柯萨奇B1病毒VP1基因序列分析

柯萨奇病毒Ｂ组 (ＣＶＢ)有 6个血清型 (ＣＶＢ1～ 6 ) ,是引起人类病毒性心肌炎等疾病的主要病原 ,近年来其发病呈上升趋势 ,目前尚缺乏有效防治措施。ＣＶＢＶＰ1基因编码其主要中和抗原 ,本研究拟克隆柯萨奇Ｂ1病毒 (ＣＶＢ1)中国分离株的ＶＰ1基因并测定其序列 ,以期为我国ＣＶＢ1感染的防治提供理论基础。1　材料和方法1 1　材料　ＣＶＢ1中国分离株由哈尔滨医科大学克山病研究所提供。ｐＭＤ18 Ｔ(ＴａＫａＲａ公司 )为 2 7ｋｂ的ＴＡ克隆载体。Ｖｅｒｏ细胞和ＪＭ10 9菌株由中国预防医学科学院病毒学研究所诊断二室提供。ＶＰ1的Ｐ…     

柯萨奇B3病毒引起心肌细胞凋亡的初步探索

目的 以病毒性心肌炎（ｖｉｒａｌ ｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ,ＶＭＣ）细胞感染模型为基础,研究柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３ ｖｉｒｕｓ,ＣＶＢ３）感染与心肌细胞凋亡的关系。方法 在嗜鼠心肌柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）感染心肌细胞后２４ｈ电镜观察细胞超微结构的改变,同时取细胞悬液以流式细胞仪检测“凋亡峰”,了解细胞亡率,并采用酶联免疫分析法（ＥＬＩＳＡ）定量测定ＣＶＢ３ｍ病毒感染后１、２、４、     

体外快速筛选和鉴别Coxsackievirus B3有毒株和无毒株方法

由于缺乏有效的体外鉴别柯萨奇病毒Ｂ3 (ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ3 ,ＣＶＢ3 )致病性的方法 ,长期以来接种乳鼠体内观察心肌病变。本研究所用的ＨｅＬａ细胞和人脐静脉内皮细胞均从中国典型物培养保藏中心 (武汉 )购买。标准病毒株ＣＶＢ3 /0 (非致病株 )由Ｂｅｃｋ教授 (ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＮｏｒｔｈ ｅｒｎＣｏｌｏｒａｄｏ,ＵＳＡ)惠赠 ,ＣＶＢ3ｍ(致病株 )由钟学宽教授 (哈尔滨医科大学 )惠赠 ,ＣＶＢ2 、ＣＶＢ6,脊髓灰质炎病毒由同济医科大学病毒室提供。阳性质粒 :Ｐｓｖｃｖｂ3 5 9(携带ＣＶＢ3 致病株全基因组 )和Ｐ…     

柯萨奇病毒与心内膜心肌纤维化的关系

柯萨奇病毒与心内膜心肌纤维化的关系尹瑞兴心内膜心肌纤维化（ＥＭＦ）的病因尚未清楚，但有资料表明某些病毒感染可能与其发病有关。我们用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）ｃＤＮＡ探针与ＥＭＦ患者的心内膜心肌组织石蜡标本进行原位杂交，探讨ＣＶＢ与ＥＭＦ的关系。本组Ｅ...     

柯萨奇B3病毒的纯化及其初步应用

柯萨奇Ｂ组病毒 (ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓｇｒｏｕｐＢ)是人类病毒性心肌炎的主要病原体 ,其中以ＣＶＢ3最常见[1] 。目前尚无特异性的防治措施 ,研制安全有效的疫苗为当务之急。ＤＮＡ疫苗是目前疫苗学研究的热点。但一般来讲 ,ＤＮＡ疫苗诱导的免疫反应低[2 ,3 ] 。如果没有纯度高、特异性强的抗原 ,低水平的免疫反应很可能会检测不到。我们在柯萨奇病毒ＤＮＡ疫苗的研究工作中就碰到了这个问题。因此 ,制备高纯度的检测特异性免疫反应用抗原即成为该疫苗研究中必须解决的问题。我们应用ＨｅＬａ细胞大量培养ＣＶＢ3,经ＣｓＣｌ密度…     

病毒性心肌炎病人巨细胞病毒感染的检测

病毒性心肌炎病人巨细胞病毒感染的检测刘成玉滕青徐丽园谭润鸾病毒性心肌炎在临床上较为常见，以柯萨奇Ｂ组病毒感染最多见。有研究表明，人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染可能与病毒性心肌炎（ＶＭ）发病有关〔１，２〕。为进一步研究ＨＣＭＶ活动性感染与ＶＭ发病的关系，...     

血清中柯萨奇B组病毒的PCR检测方法的改进及临床应用

血清中柯萨奇Ｂ组病毒的ＰＣＲ检测方法的改进及临床应用王伟俞福州陈正急性病毒性心肌炎的病因可有多种，已知与柯萨奇Ｂ组病毒感染关系密切，我们应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），用柯萨奇病毒Ｂ（ＣＶＢ）的ｃＤＮＡ５端的一对引物检测患者血清中ＣＶＢ－Ｒ...     

黄芪总皂甙对CVB_3感染心肌细胞cTnI、SERCA活性及mRNA表达的影响

目的 :探讨黄芪提取物 -黄芪总皂甙对柯萨奇Ｂ3(ＣＶＢ3)感染的培养ＳＤ乳鼠心肌细胞损伤模型的保护作用 ,对病毒引起的肌浆网钙泵 (Ｓａｒｃｏ/ＥｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍＣａ2 ＡＴＰａｓｅ,ＳＥＲＣＡ)活力及其ｍＲＮＡ表达变化的影响。方法 :将培养ＳＤ乳鼠心肌细胞分为正常组、模型组及黄芪组 ,模型组及黄芪组以柯萨奇Ｂ3亲心肌病毒株 (ＣＶＢ3ｍ,ＴＣＩＤ50 为 1 0 5 .83)感染心肌细胞。 72～ 96ｈ后 ,观察各组细胞病变作用 (ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃｅｆ ｆｅｃｔ,ＣＰＥ) ,检测其培养上清心肌肌钙蛋白Ｉ(ｃＴｎＩ)含…     

应用RT—PCR法快速检测柯萨奇病毒基因

柯萨奇Ｂ组病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢｖｉｒｕｓｅｓ，ＣＢＶ）属于小ＲＮＡ病毒科，肠道病毒属。是人类病毒性心肌炎的主要病原体，亦可引起无菌性脑膜炎、发热、肺炎、疲劳综合征等疾病〔１〕，愈来愈受到人们重视。ＣＢＶ感染的诊断一般采用ＥＬＩＳＡ和中和抗体法检...     

新生儿肺炎患者血清柯萨奇B组病毒抗体测定

新生儿肺炎患者血清柯萨奇Ｂ组病毒抗体测定李芳秋，熊华，宋韶鸣，于毅，杨毓华南京军区总医院微生物科南京２１０００２柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）是引起新生儿肺炎的病原之一［１］。本文利用ＥＬＩＳＡ法，对９０例新生儿肺炎患者血清ＣＢＶ－ＩｇＭ、ＣＢＶ－ＩｇＧ抗...     

高山红景天多糖对小鼠抗柯萨奇B5病毒感染能力的研究

对感染柯萨奇Ｂ５病毒（ＣＶＢ）小鼠模型研究结果表明，高山红景天多糖对发病小鼠心肌功能改善和免疫功能提高均具有明显的促进作用。增强了小鼠抗ＣＶＢ５感染的能力，并对由ＣＢＶ感染性疾病也有一定的防治作用。     

小鼠病毒性心肌炎免疫状态研究

本文以柯萨奇病毒Ｂ３亲心肌变异株（ＣＶＢ３ｍ）诱导的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠心肌炎为研究对象，检测了ＣＶＢ３ｍ在小鼠心肌中的消长，心肌损伤的进程，抗病毒中和抗体和抗心肌细胞抗体产生动态及脾脏中Ｔ细胞亚群，ＮＫ细胞的数量和活性变化，结果显示中和抗体的产生与心肌中病毒的清除密切相关，但病毒清除后，心肌损伤仍然持续，并伴有抗心肌细胞抗体，在整个病程中，Ｔ细胞亚群和ＮＫ细胞数量及活性也均异常，提示免疫损伤也是心肌炎发病机理中的一种重要因素。     

柯萨奇B组病毒的研究进展

柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）隶属于小ＲＮＡ病毒科，病毒毒粒小，单链线状ＲＮＡ，其感染可引起病毒性心肌炎等人类多种疾病。本文就该组病毒的核酸结构、毒粒蛋白组成、受体分子的研究和对发病机理的认识作一较为概括性的综述。     

含CpG基序的大肠杆菌DNA对柯萨奇病毒基因免疫的增强作用

柯萨奇病毒Ｂ组 (ＣＶＢ)有 6个血清型 ,即ＣＶＢ1～ 6。由于ＣＶＢ血清型多 ,采用传统疫苗预防本病难度较大。为此我们构建了ＣＶＢ1 Ｂ3型ＶＰ1基因重组质粒ｐＣＲ3 ｕｎｉＢ1Ｂ3,将该重组质粒转染后进行ＲＴ ＰＣＲ及免疫荧光检测 ,证明该表达系统可以在细胞内获得瞬时表达 ,并应用该质粒免疫ＢＡＬＢ ｃ小鼠 ,免疫后小鼠体内产生了相应的抗体 ,但是其抗体水平并不令人满意。为了获得更好的免疫效果 ,本研究探讨了大肠杆菌ＣｐＧＤＮＡ作为免疫佐剂以期增强ｐＣＲ3 ｕｎｉＢ1Ｂ3的免疫效果。材料和方法试剂盒和工具酶 :购自ＧＩＢＣＯ Ｂ…     

柯萨奇B族病毒在流产妇女中的感染

柯萨奇Ｂ族病毒在流产妇女中的感染［英］／ＡｘｅｌｓｓｏｎＣ．．．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＶｉｒｏｌｏ－ｇｙ．－１９９３，３９（４）．－２８２为研究阿萨奇Ｂ族病毒１～５型（ＣＢＶ１～５）作为流产的病原学的可能性，乃对９７名流产妇女和１１３名相同...     

华荠苎挥发油对几种病毒的抑制作用

华荠苎挥发油 (ＭＣＭＶＯ)由切碎的华荠苎 (Ｍｏｓｌａ ,Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ,Ｍａｘｉｍ ,ＭＣＭ)通入水蒸气蒸馏而得。用高压气相色谱法分离ＭＣＭＶＯ各组分 ,各峰物质通过ＧＣ ＭＳ/ＤＳ系统分析得到质谱图与标准质谱图核对 ,已初步鉴定出ＭＣＭＶＯ中的 15种主要成份 ,其中ＭＣＭＶＯ的主要成分百理香酚占挥发油的 5 1 6 % ,1 甲基 4 异丙苯占 7 6 % ,1 8 按树脑占5 6 % ,α 蛇麻烯占 4 5 %。体外试验用轮状病毒 (Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ,Ｒｏｖ) ,柯萨奇病毒Ｂ3(ＣｏｘＢ3) ,艾柯病毒Ⅱ型 (ＥＣＨＯ Ⅱ )。以 10 0ＴＣＩＤ50 的病毒接种…     

抗HCVNS3抗原单克隆抗体的研制与初步鉴定

丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)是一种单链正链ＲＮＡ病毒 ,可通过输血等方式传播 ,引起急、慢性肝炎。目前 ,ＨＣＶ的常规诊断方法主要有抗ＨＣＶ ＩｇＧ ,抗ＨＣＶ ＩｇＭ及ＨＣＶ ＲＮＡ的ＲＴ ＰＣＲ检测。对ＨＣＶ抗原的检测文献报道较少。我们利用基因工程表达的ＨＣＶＮＳ3蛋白作为免疫原 ,研制其单克隆抗体(ｍＡｂ) ,试图用于ＨＣＶ抗原诊断的研究。1材料和方法1 1　材料　Ｂａｌｂ/ｃ小鼠 ,由南京军区实验动物中心提供。Ｓｐ2 / 0小鼠骨髓瘤细胞 ,从解放军 30 2医院引进 ,液氮保存。ＨＣＶＮＳ3蛋白及ＣＰ9,ＣＰ10抗原 ,由南京军区军事医学…     

应用原位核酸杂交技术检测心肌内柯萨奇病毒RNA

应用原位核酸杂交技术检测心肌内柯萨奇病毒ＲＮＡ赵晓书，牛美娟，曲章义，郭彩玲，吴法尧，李从仁利用经病理观察证实为病毒性心肌炎，心肌炎后改变（ＰＭＣ）及扩张型心肌病（ＤＣＭ）的心脏标本，通过自备的ＣｏｘＢ３ｃＤＮＡ生物素探针对这些心肌组织内的相应核酸进...     

心肌细胞的培养与病毒性心肌炎感染模型的建立

病毒性心肌炎多发于儿童和青壮年,在引起心肌炎的病毒中以柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）最为常见且重要。选用ＣＶＢ３病毒做为致病病毒,体外搏动心肌细胞的培养,能够保持心肌原有结构和功能上的一些特点,可排除神经体液因素的影响及肝肾解毒功能的干扰。由于目前尚无“对...     

穿孔素和Fas配体在柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌浸润细胞中表达

目的探讨穿孔素（ＰＦＰ）和Ｆａｓ配体（Ｌ）介导的细胞毒作用在病毒性心肌炎发病中的作用。方法将４０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机等分为实验组和对照组，分别用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）及不含病毒的病毒稀释液经腹腔接种，于接种后７天处死，取其心脏。应用免疫组化、逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和原位杂交等方法，检测细胞介导的细胞毒作用的主要效应分子ＰＦＰ和ＦａｓＬ在心肌浸润细胞中的表达。结果（１）实验组小鼠的心肌组织中均有ＰＦＰ和ＦａｓＬ抗原阳性细胞浸润，对照组则无；（２）ＲＴ－ＰＣＲ检测发现实验组鼠的心肌组织中ＰＦＰ和ＦａｓＬｍＲＮＡ的阳性率均为１００％，明显高于对照组的２０％和３０％（Ｐ均＜０．０１）；（３）原位杂交检查显示，实验组小鼠心肌组织中均可见ＰＦＰ和ＦａｓＬｍＲＮＡ阳性的浸润细胞，而对照组则均未发现。结论ＣＶＢ３小鼠心肌炎急性期，其心肌浸润细胞中有ＰＦＰ和ＦａｓＬ表达，提示它们在病毒性心肌炎发病机制中可能有重要作用