miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223在类风湿关节炎患者外周血中检测的临床意义

目的研究miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达水平与健康人群的差异,探讨这3项指标的临床意义。方法收集68例RA确诊患者(RA组)及20例健康志愿者(健康对照组)的空腹静脉血,采用实时荧光定量PCR技术检测研究对象外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miR-223的相对表达水平;比较RA患者与健康志愿者外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的相对表达水平差异,Pearson分析RA患者血清这3项指标与类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、DAS28评分的相关性;构建miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的ROC曲线并计算曲线下面积(AUC),进而比较各指标单独及联合检测的灵敏度和特异度。结果 RA组患者外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的相对表达水平显著高于健康对照组(P<0.05)。根据DAS28评分,进一步将RA患者分为缓解组和活动组,发现活动组患者外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223相对表达水平高于缓解组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-16的表达水平与CRP、DAS28呈正相关(r=0.470、0.446,P<0.05),miRNA-146a的表达水平与CRP、DAS28呈正相关(r=0.408、0.407,P<0.05)。miRNA-223的表达水平与RF、CRP呈正相关(r=0.527、0.518,P<0.05)。miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的AUC分别为0.63、0.75、0.89,灵敏度分别为68.70%、85.24%、87.63%,特异度分别为55.39%、63.57%、90.35%。三者联合使用作为RA标志物作ROC曲线,得到AUC为0.91,灵敏度为89.34%,特异度为91.56%。结论 miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223与RA发生、发展存在密切关系,联合检测具有更高的灵敏度和特异度,适用于临床早期诊断RA。     

脓毒症患儿早期心肌损伤中血浆miRNA-146a表达水平的临床意义

目前脓毒症的诊断和治疗都在不断发展,但其发病率和病死率依然很高,是一种重要的临床综合征[1].儿童由于自身机体发育不完善抵抗力低下,脓毒症已经成为儿童感染死亡的一个重要原因.心肌功能障碍是脓毒症和脓毒性休克的公认表现[2].有研究表明,存在脓毒症心肌损伤的患者病死率明显高于没有心肌损伤患者[3-4].因此,对于脓毒症患...     

miRNA-146a与脓毒症

MicroRNAs通过作用于基因转录后水平,广泛参与和调控机体固有免疫与适应性免疫的各个环节.特别是miRNA-146a,不仅对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)和系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)等免疫系统疾病有调节作用,而且参与了脓毒症的发生、发展及其炎症反应的负反馈调节过程.本文就脓毒症的发病机制及miRNA-146a对脓毒症可能的调控作用及其作为靶点对脓毒症治疗的前景做一综述.     

高通量连续性血液滤过技术对脓毒症患者外周血单个核细胞miRNA-146a表达的影响

目的 前瞻性观察高通量连续性血液滤过(HVHF)治疗对严重脓毒症患者免疫功能及其外周血单个核细胞中miRNA-146a表达的影响.方法 选择严重脓毒症患者30例,分为HVHF组及对照组.①在两组治疗过程的0、6、12、24、48 h时相点,分离外周血单个核细胞,提取总RNA,荧光定量PCR法检测miRNA-146a表达量的变化;②两组患者治疗24 h后分离出外周血单个核细胞于体外培养,以LPS刺激,在4、8、12、24、48 h时相点检测单个核细胞中miRNA-146a表达量的变化;ELISA法检测单个核细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-10水平.结果 ①两组患者miRNA-146a表达量较治疗前均有所下调,但HVHF组较对照组下调明显(P<0.05);②HVHF组孵育的细胞在LPS刺激下各个时相TNF-α、IL-6的分泌水平均明显高于对照组(P<0.05);HVHF组TNF-α、IL-6在12 h分泌达高峰,对照组在8 h即达高峰;两组细胞IL-10分泌水平均持续升高,两组间各时相点IL-10分泌水平比较差异无统计学意义(P>0.05);③HVHF组孵育的细胞在LPS刺激下miRNA-146a表达量较孵育前有所升高,在12 h升高最明显(P<0.05),对照组在4、8 h时miRNA-146a表达都处于高水平状态,明显高于同时相的HVHF组(P<0.05).结论 HVHF通过大量清除脓毒症患者血循环中的炎症因子及促炎介质,从而下调部分miRNA-146a的表达水平,减轻严重脓毒症患者外周血单个核细胞的免疫抑制状态,使部分免疫功能得到恢复,可能是HVHF参与机体免疫内稳状态重建的作用机制之一.     

急性缺血性脑卒中患者血清miRNA-181c-5p，miRNA-340-5p和miRNA146a水平表达检测的诊断价值研究

目的　探究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke, AIS)患者血清miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平表达检测的诊断价值。方法　选取西安医学院第一附属医院急诊科2019年5月～2020年3月收治的65例AIS患者为病例组,另选同期50例体检健康者为对照组。比较两组的糖尿病史、高血压史和高血脂史,采用实时灾光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)检测miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a的水平。采用美国国立卫生院卒中量表(NIH stroke scale, NIHSS)评估AIS患者的神经功能缺损程度。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic, ROC)计算miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a的AIS诊断价值。结果　两组的糖尿病史、高血压史和高血脂史比较差异无统计学意义(P＞0.05)。相比于对照组,病例组血清中miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平均升高,其差异具有统计学意义(t=20.700,25.997,23.629,均P=0.000)。Pearson相关性分析结果显示,血清中miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平与NIHSS评分均呈显著正相关,其差异具有统计学意义(r=0.272,P＜0.001;r=0.142,P=0.005;r=0.171,P=0.013)。miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a联合检测诊断AIS的灵敏度和特异度分别为71.2%和76.4%,高于三项单独和两两联合检测。结论　miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a三者联合检测可进一步提高AIS患者的诊断率,为临床应用提供了可靠的理论基础。     

miR-27a、miR-146a在骨性关节炎患者滑膜组织中的表达及临床意义

目的:检测骨性关节炎(OA)患者与非OA患者滑膜中miR-146a和miR-27a的表达情况,并探讨其与该疾病的相关性。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测46例滑膜组织(OA患者23例,非OA患者23例)中miR-27a和miR-146a的相对表达量。结果:miR-27a和miR-146a在所有的滑膜组织中均能检测到,根据qRT-PC原理,ΔCt值越高其目的基因在相应组织中的表达水平越低,即OA患者滑膜组织的miR-27a和miR-146a的表达水平较对照组呈低表达趋势(P<0.05)。结论:miR-27a和miR-146a的差异性表达与OA滑膜病理变化有关,可能调控uPA的表达促进OA的发展。     

狼疮性肾炎患者尿液miR-26a、miR-146a表达及对病情活动的预测价值分析

目的 分析狼疮性肾炎（LN）患者尿液miR-26a、miR-146a表达及对病情活动的预测价值。方法 选取2021年1月至2022年12月在本院住院的158例LN患者,按照系统性红斑狼疮活动指数（SLEDAI）将其分为LN稳定期组（88例）和LN活动期组（70例）;选取同期本院60例体检健康者作为对照组。比较三组的一般资料及常规实验室指标;用多因素Logistic回归分析影响LN病情活动的因素;分析LN患者尿液miR-26a、miR-146a预测病情活动的效能。结果 LN活动期组和LN稳定期组的补体C3、补体C4、血红蛋白、白蛋白水平及尿液miR-26a、miR-146a表达量均低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。LN活动期组的补体C4、血红蛋白、白蛋白水平及尿液miR-26a、miR-146a表达量均低于LN稳定期组,尿酸水平高于LN稳定期组（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,尿液miR-26a、miR-146a均是影响LN患者病情活动的因素（P<0.05）。尿液miR-26a、miR-146a及二者联合预测LN患者病情活动的曲线下面积...     

不同类型肠易激综合征患者血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a水平的临床意义

目的探讨不同类型肠易激综合征(IBS)患者血清微小RNA(miRNA)-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平的相关性及临床意义,为IBS的病因学研究提供理论依据。方法采用病例抽样的方法选取2015年10月至2018年6月该院IBS患者110例,选取同期110例体检健康者为健康对照组。受试者采样前12 h低蛋白饮食,每位受试者取10 mL静脉血样本,静脉血3000 r/min离心后取上清。采用实时荧光定量反转录PCR测定受试者miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平。结果混合型IBS的miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平均显著高于其他3种亚型(P<0.05),不确定型IBS的miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平均显著高于便秘型IBS及腹泻型IBS(P<0.05)。混合型、不确定型IBS患者的miRNA-144、miRNA-29a、miRNA-200a的表达水平两两之间均存在相关性且有统计学意义(P<0.05),但对于单纯腹泻或者便秘型IBS患者来说,仅miRNA-29a与miRNA-200a的表达水平存在统计学相关性(P<0.05)。结论混合型、不确定型IBS患者血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平较其他2种亚型高,且血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达两两之间具有显著相关性。     

miRNA-146a真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞恶性增殖的影响

目的 构建miRNA-146a真核表达质粒,探讨其在宫颈癌HeLa细胞株中的表达及对HeLa细胞恶性表型的影响.方法 人工合成miRNA-146a基因序列,将miRNA-146a基因克隆到的真核表达载体pGeneSil-1中,构建成重组质粒pGeneSil-miR-146a.将miRNA-146a重组表达载体瞬时转染宫...     

呼吸道合胞病毒感染患儿外周血NDR1和miR-146a表达水平及其临床意义

目　的　探讨丝苏氨酸蛋白激酶 1(Nuclear Dbf2 p-related kinase 1, NDR1)和微小核糖核酸（micro RNA, miR）146a在呼吸道合胞病毒（ Respiratory syncytial virus,RSV）感染患儿外周血清中的表达情况及临床意义。方法　收集 2019年 7月～ 2020年 5月西北大学附属医院（西安市第三医院）检验科、西安市儿童医院就诊的 77例 RSV感染患儿作为研究对象。按照病情严重程度分为重症组 36例,轻症组 41例。同时选取 53例同期来医院体检的健康儿童为对照组。采用实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）法检测外周血清中 miR-146a表达水平;酶联免疫吸附法（ ELISA）检测 NDR1水平;Pearson法分析 NDR1与 miR-146a表达的相关性及二者与相关炎性因子表达的相关性。受试者工作特征曲线（ ROC）评估血清 NDR1和 miR-146a水平对 RSV感染严重程度的诊断价值。结果　与对照组相比, RSV感染患儿外周血中 NDR1水平（ 9.95±2.38 pg/L vs 6.46±1.12 pg/L）下调, miR-146a表达水平（ 1.03±0.17 vs 2.12±0.43）上调,差异具有统计学意义（ tmiR-146a=17.519,tNDR1=11.204,均 P＜ 0.05）。RSV感染重症组、轻症组及对照组中 hs-CRP,IL-4, IL-5,IL-6,IL-2和 IFN-γ比较差异均有统计学意义（ F=67.825,564.775,256.06,202.992,77.579,320.470,均 P＜ 0.05）。 RSV感染患儿血清 NDR1水平与 IL-2,IFN-γ表达均呈正相关（ r=0.473,0.620,均 P＜ 0.05）,与 hs-CRP,IL-4, IL-5,IL-6水平呈负相关（ r=-0.259,-0.559,-0.422,-0.505,均 P＜ 0.05）; miR-146a与 hs-CRP,IL-4,IL-5,IL-6水平均呈正相关（ r=0.381,0.636,0.421,0.570,均 P＜ 0.05）,与 IL-2,IFN-γ水平呈负相关（ r=-0.646,-0.744,均 P＜ 0.05）;RSV感染患儿外周血清中 NDR1与 miR-146a表达水平呈负相关（ r=-0.225,P＜ 0.05）;ROC结果显示,血清 NDR1,miR-146a水平预测重症 RSV感染患儿的曲线下面积（ AUC）分别为 0.911（95%CI:0.823～ 0.964）, 0.741（95%CI:0.628～ 0.834）,敏感度分别为 82.93%,68.29%,特异度分别为 88.89%,75.00%,二者联合预测重症 RSV感染患儿的 AUC为 0.925（95%CI:0.842～ 0.973）,敏感度和特异度分别为 90.24%和 83.33%。结论　NDR1在 RSV感染患儿外周血清中呈低表达,miR-146a呈高表达,二者可作为评估患儿病情发展的潜在指标。     

微小RNA-146a在脂多糖诱导肺泡巨噬细胞中的表达

目的 观察脂多糖(LPS)诱导对NR8383肺泡巨噬细胞微小RNA-146a(miRNA-146a)表达的影响.方法 将体外培养的肺泡巨噬细胞株NR8383分成LPS刺激组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,培养6 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测细胞miRNA-146a的表达.结果 LPS刺激组细胞培养上清液中TNF-α含量(ng/L)较PBS对照组明显升高(650.26±40.53比6.23±1.76,P<0.01),细胞miRNA-146a表达水平较PBS对照组上调了约(5.33±0.81)倍(P<0.01).结论 LPS刺激后,miRNA-146a在NR8383细胞中表达增高,其可能参与了NR8383肺泡巨噬细胞的炎症反应调控.     

miRNA-10a、GATA6在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨微小RNA-10a(miRNA-10a)、核转录因子GATA6在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及意义.方法 选取本院2017年6月至2019年6月92例经手术切除治疗的肝细胞癌(HCC)患者,术后取癌组织及癌旁组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miRNA-10a、GATA6 mRNA表达水平,...     

食管鳞状细胞癌患者血清miR-1246、miR-146a表达水平与预后和细胞免疫功能的关系研究

目的 探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)患者血清微小RNA(miR)-1246、miR-146a表达水平与预后和细胞免疫功能的关系,分析miR-1246、miR-146a预测ESCC患者预后的价值。方法 选择2017年2月至2019年1月该院收治的91例ESCC患者(ESCC组)和90例体检健康者(对照组)作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清miR-1246、miR-146a表达水平。比较不同临床病理特征和细胞免疫功能的ESCC患者血清miR-1246、miR-146a表达水平差异,分析miR-1246、miR-146a表达与ESCC患者预后的关系以及miR-1246、miR-146a预测ESCC患者预后的价值。结果 ESCC组血清miR-1246表达水平高于对照组,miR-146a表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。TNM分期为Ⅲ期、CD4⁺/CD8⁺降低者miR-1246表达水平高于TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、CD4⁺/CD8⁺正常患者,差异有统计...     

重症肌无力患者外周血单个核细胞中miR-146a表达分析

目的探讨miR-146a在重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义。方法 MG患者35例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,采用Ficoll分层液法分离外周血单个核细胞,实时荧光定量PCR法检测2组外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量;Pearson法分析MG患者单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量与定量MG评分的相关性。结果观察组外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量(3.41±0.25)明显高于对照组(0.95±0.12)(P0.05);全身型MG患者外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量(4.18±0.21)高于眼肌型者(3.01±0.15)(P0.05);MG患者单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量与定量MG评分呈正相关(r=0.584,P0.001)。结论 MG患者外周血单个核细胞miR-146a表达明显上调,且与病情严重程度有关。     

变应性鼻炎患儿外周血miRNA-21表达水平及其临床意义

目的探讨变应性鼻炎(AR)患儿外周血miRNA-21表达水平及其临床意义。方法选取108例AR患儿纳入AR组,选取45例健康儿童纳入对照组。AR组患儿采用丙酸氟替卡松鼻喷剂联合孟鲁司特钠咀嚼片治疗4周,比较AR组患儿治疗前后miRNA-21、嗜酸性粒细胞(EOS)计数、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、总IgE(TIgE)水平与对照组的差异。采用Pearson相关分析探讨AR患儿治疗前后miRNA-21、EOS计数、ECP、TIgE与视觉模拟评分法(VAS)评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-21、EOS计数、ECP和TIgE对AR患儿治疗后显效的评估效能。结果治疗4周后,AR组显效84例(占77.78%); AR组患儿治疗前miRNA-21、ECP、TIgE及外周血EOS计数水平高于治疗后及对照组,AR组患儿治疗后miRNA-21表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,AR组VAS评分低于治疗前,差异有统计学意义(P0.05)。AR组患儿治疗前miRNA-21、EOS计数、ECP与VAS评分呈显著正相关(r=0.568、0.433、0.352); AR组患儿治疗后miRNA-21、EOS计数和ECP与VAS评分均无相关性。miRNA-21、ECP、EOS计数、TIgE评估AR患儿治疗后显效的曲线下面积(AUC)分别为0.913、0.859、0.694、0.688,其中miRNA-21的AUC大于ECP、EOS计数、TIgE, ECP的AUC大于EOS计数、TIgE,差异有统计学意义(P0.05),而EOS计数、TIgE的AUC相比,差异无统计学意义(P0.05)。miRNA-21联合ECP评估AR患儿治疗后显效的AUC为0.984(95%CI为0.863～0.995,P0.05),诊断灵敏度为94.75%时,特异度可达90.52%。结论 AR患儿血清miRNA-21表达水平显著升高,能一定程度反映AR患儿病情的严重程度,单独应用miRNA-21或联合应用ECP与miRNA-21可较好地预测AR患儿的临床疗效。     

外周血单个核细胞miR-146a和微管相关蛋白1轻链3及红细胞沉降率与类风湿关节炎疾病活动的关系

目的观察类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者外周血单个核细胞miR-146a、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)表达及红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate, ESR)变化,探讨其与RA疾病活动的关系。方法 RA患者105例为RA组,采用28处关节疾病活动度(disease activity score 28, DAS28)评分评估RA疾病活动度,分为疾病缓解组26例、低活动度组44例、中高活动度组35例。同期体检健康者105例为对照组。RA组于入院次日、对照组于体检日采集空腹静脉血,采用实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞miR-146a、LC3 mRNA相对表达量,采用魏氏法检测ESR。比较RA组与对照组、不同疾病活动度RA患者外周血单个核细胞miR-146a、LC3 mRNA相对表达量及ESR;Pearson相关法分析外周血单个核细胞miR-146a、LC3 mRNA相对表达量及ESR与DAS28评分的相关性;绘制RO...     

老年AECOPD患者痰培养结果与外周血单个核细胞miR-125b、miR-133、miR-146a的相关性研究

目的 观察老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者痰培养结果与外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-125b、miR-133、miR-146a的相关性。方法 回顾性选取2021年1月至12月在江苏东南大学附属南京同仁医院收治的79例老年AECOPD患者为AECOPD组,根据痰培养结果分为阳性组(n=39)和阴性组(n=40);另选取同期在该院收治的43例老年COPD稳定期患者作为COPD稳定组。检测PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a相对表达量与血清中炎症相关指标[降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]水平,分析各组间指标差异,并采用Spearman相关性分析AECOPD患者PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a与血清炎症指标的相关性。结果 AECOPD组患者PBMC中miR-125b相对表达量、血清PCT、TNF-α、IL-6水平为0.87、0.38 ng/mL、41.98μg/L、250.01 pg/mL,高于COPD稳定组(0.49、0.05 ng/mL、21.16μg/...     

哮喘患儿外周血单个核细胞瘦素及Foxp3的表达

目的 探讨哮喘患儿瘦素及CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg)特异性转录因子叉头状转录因子P3(Foxp3)在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及意义。方法 选取2013年8月～2015年5月在沭阳县人民医院门诊及住院的28例哮喘患儿发作期(发作组),26例哮喘患儿缓解期(缓解组)及25例健康体检儿童(对照组),采用ELISA法检测各组血浆及PBMC培养上清液中的瘦素浓度,实时荧光定量PCR法测定PBMC中Foxp3的相对表达量,进行统计学分析。结果 发作组、缓解组和对照组三组血浆浓度(19.98±5.40 ng/ml,13.73±2.28 ng/ml,12.17±3.95 ng/ml)及PBMC培养上清液瘦素浓度(55.94±11.09 pg/ml,31.97±7.71 pg/ml,27.85±7.67 pg/ml)差异均有统计学意义(F=27.07,75.96,P均<0.01); 组间两两比较,发作组均高于缓解组与对照组(P均<0.01),而缓解组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。发作组、缓解组和对照组三组PBMC Foxp3相对表达量(2.70±0.48,3.84±0.45,3.77±0.38)差异有统计学意义(F=57.35,P<0.01); 组间两两比较,发作组低于缓解组与对照组(P<0.01),而缓解组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。发作组患儿PBMC培养上清液瘦素浓度与PBMC Foxp3相对表达量呈负相关(R=-0.730,P<0.01),而血浆瘦素浓度与PBMC Foxp3相对表达量无明显相关性(R=-0.367,P=0.550)。结论 哮喘患儿PBMC分泌瘦素增加,且分泌的瘦素抑制了Foxp3的表达。