利用培养乳鼠心肌细胞建立缺血再灌注损伤实验模型的探讨

利用培养乳鼠心肌细胞，复制缺血再灌注损伤模型，通过观察细胞三磷酸腺苷（ＡＴＰ）、细胞内钙离子（［Ｃａ＾２＋］ｉ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及心肌细胞扫描电镜变化，发现：①缺血３ｈ培养液中ＬＤＨ及［Ｃａ＾２＋］ｉ、ＬＰＯ轻度上升，ＡＴＰ耗竭明显，细胞严重水肿；②再灌注早期ＬＤＨ、［Ｃａ＾２＋］ｉ及ＬＰＯ急剧增加，ＡＴＰ含量逐渐升高，再灌注１ｈ细胞水肿减轻。结果提示：①在常温、缺氧     

乳酸脱氢酶同工酶1试剂盒的研制及探讨

乳酶脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶系指催化同一反应（乳酸丙酮酸）而结构不同的一组酶类。其广泛分布于全身各组织，而ＬＤＨ１绝大部分分布于心肌细胞中［１］，所以当心肌细胞发生病变或损伤时，ＬＤＨ１急剧升高，因此测定ＬＤＨ１对诊断心脏疾病具有较高的灵敏性。国内外测定ＬＤＨ１的方法很多，如：电泳法［２］、免疫化学法、ＥＬＩＳＡ法［３］、单克隆法及化学法［４］等。国内常用的电泳法其过程较长而且繁琐，我们用化学抑制剂及生化分析仪对ＬＤＨ１进行测定并就此方法的科学性、实用性进行了探讨。材料和方法材料（ｌ）化学法（供全…     

中药对培养心肌细胞损伤保护作用的研究进展

本文就近年来有关中药保护心肌细胞的研究情况综述如下。１对缺糖缺氧损伤的保护作用 大量实验研究表明,培养的心肌细胞如缺糖缺氧６／Ｊ’时,则迅速引起细胞内能量耗竭,导致细胞功能受损,ＬＤＨ等酶溢出,并伴有细胞超微结构损害。研究发现,中药能有效地对上述损害起保护作用。张家新［１］研究发现：在ＬＤＨ酶水平显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）的缺糖缺氧心肌细胞培养液中,加入玫瑰茄提取液后,培养液中的ＬＤＨ显著低于未加药物的缺糖缺氧组（Ｐ＜０．０５）,提示该药物能较好的对缺糖缺氧损伤起保护作用。陈兴坚［２］等…     

血液透析患者氧化修饰低密度脂蛋白水平检测与分析

近年来研究发现,氧化修饰低密度脂蛋白（ＯｘｉｄｉｚｅｄＬｏｗＤｅｎｓｉｔｙＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｏｘ－ＬＤＬ）是ＬＤＬ致动脉粥样硬化（ＡＳ）的重要机制［１］,故检测ＯＸ－ＬＤＬ将有助于对动脉粥样硬化性心血管疾病（ＡＳＣＶＤ）的预测［２］。慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）血液透析（ＨＤ）患者主要死于心脑血管疾病［３］。为探讨ＣＲＦ血透患者体内Ｏｘ－ＬＤＬ及其它脂蛋白成分的水平,我们检测了ＣＲＦ２１例ＨＤ患者血浆Ｏｘ－ＬＤＬ及血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、载脂蛋白Ｂ…     

冠心病患者低密度脂蛋白亚组分的分布及氧化易感性的研究

根据低密度脂蛋白（ＬＤＬ）颗粒的大小、密度不同，分成Ａ型和Ｂ型两个亚组分。以Ｂ型为主的ＬＤＬ是动脉粥样硬化（Ａｓ）发生的强危险因素［１，２］。冠心脏病（ＣＨＤ）患者ＬＤＬ氧化易感性同Ａｓ发生程度相关［３］；健康人群中Ｂ型ＬＤＬ亚组分较Ａ型易于氧化［４...     

利用培养乳鼠心肌细胞建立缺血再灌注损伤实验模型的探讨

利用培养乳鼠心肌细胞，复制缺血再灌注损伤模型，通过观察细胞三磷酸腺苷（ＡＴＰ）、细胞内钙离子（［Ｃａ２＋］ｉ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及心肌细胞扫描电镜变化，发现：①缺血３ｈ培养液中ＬＤＨ及［Ｃａ２＋］ｉ、ＬＰＯ轻度上升，ＡＴＰ耗竭明显，细胞严重水肿；②再灌注早期ＬＤＨ、［Ｃａ２＋］ｉ及ＬＰＯ急剧增加，ＡＴＰ含量逐渐升高，再灌注１ｈ细胞水肿减轻。结果提示：①在常温、缺氧、缺糖及限制培养液量的条件下培养乳鼠心肌细胞３ｈ，再在基础培养液（ＭＥＭ）存在下培养１ｈ，能成功复制缺血再灌注损伤模型；②证实了心肌细胞缺血再灌注损伤可能与氧自由基（ＯＦＲ）作用及［Ｃａ２＋］ｉ超负荷有关。     

氧化修饰低密度脂蛋白的蛋白组份可引起巨噬细胞线粒体膜…

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位,观察了氧化修饰低密度脂蛋白对巨噬细胞线粒体膜的损伤及春不同组份（ｍｉｏｅｔｙ）在致损伤中的作用,结果显示Ｏｓ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线粒体膜产生抽伤,用ＧＳＨＰｘ模拟物ｅｂｓｅｌｅｎ清除Ｏｘ－ＬＤＬ上的脂氢过氧化（ＬＯＯＨ）可使损伤减轻２０％,单独的脂质份虽然含有大量的ＬＯＯＨ,但在噬细胞线粒体膜电位无显著影响,而单独的蛋白组份则可引起线粒体膜一下降     

冠心病患者红细胞膜ATP酶活性及血脂水平的变化

观察２１例冠心病患者及正常对照组的空腹血浆甘油三酯（ＴＧ）、总胆固醇（ＴＣ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬＣ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）,红细胞膜Ｎａ＋Ｋ＋ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋ＡＴＰ酶,Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶及红细胞内Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］）的变化。发现冠心病组ＴＧ,ＴＣ,ＬＤＬＣ及红细胞内［Ｃａ２＋］高于对照组;而血浆ＨＤＬＣ,红细胞膜Ｎａ＋Ｋ＋ＡＴＰ酶与Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性低于后者;Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶无变化;Ｎａ２＋Ｋ＋ＡＴＰ酶,Ｃａ２＋ＡＴＰ酶分别与血浆ＴＧ,ＴＣ和ＬＤＬＣ呈负相关,与血浆ＨＤＬＣ呈正相关。根据测定结果,对其发病机制进行了讨论     

不同脂蛋白稳定前列环素生物活性的研究

不同脂蛋白稳定前列环素生物活性的研究李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁前列环素（ＰＧＩ２）具有强大的抗血小板聚集、扩张血管和保护细胞的作用，但其半寿期仅３～５分钟［１］。Ａｏｙａｍａ报道高密度脂蛋白（ＨＤＬ）是ＰＧＩ２的稳定因子，为探讨ＨＤＬ２与ＨＤ...     

心肌酶学在急性心肌梗塞中的应用

心肌酶谱（ＣＫ、ＣＫ－ＭＢ、ＬＤＨ、α－ＨＢＤＨ、ＡＳＴ）是临床诊断急性心肌梗塞（ＡＭＩ）的主要酶学检查［１．２］。其中,尤以肌酸激酶（ＣＫ）及其同工酶（ＣＫ－ＭＢ）对脏器的特异性较高,对心肌梗塞（ＭＩ）、癌瘤、神经肌肉等疾病的诊断及鉴别诊断具有重要意义。利用ＡＭＩ后系列血清活力计算心梗范围（ＩＳＯ）,可发现ＡＭＩ的预后与ＩＳＯ密切相关［３．４］。近年来,将系列血清ＣＫ活力的改变作为监测ＡＭＩ患者溶栓治疗效果的重要生化指标。笔者现结合７０例ＡＭＩ患者的检测结果分析如下。１材料与方法１．１一般资料…     

醋氨酚大鼠肝细胞损伤及其机制的研究

醋氨酚（ＡＡＰ）引起大鼠肝细胞膜损伤发生在肝细胞还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）明显下降之后，提示ＧＳＨ下降是ＡＡＰ损伤肝细胞的原因之一。同步测定培养大鼠肝细胞ＧＳＨ和胞浆自由钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ）的结果证明：加１０ｍｍｏｌ／Ｌ ＡＡＰ培养２．５小时可引起ＧＳＨ显著降低，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明显升高。二巯基苏糖醇（ＤＴＴ）５ｍｍｏｌ／Ｌ可使加ＡＡＰ后，细胞ＧＳＨ仍维持较高水平，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明     

病毒性心脏病抗腺苷酸转位酶自身抗体的研究进展

病毒性心脏病（ＶＨＤ）是指与病毒感染有关的心脏病,包括病毒性心肌炎（ＶＭＣ）及部分扩张型心肌病（ＤＣＭ）。以Ｓｃｈｕｌｔｈｅｉｓｓ为代表的学者发现一种只存在于ＶＨＤ的自身抗体,即抗心肌线粒体腺着酸转位酶（ＡＮＴ）抗体,不仅为ＶＨＤ病因和发展机理研究、亦为其治疗提供了一种新思路。１．抗ＡＮＴ抗体的基础研究线粒体产生的能量需经ＡＮＴ的转移才能进入胞浆,供心肌各种耗能活动所需。ＡＮＴ是位于线粒体内膜最丰富的疏水蛋白质,约占膜蛋白的１２％,分子量约３０ＫＤ,以二聚体形式存在。Ｓｃｈｕｌｚｅ等［１］用分离…     

氧化修饰低密度脂蛋白的蛋白组份可引起巨噬细胞线粒体膜的损伤

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位，观察了氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对巨噬细胞线粒体膜的损伤及其不同组份（ｍｏｉｅｔｙ）在致损伤中的作用。结果显示Ｏｘ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线位体膜产生损伤，用ＧＳＨＰｘ模拟物ｅｂｓｅｌｅｎ清除Ｏｘ－ＬＤＬ上的脂氢过氧化物（ＬＯＯＨ）可使损伤减轻２０％。单独的脂质组份虽然含有大量的ＬＯＯＨ，但对巨噬细胞线粒体膜电位无显著影响，而单独的蛋白组份则可引起线粒体膜电位下降，其降低程度与Ｏｘ－ＬＤＬ清除ＬＯＯＨ后的降低程度相当，说明Ｏｘ－ＬＤＬ清除ＬＯＯＨ后对线粒体膜的损伤可能是由修饰的载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）产生的。     

病毒性心脏病心肌能量代谢变化

病毒性心脏病（ＶＨＤ）是指与病毒感染有关的心脏病，包括病毒性心肌炎（ＶＭＣ）及部分扩张型心肌病（ＤＣＭ）。其预后与组织学改变的好转或加重并无相关性，而与心脏功能状况关系密切［１］。本文就ＶＨＤ能量代谢变化的研究加以综述。心肌正常能量代谢心肌富含线粒体，线粒体是心肌的产能中枢，其内膜和嵴膜上含有大量呼吸链电子传递及氧化磷酸化的酶系。心肌产生的ＡＴＰ约７０％用于收缩蛋白的相互作用，以维持。心肌的舒缩功能；约２０％用于离子及其它物质的主动转运；约１０％用于蛋白质的生物合成，以保证细胞的修复能力及结构的…     

转化生长因子大黄酸对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白功能的影响

目的 对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白－１（ＧＬＵＴ１）进行鉴定。研究ＧＬＵＴ１的作用特点,ＴＧＦ－β１对其影响以及大黄酸的干预作用。方法 分别用ＲＴ－ＰＣＲ,免疫荧光染色,流式细胞仪和［＾３Ｈ］－２脱氧葡萄糖摄入率,对系膜细胞ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡ表达,蛋白质分布和功能进行鉴定。观察不同浓度ＴＧＦ－β１在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄入以及ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡ表达的影响。结果 人类肾小球系膜     

谷氨酸脱羧酶重组杆状病毒表达载体的构建

谷氨酸脱羧酶 (ＧＡＤ)是胰岛β细胞的一种主要的自身抗原 ,与１型糖尿病细胞免疫和体液免疫均有密切关系。由于抗ＧＡＤ抗体是最重要的免疫学标志之一和可靠的早期诊断指标 ［１］,所以ＧＡＤ抗原的制备对１型糖尿病的早期诊断及其病因和机制的研究都具有重要意义。本实验将ＧＡＤ６５基因在真核细胞中的表达打下基础。１材料和方法１．１菌株Ｅ．ｃｏｉｌＤＨ５α和质粒 ｐＵＣ１８ -ＧＡＤ６５ 均为本室保存 ;ＲＮＡａｓｅ购自华美生物工程公司 ;限制性内切酶ＸｂａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＰｓｔⅠ和Ｔ４-ＤＮＡ连接酶、ＤＬ -２０００Ｍａｒｋ…     

血清乙醇脱氢酶活性测定及临床应用

乙醇脱氢酶 (ＡＤＨ)催化乙醇反应 ,氧化生成乙醛 ,乙醛在体内经乙醛脱氢酶继续催化氧化反应 ,生成乙酸 ,经三羟酸循环 ,彻底氧化供能或作为脂酸、胆固醇等合成原料。体内ＡＤＨ主要在肝脏生成 ,所以肝脏疾患 ,可能与血清ＡＤＨ活性相关。笔者通过报道血清ＡＤＨ活性分光光度测定法并结合临床 ,探讨该项指标在肝脏疾病中的诊断意义。１材料与方法１．１材料１．１ １试剂 :甘氨酸—氢氧化钠缓冲液７ ５ｇ/Ｌ ,ｐＨ９ ０ ;氧化型辅酶Ｉ(ＮＡＤ )５ ５ｍｍｏｌ/Ｌ ;乙醇溶液。１ １ ２正常人血清来自天津市蓟县人民医院献血人员 ,年龄在２０…     

糖尿病视网膜病变与脂质代谢的关系

目的 探讨脂质代谢与糖尿病视网膜病变之间的关系。方法 检测１６８例糖尿病病人血清中的总胆固醇（ＣＨ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）、载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、载脂蛋白Ｂ１００（ＡｐｏＢ１００）和奚蛋白（ａ）［ＬＰ（ａ）］；并同时观察这些病人的视网膜情况。结果 伴有糖尿病视网膜病变的病人血清中的总胆固醇、ＬＤＬ－Ｃ和Ｌｐ（ａ）较不伴有糖尿病视     

糖尿病视网膜病变与脂质代谢的关系

目的探讨脂质代谢与糖尿病视网膜病变之间的关系。方法检测１６８例糖尿病病人血清中的总胆固醇（ＣＨ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）、载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、载脂蛋白Ｂ１００（ＡｐｏＢ１００）和脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］；并同时观察这些病人的视网膜情况。结果伴有糖尿病视网膜病变的病人血清中的总胆固醇、ＬＤＬ－Ｃ和Ｌｐ（ａ）较不伴有糖尿病视网膜病变的病人明显增高，而ＨＤＬ－Ｃ、ＡｐｏＡ１和ＡｐｏＡ１／ＡｐｏＢ１００比例则较无糖尿病视网膜病变的病人明显降低。经Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析，总胆固醇、ＨＤＬ－Ｃ和ＡｐｏＡ１／ＡｐｏＢ１００作为独立的因素仍然与糖尿病视网膜病变相关。结论脂质代谢的异常，可能是糖尿病视网膜病变发生和加重的重要因素。     

中枢5—HT1A受体在大鼠脑中的不同亲和力状态

用特异性配体［＾３Ｈ］８－ＯＨ－ＤＰＡＴ与大鼠脑中不同部位脑组织膜制剂的５－ＨＴ１Ａ受体结合，显示出在海马、延髓、下丘脑的最大结合容量和亲和力有明显不同。各种孵育缓冲液使鼠脑海马、延髓膜制剂与［＾３Ｈ］８－ＯＨ－ＤＰＡＴ的结合呈现乐同的亲和力状态。孵育缓冲液中加入Ｍｎ＾２＋和Ｇｐｐ（ＮＨ）ｐ或均不加时，结合呈高、低两种亲和力状态；而仅加入Ｍｎ＾２＋或同时加入ＥＤＴＡ和Ｇｐｐ（ＮＨ）ｐ时，结合分别呈