大蒜素对大鼠心肌缺血的保护作用及相关机制研究

目的探究大蒜素对大鼠心肌缺血的保护作用及其相关机制。方法将50只准性SD大鼠随机平均分成假手术组(SO组),缺血/再灌注组(I/R组),大蒜素处理组高剂量组(HA组)、中剂量组(MA组)、低剂量组(LA组),每组10只。大蒜素处理组分别灌胃给予100、50、25 mg/(kg·d)大蒜素,给药20 d后构建大鼠心肌缺血/再灌注模型。检测各组大鼠血清及缺血心肌组织肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB),丙二醛(malondialdehyde,MDA),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量;Tunel法检测各组大鼠心肌组织细胞凋亡情况;免疫印迹法检测天冬氨酸蛋白水解酶-3(aspartic protease-3,caspase-3),磷酸化分裂原激活的蛋白激酶(phosphorylation of mitogen activated protein kinase,p-p38MAPK)及分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)的表达情况。结果 HA组与MA组的CK-MB、MDA水平均比I/R组显著偏低(P<0.05),HA组的SOD水平较I/R组显著偏高(P=0.015)。HA组,MA组的心肌损伤范围及凋亡指数较I/R组显著偏低(P<0.05),HA组caspase-3蛋白表达水平较I/R组显著偏低(P=0.023)。5组p38MAPK蛋白表达量无显著差异,但是HA组p-p38MAPK蛋白表达量较I/R组显著偏高(P=0.038)。结论大蒜素对大鼠心肌缺血具有明显的保护作用,且这种保护作用可能与心肌凋亡的抑制作用及p38蛋白的活化具有一定关系。     

钼对小鼠睾丸组织中MAPK信号通路的影响及其对雄性生殖系统的毒性机制研究

目的探讨钼对小鼠睾丸组织中MAPK信号通路的影响,分析其对雄性生殖系统的毒性机制。方法取雄性昆明系小鼠60只,随机分为4组,每组15只,分别为生理盐水对照组、低剂量组(钼酸钠,300 mg/kg)、中剂量组(钼酸钠,600 mg/kg)、高剂量组(钼酸钠,1200 mg/kg)。每日进行灌胃染毒,连续30 d,取出睾丸。采用荧光定量PCR检测小鼠睾丸ERK1、ERK2、JNK1、JNK2、p38基因mRNA表达。结果低、中、高剂量组ERK2、JNK2、p38 mRNA表达显著低于对照组(P<0.05);低、中、高剂量组ERK1、JNK1mRNA表达显著高于对照组(P<0.05);且呈剂量依赖性,随着剂量的增加,ERK2、JNK2、p38 mRNA表达显著降低,ERK1、JNK1mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论钼在ERK、JNK、p38信号通路mRNA水平上对小鼠睾丸组织产生影响,钼对雄性生殖系统损伤是通过激活ERK、JNK、p38通路的活性来调控的,且呈剂量依赖性。不同浓度钼酸钠中毒可损伤小鼠睾丸组织的MAPK信号通路。     

川贝母对哮喘模型小鼠气道炎症及ERK/MAPK信号通路的影响

目的:考察川贝母对哮喘模型小鼠气道炎症及细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,探讨其治疗哮喘的可能机制。方法:以卵蛋白致敏小鼠建立哮喘模型。将造模成功的40只小鼠随机分为模型组(灌胃0.5%羧甲基纤维素)、阳性对照组(腹腔注射0.5 mg/kg地塞米松)和川贝母低、高剂量组(灌胃9.0、18.0 mg/kg),每组10只;另选10只正常小鼠作为正常组(灌胃0.5%羧甲基纤维素)。每天给药1次,连续28 d。给药结束后,对小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中总细胞和分类细胞(中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞)进行计数;光镜下观察小鼠支气管平滑肌病理组织形态,并进行炎症评分;酶联免疫吸附法测定肺组织中ERK、磷酸化ERK(p-ERK),p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)活性;Western blot法测定肺组织中ERK、p-ERK、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法测定肺组织中ERK、p38 MAPK m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠BALF中总细胞计数、分类细胞计数、炎症评分和肺组织中p-ERK、p-p38 MAPK活性均显著升高(P<0.01),肺组织中p-ERK、p-p38 MAPK蛋白表达以及ERK、p38 MAPK m RNA表达均显著增强(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论:川贝母可改善哮喘模型小鼠气道炎症,其机制可能与抑制ERK/MAPK信号通路的激活有关。     

N-乙酰半胱氨酸影响p38有丝分裂原活化蛋白激酶对顺铂诱导急性肾损伤的保护作用

目的研究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导大鼠急性肾损伤(acute kidney in-jury,AKI)后组织细胞凋亡的影响和与p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)的关系。方法静脉注射CDDP制备大鼠AKI模型。大鼠随机分为正常对照组、AKI模型对照组、NAC低剂量组(50 mg.kg-1)、NAC中剂量组(100 mg.kg-1)、NAC高剂量组(200 mg.kg-1)、特异性p38MAPK抑制剂SB203580组(10mg.kg-1)。大鼠预先连续给药3 d,给予CDDP,再继续给药5 d。TUNEL法进行细胞凋亡检查。试剂盒测定肾脏组织caspase-3。Western blot测定caspase-3、Bax、Bcl-2、磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,p-p38MAPK)表达。结果与正常对照组相比,CDDP诱导AKI模型组肾组织凋亡细胞增加,caspase-3、Bax、p-p38MAPK表达升高,Bcl-2表达降低(P<0.01)。与AKI模型组相比,NAC与SB203580减少凋亡细胞、降低肾脏组织caspase-3、Bax、p-p38MAPK表达和增加Bcl-2表达(P<0.01)。结论 NAC可有效防治CD-DP诱导大鼠AKI,并与p38MAPK相关。     

地黄合剂介导p38 MAPK通路对糖尿病大鼠主动脉的影响

目的 研究地黄合剂抑制p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase, p38 MAPK)对糖尿病大鼠主动脉蛋白羰基和炎症因子的影响。方法 50只SPF大鼠均分为5组，分别为正常组、糖尿病组、氯沙坦组、低剂量地黄(合剂)组、高剂量地黄(合剂)组，除正常组外，其他组大鼠建立糖尿病大鼠模型，对其用药，麻醉抽血，开腹取出主动脉，采用放免法、苏木素-伊红染色法(HE染色法)、蛋白印迹法(Western blot)等检测大鼠基本指标、主动脉病理学变化情况、p38 MAPK通路相关蛋白情况、蛋白羰基相关指标水平、炎性因子情况并进行对比分析。结果 与正常组相比，糖尿病组大鼠体质量下降，血糖和血管紧张素2升高(P<0.05);氯沙坦组和高剂量地黄组体质量明显升高，血糖和血管紧张素2降低(P<0.05);低、高剂量地黄组组织形态均有不同程度的变化，高剂量地黄组和氯沙坦组大鼠细胞变化减轻程度最为明显(P<0.001),低剂量地黄组次之(P<0.05)。与糖尿病组相比，正常组大鼠的p38 MAPK、cAMP反应元件结合蛋白1(c...     

银杏叶总黄酮对肾缺血-再灌注损伤大鼠p38 MAPK活性的影响

目的观察银杏叶总黄酮(TFG)对肾缺血-再灌注(I-R)损伤大鼠p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性的影响。方法 120只SD大鼠随机均分为假手术组I、-R组和TFG预处理组(TFG 250 mg/kg,每天3次)。3 d后采用夹闭双侧肾蒂致肾缺血45 min后再灌注制作大鼠肾I-R损伤模型。Western blot检测p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK蛋白表达;免疫组化方法检测肾组织磷酸化p38 MAPK的分布情况。结果磷酸化p38 MAPK表达活性在再灌注10 min开始增加,1 h达最高峰,持续至24 h仍高于正常水平,且主要在肾小管细胞表达。TFG预处理组磷酸化p38 MAPK的表达较I-R组明显减弱(P<0.01)。结论 TFG可能通过抑制肾I-R损伤大鼠p38 MAPK的活化而发挥防治作用。     

乌司他丁通过干预p38MAPK/ERK信号通路减轻脓毒症性肺损伤

目的探讨乌司他丁(ulinastatin,UTI)对脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠的肺保护作用及可能机制。方法 56只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型(LPS 6、12、24 h)组、乌司他丁(UTI 6、12、24 h)组,每组8只。采用腹腔注射细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,10 mg·kg~(-1))的方法制备大鼠ARDS模型,乌司他丁组在左侧腹腔注射LPS后1 h后,在右侧腹腔注射乌司他丁20 000 U·kg~(-1),对照组、注射同等剂量的生理盐水,各组大鼠在不同时间点留取肺组织及血浆标本。计算肺组织湿/干质量(W/D)比值;光镜下观察肺组织病理改变;用ELISA法检测各组血浆中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素~(-1)8(interleukin~(-1)8,IL~(-1)8)、肺表面活性物质A((surfactant protein A,SPA)含量,检测各组肺匀浆中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide Dismutase,SOD)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;免疫组化法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)、细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular-signal regulated protein kinase,ERK)蛋白表达情况;Western blot法检测肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)及磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达的变化。结果光镜下观察对照组肺组织结构完整,肺泡腔清晰;LPS组肺泡壁增厚,渗出明显,肺组织出现损伤性变化,以12h组变化最明显;UTI组各组病理改变较LPS组明显减轻。与对照组比较,LPS组W/D比值、血浆TNF-α、IL~(-1)8含量,肺匀浆MDA、NO含量均明显升高(P<0.05),而肺匀浆SOD含量明显降低;与LPS组比较,UTI各组肺组织W/D比值、血浆TNF-α、IL~(-1)8含量,肺匀浆MDA含量均明显降低,而肺匀浆SOD含量明显增高,差异有统计学意义;免疫组化结果显示:与对照组比较,LPS组p38MAPK、ERK蛋白在胞质和胞核表达均明显增加,而UTI组较LPS组表达均明显减少;Western blot检测结果显示:与对照组比较,LPS组肺组织p-p38MAPK/ERK蛋白表达均明显增高,而UTI干预组蛋白表达均明显受抑制。结论乌司他丁通过干预p38MAPK/ERK信号通路、抗氧化作用而减轻炎症反应,发挥对LPS致脓毒性大鼠ARDS的保护作用。     

汉防己乙素抑制P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化缓解心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡和线粒体氧化损伤

目的探讨汉防己乙素(Fan)对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡和线粒体损伤的影响。方法雄性SD大鼠分为假手术组、模型(I/R)组、I/R+Fan 1,3和10 mg·kg-1组,I/R+盐酸维拉帕米(VH)20 mg·kg-1组,每组9只。模型大鼠结扎左前降支冠状动脉30 min后,松开结扎线再灌注90 min。给药大鼠分别在造模前20 min ip给予Fan 1,3,10 mg·kg-1及VH 20 mg·kg-1。记录平均动脉血压(MAP),左心室收缩压(LVSP);ELISA法测定血清中肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量;HE染色观察心肌组织病理损伤;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;试剂盒检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;Western印迹法检测心肌组织Bcl-2、Bax、原癌基因(c-Myc)、活化胱天蛋白酶3蛋白表达水平和P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平。结果与假手术组比较,I/R组LVSP和MAP、GSH含量、SOD活性及c-Myc蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);Mb,CK-MB和MDA含量、心肌细胞凋亡率、活化胱天蛋白酶3和Bax蛋白表达水平及P38MAPK和ERK1/2的磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+Fan 3和10 mg·kg-1组LVSP和MAP、GSH含量、SOD活性及Bcl-2和c-Myc蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),Mb,CK-MB和MDA含量显著降低(P<0.05),心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.05),胱天蛋白酶3和Bax/Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),P38 MAPK和ERK1/2磷酸化水平显著降低(P<0.05)。结论 Fan能够抑制P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化,缓解心肌I/R大鼠心肌细胞凋亡和线粒体损伤。     

青黛通过ERK/p38 MAPK/MEK信号通路对湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠抗炎修复和免疫功能的影响

目的 探讨青黛对湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠抗炎修复和免疫功能的影响,并探讨其机制。方法 60只大鼠随机分为6组,分别为对照组、模型组、青黛低剂量组、青黛中剂量组、青黛高剂量组以及柳氮磺胺吡啶(SASP)组、每组10只。青黛低、中、高剂量组分别ig 0.6、1.2、2.4 g/kg青黛悬浊液,SASP组ig 500 mg/kg柳氮磺吡啶悬浊液,对照组、模型组ig等体积生理盐水。检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-4、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞百分率;放射免疫法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;荧光实时定量PCR法检测蛋白激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和MEK mRNA相对表达;免疫印迹法检测ERK、p38 MAPK和MEK蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠血清中IL-4、IL-10降低,TNF-α升高,PBMC中CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞含量降低,大鼠结...     

黄芪水提物对慢性肾功能衰竭模型大鼠的改善作用及其对MAPK信号通路的影响

目的:考察黄芪水提物对慢性肾功能衰竭(CRF)模型大鼠的改善作用及其对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,探讨其可能机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组(10只)和造模组(50只),后者灌胃25%腺嘌呤混悬液200 mg/kg(每天1次,连续28 d)以复制CRF模型。造模后,将造模组大鼠随机分为模型组、贝那普利组(阳性对照,2 mg/kg)和黄芪水提物低、中、高剂量组(1.5、3、6 g/kg,按生药量计),每组10只。对照组和模型组大鼠均灌胃等体积生理盐水,各给药组均灌胃相应药物;每天1次,连续28 d。末次给药12 h后,采用比色法检测各组大鼠血清肾功能指标(血肌酐、尿素氮、尿酸)含量,采用酶联免疫吸附测定法检测其血清炎症因子[白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α]水平,分别采用羟胺法、可见分光光度法和硫代巴比妥酸法检测各组大鼠肾组织中氧化应激相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)]的活性或含量,分别采用实时聚合酶链反应法、Western blotting法检测其肾组织中凋亡相关因子[Bax、Bcl-2、胱天蛋白酶3(Caspase-3)]mRNA以及MAPK信号通路相关调控蛋白[p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)]的表达情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清肾功能指标含量、炎症因子水平以及肾组织MDA含量、Bax与Bcl-2 mRNA相对表达量的比值(Bax/Bcl-2)、Caspase-3 mRNA的相对表达量、MAPK信号通路相关调控蛋白磷酸化产物(p-p38 MAPK、p-JNK、p-ERK1/2)的相对表达量均显著升高,肾组织SOD、CAT活性均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠血清肾功能指标含量、炎症因子水平以及肾组织Bax/Bcl-2、MAPK信号通路相关调控蛋白磷酸化产物的相对表达量,贝那普利组和黄芪水提物中、高剂量组大鼠肾组织MDA含量、Caspase-3 mRNA相对表达量均显著降低;贝那普利组和黄芪水提物中、高剂量组大鼠肾组织SOD、CAT活性均显著升高(P<0.05或P<0.01);且贝那普利组MDA含量、Bax/Bcl-2均显著低于黄芪水提物高剂量组(P<0.05)。结论:黄芪水提物对CRF模型大鼠具有一定的改善作用,可抑制其炎症反应、氧化应激和细胞凋亡,其作用机制可能与抑制MAPK信号通路相关调控蛋白的表达有关。     

通心络胶囊对糖尿病心肌病小鼠的心脏保护作用

目的 观察通心络胶囊调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38 MAPK)炎症信号通路对糖尿病心肌病小鼠防治作用。方法 KK/Upj-Ay小鼠40只随机分为模型组和通心络低、中、高剂量组,每组10只,另设C57BL/6小鼠10只作为对照组。各组给予相应药物,疗程为12周,观察体质量,测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、左心室指数;放射免疫法测定各组血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量;HE染色观察心肌组织病理变化;Western blot法检测心肌组织p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、细胞外信号调节激酶(extracellular-signa1 regulated kinase,ERK)总蛋白及磷酸化p38 MAPK、JNK、ERK(p-p38 MAPK、p-JNK、p-ERK)的表达。结果 与对照组比较,模型组FBG、HbA1c、TG、TC、左心室指数、TNF-α、IL-6及p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK表达均显著增高,通心络胶囊能够减轻心肌组织病理损伤,降低TG、TC、TNF-α、IL-6含量及p-p38MAPK、表达,而不影响体质量、FBG、HbA1c及p-JNK、p-ERK表达;且各组p38 MAPK、JNK、ERK总蛋白表达无统计学意义。结论 通心络胶囊可减轻糖尿病心肌病理损伤,改善心功能,其机制可能与降低p38 MAPK蛋白磷酸化水平,抑制炎症反应有关。     

水飞蓟素通过共同抑制TLR4/NF-κB和TNF-α/ROS/P38MAPK通路减轻糖尿病肾病大鼠肾脏损伤的研究

目的：探讨水飞蓟素通过共同抑制Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)和肿瘤坏死因子α/活性氧簇/P38丝裂原活化蛋白激酶(TNF-α/ROS/P38MAPK)通路减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏损伤的机制。方法：选取健康SD大鼠50只,按随机数字表法分为对照组、模型组、低剂量水飞蓟素组、中剂量水飞蓟素组、高剂量水飞蓟素组,每组10只。建模成功并治疗8周后,生化分析仪测定各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C(Cys-C)、β₂微球蛋白(β₂-MG)、24 h尿蛋白(UTP)水平;计算肾脏指数;试剂盒检测各组大鼠肾组织丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)水平;RT-PCR检测各组大鼠TLR4,NF-κB,TNF-α和P38MAPK等mRNA的表达水平。结果：与对照组相比,模型组体质量、T-AOC均降低(P<0.05),肾脏指数和FBG,Scr, BUN,Hcy, Cys-C,β₂-MG,24 h UTP,MDA,TLR4 mRNA,NF-κB p65 mRNA,...     

水飞蓟素对急性胰腺炎大鼠急性肺损伤及MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的探究水飞蓟素对急性胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用,以及与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子κB(NF-κB)信号通路的关系。方法将SD大鼠分为假手术组、模型组、水飞蓟素低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg~(-1))、地塞米松组(2 mg·kg~(-1)),酶联免疫法测定炎症指标;苏木精-伊红染色法(HE)观察胰腺、肺部组织病理学变化;免疫印迹法检测MAPK/NF-κB通路蛋白表达。结果建模后,模型组PaO_2、OI降低,PaCO_2、胰腺、肺组织病理评分、淀粉酶活性、TNF-α和IL-1β水平均升高,与假手术组相比差异有显著性(P<0.05);给药后,水飞蓟素各组、阳性组的PaO_2、OI升高,PaCO_2、胰腺、肺组织病理评分、淀粉酶活性、TNF-α、IL-1β水平、胰腺、肺组织W/D、PMN降低,p-JNK、p-p38、p-ERK1/2、p-IκBα蛋白表达降低,呈剂量依赖性,与模型组相比差异有显著性(P<0.05)。结论水飞蓟素可能通过抑制MAPK/NF-κB通路,发挥对重症急性胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用。     

紫草素对肺炎链球菌引起的肺炎小鼠细胞外信号调节激酶 / p38丝裂素活化蛋白激酶 /核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白 3信号通路及肺血管通透性的影响

目的 探究紫草素对肺炎链球菌引起的肺炎小鼠细胞外信号调节激酶/p38丝裂素活化蛋白激酶/核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白3(ERK/p38/NLRP3)信号通路及肺血管通透性的影响.方法 采用肺炎链球菌悬液50 L滴加BALB/c小鼠破损鼻黏膜建立肺炎链球菌性肺炎模型,成模小鼠采用随机数字表法分为模型组、紫草素低、中、高浓度组及头孢呋辛酯组,另取鼻腔滴加50 L生理盐水BALB/c小鼠为对照组,每组10只,紫草素低、中、高浓度组分别给予紫草素12.5 mg/kg、25.0 mg/kg、50.0 mg/kg,头孢呋辛酯组给予头孢呋辛酯50.0 mg/kg,对照组、模型组给予等量生理盐水,每天1次,连续灌胃7 d.末次给药12 h后处死小鼠,检测各组小鼠左肺湿/干重比值(W/D),每组采用随机数字表法选取4只小鼠进行1％伊文氏蓝5 mL/kg尾静脉注射检测肺血管通透性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达量,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(WB)分别检测肺组织ERK、p38、NLRP3 mRNA及蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组小鼠肺组织W/D比值[(4.49±0.27)％比(3.02±0.15)％]、肺血管通透性[(0.091±0.009)g/mg比(0.034±0.004)g/mg]、IL-1β[(567.29±14.65)pg/mL比(102.46±6.73)pg/mL]、TNF-α[(417.16±12.89)pg/mL比(83.59±6.28)pg/mL]、ERK、p38、NLRP3 mRNA及蛋白表达水平均显著增加(P<0.05);与模型组比较,紫草素低、中、高浓度组小鼠肺组织W/D比值、肺血管通透性、IL-1β、TNF-α表达量、ERK、p38、NLRP3 mRNA及蛋白表达水平均依次降低(P<0.05),紫草素高剂量组均低于头孢呋辛酯组(P<0.05).结论 紫草素可减轻肺炎链球菌性肺炎小鼠肺组织损伤、炎症反应及肺血管通透性,可能与抑制ERK/p38/NL?RP3信号通路有关.     

重楼皂苷 Ⅶ通过 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的观察重楼皂苷 Ⅶ对肝癌细胞恶性生物学行为的影响,并探讨相关机制。方法于 2021年 6月至 2022年 6月,对数期人肝癌 HepG2细胞,分为对照组(常规培养)、重楼皂苷 Ⅶ组(重楼皂苷 Ⅶ 0.8 μmol/L)、SB203580［p38丝裂原活化蛋白激取酶( p38 MAPK)信号通路抑制剂］组( SB203580 10 μmol/L)、联合组(重楼皂苷 Ⅶ 0.8 μmol/L、SB203580 10 μmol/L)。噻唑蓝法检测细胞增殖能力;膜联蛋白 Ⅴ(Annexin Ⅴ)/碘化丙啶( PI)双染法检测细胞凋亡率;划痕实验检测细胞迁移能力;小室实验检测细胞侵袭能力;蛋白质印迹法检测细胞 p38 MAPK、磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶( p-p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、磷酸化细胞外信号调节激酶( p-ERK1/2)蛋白表达。结果与对照组 24、48、72 h吸光度值,迁移率( 74.33±9.37)%,凋亡率( 3.25±0.78)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2及侵袭细胞数( 364.92±47.99)个比较,重楼皂苷 Ⅶ组 24、48、 72 h吸光度值,迁移率( 11.21±3.35)%降低,凋亡率( 39.87±8.94)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2升高,侵袭细胞数( 54.84±7.41)个减少( P<0.05); SB203580组 24、48、72 h吸光度值,迁移率( 89.30±14.56)%升高,凋亡率( 1.05±0.15)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2降低,侵袭细胞数( 617.04±75.34)个增加( P<0.05)。与重楼皂苷 Ⅶ组比较,联合组 24、48、 72 h吸光度值,迁移率( 40.52±8.18)%升高,凋亡率( 11.30±2.80)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2降低,侵袭细胞数( 141.36±16.75)个增加( P<0.05);与 SB203580组比较,联合组 24、48、72 h吸光度值、迁移率降低,凋亡率、 p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2升高,侵袭细胞数减少( P<0.05)。结论重楼皂苷 Ⅶ可抑制肝癌 HepG2细胞增殖、迁移及侵袭等恶性生物学行为,并诱导其凋亡,作用机制可能与激活 p38 MAPK信号通路相关。     

蛇床子素对髓核致炎神经根痛大鼠的保护作用

目的研究蛇床子素通过抑制脊髓背角胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路对髓核致炎神经根痛大鼠的保护作用。方法将80只大鼠随机分为对照组(n=20)、模型组(n=20)及低(n=20)、高剂量实验组(n=20)。模型组及低、高剂量实验组大鼠均用手术在特定椎节(L_5-6)左侧建立髓核致炎神经根痛大鼠模型。造模后,低、高剂量实验组分别于L_5根周注射20,30 mg·kg^-1·d^-1蛇床子素,模型组与对照组注射等量生理盐水,连续干预7 d。用Up-Down法检测各组大鼠50%机械性撤足痛阈值(MWT);用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平;用苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠脊髓背角组织病理变化;用蛋白质印迹(Wb)法检测脊髓背角磷酸化ERK(p-ERK)与磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白表达。结果对照组、模型组与低、高剂量实验组大鼠术后7 d时的50%MWT分别为24.31±1.79,10.12±1.36,17.33±2.15和26.96±3.11,各组大鼠脊髓背角p-ERK蛋白相对表达量分别为0.14±0.07,0.95±0.05,0.33±0.12和0.25±0.10,p-p38 MAPK蛋白相对表达量分别为0.38±0.11,0.93±0.07,0.69±0.14和0.47±0.09。各组的上述指标相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论蛇床子素可改善髓核致炎神经根痛大鼠的痛敏程度,抑制炎性反应,其机制可能与抑制脊髓背角ERK/MAPK通路的信号转导有关。     

异甘草酸镁对肝组织中波形蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 研究异甘草酸镁抑制肝纤维化进程中肝细胞上皮间质转化作用的机制.方法 将60只小鼠随机分为6组,每组10只,分别为空白对照组,模型组,异甘草酸镁低剂量组(4 mg/kg)、中剂量组(16 mg/kg)和高剂量组(32mg/kg),水飞蓟宾组(16 mg/kg),其中模型组为运用CCl4.HE染色观察各组肝组织的病理学改变,免疫组化法检测肝组织中波形蛋白(Vimentin)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Western Blot检测肝组织中Vimentin、Collagen Ⅰ和α-SMA的蛋白表达情况.结果 病理学结果显示,与空白对照组相比,模型组小鼠肝组织的纤维化程度明显加重,肝脏炎症坏死区及纤维间隔明显增多;异甘草酸镁各剂量组小鼠肝组织纤维化水平均明显低于模型组.免疫组化检测和Western Blot结果均显示,模型组肝细胞Virnentin、Collagen Ⅰ和α-SMA的表达量明显增强;异甘草酸镁能抑制小鼠肝组织中Vimentin、Collagen Ⅰ和α-SMA的蛋白表达,且具有一定剂量依赖关系.结论 异甘草酸镁对CCl4所致小鼠肝纤维化形成有明显的抑制作用.     

水飞蓟素对神经胶质瘤的体内外抑制作用及机制

目的 探讨水飞蓟素（SM）对神经胶质瘤的体内外抑制作用及潜在机制。方法 将人神经胶质瘤细胞系U87随机分为对照组，低、中、高质量浓度SM组（50、100、200μg/mL），蛋白激酶B（又称Akt）激活剂组（SC79 20μmol/L），高质量浓度SM联合Akt激活剂组（SM 200μg/mL+SC79 20μmol/L）。经药物（对照组除外）处理后，检测各组细胞的光密度（OD）值、克隆形成率、凋亡率、增殖/凋亡相关蛋白[增殖细胞核抗原（PCNA）、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、胱天蛋白酶3(caspase-3)]的表达情况和Akt/促分裂原活化的蛋白激酶（MAPK）信号通路相关蛋白[Akt、p38 MAPK、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)]的磷酸化水平。于右侧腋窝内皮下注射U87细胞建立异种移植肿瘤裸鼠模型并将其分为对照组，低、中、高剂量SM组（25、50、100 mg/kg）,Akt激活剂组（SC79 40 mg/kg）、高剂量SM联合Akt激活剂组（SM 100 mg/kg+SC79 40 mg/kg），每组5只。经药物（裸鼠对照组除外）干...     

利拉鲁肽对食源性肥胖大鼠下丘脑p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的 研究利拉鲁肽对食源性肥胖大鼠的治疗效果，并探讨其对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法 以饲喂高脂饲料的方法建立食源性肥胖大鼠模型。将31只食源性肥胖大鼠随机分为模型组(n=11)、利拉鲁肽组(n=10)、联合组(n=10),另取10只健康大鼠做为对照组。利拉鲁肽组腹腔注射0.6 mg·kg^-1利拉鲁肽注射液，联合组腹腔注射0.6 mg·kg^-1利拉鲁肽注射液+2 mg·kg^-1茴香霉素，对照组、模型组腹腔注射等体积生理盐水。每天1次，持续2周。以全自动生化分析仪检测大鼠血脂指标；以脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测下丘脑弓状核神经元凋亡率；以蛋白质印迹法检测下丘脑组织p38 MAPK、p-p38 MAPK、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、p-ERK1/2蛋白表达水平。结果 利拉鲁肽组、联合组、对照组、模型组的体脂比分别为(3.34±0.35)%、(3.61±0.38)%、(2.38±0.25)%和(3.94±0.41)%;三酰甘油(TG)分别为(1....     

三氯乙烯对大鼠肝细胞凋亡及c-myc和p53基因表达的影响

目的研究三氯乙烯对大鼠肝细胞凋亡、c-myc和p53表达的作用。方法选用雄性SD大鼠,每组5只,用1 500和3 000 mg/kg的三氯乙烯经口灌胃染毒。用流式细胞术研究细胞凋亡和细胞增殖,用RT-PCR检测c-myc和p53表达。结果雄性SD大鼠经口染毒1 500和3 000 mg/kg的三氯乙烯,可引起肝细胞凋亡和增殖指数下降,肝细胞c-myc mRNA和p53 mRNA较对照组显著增高(P0.01)。结论三氯乙烯在1 500和3 000 mg/kg的剂量条件下,能明显诱导大鼠肝细胞凋亡并抑制增殖,使大鼠肝细胞c-myc和p53的表达增强。