银杏达莫联合甲基强的松龙对机械通气所致肺损伤大鼠肺组织蛋白酶激活受体-2的表达及肺组织病理结构改变的影响

捅要目的观察银杏达莫联合甲基强的松龙对机械通气所致肺损伤（VILI）大鼠肺组织蛋白酶激活受体-2（PAR-2）表达及其对肺组织病理结构的影响,为其在肺损伤过程中的临床应用提供理论依据。方法取112只健康雄性SD大鼠,随机分为四大组各28只,对照组（A组）、机械通气肺损伤组（H组）、机械通气肺损伤＋甲基强的松龙组（D组）,机械通气肺损伤＋甲基强的松龙＋银杏达莫组（F组）。机械通气组中每只大鼠采用经环甲膜切开气管插管。各组于机械通气开始时从尾静脉注入等量生理盐水。各组又分为0．5h、1h、2h、3h分为4个亚组,在各时间点用窒息法将大鼠处死,取肺组织在光镜下观察病理改变,PCR法检测PAR-2mRNA的表达,免疫组化检测肺组织PAR-2蛋白的表达,并以SPSS17．0统计软件分析结果。结果A组和H组相比,H组大鼠的肺组织损伤评分、PAR-2蛋白表达明显升高（P〈0．01）;与H组相比,D、F组大鼠肺组织损伤评分、PAR-2蛋白的表达明显降低（P〈0．05）,以F组降低为甚,差异具有统计学意义。结论机械通气所致肺损伤过程中PAR-2的表达明显升高,银杏达莫及甲基强的松龙可能通过抑制炎性反应及PAR-2的表达而在机械通气所致肺损伤过程中起保护作用。     

环氧合酶-2抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤的影响

目的:探讨环氧合酶－2抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤的影响.方法:健康成年雄性SD大鼠30只,随机分为3组(n=10):常规潮气量通气组(TV组,潮气量8 mL/kg)、大潮气量通气组(HV组,潮气量40 mL/kg)、大潮气量通气＋环氧合酶-2选择性抑制剂组(HV+NS398组).HV+NS398组于机械通气前30 min腹腔注射NS398 8 mg/kg.于机械通气4h时处死大鼠,Western Blot法检测肺组织中水通道蛋白1(AQP1)表达;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、血栓素B2(TXB2)含量及总蛋白浓度,计算肺组织湿/干重比(W/D).结果:与TV组相比,HV组AQP1表达降低(P＜0.05),BALF中TNF-α、IL-6、TXB2和总蛋白浓度增加,肺组织W/D升高(P＜0.05);与HV组相比,HV+NS398组AQP1表达升高,BALF中TNF-α、IL-6、TXB2和总蛋白浓度降低(P＜0.05),肺组织W/D降低(P＜0.05).结论:环氧合酶-2抑制剂可能通过上调AQP1的表达及减轻炎性反应程度,而缓解大鼠机械通气所致肺损伤.     

L-硝基精氨酸对大鼠内毒素性肺损伤治疗作用及其机制的研究

目的探讨L-硝基精氨酸（NG—nitro-L—arginine,L—NA）对内毒素性肺损伤大鼠肺表面活性物质（PS）和细胞凋亡的影响,探讨L—NA对肺损伤的保护作用及其机制。方法健康雄性SD大鼠采用舌下静脉注射脂多糖（LPS）复制肺损伤模型,分别于给予LPS 1h和6b后给予0．9％氯化钠溶液（对照纽及LPS组,静脉给药）和L-NA（20mg／kg,静脉给药）（L-NA治疗组）,治疗3h,取肺组织,原位杂交法（ISH）测定肺组织肺表面活性物质蛋白A（SP-A）mRNA;流式细胞术（FCM）检测肺细胞凋亡率;Western blot法检测Caspase-3蛋白的表达;免疫组化法测定Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果与对照组比较,大鼠肺损伤后SP-A mRNA表达明显下降（P〈0．01）;细胞凋亡率、Caspase-3和Bax蛋白表达明显升高（P〈0．01）,Bcl-2蛋白表达和Bcl-2／Bax降低（P〈0．01）;肺损伤1h用L—NA治疗3h后,SP-A mRNA阳性细胞表达明显增强（P〈0．05）,细胞凋亡率降低（P〈0．05）;但Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达、Bcl-2／Bax与LPS组比较没有明显的变化（P〈0．05）,肺组织病理改变减轻,肺损伤6h用L—NA治疗3h对LPS引起的以上变化没有明显影响。结论肺损伤1h后给予L—NA可减轻内毒素性肺损伤,增强PS表达,减少细胞凋亡是其机制之一。     

加味桃仁承气汤对机械通气相关性肺损伤大鼠细胞自噬的影响

目的 探究加味桃仁承气汤通过腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对机械通气相关性肺损伤（VILI）大鼠细胞自噬的影响。方法 将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（Model组）、加味桃仁承气汤低剂量组（中药-L组，2.85 g/kg）、加味桃仁承气汤高剂量组（中药-H组，8.55 g/kg）和加味桃仁承气汤高剂量+AMPK抑制剂Compound C组（中药-H+CC组，加味桃仁承气汤8.55 g/kg+Compound C 250μg/kg），每组12只。于插管即刻和机械通气1 h、2 h与4 h时测定氧合指数（OI）。机械通气结束后收集肺泡灌洗液（BALF），酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BALF中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-18水平；处死大鼠，取肺组织测定湿/干重（W/D）比值；HE染色观察各组大鼠肺组织病理学改变并进行肺损伤评分；透射电镜观察肺泡上皮细胞形态。RT-qPCR检测大鼠肺组织中的AMPK、mTORC1 mRNA表达水平；Western blot检测大鼠肺组织中AMP...     

二硫代氨基吡咯烷对大鼠急性肺损伤保护作用

目的探讨二硫代氨基吡咯烷（PDTC）对内毒素（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织的保护作用及其机制。方法将72只Wistar大鼠随机分为对照组（C组）,LPS组（L组）,PDTC＋LPS组（P组）。各组分为1,3,6,12 h亚组,每组6只。L组和P组制作内毒素性肺损伤模型。P组腹腔注射LPS前30 min尾静脉注射PDTC,120 mg•kg－1,L组和C组给予等体积0.9%氯化钠溶液。观察大鼠肺组织病理变化,肺组织湿/干质量比（W/D）变化,RT PCR法检测大鼠肺组织细胞间黏附分子 1 mRNA （ICAM 1mRNA）的表达,放射免疫法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF α）、白细胞介素6（IL 6）含量变化。结果病理切片显示,与C组比较,L组肺组织结构破坏严重,W/D明显增大,ICAM 1mRNA在各时间点表达明显增强（P＜0.05）,血清TNF α、IL 6含量在1,3,6 h增高（P＜0.05）。与L组比较,P组肺组织结构破坏明显减轻,W/D减小（P＜0.05）,ICAM 1mRNA表达明显减少（P＜0.05）,血清TNF α、IL 6含量1,3,6 h降低（P＜0.05或P＜0.01）。结论PDTC能明显抑制ICAM 1mRNA表达,降低TNF α和IL 6含量,PDTC可能对ALI大鼠有保护作用。     

血晶素诱导HO-1表达增加及对急性肺损伤小鼠MMP-2、MMP-9 mRNA的影响

目的 通过复制急性肺损伤模型,探讨血晶素诱导血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）的表达对于小鼠急性肺损伤的影响.方法 利用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹方法检测急性肺损伤小鼠肺组织基质金属蛋白酶-2 （matrix metalloproteinas-2, MMP-2）、MMP-9 mRNA和HO-1蛋白的表达.结果 血晶素加脂多糖组和对照组比较,HO-1蛋白表达明显增高 （P〈0.05）;脂多糖组与对照组比较,MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达差异有统计学意义（P〈0.05）,血晶素加脂多糖组与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 HO-1降低了急性肺损伤小鼠肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,对于小鼠的急性肺损伤有保护作用.     

潮气量机械通气不同情况下对肺损伤的影响及有效性护理对策

目的分析潮气量机械通气在不同的情况之下对于肺损伤所造成的影响,探讨有效的护理对策。方法把120例患者随机分成对照组、小潮气量机械通气组(通气A组)及大潮气量机械通气组(通气B组),三组各40例,通气A组与通气B组通气的时间皆为4h。检测患者肺组织的总蛋白、白细胞的计数、肿瘤的坏死因子α蛋白与m RNA含量以及中性粒细胞细胞髓的过氧化物酶(MPO)含量,制定相应的护理对策。结果和对照组相比较,通气B组的肺组织的总蛋白、白细胞的计数、肿瘤的坏死因子α蛋白与mRNA含量以及MPO含量皆有明显增加,差异有统计学意义(P0.05);而通气A组上述指标变化不明显,差异无统计学意义(P0.05)。结论大潮气量机械通气会造成呼吸机致使肺损伤,在临床要要加强对于机械通气的护理防护,制定有效的护理对策,采取综合护理干预的方法能够有效的促进患者早日康复。     

机械通气相关性肺损伤大鼠模型的建立与评价

目的 建立机械通气相关性肺损伤大鼠模型并进行评价,确定建立机械通气相关性肺损伤大鼠模型的最适通气条件。方法 选取成年雄性SD大鼠72只,体重250³00 g,随机分为A、B、C、D组（n=18）:对照组（A组,自主呼吸组）,小潮气量（VT）组（B组,VT=6 ml/kg）,常规VT组（C组,VT=10 ml/kg）,大VT组（D组,VT=40 ml/kg）,各组按机械通气时间（2、4、6 h）再随机分为3个亚组（n=6）。A组仅作气管切开插管,其余各组气管切开后接小动物呼吸机行机械通气,呼吸机参数均设置为RR70/min,FiO₂ 21%,PEEP 0 cmH₂O。机械通气结束后处死大鼠,剖胸取右肺组织计算湿重干重比（W/D）,计算细胞凋亡指数,HE染色后光镜下观察肺组织病理学结果,并进行肺损伤评分。比较不同VT及通气时间条件下大鼠的肺损伤情况。结果 与A、B、C组比较,D组通气2 h时开始出现肺损伤病理学表现,通气4 h时肺损伤评分、肺组织W/D和细胞凋亡指数均升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 给予大鼠40 ml/kg VT通气4 h可以成功建立机械通气相关性肺损伤模型。     

糖尿病大鼠肺组织中TGF-β1的表达变化及罗格列酮的作用

目的通过检测2型糖尿病大鼠肺组织中TGF-β1在的表达变化,探讨其在糖尿病肺损伤中的作用及罗格列酮的治疗影响。方法通过高糖、高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）的方法,建立2型糖尿病大鼠模型,采用光镜动态观察12、24周时对照组、糖尿病组及罗格列酮组的大鼠肺组织的形态学改变,用Masson三色染色观察肺组织胶原沉积情况,应用免疫组织化学（immunohisto-chemistry）方法检测各组大鼠肺组织TGF-β1动态表达变化情况。结果糖尿病大鼠肺组织胶原含量明显增多（P〈0.05）,糖尿病组大鼠肺组织TGF-β1表达增多（P〈0.05）,罗格列酮组TGF-β1表达下降（P〈0.05）。结论糖尿病大鼠出现了肺间质纤维化,TGF-β1的含量增加可能与糖尿病大鼠肺间质纤维化的发生有关,罗格列酮治疗降低了糖尿病大鼠肺组织中TGF-β1的含量,减轻糖尿病大鼠肺间质纤维化的程度。     

机械通气大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-1α及核因子-κB的表达

目的通过观察巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)和核因子-κB(NF-κB)在机械通气大鼠肺组织中的表达,探讨MIP-1α及NF-κB在呼吸机所致肺损伤(VILI)发生中的作用。方法 32只雄性健康Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组、常规潮气量组和大潮气量组。分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色方法检测各组大鼠肺组织MIP-1α mRNA及NF-κB p65蛋白表达水平,测定其支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞及中性粒细胞计数。结果大潮气量组和常规潮气量组大鼠BALF中白细胞和中性粒细胞计数,以及细支气管上皮MIP-1α mRNA和NF-κB p65蛋白阳性表达细胞百分比均明显高于小潮气量组和对照组(P<0.01)。对照组与小潮气量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。相关分析结果表明,各组大鼠细支气管上皮MIP-1α mRNA阳性表达细胞百分比与BALF中性粒细胞计数和NF-κB p65蛋白阳性表达细胞百分比之间均呈正相关(r=0.546,r=0.482,均P<0.05)。结论在VILI发生过程中,MIP-1α是导致中性粒细胞在肺内募集、活化的重要细胞因子;肺组织细胞表达MIP-1α在一定程度上可能受NF-κB的调控;机械刺激→NF-κB→MIP-1α信号通路可能是VILI发生过程中细胞内信号传导途径之一。     

酪氨酸蛋白激酶抑制剂对大鼠呼吸机所致肺损伤的保护作用

目的研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂金雀异黄素(genistein)对大鼠呼吸机所致肺损伤(VILI)的保护作用。方法30只健康SD大鼠随机均分成A、B、C3组,A组为正常潮气量机械通气组:潮气量(VT)=8ml·kg-1;B组为大潮气量机械通气组:潮气量(VT)=40ml·kg-1;C组为大潮气量通气加Genistein处理组:潮气量(VT)=40ml·kg-1,C组大鼠实验前30min腹腔注射Genistein溶液(50mg·kg-1)。A、B、C3组机械通气频率(P)均为每分钟80次,通气时间均为2h。实验完毕收集肺组织和肺灌洗液标本。光镜观察肺病理改变,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况,同时测定肺灌洗液中总蛋白、肺湿/干比、白细胞计数、肿瘤坏死因子(TNF-α)等指标以及肺组织中中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)的水平。结果和A组相比,B组肺病理改变明显,肺细胞凋亡数量增加,肺湿/干比、总蛋白、白细胞计数、MPO、TNF-α等指标均增高(P<0.01);和B组比较,C组肺病理改变明显减轻,肺细胞凋亡数量减少,肺湿/干比、总蛋白、白细胞计数、MPO、TNF-α等指标均降低(P<0.05)。结论酪氨酸蛋白激酶抑制剂genistein对大鼠呼吸机所致的肺损伤具有较好的保护作用。     

程序性坏死特异性抑制剂-1对呼吸机相关性肺损伤的保护作用

目的 探讨程序性坏死特异性抑制剂-1（Nec-1）对呼吸机相关性肺损伤（VILI）大鼠的保护作用。方 法 将40只SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸组（C组）、正常潮气量（VT）组（N组）、高VT组（H组）和Nec-1组 共4组,每组10只。C组保持自主呼吸,N组、H组和Nec-1组分别给予8、40、40 mL/kg的VT行机械通气,Nec-1组在 机械通气开始时静脉给予Nec-1（1 mg/kg）。通气4 h后收集支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织标本,测定BALF中 总细胞数、总蛋白水平、白细胞介素（IL）-6、IL-1β及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。测定肺组织湿/干质量比值（W/ D）,HE染色观察肺组织病理学改变并进行肺组织评分;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白 质免疫印迹（Western blot）分别检测肺组织中受体相互作用蛋白 1（RIPK1）、RIPK3 和核转录因子-κB p65（NF-κB p65）的mRNA及蛋白表达。结果 C组和N组大鼠BALF中和肺组织各指标差异均无统计学意义。H组大鼠BALF 中总细胞数、总蛋白、炎性因子 IL-6、IL-1β、TNF-α 水平、肺组织 W/D 比值、肺组织病理评分及肺组织内 RIPK1、 RIPK3、NF-κB p65 的 mRNA 和蛋白相对表达水平较 C 组和 N 组明显升高（P＜0.01）。与 H 组相比,Nec-1 组大鼠 BALF中和肺组织各指标水平下降（P＜0.01）。结论 RIPK1/RIPK3/NF-κB信号传导通路参与大鼠VILI,Nec-1对大 鼠VILI的肺脏具有一定的保护作用。     

不同潮气量、通气时间对家兔呼吸机相关肺损伤模型的影响

目的 探索不同潮气量、通气时间对制作家兔呼吸机肺损伤模型的影响.方法 54只家兔随机分为3组：常规潮气量组（VT10组,VT10 ml/kg）、中潮气量组（VT20组,VT20 ml/kg） 、大潮气量组（VT40组,VT40 ml/kg）;各组内再根据通气时间分别分为2 h、4 h和6 h 3个亚组.监测通气过程中的动脉血气、肺机械力学和血流动力学变化,肺组织大体标本及HE染色观察肺损伤情况,测定肺湿干比、BALF蛋白浓度,计数BALF中有核细胞和中性粒细胞数目.结果 VT10组在各时间点PaO2/FiO2保持稳定,VT20和VT40两组PaO2/FiO2随通气时间延长有下降趋势,其中VT20组通气4 h、6 h后PaO2/FiO2均＜300 mmHg,VT40组通气后2 h、4 h、6 h的PaO2/FiO2值均＜300 mmHg.VT10组肺组织肉眼及光镜下未见明显的改变.VT20组随着通气时间延长,可见一定程度的肺损伤,至通气6 h时,大体标本肉眼可见散在出血点,而VT40组通气2 h后肺组织就出现轻度损伤改变,通气4 h损伤显著.各组家兔的肺湿干比、BALF蛋白含量、有核细胞总数及中性粒细胞计数均随通气时间延长而升高.结论以VT40 ml/kg通气4 h为成功复制呼吸机所致肺损伤家兔模型的最理想条件.     

Neutrophil elastase inhibitor (sivelestat) attenuates subsequent ventilator-induced lung injury in mice

Mechanical ventilation can paradoxically cause acute lung injury, which is termed ventilator-induced lung injury. Neutrophil recruitment and neutrophil elastase release play a central role in the pathogenesis of ventilator-induced lung injury including cell damage, extracellular matrix degradation and alveolar-capillary hyperpermeability. We therefore speculated that neutrophil elastase inhibition ameliorates ventilator-induced lung injury. Anesthetized C57/BL6 mice received mechanical ventilation with a high tidal volume (V(T); 20 ml/kg) for 4 h. The neutrophil elastase inhibitor (sivelestat, 100 mg/kg) or saline was given intraperitoneally (i.p.) 30 min before ventilation. Sivelestat completely inhibited both neutrophil elastase and myeloperoxidase activities that were increased by ventilation, and attenuated the histopathological degree of lung damage, neutrophil accumulation and lung water content, as well as the concentration of macrophage inflammatory protein (MIP)-2, interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-alpha in bronchoalveolar lavage fluid and serum. Moreover, mechanical ventilation increased the phosphorylation of c-Jun NH2-terminal kinase (JNK) and the expression of early growth response gene-1 (Egr-1) mRNA, and these increases were also recovered by sivelestat. The terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end-labeling (TUNEL) staining revealed apoptotic cells mainly in alveolar epithelial cells and their numbers corresponded to histological damage. These data suggested that sivelestat could protect against ventilator-induced lung injury by suppressing apoptotic responses through mechanical stress-induced cell signaling in addition to inhibiting neutrophil chemotaxis.     

Protective effects of hemin in an experimental model of ventilator-induced lung injury

Mechanical ventilation is an indispensable life-support modality for critically ill patients with acute lung injury or acute respiratory distress syndrome. Unfortunately, mechanical ventilation even the protective ventilation strategies may evoke ventilator-induced lung injury. Heme oxygenase-1 (HO-1) has recently exhibited anti-inflammatory and anti-oxidative properties in vitro and in vivo. The effect of HO-1 in ventilator-induced lung injury has not been fully characterized. In this study, rabbits were subjected to high tidal volume ventilation to induce ventilator-induced lung injury, which was confirmed by histopathological alterations, increased bronchoalveolar lavage fluid protein content and lung wet-to-dry ratio. In contrast to the level of HO-1 expression in high tidal volume group, pretreatment with hemin, an inducer of HO-1, further up-regulated HO-1 expression. At the same time, these lung injury indexes were attenuated markedly. This pulmonary protection was accompanied by a decrease in bronchoalveolar lavage fluid neutrophil count and in lung myeloperoxidase activity. Besides, pretreatment with hemin prohibited the production of proinflammatory cytokines, including tumor necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-8, and up-regulated the level of anti-inflammatory cytokine interleukin (IL)-10 in bronchoalveolar lavage fluid. Furthermore, a decreased malondialdehyde activity, a marker of oxidative stress and a robust increase in total antioxidant capacity were observed in hemin-treated animals. Our findings suggest that HO-1 up-regulation by hemin plays a protective role in ventilator-induced lung injury by suppression inflammatory process and oxidative stress.     

小剂量糖皮质激素联合小潮气量、肺复张在重症肺炎肺损伤患儿中的应用

目的:观察小剂量糖皮质激素联合小潮气量、肺复张(RM)治疗重症肺炎肺损伤患儿的临床有效性及安全性。方法:入我院PICU 符合重症肺炎肺损伤患儿42例,随机分为试验组和对照组各21例,所有入选患儿均给予常规治疗、小剂量糖皮质激素,试验组入院24 h内给予小潮气量(VT:6~8 mL/kg)机械通气和RM,对照组只给予机械通气(VT:8~10 mL/kg)。分析两组患儿血流动力学、呼吸力学、血气变化、预后及并发症。结果:试验组患儿在小剂量糖皮质激素、小潮气量基础上共进行RM操作73例次, RM后5 min、15 min、60 min气道峰压、呼吸频率、呼气末压力、吸气氧体积分数、平均气道压水平均低于RM前(P<0.05);呼吸频率、平均动脉压RM前后比较差异无统计学意义(P>0.05);两组血气分析均较通气前改善(P<0.05);通气后两组患儿PaO2 / FiO2、肺动态顺应性、呼气功比较差异有统计学意义(P<0.05);试验组机械通气时间、吸氧时间、住院时间均较对照组短,并发症较对照组减少(P<0.05)。结论:小剂量糖皮质激素联合小潮气量、RM可以改善重症肺炎肺损伤患儿氧合功能,提高患儿肺的顺应性,患儿耐受性良好,能缩短患儿机械通气时间、氧暴露时间、住院时间,减少不良反应。     

低潮气量机械通气在全身麻醉中的应用

目的 探讨全身麻醉应用低潮气量（VT）机械通气的可行性.方法 回顾分析2005年1月至2013年3月在全身麻醉下行择期手术患者200例,按照机械通气VT不同分为两组,各100例.Ⅰ组VT 8～10 mL/kg,应用传统潮气量通气;Ⅱ组VT 6～〈8 mL/kg,应用小潮气量通气.比较术中两组患者呼气末二氧化碳（PETCO2）、气道压、血氧饱和度（SpO2）、胸肺顺应性等相关指标.结果 两组SpO2比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;Ⅱ组术中PETCO2 高于Ⅰ组,差异有统计学意义（P＜0.05）;Ⅱ组术中气道平台压、气道峰压低于Ⅰ组,差异均有统计学意义（P＜0.05）,而两组胸肺顺应性比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 低VT机械通气作为一种肺保护通气策略应用于全身麻醉是可行的.