抑癌基因PML在宫颈病变组织中的表达

目的探讨抑癌基因早幼柱细胞性白血病基因（promyelocytie leukemia,PML）在宫颈病变组织中表达量的变化。方法选取以下宫颈病变新鲜组织标本,包括宫颈上皮内瘤样病变I级（cervieal Intraepithelial Neoplasia,CINI）28侧、CINII20倒、CINIII26例、宫颈原位癌18例、宫颈浸润鳞癌I期2l例、Ⅱ期21例,m期6例,IV期2例、复发性宫颈癌2例（包括宫颈癌腹腔转移组织1例）以及因其他疾病切除子宫病理证实为慢性宫颈炎者30例。用免疫组化的方法检测PML在各种宫颈病变组织中的表达量。结果PML的表达量随着宫颈病变严重程度的增加而增加（χ^2=113．022,P=〈0．00,r=O．262,P〈0．00）。结论PML的表达与宫颈病变的严重程度呈正相关。     

宫颈上皮内瘤变中精子相关抗原9的表达及意义

目的：探讨精子相关抗原9（SPAG9）在各级别子宫颈上皮内瘤变（CIN）中的表达情况及其诊断价值。方法：收集广东省妇幼保健院病理科2011年12月～2013年6月病理诊断为CIN的宫颈上皮活检或手术标本,应用免疫组织化学两步法检测正常宫颈（20例）、CINI（30例）、CINII（34例）、CINⅢ（26例）宫颈上皮组织标本中SPAG9蛋白的表达。结果：@SPAG9蛋白在CINI～Ⅲ各组中的阳性表达率（91．18％～93．33％）均高于正常宫颈组（P均〈0．01）,CINI、CINII及CINII组间蛋白阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。②SPAG9免疫反应评分,CINII组织中SPAG9蛋白的表达评分高于CINⅡ组织（P〈0．05）,后者的表达评分又高于CINI组织（P〈0．05）。结论：SPAG9蛋白在CIN各级组织中均呈高表达,且表达强度与CIN的组织学分级相关,SPAG9蛋白可以作为宫颈上皮内瘤变的诊断标记物。     

RASSF2A基因启动子甲基化在宫颈癌组织中的表达及临床监测价值

目的探讨RASSF2A基因启动子甲基化在宫颈癌组织中的表达及临床监测价值。方法选取2012年1月-2013年1月淮安市洪泽区人民医院收治的宫颈癌患者标本60例,对比RASSF2A启动子甲基化在不同分期及组织学类型患者中的阳性率情况。结果临床上Ⅲ~Ⅳ期患者的宫颈癌组织当中,RASSF2A的甲基化率显著高于Ⅰ期患者(P0.05),Ⅰ期患者与Ⅱ期患者之间、Ⅱ期患者与Ⅲ~Ⅳ期患者之间的RASSF2A甲基化差异均无统计学意义(均P0.05);宫颈鳞癌患者RASSF2A甲基化明显高于宫颈腺癌患者(P0.05);免疫组织染色结果显示,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期,RASSF2A的阳性表达逐渐下降,3组患者比较差异均有统计学意义(P0.05)。宫颈鳞癌患者RASSF2A阳性率明显低于宫颈腺癌患者阳性表达率(P0.05);结论RASSF2A甲基化同宫颈癌发生存在联系,并多见于宫颈鳞癌组织当中,RASSF2A甲基化同宫颈癌细胞转移以及浸润相关。     

RASSF1A基因在膀胱移行细胞癌中转录表达和启动子甲基化的研究

目的探讨RAssF1A（RAS association domain family1A）基因mRNA表达水平和基因启动子区CPG岛甲基化的关系。方法：用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术鉴测37例膀胱移行细胞癌（bladdert tansitional cell Carcinoma,BTCC）组织和8例正常膀胱组织中RASSFIA基因mRNA表达水平;用甲基化特异性PCR（Methylation—Specific PCR,MSP）。方法研究膀胱移行细胞癌组织和正常膀胱组织中的RASSF1A基因启动子区CPG岛甲基化状态。结果RASSF1 AmRNA在8份正常膀胱组织中全部表达,在BTCC组织中的表达率为35．1％（13／37）,二组间表达差异有显著性（P〈0．05）,但在各肿瘤分期、病理分级间的表达差异无显著性（P〉0．05）。在正常膀胱组织中RASSF1A基因启动子未发生甲基化,但在BTCC组织中RASSFIA基因启动子甲基化频率为51．3％（19／37）。二组间表达差异有显著性（P〈0．05）。在19份启动子异常甲基化的BTCC标本中,有16份同时伴有RASSF1AmRNA表达缺失．,两者存在明显相关性（P〈0．05）。结论RASSFIA基因启动子在BTCC组织中发生异常甲基化,使RASSF1AmRNA表达缺失或下调,从而使RASSF1A基因失活,参与了肿瘤的发生,而与肿瘤的进展可能无关。     

宫颈上皮内瘤变p16及Ki-67表达及其诊断价值

目的探讨宫颈上皮内瘤变p16及Ki-67表达及其诊断价值。方法以我院2013年1月~2014年10月收治的80例宫颈上皮内瘤变患者为研究对象,其中CINI 28例,CINII 29例,CINIII 23例,选择同期行健康体检的30例正常宫颈组织人群为对照组,通过免疫组化技术对所有宫颈组织中的p16及Ki-67表达进行测定并比较。结果 CINI、CINII、CINIII p16阳性率分别为14.29%、48.28%、91.30%,均明显高于对照组的0.00%(p<0.05)。CINI、CINII、CINIII Ki-67阳性率分别为82.14%、93.10%、95.65%,均明显高于对照组的6.67%(p<0.05)。另外,p16、Ki-67阳性表达随CIN等级增高而上升。结论 p16、Ki-67表达可能参与宫颈上皮内瘤变发生、发展,两者联合测定可作为CIN分级诊断辅助手段。     

IL-10基因启动子区CpG岛甲基化与宫颈癌的相关性研究

目的:探讨IL-10基因启动子甲基化与HPV感染导致宫颈癌的相关性。方法:采用PCR和甲基化特异性PCR(MSP)分别检测宫颈癌49例、癌前病变50例(19例CIN1、10例CIN2、21例CIN3)及正常对照50例宫颈组织中HPV16及IL-10基因启动子甲基化状态,并分析IL-10基因甲基化状态与不同临床病理特征之间的联系。结果:宫颈癌组及癌前病变组IL-10基因甲基化率与对照组比较差异均有统计学意义(P﹤0.05)。宫颈癌组IL-10基因甲基化和HPV16 E7 DNA检测结果有一定的关联性(χ2=20.163,P<0.05,Pearson列联系数r=0.345)。不同年龄、肿瘤组织大小、病理分级、临床分期及有无淋巴结转移和IL-10基因甲基化未见明显关系(P>0.05)。结论:宫颈癌IL-10基因启动子CpG岛甲基化与高危型HPV16感染具有关联性,IL-10基因启动子区低甲基化与宫颈癌发病相关。     

宫颈病变组织中p16蛋白表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系

目的探讨宫颈癌（cervicalcancer）及其癌前病变组织中p16蛋白表达及其与人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus,HPV）感染的关系。方法采用免疫组化（immunohistochemistry,IHC）SP法检测40例宫颈浸润癌（invasivecarcinomaofcervix,ICC）标本（ICC组）、20例低度宫颈上皮内瘤样病变（cervicalintraepithelialneoplasiaI,CINI）标本（CINI组）、30例高度宫颈上皮内瘤样病变（CINⅡ～Ⅲ）（CINⅡ～Ⅲ组）标本和20例正常宫颈组织标本（对照组）的p16蛋白表达;用导流杂交基因芯片技术（HybriMax）测定上述标本的人乳头瘤病毒分型。结果P16蛋白在正常宫颈上皮（对照组）无表达,在宫颈癌及癌前病变组织呈现过表达（ICC组,CINI组,CINⅡ～Ⅲ组）;在CINI,CINII～HI,ICC组过表达率分别为35．0％,83．3％和100．0％。P16蛋白表达随宫颈病变级别进展而增加（P〈O．001）。高危人乳头状瘤病毒在正常宫颈上皮（对照组）的感染率为0,CINI,CINⅡ～Ⅲ,ICC组分别为55．0％,80．0％和92．5％。HPV一16和（或）一18亚型是宫颈癌及癌前病变最常见感染亚型。P16蛋白过表达在高危型人乳头瘤病毒（highriskhumanpapillomavirus,HR—HPV）感染宫颈组织明显高于HPV呈阴性或低危型人乳头瘤病毒（low—risk human papillomavirus,LRHPV）感染宫颈组织（P〈0．05）。结论P16蛋白过表达,可用于区分正常宫颈和宫颈癌前病变及宫颈浸润癌组织。P16蛋白过表达与高危型人乳头瘤病毒感染有关。     

ZNF217在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及意义

目的研究ZNF217在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中的表达,探讨ZNF217在宫颈癌的发生、发展中的作用,为宫颈癌的临床诊断和治疗提供重要的理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测ZNF217在60例宫颈癌（宫颈癌组）、18例低度宫颈上皮内瘤变（CINI组）、32例高度宫颈上皮内瘤变（CINⅡ～Ⅲ组）和20例正常宫颈组织（正常组）中的表达。结果①ZNF217蛋白主要表达于宫颈上皮细胞浆。正常宫颈组织、CINI、CINⅡ～Ⅲ及宫颈癌中的ZNF217蛋白的阳性表达率分别为25．0％、33．3％、50．0％、81．5％。宫颈癌组与正常宫颈组、CINI组与宫颈癌组、CINⅡ～Ⅲ组与宫颈癌组间ZNF217阳性表达率有显著差异（x2值分别为18．755、12．874、7．762,均P〈0．01）,而正常宫颈组与cINI组、与CINⅡ-Ⅲ组zNF217阳性表达率无明显差异（x2值分别为0．320、1．299,均P〉0．05）。ZNF217在宫颈癌组织中的表达与组织分化程度和淋巴结转移有关（∥值分别为12．851、6．222,均P〈0．05）,但与组织类型和临床分期无关（x2值分别为0．009、6．675,均P〉0．05）。结论ZNF217高表达在宫颈癌的发生发展中起了重要作用。     

宫颈细胞学ASCUS 112例临床分析

目的通过对宫颈细胞学ASCUS的分析,以便及时发现宫颈癌前病变以及早期宫颈癌。方法采用液基细胞学检查(TCT),将我院2010年1月-2010年12月期间,宫颈细胞学结果为ASCUS的患者,取活组织病理检查。结果在112例细胞学检查为ASCUS的患者中,结果为:宫颈癌5例,宫颈CINI为11例,CINII为50例,CINIII为31例。结论对ASCUS的患者,行活体检查,可以早期发现癌前病变甚至宫颈癌。     

FAM19A4基因启动子DNA甲基化对宫颈病变的诊断价值研究

目的探讨序列相似家族19成员A4(FAM19A4)基因启动子DNA甲基化水平在不同宫颈病变中的差异以及对宫颈癌和癌前病变的诊断价值。方法收集188例不同阶段宫颈病变的宫颈细胞样本,其中正常宫颈组65例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)组33例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)组56例,宫颈癌组34例。用靶向二代测序法检测FAM19A4基因启动子DNA甲基化的表达水平,分析不同组别甲基化水平差异及对宫颈病变的诊断价值。结果宫颈癌组、HSIL组、LSIL组及正常宫颈组FAM19A4基因启动子DNA甲基化水平的中位数分别为18.89、11.39、9.72、8.89,宫颈癌组明显高于HSIL组、LSIL组及正常宫颈组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。FAM19A4基因启动子DNA甲基化水平与宫颈病变程度呈正相关,相关系数为0.521(P<0.05)。FAM19A4基因启动子DNA甲基化诊断宫颈癌的灵敏度为82.35%,特异度为86.15%,ROC曲线下面积为0.91。结论宫颈癌和HSIL患者的FAM19A4基因启动子DNA甲基化水平异常增高,该指标对宫颈癌具有一定诊断价值。     

高危型HPV监测在宫颈上皮内瘤变Ⅰ随访中的意义

目的:探讨HR-HPV监测在宫颈上皮内瘤变I级(CINI)随访中的意义。方法:对158例CINI级患者每8个月随访1次,共2年。随访内容为采用HC-2检测技术检测HR-HPV感染、宫颈细胞学检查,异常者行阴道镜检查及活检,随访终点为病理诊断为CINII、CINIII及宫颈癌(此3项定义为CINII+)。结果:57例HR-HPV阴性者及63例一过性HR-HPV者中无一例病变进展;38例持续性HR-HPV感染者17例病变进展,3组间病变进展率之间有统计学差异(P<0.05),病毒负荷量与病变进展无相关性(P>0.05)。结论:持续性HR-HPV感染者CINI病变进展率高,应密切随访或采用手术治疗。     

HPVLl蛋白、P16和Ki-67在宫颈上皮内瘤变中的表达及意义

目的研究HPVLl蛋白、p16、Ki-67在宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达情况,探讨它们在宫颈上皮癌前病变中的预测价值。方法收集宫颈粘液PCR检测HPV阳性、阴道镜活检发现宫颈上皮内病变的100例病例,其中CINI38例,CINII34例,CINⅢ28例,采用免疫组化的方法检测各组宫颈活检标：奉中HPVLl蛋白、p16、Ki-67的表达情况,分析各种蛋白的表达与宫颈病变的关系。结果HPVLl在CINI、CINⅡ、CINIII的表达率分别为55．2％、29．4％、7．1％;P16在CINI、CINⅡ、CINⅢ的表达率分别为39．5％、73．5％．92．9％;Ki-67在CINI、CINII、CINⅢ的表达率分别为76．3％、88．2％、100％。随着宫颈活检病理分级升高,H1’VLl蛋白表达率降低,p16、Ki-67表达率升高,差异有统计学意义。结论HPVLl在CINI中存在低表达,p16、Ki-67在宫颈鳞癌组织CINⅡ、CINⅢ中表达增加,提示可能与宫颈病变的进展有关,联合检测宫颈病变组织中HPVLl蛋白、p16、Ki-67蛋白的表达情况,有望成为预测宫颈病变进展的生物学指标。     

宫颈癌组织中Hpa与DEK基因表达的相关性研究

目的研究DEK与Hpa基因在宫颈癌组织中的表达及二者的相关性。方法采用免疫组织化学方法对宫颈癌石蜡标本45例、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）45例、正常宫颈组织10例进行Hpa及DEK基因检测。结果（1）DEK在宫颈癌组织、CIN、正常宫颈组织中阳性表达率分别为88．9％、24．4％、10．0％。宫颈癌组织中DEK阳性表达率高于CIN组织和正常组织（X2=38．05,P〈0．01;）（2=5．77,P〈0．05）;Hpa基因在宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为75．6％、24．4％和10．0％,宫颈癌组织中Hpa阳性表达率高于CIN组织和正常组织（x2=31．69,12．94,P〈0．01）。（2）在宫颈癌组织中DEK基因表达与Hpa基因表达呈正相关（r=0．617,P=0．001）。结论宫颈癌组织及CIN组织中DEK、Hpa的表达共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生和发展。     

实时荧光定量PCR检测膀胱癌TWIST1基因启动子的甲基化状态

目的建立针对TWIST1基因启动子甲基化状态的荧光定量检测方法,进而评估其在膀胱癌临床研究的应用前景。方法应用实时荧光定量PCR方法检测南通地区50例确诊膀胱癌患者和25例非膀胱癌的健康对照者的尿液标本中TWIST1基因启动子的甲基化和非甲基化含量,对其甲基化率进行对比。结果正常人的TWIST1启动子的甲基化率为8.1%～17.3%,平均值为12.3%,膀胱癌患者的甲基化率为25.2%～48.3%,平均值为38.2%,膀胱癌患者的TWIST1基因启动子甲基化率有明显的增高（P〈0.05）。结论 TWIST1基因启动子区在膀胱癌中异常甲基化,能够作为有效检测膀胱癌的基因。     

RAC1在宫颈癌组织中的表达及其作用

目的研究RAC1在宫颈癌组织中的表达，探讨其与宫颈癌转移的相关性。方法应用免疫组织化学SP法，检测10例正常宫颈组织、20例不典型增生宫颈组织、58例宫颈癌组织中RAC1蛋白的表达情况。分析其表达结果与临床病理特征的关系。结果（1）RAC1蛋白在正常宫颈组织中不表达，在不典型增生宫颈组织中的表达率为25．00％，在宫颈癌组织中的表达率为81．03％，在宫颈癌组织中的表达水平高于不典型增生及正常宫颈组织（P〈0．05），随着从正常宫颈组织-宫颈不典型增生组织-宫颈癌的转化，RAC1阳性表达率呈递增趋势。（2）RAC1的表达与病理分级相关（P〈0.05），与宫颈癌患者的年龄、临床分期、有无淋巴结转移则无明显相关关系（P〉0．05）。结论RAC1蛋白的表达可作为判断宫颈癌预后的指标之一。检测RAC1对了解宫颈癌生物学行为和评估预后具有一定的临床价值。     

PTEN启动子甲基化及基因表达与宫颈癌临床指标的关联研究

目的 探讨PTEN启动子甲基化及基因表达与宫颈癌临床指标的相关性.方法 选取2013年1月至2014年1月期间辽阳市中心医院收治的100例宫颈癌患者作为研究对象,分别采用PCR-SSCP、甲基化特异性PCR及免疫组化技术检测组织PTEN启动子甲基化及基因表达情况,并分析其与患者临床病理资料的相关性,PTEN启动子甲基化及基因表达相关性.结果 100例宫颈癌患者中PTEN启动子甲基化阳性例数为62例,PTEN启动子甲基化率为62.0％.PTEN基因表达阳性例数50例,阳性率为50.0％.PCR-SSCP分析发现1例患者出现新的突变,位于第9个外显子.PTEN启动子甲基化与宫颈癌患者FIGO分期、肿瘤分级、肿瘤大小以及淋巴结转移均有显著相关性(x2值分别为4.802、8.440、7.472、8.237,均P＜0.05),与宫颈癌患者年龄以及组织分型均无显著相关性(x2值分别为0.075、0.180,均P＞0.05).PTEN基因表达与宫颈癌患者FIGO分期以及淋巴结转移有显著相关性(x2值分别为2.597、7.250,均P＜0.05),与宫颈癌患者年龄、肿瘤分级、肿瘤大小以及组织分型均无显著相关性(x2值分别为0.041、2.627、2.716、0.219,均P＞0.05).宫颈癌组织中PTEN启动子甲基化及其基因表达呈显著负相关(r=-0.65,P=0.014).结论 PTEN启动子甲基化可以抑制PTEN基因的转录,降低其蛋白表达,PTEN蛋白表达降低可能参与宫颈癌发生、浸润和转移.     

GSTP1和RASSF1A在前列腺癌组织中的甲基化检测及其表达研究

目的：研究前列腺癌和前列腺增生组织中GSTP1和RASSF1A基因的甲基化差异及其蛋白表达情况,探讨GSTP1和RASSF1A基因甲基化作为前列腺癌早期诊断的价值,并揭示该基因甲基化与前列腺癌的发生发展的关系。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）方法检测GSTP1和RASSF1A基因启动子区CpG岛甲基化状态,并运用免疫组化SP染色法检测前列腺癌组织中GSTP1和RASSF1A基因的蛋白表达情况。结果：前列腺癌组织中GSTP1和RASSF1A基因甲基化检出率均明显高于前列腺增生组织,差异均有统计学意义（GSTP1：76.00%vs3.33%,P〈0.001;RASSF1A：68.00%vs16.67%,P〈0.001）。在前列腺癌中,GSTP1和RASSF1A蛋白阳性表达均明显低于前列腺增生组织,差异均有统计学意义（GSTP1：20.00%vs76.67%,P〈0.001;RASSF1A：38.00%vs90.00%,P〈0.001）。结论：GSTP1和RASSF1A基因异常甲基化可导致靶基因的蛋白表达降低,促进前列腺癌的发生发展。因此,GSTP1和RASSF1A基因在前列腺癌的发生、发展中起到重要作用,检测GSTP1和RASSF1A基因的甲基化有望成为前列腺癌早期诊断的分子标志物。     

高危型HPV感染及CALCA基因启动子甲基化在宫颈病变检测中的临床价值

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染、降钙素基因相关肽α(CALCA)基因启动子甲基化在宫颈病变检测中的应用价值。方法选择2017年1月-2019年12月于河南大学淮河医院进行阴道镜病理组织活检的360例患者作为研究对象,根据阴道镜病理活检结果分为宫颈炎组、低度鳞状上皮内病变(LSIL)组、高度鳞状上皮内病变(HSIL)组、宫颈癌组,分析各组患者HR-HPV和低危型HPV(LR-HPV)感染情况,并检测宫颈病变组织中CALCA基因启动子区CpG位点甲基化情况,分析HR-HPV感染、CALCA基因启动子区CpG位点甲基化与宫颈癌临床特征的关系。结果四组患者HR-HPV阳性率比较差异有统计学意义(χ~2=137.201,P0.001),其中宫颈癌组HR-HPV阳性率最高;四组患者LR-HPV阳性率比较差异无统计学意义(χ~2=4.123,P=0.248);四组CALCA基因启动子区CpG位点甲基化率比较差异具有统计学意义(χ~2=153.190,P0.001),其中宫颈癌组甲基化率为80.00%(36/45); HR-HPV阳性宫颈癌患者临床分期、淋巴结转移与HR-HPV阴性患者比较差异有统计学意义(P0.05); CALCA基因启动子区CpG位点甲基化宫颈癌患者肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移与非甲基化患者比较差异有统计学意义(P0.05)。结论宫颈癌组HR-HPV阳性率较高,HR-HPV感染及CALCA基因启动子区CpG位点甲基化与宫颈癌发生和发展有关,对临床宫颈癌诊断具有重要作用。     

宫颈癌组织中E-钙粘素基因5’端CpG岛甲基化与蛋白表达的关系

目的:探讨宫颈癌组织中E-钙粘素(E-Cad)基因5’端CpG岛甲基化与蛋白表达的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)和免疫组织化学法分别检测10例正常宫颈鳞状上皮、31例宫颈癌组织中E-Cad基因5’端CpG岛的甲基化状况与蛋白表达情况,并分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果:1正常宫颈鳞状上皮组织中未发现存在E-Cad基因甲基化状态,而在宫颈癌组织中E-Cad基因的甲基化率为54.84%(17/31);2宫颈癌组织中存在E-Cad蛋白表达降低或缺失,阳性率仅为38.71%(12/31),显著低于正常宫颈组织的100.00%(10/10),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:E-Cad基因5’端CpG岛甲基化是宫颈癌中该基因失活的机制之一,可能与宫颈癌的发生、发展有关。     

DAPK基因启动子区过甲基化与颈段食管癌的关系

目的探讨死亡相关蛋白激酶基因启动子区过甲基化与颈段食管癌的关系。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）法和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法分析颈段食管部正常黏膜、颈段食管癌及相应癌旁组织中DAPK基因启动子区过甲基化及其mRNA表达状况。结果42例颈段食管癌组织中,有27例（64．3％）DAPK基因启动子区过甲基化,其在各病理分级和T分级之间差异无统计学意义（P〉0．05）,而在N分级之间差异有统计学意义（P〈0．05）。25例癌旁组织中,有6例过甲基化,且均为颈段食管癌组织中有过甲基化的病例。颈段食管部正常组织、非甲基化的颈段食管癌组织和癌旁组织中均有DAPKmRNA表达。结论颈段食管癌中DAPK基因启动子区过甲基化与mRNA失表达有关,可能是颈段食管癌发生、发展的原因之一。