电刺激中脑导水管周围灰质对大脑皮层和脊髓慢痛反应的影响

本文以体感皮层诱发电位(C-CEP)为指标，观察中脑导水管周围灰质(PAG)对慢痛反应的影响，为探讨慢痛的调制提供资料。     

中脑导水管周围灰质在电针镇痛和痛觉调制中的作用

我们对中脑导水管周围灰质(PAG)在针刺镇痛和痛觉调制中的作用进行了系列的研究，结果如下：     

中脑导水管周围灰质内催产素在电针镇痛中的作用及机制的实验研究

我们以往的工作表明 ,侧脑室和脊髓蛛网膜下腔内注射催产素 (ＯＴ)能明显提高大鼠电针镇痛效应 ,注射抗催产素血清 (ＡＯＴＳ)则能显著降低电针镇痛效应。提示 ,中枢神经系统内的催产素在电针镇痛的复杂过程中发挥着一定作用。中脑导水管周围灰质 (ＰＡＧ)是电针镇痛的关键部位 ,其内含有丰富的ＯＴ、ＯＴ神经末梢及ＯＴ受体 ,但中枢ＯＴ在电针镇痛中的作用是否与之有关 ,作用机制怎样 ?是一个引人关注的问题。本工作以钾离子透入法 ,以甩尾法作为疼痛指标 ,测定大鼠痛阈 ,观察ＰＡＧ注射ＯＴ、ＡＯＴＳ、纳洛酮 (Ｎｘ)、抗 β 内啡肽血清 (…     

电针对偏头痛大鼠中脑导水管周围灰质5-羟色胺7受体和血浆降钙素基因相关肽表达的影响

目的:探讨电针是否能通过调控中脑导水管周围灰质(PAG)5-羟色胺7(5-HT7)受体和外周血降钙素基因相关肽(CGRP)介导抗偏头痛。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和电针组,每组14只。反复电刺激大鼠上矢状窦区硬脑膜诱发神经源性偏头痛模型。对照组仅予颅内电极安置,电针组于硬脑膜电刺激后电针"风池"穴,每日1次,治疗6次。采用免疫荧光标记法和Western blot法检测PAG区5-HT7受体的表达,放射免疫法检测外周血CGRP含量。结果:与对照组比较,反复硬脑膜电刺激造模后PAG区5-HT7受体阳性神经元数目和蛋白相对表达量及外周血CGRP含量显著增高(均P0.001);与模型组比较,电针组5-HT7阳性神经元数目和蛋白相对表达量显著降低(P0.01),外周血CGRP含量降低(P0.05)。结论:电针"风池"穴可下调偏头痛大鼠PAG区5-HT7受体表达,降低其外周血CGRP含量。     

电针三阴交穴和血海穴对实验性类痛经大鼠痛调节机制的影响

目的：通过观察电针同一经脉上的同神经节段支配的不同属性穴位对大鼠实验性类痛经反应和中枢痛觉调制系统内阿片肽类物质的影响,探讨经穴效应是否存在特异性。方法：动情间期3月龄SD雌性大鼠64只,随机分为盐水组、模型组、三阴交组、血海组,每组16只。除盐水组外,其余各组大鼠均以苯甲酸雌二醇和缩宫素制备类痛经大鼠模型。模型制备后,给予穴位组即刻电针。随即观察大鼠的扭体反应,并应用免疫组化法和ELISA法分别检测大鼠相应节段脊髓背角浅层κ-受体的表达和PAG内ENK、β-EP的含量。结果：模型制备后,大鼠扭体潜伏期明显缩短,扭体次数和评分明显增加（P〈0.01）。电针两穴后,扭体评分和次数均明显减少（P〈0.01）,且电针三阴交穴扭体潜伏期明显延长（P〈0.05）;电针三阴交和血海穴可使各节段脊髓背角浅层κ-受体均有明显表达（P〈0.05,P〈0.01）;但电针三阴交穴的L2、S1节段IOD值比血海穴明显升高（P〈0.01,P〈0.05）;电针三阴交穴可使PAG内ENK和β-EP（P〈0.01）含量明显升高。结论：电针同一经脉上的同神经节段支配的不同属性穴位均可缓解大鼠的类痛经反应,并可调节中枢痛觉调制系统内的阿片肽类物质的含量。但穴位属性不同。调节效应不同。特定穴的调节效应优于非特定穴。说明经穴效应具有相对特异性。     

电针对炎症痛大鼠痛阈及中缝大核、中缝背核和导水管周围灰质c-fos表达的影响

越来越多的研究均表明 ,不同类型的伤害性刺激可诱发ｃ ｆｏｓ在大鼠、小鼠、猫和豚鼠的脊髓和不同脑区中表达。本实验观察了大鼠在角叉菜胶致炎后 ,在痛觉调制密切相关的中缝大核、中缝背核和导水管周围灰质ｃ ｆｏｓ表达的变化 ,及电针镇痛作用对ｃ ｆｏｓ表达的影响。实验分成正常对照组、角叉菜胶致炎组和电针 角叉菜胶致炎组。大鼠脚掌注射角叉菜胶 (2 % ,0 .1ｍＬ)造成大鼠炎症痛模型 ,测定大鼠的痛阈变化。电针组动物 ,在角叉菜胶致炎前电针大鼠“足三里”和“昆仑”穴(疏密波 ,2Ｈｚ和 6 0Ｈｚ交替 ,强度 1～ 3ｍＡ) 30ｍｉｎ。大…     

大鼠楔状核内微量注射TRH、ACh对中脑导水管周围灰质痛放电的影响

实验在60只SD大鼠上进行。采用细胞外记录方法，记录中脑导水管周围灰质（PAG）内痛兴奋神经元（PEN）的自发放电和伤害性刺激的诱发放电。主要观察中脑楔状核（NCF）内微量注射促甲状腺激素释放激素（TRH）和乙酰胆碱（ACh）对PAG内PEN的痛放电影响，以及TRH与NCF内胆碱能神经的关系。结果表明：（1）NCF内分别注入TRH（0．5μg／0．5μl）和ACh（2．5μg／0．5μl）均能明显抑制PAG内PEN的痛放电频率。而将等剂量TRH注入NCF背侧的下丘内，对PAG的痛放电则无明显影响。（2）预先注入阿托品（2．5μg／0．5μl）再注入TRH或ACh，阿托品能阻断ACh对PAG痛放电的抑制效应；但不影响TRH的抑制作用。（3）单独注入阿托品（2．5μg／0．5μl）对PAG的抑制效应也无明显影响。结果提示：外源性TRH和ACh都参与NCF对伤害性信息的调制作用，ACh的抑制效应是经m-受体介导的；而TRH的作用似乎与m-受体无关。     

青藤碱对偏头痛模型大鼠中脑导水管周围灰质区NF-κB和COX-2表达的影响

目的研究青藤碱对偏头痛大鼠中脑导水管周围灰质区(PAG)核转录因子-κB(NF-κB)和环氧化酶-2(COX-2)表达的影响,探讨青藤碱治疗偏头痛的可能机制。方法 60只健康SD大鼠随机分成对照组、模型组、尼美舒利组、青藤碱低、中、高剂量组,复制硝酸甘油型偏头痛大鼠。尼美舒利为阳性对照组,在制模、药物干预后,免疫组化检测大鼠PAG区NF-κB和COX-2阳性表达。结果 1与对照组比较,模型组PAG区NF-κB、COX-2表达明显增多,差异有统计学意义(P0.01);2与模型组比较,尼美舒利组和青藤碱高剂量组PAG区NF-κB、COX-2表达明显减少,差异有统计学意义(P0.01);3与尼美舒利组比较,青藤碱高剂量组PAG区NF-κB、COX-2表达无明显差异(P0.05)。结论 NF-κB、COX-2参与了偏头痛发病过程;青藤碱能较好地缓解硝酸甘油型偏头痛大鼠行为学变化,推测其作用机制可能是通过抑制PAG区NF-κB和COX-2的表达。     

慢性坐骨神经损伤大鼠中脑导水管周围灰质MC4R的表达及HS014对热痛觉过敏的影响

目的观察大鼠慢性坐骨神经损伤(CCI)后不同时间点中脑导水管周围灰质(PAG)4型黑皮质素受体(MC4R)mRNA表达变化及给予选择性MC4R拮抗剂HS014对CCI大鼠疼痛行为学的影响。方法 1将42只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组6只、假手术组18只和CCI组18只,检测各组大鼠术前和术后3,7,14 d热缩足潜伏期(TWL),假手术组和CCI组分别于术后3,7,14 d,对照组于术后14 d TWL检测完成后处死大鼠,取PAG脑组织,用半定量RT-PCR法检测PAG脑区MC4R mRNA表达情况。2将30只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组6只、假手术组6只和CCI组18只,均先进行PAG置管。置管后7 d,CCI组随机分成CCI+NS组、CCI+HS014 5μg组和CCI+HS014 10μg组,每组6只。假手术组和CCI各组手术造模。术后7 d,CCI+NS组经导管注射生理盐水0.5μL,CCI+HS014 5μg组注射HS014 5μg/0.5μL,CCI+HS014 10μg组注射HS014 10μg/0.5μL。检测各组大鼠置管后7 d、术后7 d和干预后(注射后10~30 min完成检测)TWL。结果 CCI组大鼠术后3 d开始出现TWL缩短(P0.05),术后7 d和14 d TWL缩短更加明显(P均0.05),与对照组和假手术组比较差异均有统计学意义(P均0.05)。CCI组术后各时间点MC4RmRNA表达量均明显高于对照组和假手术组(P均0.05),并且随着CCI术后时间的推移,MC4RmRNA的表达量逐渐增高(P均0.05)。CCI各组大鼠术后7 d TWL明显低于置管后7 d(P均0.05);CCI+NS组干预后TWL与术后7 d比较差异无统计学意义(P0.05),而CCI+HS014 5μg组和CCI+HS014 10μg组干预后TWL均明显长于术后7 d和CCI+NS组(P均0.05),CCI+HS014 10μg组干预后TWL明显长于CCI+HS014 5μg组(P0.05)。结论 CCI可引起PAG中MC4RmRNA的表达增加,其选择性拮抗剂HS014可剂量依赖性减轻CCI大鼠的热痛觉过敏,提示PAG中MC4R的表达增加可能参与神经病理性疼痛的形成和维持。     

家兔中脑导水管周围灰质（PAG）中八肽胆囊收缩素（CCK-8）对吗啡镇痛和电针镇痛的拮抗作用

CCK-8是目前所知作用最强的一种抗阿片肽。我们曾经报告，只要向大鼠脑室注射1-4ng的CCK-8即可显对抗吗啡镇痛和电针镇痛。为探讨CCK-8的中枢抗阿片作用部位及种属特异性，我们将CCK-8注入家兔PAG，观察其对吗啡镇痛和电针镇痛的影响。     

电针与预电针对糖尿病神经痛大鼠痛觉敏化及脊髓背角P2X7R表达的影响

目的:观察腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后糖尿病大鼠出现神经痛的时间及脊髓背角嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)表达情况,以及电针和预电针对糖尿病神经痛(DNP)大鼠热痛阈和脊髓背角P2X7R表达的影响,探讨电针防治DNP的可能作用机制.方法:第一部分:从64只雄性SD大鼠中随机选取30只作为对照组;余下大鼠以65 m...     

不同电流强度电针缓解大鼠胫骨癌痛的量效关系及抑制脊髓GFAP的表达

目的:观察不同电流强度电针与不同剂量吗啡结合缓解大鼠胫骨癌痛的量效关系,探讨其可能的作用机制,为电针与吗啡结合缓解癌症疼痛适宜参数的选择提供实验依据.方法:将雌性Wistar大鼠100只随机分为正常对照组(10只)、模型组(10只)及治疗组(80只),治疗组按不同电流强度与吗啡剂量结合的2因素3水平组合又分为8组,每组10只.大鼠右侧胫骨上段骨癌造模后第15天起,治疗组以2 Hz/100 Hz疏密波电针“夹脊”穴,给各组大鼠以不同的刺激参数治疗,每天1次,连续6d.检测大鼠治疗前和首次治疗后0 min、1h、2h和5h时及治疗3次后、治疗6次后痛阈.采用免疫组织化学方法测定脊髓背角胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达.结果:首次治疗后0 min、1h和2h时,2 mA电针与1mA电针均有提高痛阈的作用(均P＜0.01),但两者间比较差异无统计学意义(均P＞0.05);首次治疗后5h时,2 mA电针仍有提高痛阈的作用(均P＜0.01),1mA电针提高痛阈作用不显著(P＞0.05);治疗3次和6次后,2 mA电钎和1mA电针均有提高痛阈的作用(均P＜0.01),且2 mA电针的作用优于1mA电针(P＜0.05),并与5 mg/(kg·d)吗啡有协同作用(P＜0.05).治疗6次后,2 mA和1mA电针均有抑制脊髓背角GFAP表达的作用(均P＜0.01),两者比较差异无统计学意义(P＞0.05);5 mg/(kg· d)和2.5 mg/(kg·d)吗啡均无抑制作用(P＞0.05).结论:不同电流强度电针缓解大鼠胫骨癌痛的作用存在量效关系,2 mA电针的作用优于1mA电针,并与5 mg/(kg·d)吗啡有协同作用.电针可能通过抑制脊髓背角GFAP表达来实现协同吗啡缓解大鼠胫骨癌痛的作用.     

电针对神经病理性疼痛模型大鼠脊髓腰段神经元离子型谷氨酸受体相关亚单位蛋白及其基因表达的影响

目的:通过观察神经病理性损伤(spared nerve injury,SNI)模型大鼠脊髓腰段神经元离子型谷氨酸受体(iGluRs)相关亚单位NR 1、NR 2 B、GluR 1蛋白及其mRNA的表达以及电针的作用,探讨电针干预脊髓中枢敏化的分子生物学机制。方法:SD大鼠随机分成对照组、模型组和电针组,每组10只。后两组制备大鼠神经病理性疼痛坐骨神经分支选择损伤模型(SNI),对照组仅分离但不损伤神经。伤侧足底触觉法于造模前、造模后第2、7、14天测定机械痛阈。电针组在造模第7天测痛后电针"委中"和"环跳"穴30 min,1次/d,共7 d。各组末次测痛后处死动物,摘取腰段脊髓,用Western blot检测NR 1、NR 2 B和GluR 1蛋白的表达,RT-PCR检测相应蛋白mRNA的表达。结果:造模后SNI模型大鼠损伤侧足底机械痛阈进行性降低(P0.05,P0.01);电针能显著提高SNI模型大鼠机械痛阈(P0.01)。SNI模型大鼠脊髓腰段神经元相关受体亚单位NR 1、NR 2 B、GluR 1蛋白及其mRNA表达均有上调现象,但只有NR 2 B与对照组相比差异有统计学意义(P0.05);电针对上述表达上调有抑制作用的倾向,同样,只有对NR 2 B蛋白及其mRNA的上调有显著抑制作用(P0.05)。结论:电针通过对脊髓神经元iGluRs相关亚单位NR 2B蛋白及其mRNA表达的显著下调,达到调整SNI大鼠痛信息调控机制的作用。     

电针对炎性痛大鼠痛行为及颈段脊髓γ-氨基丁酸受体亚型基因表达的影响

目的:观察电针对甲状腺区甲醛致痛大鼠脊髓γ-氨基丁酸受体(GABAR)表达的影响,分析针麻行甲状腺手术的镇痛机制。方法:将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、足三里-阳陵泉组、合谷-内关组、扶突组,每组10只。甲状软骨处皮下注射2.5%甲醛造成局部炎性疼痛模型,造模后10min给予电针。分别在注药前、后观察动物的行为学(擦面反应、热痛阈值)变化。行为学观察结束后立即取C1-C3段脊髓组织,用逆转录聚合酶链反应法检测大鼠脊髓组织GABAR亚单位A(GABAAR)、B 1(GABABR 1)和B 2(GABABR 2)mRNA表达水平的变化;用H-E染色,观察甲状腺区组织病理形态变化。结果:注射甲醛后5、40、70min,动物擦面次数明显增多(均P<0.05),热痛阈明显降低(均P<0.05)。电针"扶突"合谷-"内关"后,动物的痛阈明显升高(均P<0.05),擦面次数明显减少(均P<0.05)。注射甲醛后80min,模型组脊髓GABABR 1mRNA及GABABR 2mRNA的表达明显增加(均P<0.05),GABAAR mRNA表达稍增加(P>0.05)。与模型组比,足三里-阳陵泉组、合谷-内关组、扶突组GABABR 1mRNA,合谷-内关组、扶突组GABABR 2mRNA及GABAAR mRNA的表达均进一步上调(均P<0.05)。H-E染色结果表明,电针"合谷"-"内关"及"扶突"穴可抑制甲状腺区组织炎性反应的发展。结论:电针"扶突"穴和"合谷"-"内关"可明显抑制颈部甲状腺区注射甲醛诱发的痛行为反应,上调颈段脊髓GABABR 1mRNA、GABABR 2mRNA及GABAAR mRNA的表达,减轻甲状腺区注射甲醛产生的炎性反应。     

电针“扶突”等穴对颈部切口痛大鼠颈段脊髓5-羟色胺1A、5-羟色胺2A受体mRNA表达的影响

目的:观察电针双侧"扶突"等穴对甲状腺区切口痛大鼠颈段脊髓中5-羟色胺(HT)受体(R)亚型5-HT 1AR和5-HT 2AR mRNA及蛋白表达的影响,探讨电针缓解颈部切口痛的可能机制。方法:Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶突组、合谷-内关组、足三里-阳陵泉颈段组、足三里-阳陵泉腰段组,每组8只。沿大鼠颈中线做长约1.5cm的纵行切口,制作切口痛模型。分别电针双侧"扶突""合谷"-"内关""足三里"-"阳陵泉"穴,各30min。用辐射热测大鼠切口部位热痛阈;用荧光定量Real-time PCR和免疫印迹(Western blot)方法检测颈段(C1-C4)、腰段(L1-L3)脊髓5-HT 1A和5-HT 2A受体亚型mRNA和蛋白的表达水平变化。结果:与颈部切口术前比较,各组的热辐射躲避潜伏期明显缩短(P<0.05);电针"扶突"穴或"合谷"-"内关"穴后,与本组术后比较其躲避潜伏期显著延长(P<0.05);电针"足三里"-"阳陵泉"与本组术后比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,模型组颈段脊髓中5-HT 1AR mRNA的表达明显升高(P<0.05),5-HT 2AR mRNA和蛋白的表达均明显上调(P<0.05);与模型组比较,扶突组和合谷-内关组脊髓中5-HT 1AR的mRNA表达水平均明显下降(P<0.05),5-HT 2AR的mRNA和蛋白的表达水平均明显上调(P<0.05),足三里-阳陵泉组5-HT 1AR和5-HT 2AR的mRNA表达水平与模型组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:电针"扶突"和"合谷"-"内关"穴可缓解大鼠颈部急性切口痛,该作用可能与其下调颈段脊髓中5-HT 1AR mRNA表达、上调5-HT 2AR mRNA和蛋白的表达水平相关。     

电针“扶突”等穴对颈部切口痛大鼠痛行为及脊髓mGluR 5/cAMP/CREB信号通路活动的影响

目的:观察颈部切口痛大鼠痛行为反应变化及电针对颈段脊髓代谢型谷氨酸受体5(mGluR 5)、腺苷-3’,5’-环化磷酸(cAMP)、促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)、环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)基因表达的影响,分析针刺镇痛行甲状腺手术的机制。方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、扶突组、合谷-内关组及足三里-阳陵泉组,每组8只。异氟烷麻醉下,于大鼠颈部做一长约1.5cm纵形切口,复制切口疼痛模型。各治疗组在造模4、24、48h后给予电针上述诸穴区各30min。热辐射法测定动物的痛阈变化。取C1～C4段脊髓背侧部分的组织,用荧光定量RT-PCR法检测mGluR 5、cAMP、MAPK与CREB基因的表达。结果:与正常组比,术后大鼠颈部切口处热痛阈降低(P<0.05);电针扶突、合谷-内关组动物的痛阈明显升高(P<0.05);足三里-阳陵泉组的痛阈与模型组比差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比,模型组mGluR 5mRNA、cAMP mRNA、CREB mRNA表达量均明显升高(P<0.05),MAPK mRNA表达量轻度升高(P>0.05)。与模型组比,电针"扶突"后cAMP mRNA、CREB mRNA表达量显著降低(P<0.05),mGluR 5mRNA、MAPK mRNA表达量轻度降低(P>0.05);电针"合谷"-"内关"穴以及"足三里"-"阳陵泉"穴的效果不明显(P>0.05)。电针"扶突"穴下调mGluR 5、cAMP、CREB基因表达的作用明显优于电针"合谷"-"内关"穴以及"足三里"-"阳陵泉"穴(均P<0.05)。结论:电针"扶突"能明显升高大鼠颈部切口痛术后痛阈,该作用可能与其下调脊髓C1～C4段mGluR 5、cAMP、CREB基因表达水平有关。与"足三里"-"阳陵泉"及"合谷"-"内关"的作用比较,电针"扶突"的作用具有相对特异性。     

The effect of electroacupuncture on the protein expression levels of Cyt-C,Caspase-3 and Caspase-9 in the bladder tissue of rats with neurogenic bladder after suprasacral spinal cord injury

Objective

To observe the effect of electroacupuncture on the morphological change of the bladder tissue and the protein expression levels of cytochrome C, Caspase-3 and Caspase-9 in the bladder tissue of rats with neurogenic bladder after suprasacral spinal cord injury, and to preliminarily explore its partial mechanism of action.

电针颈夹脊穴对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角谷氨酸受体及趋化因子受体表达水平的影响

目的:观察电针颈夹脊穴对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角谷氨酸受体N-甲基-D-天冬门氨酸(NMDA)、氨基-3-羧基-5-甲基异唑-4-丙酸(AMPA)及单核细胞趋化蛋白-1受体(CCR2)、趋化因子C-X3-C-基元受体1(CX3CR1)表达的影响.方法:将72只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、电针组、L-α-氨基...