小鼠腹腔细胞作为人杂交瘤细胞饲养细胞的实验研究

在人杂变瘤细胞克隆化过程中，常规采用人外周血淋巴细胞(PBL)作为饲养细胞．但因PBL制备比较繁琐，来源有限，给实际工作带来不便。我们试用小鼠腹腔细胞作饲养细胞，并与PBL对比，证明两对人杂变瘤细胞的克隆化率及用性率没有显性差别。现将结果报告如下。     

细胞舍生

细胞舍生山西医学院（０３０００１）何泽涌，杨美林（接上期）以糖皮质激素，或抗ＣＤ３—ＴＣＲ抗体，或与调控Ｃａ２＋通道相关受体的配体作为信号，对胸腺细胞膜作用后，都使细胞质Ｃａ２＋浓度持续增高，细胞核内的核酸内切酶随之活化，细胞舍生。因此认为细胞质Ｃａ...     

细胞舍生

细胞舍生山西医学院（０３０００１）何泽涌，杨美林（一）细胞舍生是细胞的一种死亡方式。这是在体内正常的微环境中，通过细胞自身内部的某些生化反应，如某种蛋白质的合成，或某种酶的活化等等而致的细胞死亡。细胞舍生是有选择性的，即在体内同一微环境内，有的细胞舍...     

高浓度大鼠肝实质细胞与非实质细胞共培养的细胞功能研究

目的:高浓度肝实质细胞与非实质细胞原代共培养,研究其功能活性。方法:应用原位胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞,获得有活性的肝细胞,并应用高浓度实质和非实质肝细胞共培养的方法原代培养（共培养组）,并以微囊肝细胞培养为对照组（微囊组）进行了比较。结果:两组均维持白蛋白分泌、尿素合成功能7天;共培养组的白蛋白分泌与微囊组一样为下降趋势,共培养组从（0.870±0.102）降至（0.492±0.040）g·L-1·10-6cells·24h-1,微囊组从（1.147±0.099）降至（0.375±0.012）g·L-1·10-6cells·24h-1;共培养组的肝细胞第4天后维持在一个较稳定的水平,而微囊组肝细胞前3天明显高于共培养组,而后两天显著低于共培养组（P<0.05）。共培养组的尿素合成功能,由（4.50±0.56）降至（4.37±0.19）μmol·L-1·10-6cells·90min-1,微囊组由（5.42±0.81）降至（3.60±0.33）μmol·L-1·10-6cells·90min-1,前3天微囊组高于共培养组,后2天共培养组明显高于微囊组（P<0.05）。共培养2～7天肝细胞的对氨基苯甲酸（PABA）浓度稳定在 7.2～9.9mg/L·10-6cells·24h-1。结论:高浓度肝实质细胞与非实质细胞共培养,可使肝细胞的特异性功能维持7d,而且较微囊肝细胞更适合应用于中空纤维舱型生物人工肝。     

T细胞淋巴瘤细胞凋亡的基因调控

凋亡（Apoptosis）是细胞坏死之外的一种细胞死亡方式，即所谓细胞程序化死亡（Programmedcelldeath），是指正常细胞的“生理性”死亡过程。它是一个有序的过程，是以细胞内源性内切酶活性增加为代表的一系列生化代谢的变化[1]。细胞先是接收、识别某些特殊的生理或病理性刺激信号，然后启动细胞特有的基因或基因群，通过mRNA的转录，合成一组有致死效应的蛋白质，从而导致细胞的解体死亡[1]。这是一种细胞的“自杀”行为，与细胞的增殖和分化一样，对维持组织的自身稳定具有重要的积极作用。一、调亡的基因调控细胞的调亡受到多种因素的…     

静脉血管平滑肌细胞中的多倍体细胞分析

目的探讨流式细胞术分析静脉血管平滑肌细胞多倍体细胞的方法和意义。方法选取普通级健康成年日本大耳白兔2只,雄性,8月龄,大约3 kg;普通级SD大鼠2只,雄性,8周龄,大约200 g。人大隐静脉为2例心脏冠状动脉旁路移植术中修补血管所得。在麻醉日本大耳白兔和大鼠后开腹腔获取下腔静脉,采用多种酶组合的消化液消化兔、大鼠以及人的静脉血管得到适合流式细胞检测的静脉血管平滑肌单细胞悬液,用碘化丙啶标记细胞,利用细胞流式仪分析兔、大鼠以及人的静脉血管平滑肌单细胞悬液各5 000个细胞,检测细胞DNA含量,DNA含量翻倍的细胞为多倍体细胞。并利用荧光原位杂交技术（FISH）验证阳性对照HEK293细胞系中的多倍体的存在。结果流式结果显示分析的5 000个细胞中,阳性对照HEK293细胞的多倍体细胞为1 355个（27.1%）,从2例患者中取得的大隐静脉多倍体细胞为310个（6.2%）和250个（5.0%）;2只大鼠的下腔静脉平滑肌细胞中多倍体细胞为360个（7.2%）和450个（9%）;2只兔的下腔静脉平滑肌细胞中多倍体细胞分别为270个（5.4%）和305个（6.1%）。结论成年的静脉血管包括人大隐静脉的平滑肌细胞中普遍存在一定比例的多倍体细胞。     

细胞缝隙连接对乳腺癌细胞紫杉醇敏感性的影响

目的：探讨细胞缝隙连接对乳腺癌细胞紫杉醇敏感性的影响。方法：以乳腺癌T47D细胞为研究对象,采用CCK8法检测细胞毒性。结果：紫杉醇（TAX）的细胞毒性有细胞密度依赖性,与低密度相比,细胞在高密度时的毒性显著增加。这说明,细胞在高密度有缝隙连接（Gap Junction,GJ）形成的情况下,TAX的细胞毒性显著增加。此外,细胞在高密度的情况下,分别采用维甲酸（RA）和甘草次酸（18-α-GA）增强或抑制GJ功能,结果发现,RA组的TAX细胞毒性显著高于正常组,相反,给予18-α-GA抑制GJ功能后,TAX的细胞毒性显著降低。结论：增强GJ功能可显著提高乳腺癌细胞对TAX的敏感性。GJ可能是提高TAX对乳腺癌疗效的新靶点。     

细胞毒性死亡机制

细胞毒性死亡机制彭双清军事医学科学院毒物药物研究所（北京１００８５０）各种毒物可通过不同的作用机制引起细胞损伤，其终极结果是靶细胞的死亡。引起细胞死亡的因素很多，但不外乎是内在因素和外在因素。周围环境因素可以是物理的、化学的，还可以是生物的。化学毒物...     

细胞凋亡指数在口腔鳞状细胞癌中的变化

目的 探讨细胞凋亡与口腔鳞状细胞癌(OSCC)预后之间的关系.方法 由活检或外科手术获得诊断的OSCC组织标本经末端脱氧核苷酸转移酶介导的UTP缺口标记(TUNEL)染色以鉴定凋亡细胞,并由阳性细胞百分比表示细胞凋亡指数(AI).结果 化疗后AI显著升高(P＜0.01).虽然未经治疗病例AI在活检组织和外科手术切除组织间没有发生显著变化,但AI的升高与良好预后有关(P＜0.05).结论 AI的升高有可能作为判断未经治疗OSCC患者预后的有用指标.     

牛磺酸与细胞凋亡

牛磺酸(Taurinet)是动物体内的一种含硫氨基酸,它广泛分布于生物体内各组织、器官,主要以游离状态存在于组织间液和细胞内液中,具有广泛的生物学作用。它主要存在于心肌细胞,对心肌细胞、神经细胞、肾脏细胞、平滑肌细胞、肿瘤细胞等细胞的凋亡都有重要的影响,进而能对细胞有一定的保护作用。     

树突状细胞诱导免疫效应细胞对胰腺癌细胞PC3凋亡和抑制的实验研究

目的 观察人树突状细胞(Dendritic cells，DC)体外扩增及其诱导免疫效应细胞对胰腺癌细胞系(PC3)凋亡和抑制作用。方法 用淋巴细胞分离液分离抗凝新鲜全血以获得单核细胞(Peripheral blood mononudear cells，PBMC)，用贴壁法获取DC和去DC的单核细胞(即免疫效应细胞)，并分别用人粒／巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)、人白介素4(IL-4)、人肿瘤坏死因子(TNF—α)、PC3肿瘤相关抗原(PC3TAA)和人白介素2(IL-2)培养正常人或胰腺癌病人DC和免疫效应细胞，5—6天后将DC和免疫效应细胞混合培养1—2天并计数细胞。观察DC生长状况，检测DC表型(CD1a、CD80、CD83、CD86)。用乳酸脱氢酶法(1actate dehydrogenase)和MTT法检测DC诱导免疫效应细胞对PC3的抑制作用，TdT法检测培养上清液对PC3细胞的凋亡作用。结果 体外多种细胞因子和肿瘤相关抗原能有效引起DC增殖，并高表达CD80、CD83、CD86；体外实验中，酶法：最大抑制(杀伤)效率为62．4％，MTT法：最大抑制(杀伤)效率为98．1％；DC培养上清液和DC混合免疫效应细胞培养上清液均能有效地引起PC3凋亡。结论 DC在抗胰腺肿瘤中有重要作用。     

上皮根鞘在无细胞牙骨质和细胞牙骨质形成中的作用研究

目的 观察无细胞牙骨质和细胞牙骨质发育时上皮根鞘细胞的增殖、凋亡的表达,探讨上皮根鞘在非细胞牙骨质和细胞牙骨质形成不同作用.方法 TUNEL法检测牙根发育中上皮根鞘细胞凋亡的情况.比较非细胞和细胞牙骨质形成时上皮根鞘细胞和牙周膜细胞的凋亡阳性表达指数,取α=0.05水准.SP免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA).结果 小鼠出生后第9天,无细胞牙骨质形成阶段,上皮根鞘细胞与牙周组织凋亡阳性表达指数未见显著性差异;出生后第19天,牙根根1/3为细胞牙骨质所覆盖,此时上皮根鞘细胞凋亡阳性表达指数高于牙周组织(P<0.05).结论 细胞凋亡调控上皮根鞘细胞的转归;上皮根鞘细胞在无细胞牙骨质和细胞牙骨质形成中的作用不尽相同.     

细胞舍生

细胞舍生山西医学院（０３０００１）何泽涌，杨美林在未成熟的神经细胞，细胞质的Ｃａ２＋浓度较低，它的免于舍生，主要依赖ＮＴＦ的作用。随神经细胞的成熟，随了向心性输入的增多，细胞质Ｃａ２＋浓度增高，对ＮＴＦ的依赖性逐渐降低［４７］。但若细胞质Ｃａ２２＋过...     

细胞克隆化对CTLL-2细胞纯化的研究

本文介绍CTLL-2细胞在培养中出现不正常,影响检测效果时,利用细胞克隆化方法、克服因重新复苏细胞等条件延误检测结果。提高克隆化纯度细胞,优选细胞最佳期,从而使CTLL细胞检测更敏感,更准确。     

CIK细胞杀瘤实验前后细胞表型与细胞毒性相关性研究

目的为了分析体外细胞因子诱导培养CIK细胞在体外杀瘤实验中的细胞表型变化与其杀瘤活性的相关性及为临床过继免疫治疗提供实验依据。方法采用体外诱导方法扩增培养正常人外周血淋巴细胞及单个核细胞,用CCK-8试剂检测培养14d的CIK细胞对SPC-A-1和BGC-823肿瘤细胞的细胞毒活性,应用流式细胞术测定杀瘤实验前后CD3＋等6种不同表型细胞百分率的变化。结果在与效靶比成正比的条件下,体外实验CIK细胞对两种肿瘤细胞的杀伤率都与CD3＋CD4＋,CD3＋CD4-CD8-细胞比例变化呈正相关（P〈0.05）,都与CD3＋CD25＋,CD3＋CD28＋,CD3＋CD25＋CD28＋细胞比例变化呈负相关（P〈0.05）,对SPC-A-1细胞的杀瘤率与CD3＋CD16＋CD56＋呈正相关（P〈0.05）。结论本研究表明靶细胞抗原在活化细胞中起重要作用,测定培养细胞活化相关表型可以间接监测其杀瘤能力,为临床CIK细胞过继免疫治疗的应用提供实验依据。