的70%乙醇提取物(含6%穿心莲内酯)。SD 雌性大鼠肌肉注射1     

荨麻抑制前列腺增生作用物质基础研究

通过抑制5α-还原酶、前列腺增生(BPH)大鼠模型,确定二氯甲烷、乙酸乙酯部位为荨麻治疗BPH的活性部位.采用半制备HPLC、NMR等方法,从活性部位中分离、鉴定了28个成分:lobechine methyl ester(1)、邻苯二甲酸二丁酯(2)、亚油酸甘油酯(3)、表松脂酚(4)、羟基二氢博伏内脂(5)、E-7,...     

HPLC同时测定大豆甾醇提取物中β-谷甾醇和豆甾醇的含量

植物甾醇广泛存在于人体和动物体内，具有多种生物活性，被认为是降低胆固醇的有效物质。近年来，对植物甾醇的研究日益活跃，国内外药理及临床研究表明，植物甾醇如β-谷甾醇、豆甾醇等有明显的降血脂、消炎、抗溃疡、抗肿瘤作用。关于甾醇类化合物的含量测定方法，     

葫芦巴对大鼠实验性前列腺增生的影响

目的:观察葫芦巴提取物对前列腺增生大鼠的影响。方法:去势大鼠皮下注射睾酮5mg/kg,同时给予葫芦巴提取物连续28天,检查前列腺病变情况,取相同部位前列腺组织,以免疫组化定量技术对α-SMA抗原进行检测。结果:葫芦巴提取物高剂量组(2g/kg)、中剂量组(1g/kg)能显著降低前列腺重量和前列腺指数,显著降低前列腺腺腔直径和腺上皮高度;葫芦巴提取物各剂量组均可降低前列腺组织中α-SMA的表达。结论:葫芦巴提取物能抑制前列腺增生,机理之一与该药抑制了前列腺组织中平滑肌细胞的增生可能有关。     

消瘀泄浊饮对肾间质纤维化大鼠的肾脏保护作用研究

目的:探讨消瘀泄浊饮对UUO模型大鼠的保护作用及作用机制。方法:实验采用UUO大鼠模型,将32只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)、洛汀新治疗组(B组)、消瘀泄浊饮组(X组)。分组用药并监测体重,给药14天后处死大鼠。测定大鼠左肾指数,血清肌酐、尿素氮、白蛋白水平;肾组织HE染色观察病理改变;用免疫组织化学方法检测肾组织α-SMA的表达。结果:消瘀泄浊饮能够明显降低实验大鼠血清肌酐、尿素氮水平,升高白蛋白水平,能降低肾组织中α-SMA蛋白表达,与模型组比较有显著性差异,形态学观察也显示其肾脏损害轻于模型组。结论:消瘀泄浊饮能有效地延缓肾间质纤维化的进程,可通过抑制α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化和形成,从而起到抗肾纤维化的作用。     

益肾解毒汤对UUO实验性大鼠肾功能及CTGF、α-SMA蛋白表达的影响

目的:探讨益肾解毒汤对UUO实验性大鼠肾血清肌酐、血清尿素氮及血清CTGF、α-SMA的影响。方法:采用单侧输尿管结扎术(UUO)建立大鼠肾纤维化模型。90只Wistar大鼠分为假手术组、模型组、益肾解毒汤低、中、高剂量组及贝那普利组。在7天、14天、21天不同时间点,观察实验大鼠治疗前后肾功能变化情况;采用免疫组化二步法检测肾组织中CTGF、α-SMA蛋白表达水平。结果:益肾解毒汤各治疗组大鼠血肌酐、血尿素氮水平均有所降低,与模型组比较有显著性差异(P0.05);益肾解毒汤高剂量组能减少肾间质中CTGF、α-SMA的过度表达,效果明显,与贝那普利组比较有显著性差异(P0.05)。结论:益肾解毒汤能下调肾间质组织CTGF、α-SMA蛋白表达水平,保护肾功能,对UUO模型大鼠肾间质纤维化进程有显著的干预作用。     

β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒体膜电位ΔΨm变化。结果β-谷甾醇、豆甾醇均明显抑制SMMC-7721细胞增殖,使细胞形态发生典型凋亡变化,凋亡率和细胞内Ca2+、ROS的含量均显著增加,线粒体膜电位降低。β-谷甾醇使细胞周期阻滞在G2/M期,而豆甾醇则同时阻滞在S期和G2/M期。结论β-谷甾醇、豆甾醇具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导细胞凋亡的作用。     

健脾补肾、和解泄浊法抑制肾间质纤维化的实验研究

目的 观察补肾排毒合剂对单侧输尿管梗阻（UUO）后大鼠肾间质α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）表达的影响及对肾间质纤维化的保护作用。方法 采用UUO诱导肾间质纤维化的动物模型，将48只Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（UUO）和补肾排毒合剂治疗组（REM），每组分别于造模后3、10、20、30d各处死4只，取左肾组织行HE染色，动态观察肾脏病理学变化，评定各组肾小管间质损害程度，以免疫组化方法测定肾组织中α—SMA、Col Ⅳ。结果 与UUO组比较，REM组大鼠肾间质病变程度明显减轻，α-SMA、Col Ⅳ在肾间质中的表达也有明显降低。结论 补肾排毒合剂可通过降低α—SMA、Col Ⅳ的表达，减少肾间质细胞外基质合成，延缓肾间质纤维化的进展。     

外用复方中药对兔耳增生性瘢痕挛缩的抑制作用

目的观察一种防治瘢痕的外用复方中药瘢痕膏对兔耳增生性瘢痕挛缩的抑制作用。方法选用8只新西兰大耳白兔建立兔耳增生性瘢痕动物模型。实验组于创面上皮化时即开始用瘢痕膏,并设立空白对照。用药后第30天及第100天观察两组瘢痕组织的外观形态,应用ABC免疫组织化学法染色测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),利用计算机辅助病理图象分析系统测定并纪录每张切片阳性反应区域的平均面积百分比和光密度值。结果实验组瘢痕反应较轻,免疫组化染色瘢痕膏组兔耳瘢痕组织α-SMA平均面积百分比和光密度值明显低于对照组(P<0.05)。结论用复方中药对兔耳增生性瘢痕挛缩有抑制作用,对增生性瘢痕有防治作用。     

荷莲豆化学成分的研究

中药荷莲豆具清热解毒、消肿利水之功效,民间亦作为治疗肝炎、肾炎药物。经化学分离鉴定得到棕榈酸(Ⅰ)、α-菠甾醇(Ⅱ)、琥珀酸(Ⅲ)、对羟基桂皮酸(Ⅳ)和硝酸钾(Ⅴ)。Ⅱ、Ⅲ药理作用与其功效相符,Ⅴ含量达1‰,应予重视。     

姜黄素对人前列腺增生间质细胞凋亡及Bcl02,Bax表达的影响

目的:研究姜黄素对人前列腺增生间质细胞凋亡的诱导作用.方法:通过MTT法测定姜黄素抑制间质细胞的增殖效应;TUNEL法检测细胞凋亡;RT-PCR技术检测Bcl-2和Bax mRNA的表达;流式细胞术测定凋亡细胞周期的分布.结果:10,20,40 vLmol·L-1浓度的姜黄素对增生间质细胞的生长均有抑制作用,这种抑制作用具有时间/剂量依赖性(P<0.05).TUNEL结果:与阴性组相比,10,20,40 panol·L-1浓度的姜黄素可以诱导间质细胞发生凋亡,凋亡率依次为(20.52±2.52)%,(48.33±0.75)%,(84.60±0.57)%(P<0.01).RT-PCR结果:姜黄素作用于间质细胞24 h,Bcl-2/Bax mlLNA的水平下降(P<0.05).流式细胞检测发现姜黄素可以诱导人前列腺增生间质细胞周期阻滞于G.期,10,20,40μmol·L-1浓度的姜黄素组细胞G1期分别为(59.3 4±4.9)%,(65.2 4±5.1)%和(71.0±4.7)%.结论:姜黄素可以诱导人良性前列腺增生问质细胞发生凋亡,其机制可能与姜黄素改变凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达有关.     

黄芩苷通过影响miRNA的表达抑制乳腺癌细胞的侵袭转移

目的:从miRNA角度探讨黄芩苷对乳腺癌侵袭与转移的影响及可能的机制。方法:黄芩苷作用于乳腺癌MCF-7细胞,运用免疫组化检测TGF-β和VEGF表达的变化,筛选最佳药物浓度;用miRNA芯片筛选受黄芩苷调控的差异miRNA,qRT-PCR对芯片结果中上调的miRNA进行验证,Western-blot检测Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、p-p38、p53的表达,MTT法检测细胞生存率,Transwell实验检测细胞侵袭与转移,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:用25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L的黄芩苷作用于乳腺癌细胞,免疫组化显示TGFβ、VEGF的表达下降,筛选出最佳药物浓度为50μmol/L;黄芩苷干预后miRNA芯片筛选出miR-126表达上调最明显,并以qRT-PCR验证。黄芩苷或miR-126 mimics作用于乳腺癌细胞后Bcl-2表达水平下降,Caspase-9和Caspase-3的裂解产物、p-p38、p53表达水平提高。Transwell试验表明黄芩苷干预或转染miR-126 mimics后乳腺癌细胞的侵袭转移能力降低,MTT法显示黄芩苷或miR-126 mimics均可抑制乳腺癌细胞的增殖,流式细胞术显示黄芩苷与miR-126 mimics促进癌细胞凋亡。结论:黄芩苷能抑制乳腺癌细胞的增殖及侵袭转移,其机制可能与上调miR-126的表达有关。     

姜黄素对人前列腺增生间质细胞凋亡及Bcl-2,Bax表达的影响

目的：研究姜黄素对人前列腺增生间质细胞凋亡的诱导作用。方法：通过MTT法测定姜黄素抑制间质细胞的增殖效应；TUNEL法检测细胞凋亡；RT-PCR技术检测Bcl-2和Bax mRNA的表达;流式细胞术测定凋亡细胞周期的分布。结果：10，20，40 μmol·L^-1浓度的姜黄素对增生间质细胞的生长均有抑制作用，这种抑制作用具有时间/剂量依赖性(P<0.05)。TUNEL结果：与阴性组相比，10，20，40 μmol·L^-1浓度的姜黄素可以诱导间质细胞发生凋亡，凋亡率依次为(20.52±2.52)%，(48.33±0.75)%，(84.60±0.57)%(P<0.01)。RT-PCR结果：姜黄素作用于间质细胞24 h,Bcl-2/Bax mRNA的水平下降(P<0.05)。流式细胞检测发现姜黄素可以诱导人前列腺增生间质细胞周期阻滞于G₁期，10，20，40 μmol·L^-1浓度的姜黄素组细胞G₁期分别为(59.3±4.9)%，(65.2±5.1)%和(71.0±4.7)%。结论：姜黄素可以诱导人良性前列腺增生间质细胞发生凋亡，其机制可能与姜黄素改变凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达有关。     

Ligustilide inhibits spontaneous and agonists- or K+ depolarization-induced contraction of rat uterus

In the present study, the effects of ligustilide (LIG) on uterine contraction in vitro were investigated. In isolated rat uterine, LIG (2-8 microg/ml) inhibited the spontaneous periodic contraction in a concentration-dependent manner (EC(50)=4.4 microg/ml, 95% confidence interval 2.7-6.1 microg/ml), and attenuated prostaglandin F2alpha (PGF(2)alpha)- or acetylcholine chloride (Ach)-induced uterine contractions. At 8 microg/ml, LIG nearly completely blocked the PGF(2)alpha-induced contractions (95.3%). In the case of Ach-induced contraction, about 73.9% was inhibited by LIG at this dosage. It was also observed that LIG affected significantly oxytocin-induced increase in the contraction of uterine horns that were incubated not only in the Locke solution but also in a Ca(2+)-free solution. In addition, LIG caused concentration-dependent inhibition of uterine contraction induced by K(+) (56.3 Mm) depolarization, reaching the significant level at 2 microg/ml (EC(50)=3.3 microg/ml, 95% confidence interval 2.5-4.1 microg/ml). The findings clearly show that LIG has multiple effects on the uterine smooth muscles, suggesting that LIG possesses a non-specific antispasmodic function. The data also imply strongly that LIG is one of active ingredients of Danggui and has the potential to be developed into an effective drug for the prevention and treatment of primary dysmenorrhoea.     

抑制内皮素诱导的肝星状细胞收缩的中药成分筛选

目的:观察5种经研究有抗肝纤维化作用的中药成分:灯盏花素、青蒿琥酯、红景天苷、黄芪总甙、粉防已碱对肝星状细胞(HSCs)收缩的影响,筛选出能抑制HSCs收缩的中药成分。方法:分离培养大鼠HSCs,通过MTT及细胞形态观察研究100～0.1μmol/L灯盏花素、青蒿琥酯、红景天苷、黄芪总甙、粉防已碱对HSCs增殖及毒性作用,以10nmol/L内皮素(ET-1)为刺激因子,用凝胶收缩实验观察各中药成分对ET-1刺激下HSCs收缩的影响,筛出能抑制HSCs收缩的成分,凝胶面积用"%原始面积"表示。结果:100～0.1μmol/L灯盏花素、青蒿琥酯、黄芪总甙、粉防已碱具有浓度依赖性地抑制HSC增殖的作用,其中100μmol/L黄芪总甙,100μmol/L及10μmol/L粉防己碱对HSCs有毒性作用。100μmol/L及10μmol/L灯盏花素凝胶面积分别为74.33±5.5%和67.39±3.47%,与ET-1组面积(49.96±4.46%)相比有显著差异(P﹤0.01);100μmol/L及10μmol/L青蒿琥酯凝胶面积分别为79.62±1.95%和58.86±2.99%,与ET-1组面积(39.85±3.12%)相比有显著差异(P﹤0.01)。100～0.1μmol/L红景天苷、10～0.1μmol/L黄芪总甙和1及0.1μmol/L粉防己碱凝胶面积与ET-1组相比无明显差异。结论:5种中药成分中,100及10μmol/L灯盏花素及青蒿琥酯均能抑制ET-1诱导的大鼠HSCs收缩。     

Andrographis paniculata (Ness) induces relaxation of uterus by blocking voltage operated calcium channels and inhibits Ca(+2) influx

The possible relaxation of uterine smooth muscle by Andrographis paniculata dried extract via a blockade of voltage operated calcium channels was investigated in rats. Uterine horns pretreated with oestradiol were incubated in Ca(+2) -free Jalon's solution and stimulated with KCl (20-60 mM) in order to produce depolarization of the membrane. The isometric contractile response to 1 mM or cumulative concentrations of CaCl2 were blockaded by 0.2, 0.4 and 0.8 mg/mL of A. paniculata. The maximum contractile response induced by acetylcholine was moderately antagonized by A. paniculata. The possible blockade of Ca(+2) entry by A. paniculata was evaluated with (45)Ca(+2) uptake in uterine rings incubated with free-Ca(+2)-Ringer's solution high in K+ (KCl 40 mM). The influx was completely blockaded with 0.4 mg/mL of A. paniculata. These results strongly suggest that A. paniculata blockades voltage operated calcium channels inhibiting the entry of Ca(+2) from the external medium.     

二甲双胍抑制高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖作用机制的进一步研究

目的探讨二甲双胍抑制高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用机制。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)分为2组,AICAR组分为正常对照(NC)组(葡萄糖浓度5.6 mmol/L)、高糖(HG)组(葡萄糖浓度30 mmol/L)、HG+AICAR组(葡萄糖浓度30 mmol/L+AICAR浓度2.0 mmol/L)、HG+AICAR+二甲双胍组(葡萄糖浓度30 mmol/L+AICAR浓度2.0 mmol/L+二甲双胍浓度200 mmol/L)4个亚组,Compound C组分为NC组、HG组、HG+Compound C组(葡萄糖浓度30 mmol/L+Compound C浓度0.5 mmol/L)、HG+Compound C+二甲双胍组(葡萄糖浓度30 mmol/L+Compound C浓度0.5 mmol/L+二甲双胍浓度200 mmol/L)4个亚组,作用时间均为24 h,MTT法检测各组HBZY-1细胞增殖的情况;如上分组,作用12 h,用Western blot法检测各组细胞内p-单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(p-AMPK)和AMPK蛋白表达的变化。结果①与NC组相比,高糖刺激24 h后HBZY-1增殖明显(P均0.01);与HG组相比,加AICAR干预后HBZY-1增殖明显抑制,加Compound C干预后系膜细胞进一步增殖,均有显著性差异(P均0.01);与HG+AICAR组相比,加二甲双胍干预后HBZY-1增殖进一步抑制,有显著性差异(P0.01);与HG+Compound C组相比,加二甲双胍干预后HBZY-1增殖明显抑制,有显著性差异(P0.01);②与NC组相比,高糖刺激24 h后HBZY-1细胞内p-AMPK表达水平明显下降(P均0.01);与HG组相比,加AICAR干预后p-AMPK表达水平明显升高,加Compound C干预后p-AMPK表达水平进一步下降,均有显著性差异(P均0.01);与HG+AICAR组相比,加二甲双胍干预后HBZY-1细胞内p-AMPK表达水平进一步升高,有显著性差异(P0.01);与HG+Compound C组相比,加二甲双胍干预后p-AMPK表达水平明显升高,有显著性差异(P0.01)。结论二甲双胍可能通过增加肾小球系膜细胞内p-AMPK的表达水平来抑制HBZY-1的增殖。     

蝙蝠葛苏林碱抑制NMDA引起的细胞游离钙升高而减少神经毒性

 目的:研究蝙蝠葛苏林碱(daurisoline,DAU)拮抗N-甲基-D-精氨酸(N-methyl-D-aspratate,NMDA)引起的神经毒性作用,并对其作用机制进行了分析?方法:NMDA损伤原代培养的海马神经细胞;培养细胞内游离钙浓度的测定;大鼠动脉条内⁸⁶Rb⁺外流率的测定?结果:DAU能对NMDA损伤的原代培养的海马神经细胞有明显的保护作用,能剂量依赖性的抑制损伤后培养细胞中LDH的释放;DAU还能剂量依赖性的抑制KCl,Bay,K8644,NMDA,去甲肾上腺素(NE)以及咖啡因(caffeine)刺激的细胞内游离钙浓度的上升,但并不影响静息的或由钾通道开放剂吡哪地尔(pinacidil,PIN)刺激的大鼠动脉条内⁸⁶Rb⁺的外流率?结论:DAU通过阻断NMDA引起的细胞钙升高而拮抗神经毒性?     

龙牙楤木总皂苷对缺血/再灌注心肌细胞收缩功能和钙瞬变的影响

为探讨龙牙楤木总皂苷(AS)对缺血/再灌注(I/R)诱导大鼠心肌细胞损伤的保护作用,采用乳酸钠灌注液灌注成年大鼠的心室肌细胞模拟缺血,含钙台式液模拟再灌注,细胞收缩与离子浓度同步测定系统同步检测AS对单个I/R细胞收缩和钙瞬变的影响.发现AS使再灌注后心肌细胞静息态肌小节长度、收缩幅度、收缩/舒张速度以及钙瞬变幅度、速度增大(P ＜0.05,P＜0.01),细胞达到舒张时最大长度的90.0％的时间、细胞收缩达峰值的时间、稳态钙静息值、收缩期[Ca2+]i上升到最高的50.0％的时间、胞内钙瞬变衰减率减少(P ＜0.05,P＜0.01).因此,推测AS改善了缺血再灌注后细胞收缩与钙稳态的损伤.     

Endothelium-dependent contraction of rat thoracic aorta induced by gallic acid

The vascular effect of a component of hydrolysable tannins, gallic acid, was examined in isolated rat thoracic aorta. Gallic acid exerted a contractile effect on the phenylephrine- or prostaglandin F(2/alpha)-precontracted endothelium-intact arteries. In endothelium-denuded arteries, the contractile response to-gallic acid was absent. Pretreatment with N(G)-nitro-L-arginine methyl ester (30 microM) abolished the gallic acid-induced contraction. Pretreatment with indomethacin (10 microM) or BQ610 (100 nM) had no observed effect. Pretreatment with gallic acid (1-10 microM) significantly attenuated the relaxation induced by acetylcholine, and that with 10 microM gallic acid also reduced the potency of sodium nitroprusside in the relaxation, without a reduction in efficacy, in endothelium-denuded arteries. These findings indicate that gallic acid induced endothelium-dependent contraction and strongly inhibited the endothelium-dependent relaxation rather than the endothelium-independent relaxation, probably through inhibition of endothelial nitric oxide (NO) production. Since NO plays an important role in vasodilative regulation and inflammatory disorders, these findings may also indicate that gallic acid interferes with the inflammatory responses.