汉防己甲素抑制鼠角膜新生血管VEGF、TGF-β的实验研究

目的 探讨汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-13)表达的影响.方法 碱烧伤法制作大鼠角膜新生血管模型,采用裂隙灯照相和免疫组化等方法,分别观察Tet组与其他对照组模型大鼠角膜新生血管每天的生长状况及榆测各组模型大鼠角膜中VEGF和TGF-β在各时期的表达情况.结果 Tet组模型大鼠角膜新生血管及VEGF和TGF-B的表达情况均较对照组有显著变化.结论 Tet能有效抑制碱烧伤诱发的大鼠角膜新生血管,同时降低新生血管中VEGF和TGF-B的表达.     

重组人角质细胞生长因子异构体对兔角膜碱烧伤的疗效观察

目的:观察重组人角质细胞生长因子异构体(简称K102)对实验性兔角膜碱烧伤的治疗作用。方法:60只新西兰大耳白兔,均选左眼为实验眼,随机分成5组,各组均以1mol·L-1的氢氧化钠溶液建立碱烧伤模型。其中,A、B、C组为治疗组(浓度分别为0.5、0.25、0.125mg·mL-1K102滴眼液),D组为阳性对照组(贝复舒滴眼液),E组为阴性对照组(K102滴眼液的溶媒)。镜下观察各组角膜上皮愈合速度(率)及血管新生(CNV)发生情况。结果:在碱烧伤24h内,A、B、C组的角膜上皮生长速率分别为1.52、1.57、1.46mm2·h-1,与E组(0.98mm2·h-1)比较具有显著性差异(P<0.01);各组上皮愈合率各时间点比较治疗组均优于阴性对照组并有显著性差异(P<0.01或<0.05)。治疗组低浓度可抑制CNV,高浓度可促进CNV。结论:K102滴眼液不同浓度均能够显著促进兔角膜碱烧伤后上皮愈合,抑制角膜CNV生长,改善角膜碱烧伤预后。     

阿柏西普对小鼠角膜碱烧伤后新生血管的抑制效果及机制探讨

目的 探讨阿柏西普对小鼠角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用及机制.方法 制作小鼠角膜碱烧伤模型,分为阿柏西普组(A组)和生理盐水组(B组),观察两组新生血管生长情况,对比新生血管面积.两组小鼠于造模后第14天,用Western blot检测血管内皮生长因子A(VEGFA)和血管内皮生长因子B(VEG-FB)在角膜组织中的表...     

双氯酚酸钠抑制VEGF对角膜新生血管调控作用的研究

目的探讨双氯酚酸钠抑制血管内皮生长因子(VEGF)对调控角膜新生血管的作用。方法建立化学伤后大鼠角膜新生血管动物模型,随机分为双氯酚酸钠组和生理盐水组。计算两组各个阶段新生血管面积,免疫组织化学染色方法检测VEGF蛋白在角膜各层中的分布,测定积分光密度确定表达的蛋白量。结果正常SD大鼠角膜中表达极低的VEGF蛋白;各个时段实验组的血管生长速度和面积均小于对照组(P<0.05);各个时段实验组VEGF表达少于对照组(P<0.01),均具有显著差异;各组内VEGF表达和角膜新生血管生成具有显著正相关(P<0.05)。结论双氯酚酸钠可以抑制碱烧伤后角膜VEGF的表达,从而可以调控角膜修复和炎症性新生血管生成过程。     

葛根退赤汤对碱烧伤诱导SD大鼠角膜新生血管的抑制作用

目的 研究葛根退赤汤对碱烧伤诱导斯泼累格·多雷(SD)大鼠角膜新生血管(CNV)的抑制作用及其可能作用机制.方法 成年SD大鼠40只(40眼),随机分为正常对照组、碱烧伤组、治疗低剂量组、治疗高剂量组.正常对照组10只(10眼)不做处理.剩余30只(30眼)利用1 mol/L NaOH滤纸片建立右眼碱烧伤模型.碱烧伤组...     

血管内皮生长因子及其受体的研究进展

<正>血管内皮生长因子(VEGF)家族及其受体在血管生成和血管通透性中有很重要的作用。当前VEGF家族有7个,分别是VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F及胎盘生长因子(placenta growth factor,PIGF)。VEGF家族的受体分为酪氨酸激酶受体[VEGFR-1(或Flt-1)、VEGFR-2(或KDR)、VEGFR-3]和非酪氨酸激酶受体[神经纤维网蛋白-1     

草乌甲素对碱烧伤引起的角膜新生血管的抑制作用

目的：探讨草乌甲素对碱烧伤引起的角膜新生血管的抑制作用。方法：采用碱烧伤法制备角膜新生血管模型,将36只健康的SD大鼠随机分为两组,实验组予以腹腔注射草乌甲素溶液,2次/d,至建立模型后2周;对照组以等体积的生理盐水腹腔注射;观察两组建立模型后d14新生血管长度和新生血管面积。结果：新生血管长度实验组为（1.68±0.13）mm,对照组为（2.76±0.13）mm;新生血管的面积实验组为（17.9±2.24）mm2,对照组为（26.9±2.55）mm2;两组比较差异均有统计学意义（P<0.01）。结论：草乌甲素可以抑制碱烧伤引起的角膜新生血管的生成。     

贝伐单抗抑制角膜新生血管形成的实验研究

目的观察贝伐单抗在抑制角膜新生血管形成中的作用,并探讨其机制。方法将64只新西兰大白兔分为实验组(32只)及对照组(32只),采用碱烧伤法进行角膜新生血管形成(CNV)造模,实验组给予角膜下注射贝伐单抗,对照组给予生理盐水角膜下注射,观察角膜水肿程度、CNV面积及长度,Western印迹法检测VEGF、IL-8及PIGF在角膜中的表达水平。结果角膜水肿程度:在造模24 h后,实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);造模21 d后,实验组轻于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。造模3、7、14及21 d时,实验组CNV面积、平均长度均明显小于对照组(P<0.05或P<0.01)。Western blot显示,VEGF在角膜中蛋白水平表达,对照组高于实验组(t=11.516,P<0.01);对照组与实验组PIGF比较差异无统计学意义(t=1.29,P>0.05);IL-8在对照组中表达高于实验组(t=4.49,P<0.05)。结论贝伐单抗可通过降低角膜中VEGF及IL-8表达有效抑制角膜水肿及新生血管形成。     

双氯酚酸钠抑制环氧化酶-2对角膜新生血管调控作用的实验研究

目的探讨双氯酚酸钠抑制环氧化酶-2从而调控角膜新生血管的作用。方法建立化学伤后角膜新生血管动物模型,随机分为双氧酚酸钠组和生理盐水组,计算两组各个阶段新生血管面积;应用免疫组织化学染色方法检测COX-2在角膜各层中的分布,测定积分光密度确定表达的蛋白量。结果正常SD大鼠角膜中表达极低的COX-2蛋白;各个时段实验组的血管生长速度和面积均小于对照组(P<0.05);各个时段实验组COX-2表达低于对照组(P<0.01),差异均具有统计学意义;各组内COX-2表达和角膜新生血管生成呈显著正相关(P<0.05)。结论双氯酚酸钠可以抑制碱烧伤后角膜COX-2的表达,从而调控角膜修复和炎症性新生血管生成过程。     

迷迭香酸通过FOXO3a/VEGF信号通路对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞的保护作用及机制研究

目的 探讨迷迭香酸对叉头框转录因子O3a(Forkhead box O3a,FOXO3a)/血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路蛋白表达及对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelia...     

牛碱性成纤维细胞生长因子对紫外线损伤角膜的修复作用

目的 探讨牛碱性成纤维细胞生长因子（bovinebasic fibroblast growth factor,bFGF）对大鼠角膜紫外线损伤后的修复作用。方法 选取30只健康无眼疾SD大鼠（♂,200~250 g）,随机分成3组,每组10只。除正常对照组常规饲养外,其余2组大鼠紫外线照射42 d,造模后,治疗组给予bFGF滴眼液;照射组给予等量生理盐水滴眼,14 d后取材。治疗期间每7 d进行裂隙灯检查、荧光素染色及泪膜破裂时间测定。TUNEL检测角膜细胞凋亡指数,免疫组化法检测Bax、Bcl-2表达。结果 造模结束后,模型大鼠角膜混浊,新生血管增生。照射组治疗后新生血管蔓延、角膜混浊严重。与照射组相比,治疗组新生血管只在角膜缘且角膜基本透明;角膜混浊程度减轻（P<0.05）;随着治疗时间延长,泪膜破裂时间平均值提高;角膜细胞凋亡指数下降（P<0.05）;Bcl-2/Bax显著升高（P<0.05）。结论 bFGF可显著减轻紫外线照射导致的角膜损伤,其作用机制可能与升高Bcl-2蛋白表达、降低Bax的蛋白表达从而上调Bcl-2/Bax比例有关。     

双嘧达莫可能通过Trk受体促进神经干细胞增殖

目的:探讨双嘧达莫促进体外培养神经干细胞增殖的机制。方法:取新生小鼠大脑进行神经干细胞原代培养,以2.5μmol·L~(-1)双嘧达莫组作为阳性对照组,分别加入腺苷受体拮抗剂CGS15943和Trk受体拮抗剂K252a,通过观察神经球形态、神经球生成数目、MTT法定量,初步探讨双嘧达莫促神经干细胞增殖的机制。结果:K252a 双嘧达莫组神经球数量和细胞活性均明显低于双嘧达莫组(P<0,01),而CGS15943 双嘧达莫组与双嘧达莫组相比差异无统计学意义。结论:双嘧达莫的促神经干细胞增殖作用可能是通过Trk受体介导的。     

miR-34a通过调控雄激素受体基因抑制前列腺癌细胞系LNCaP增殖

目的:探究miR-34a对雄激素受体(AR)基因的调控作用及对前列腺癌(PCa)LNCaP细胞增殖、凋亡的影响。方法:收集2016年10月至2019年9月本院泌尿外科行前列腺穿刺活检确诊为PCa患者组织标本36例,另取同期行手术治疗切除的良性前列腺增生(BPH)组织标本41例。体外培养LNCaP细胞,分别转染miR-34a mimics(mimics组),miR-34a mimic NC(NC组),设正常生长细胞为空白对照组(BC组),另在mimics组基础上转染AR过表达(AR过表达组)载体及其对照(AR对照组),采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-34a及AR mRNA表达水平,免疫印迹法检测AR蛋白、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)及原癌基因产物(c-Mcy)、细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、capase-3)的表达水平。结果:与BPH组织比较,PCa组织中miR-34a表达水平显著降低(P<0.05),AR mRNA及蛋白表达水平均显著增加(P<0.05);与BC、NC组比较,mimics组LNCap细胞miR-34a表达水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著增加(P<0.05),AR、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05),同一时间LNCap细胞活力均显著降低(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,miR-34a与AR可能存在一定的调控关系,过表达AR基因可逆转miR-34a mimics对LNCaP细胞增殖抑制,促进凋亡作用。结论:miR-34a可能通过调控AR抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,促进其凋亡。     

K252a在大鼠海马全脑缺血／再灌介导的神经元损伤中对JNK下游信号通路的影响

目的：检测K252a在大鼠海马全脑缺血/再灌介导的神经元损伤中对JNK下游信号通路的影响。方法采用SD大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,于缺血前20 min脑室注射K252a,用免疫沉淀、免疫印迹和免疫组化的方法研究K252a在大鼠海马全脑缺血/再灌注介导的神经元损伤中对JNK下游信号通路的影响。结果在海马的CA1区,K252a可以明显抑制脑缺血介导的JNK核底物c-jun的磷酸化和Fasl蛋白的表达,以及Fasl和Fas结合的增高。结论缺血前20 min脑室注射K252a可以明显抑制JNK介导的死亡受体信号通路。     

神经胶质成熟因子-β诱导糖尿病大鼠视网膜Müller细胞炎症反应的机制研究

目的 研究神经胶质成熟因子-β(GMFB)对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞活化的作用及相关机制。方法SPF级雄性SD大鼠60只，采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ,55 mg/kg)制备糖尿病模型后分为STZ组、STZ+AAVGMFB组和STZ+AAV-GMFB+K252a组，每组15只。另取15只正常大鼠作为CON组。STZ+AAV-GMFB组和STZ+AAV-GMFB+K252a组大鼠于成模8周后玻璃体腔单次注射AAV-GMFB腺病毒载体5μL。STZ+AAV-GMFB+K252a组在注射腺病毒基础上给予腹腔注射25μg/（kg·d）的K252a。12周后，免疫荧光检测GMFB在Müller细胞中的表达，免疫组织化学染色检测视网膜胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达，酶联免疫吸附试验检测视网膜炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素（IL）-1β、IL-6的表达，Western blot检测GMFB、脑源性神经营养因子（BDNF）及磷酸化酪氨酸激酶受体B(p-TrkB)蛋白相对表达水平。HE染色检测视网膜病理改变。结果 GMFB在Müller细胞中大量表达。与CON组比较，S...     

VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

肿瘤的生长和侵袭、转移依赖于新生血管的形成.抑制肿瘤介导的血管生成,阻断癌细胞的营养途径,就可有效抑制癌细胞增殖.血管内皮生长因子(VEGF)是肿瘤新生血管形成中的关键性促血管生长因子,它与特异性高表达在新生血管内皮细胞表面的受体酪氨酸激酶结合,激活酪氨酸激酶从而发挥生物学功能.因而以VEGF受体酪氨酸激酶为靶点的肿瘤血管靶向性治疗已成为近几年肿瘤治疗的新途径[1-3].     

奥希替尼相关心脏毒性的研究进展

奥希替尼是一种作用于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)的第三代酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor, TKI),主要用于治疗EGFR突变的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者。心脏毒性是奥希替尼常见的不良反应之一,其发生机制可能与奥希替尼抑制磷脂酰肌醇激酶3(phosphoinositide 3-kinase, PI3K)信号通路或人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2, HER2)/神经调节蛋白1(neuregulin 1, NRG1)信号通路相关;临床表现主要为QT间期延长(QT interval prolongation, QTIP)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)降低和心力衰竭(heart failure, HF),严重时可危及患者生命;其发生的危险因素涉及心脏疾病史和联合用药。奥希替尼治疗时应对患者...     

汉黄芩素调节炎症通路对膝骨关节炎大鼠炎性损伤的影响

目的 探讨汉黄芩素(wogonin,Wog)调节核因子(nuclear factor,NF)红系2相关因子(NF-erythroid 2-related factor,Nrf2)/Toll样受体(Toll like receptor,TLR)4/NF-κB通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠的影响。方法 将SD大鼠随机分为正常组、模型组、Wog低、中及高剂量(10、30及90 mg/kg)组,阳性对照组(塞来昔布,24 mg/kg),每组10只,用木瓜蛋白酶建立KOA大鼠模型,灌胃28 d。检测大鼠机械痛和冷痛阈值、软骨病理变化、细胞凋亡、炎症因子、氧化应激和蛋白表达水平。结果 在术后D7、D14、D21、D28,较模型组,Wog中、高剂量组和阳性对照组机械痛阈值、冷痛阈值显著上升;软骨病理损伤显著好转;细胞凋亡率、白介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、丙二醛、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3和caspase-9、基质金属蛋白酶(matrix meta...     

羊膜匀浆提取液与羊膜移植对大鼠碱烧伤后新生血管抑制作用的比较

目的 比较羊膜匀浆提取液和羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后新生血管的影响.方法 SD大鼠30只随机分为三组,每组10只.使用3 mm直径圆形滤纸片浸入1 mol·L-1,NaOH溶液中60 s后放置于大鼠角膜中央建立右眼角膜碱烧伤模型.A组行PBS（磷酸缓冲盐溶液）液点眼,B组行羊膜移植术,C组行AM（羊膜匀浆提取液）点眼.通过裂隙灯显微镜观察三组的角膜新生血管情况.结果 碱烧伤后11 d,三组的角膜新生血管面积分别为（49.12±2.05）、（35.17±1.95）、（34.04±1.37）mm2.B、C两组的新生血管面积比A组显著减少（qA、B=15.59,P A、B〈0.001,qA、C=19.340 6,PA、C〈0.001）,而B、C组之间没有显著性差异（q=1.499 4,P〉0.05）.结论 新鲜人羊膜匀浆提取液与羊膜移植均能有效减少角膜新生血管形成.     

补体C5a、C5a受体及其拮抗剂的研究进展

C5a是最重要的补体活化产物之一,它与相应的C5a受体结合被激活后,参与了多种疾病的病理过程,如急性肺损伤、脓毒血症、类风湿性关节炎、肾小球肾炎等疾病。如何阻断C5a信号的下传,从而减轻炎症反应一直是免疫学研究的热点问题。目前C5a和C5a受体的拮抗剂主要分为抗C5a抗体、小分子拮抗剂、C5a反义肽、C5a突变体和细菌来源的趋化抑制蛋白等。本文着重介绍C5a和C5a受体的结构与功能,以及相关拮抗剂的研究进展。