模拟失重对大鼠心肌细胞凋亡影响的实验研究

目的 探讨模拟失重对大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 将20只SD大鼠随机分为正常对照组及尾吊组,每组各10只.正常对照组常规饲养3周,尾吊组悬吊3周.结束后同时取2组大鼠心肌组织,用TUNEL法、流式细胞仪法检测心肌细胞凋亡.同时检测心肌组织Caspase-3活性.结果 与对照组比较,尾吊组大鼠心肌细胞凋亡明显增加(P<0.01),Caspase-3活性明显增高(P<0.05).结论 模拟失重导致尾吊组大鼠心肌组织细胞凋亡增加.这可能是模拟失重条件下心脏重量减轻、功能减低的细胞学基础之一.     

尾悬吊模拟失重大鼠肺组织细胞凋亡调控基因的研究

为研究尾悬吊模拟失重大鼠肺组织细胞凋亡调控基因的变化，采用尾悬吊模拟失重，分为悬吊7天和21天及相应对照4组，每组10只健康雄性SD，并采用原位杂交技术检测肺组织bcl-2/bax的表达情况。发现7天尾悬吊模拟失重大鼠肺组织bcl-2 mRNA水平明显低于对照组，两者之间差异有显著性意义（P＜0．05），但21天bcl-2 mRNA水平与对照组相比无显著性差异（P＜0．05）；7天尾悬吊模拟失重大鼠肺组织bax mRNA水平明显高于对照组，两者之间差异有显著性意义（P＜0．05），但21天bax mRNA水平与对照组相比亦无显著性差异（P＞0．05）。提示尾悬吊7天模拟失重大鼠肺组织细胞凋亡调控基因存在变化。     

过度训练对大鼠心肌细胞凋亡的影响

为了研究过度训练对大鼠心肌细胞凋亡的影响 ,通过对大鼠进行力竭性游泳训练建立大鼠过度训练模型 ,用DNA原位末端标记法检测心肌细胞的凋亡 ,并用免疫组化的方法检测心肌细胞中bcl- 2和Fas蛋白的表达情况。结果发现 :①过度训练时 ,大鼠心肌细胞凋亡显著增加。心肌细胞凋亡可能是过度训练影响心血管功能的病理生理机制。②过度训练时 ,大鼠心肌细胞中bcl- 2蛋白的表达显著下降 ,Fas蛋白的表达轻度增加。因此 ,过度训练抑制bcl- 2蛋白的表达而促进Fas蛋白的表达 ,这可能是过度训练时大鼠心肌细胞凋亡发生的基因调控机制。③过度训练时 ,大鼠心肌组织和血清中SOD活性显著下降 ,MDA含量显著增加。因此 ,过度训练时机体抗氧化能力下降 ,导致氧自由基生成增多。这可能也是心肌细胞凋亡的调节机制。     

还原型谷胱甘肽对大鼠力竭运动后自由基和心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠力竭运动后自由基和心肌细胞凋亡的影响。方法:30只SD大鼠随机分为对照组、力竭组和GSH组,每组10只。对照组大鼠安静状态下饲养,腹腔注射生理盐水1周后取样;力竭组大鼠腹腔注射生理盐水1周后进行一次性力竭运动,运动后即刻取样;GSH组大鼠给予GSH腹腔注射1周后,进行一次性力竭运动,运动后即刻取样。检测各组大鼠血清及心肌丙二醛(MDA)含量和心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性,并采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率。结果:力竭组大鼠心肌SOD活性显著低于对照组和GSH组(P<0.05);力竭组大鼠血清和心肌MDA含量均显著高于对照组和GSH组(P<0.05)。力竭组大鼠心肌细胞凋亡率均显著高于对照组和GSH组(P<0.05)。结论:氧自由基生成增加和(或)SOD活性降低导致大鼠力竭运动后心肌细胞凋亡增加;GSH可减轻力竭运动后大鼠心肌细胞凋亡程度。     

大鼠心肌缺血再灌注损伤中的心肌细胞凋亡

 目的 观察MIRI时心肌细胞凋亡现象及其病理组织学改变,探讨细胞凋亡在MIRI中的意义.方法 采用SD大鼠MIRI模型,用原位末端标记染色检测心肌细胞凋亡和HE染色法检测心肌病理组织学改变.结果 假手术组及MIRI大鼠左室非缺血心肌组织中均末发现凋亡细胞出现,MIRI60 min、90 min和120 min大鼠缺血心肌中均可见凋亡细胞,且凋亡细胞的个数随再灌注时间的延长而增多,分别为36.3±8.76个/视野,38.41±14.21个/视野和48.01±23.87个/视野..结论 缺血后再灌注损伤可诱发心肌细胞凋亡.     

成体心肌细胞凋亡、增殖与运动促进心肌细胞再生研究进展

<正>传统观点认为,成体心肌细胞是终末分化细胞,不再进行分裂增殖,其细胞数目也不再增加。20世纪90年代研究显示,哺乳动物包括人类心脏在正常生理状态下存在着心肌细胞死亡,在病理状态下心肌损伤后,心肌细胞除了发生坏死外,还通过凋亡使心肌组织发生重构。细胞坏死和凋亡率增     

骨髓单个核细胞移植对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及bcl - 2表达的调节

 目的观察骨髓单个核细胞(BM-MNCs)移植对心肌梗死(MI)后恢复期心肌细胞凋亡及心功能的影响,并探讨其可能机制.方法通过结扎左冠状动脉前降支制成MI模型.2周后第2次开胸在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM-MNCs混悬液200μl(5×106个细胞).经超声心动图测定左室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)等指标.采用DNA缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测bcl-2蛋白在心肌细胞中表达水平.结果术后4周,移植组EF、FS值均高于对照组(P＜0.05);8周时EF、FS值升高达22.4%、28.1%(P＜0.05).TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组(4周:0.0946±0.0170 vs 0.1730±0.0180,P＜0.05;8周:0.0916±0.0140 vs 0.1820±0.0150,P＜0.05).免疫组化结果表明,移植组bcl-2蛋白表达高于对照组(4周:12.66±3.37vs 5.68±2.53,P＜0.05;8周:13.080±3.087 vs 5.02±1.91,P＜0.05).结论骨髓单个核细胞移植可抑制MI后心肌细胞凋亡的发生,从而保护心功能,其机制可能与对bcl-2表达的调节有关.     

川芎嗪对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

 目的 观察川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)对缺血心肌细胞凋亡以及病理组织学改变的作用.方法 采用大鼠心肌缺血再灌注(Myocardial ischemic reperfusion,MIR)损伤模型,用缺口末端标记技术(TDT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测MIR过程中不同时间点缺血心肌细胞凋亡的动态变化及川芎嗪对其影响,并采用电镜观察其病理组织学改变进行对照研究.结果 (1)非缺血心肌无TUNEL阳性细胞出现,MIR 60 min大鼠缺血心肌中可见TUNEL阳性细胞,120 min时TUNEL阳性细胞数目最多.(2)与单纯MIR大鼠相比,川芎嗪干预MIR大鼠缺血心肌细胞中TUNEL阳性细胞数明显减少,心肌缺血再灌注60 min时分别为(36.30±8.76)个,张和(24.70±7.15)个/张(P<0.05),120 min时分别为(48.43±23.87)个/张和(10.04±8.11)个,张(P<0.01).(3)电镜结果显示MIR 60 min时,心肌缺血性改变最明显,川芎嗪干预大鼠再灌注组心肌缺血损伤有一定减轻.结论 心肌缺血再灌注可诱导心肌细胞发生凋亡,且随再灌注时间的延长,心肌细胞凋亡数目逐渐增多.川芎嗪干预可使缺血心肌细胞凋亡减少,病理组织学改变亦有减轻.     

高强度间歇训练对中年大鼠心肌细胞增殖/凋亡的影响

目的:探讨高强度间歇性训练(HIIT)对中年大鼠心肌细胞凋亡与增殖相关蛋白表达的影响。方法:选取9月龄wistar大鼠70只。随机分为基础值组(B组),4周安静对照组(Q1组)、4周中等强度运动组(M1组)、4周HIIT组(H1组)和8周安静对照组(Q2组)、8周中等强度运动组(M2组)、8周HIIT组(H2组),每组10只。安静对照不进行运动。中等强度运动组:大鼠进行跑台训练。实验运动前进行VO2max测试,确定训练方案平均运动强度约为60%VO2max,每天训练1次,每次50 min,每周5 d。HIIT运动组:实验运动前进行VO2max测试,并根据测试结果及大鼠达到最大摄氧量时的跑台运动速度,确定HIIT运动方案进行为期8周的训练,每天训练1次,每次50 min,每周训练5 d。训练结束后,测定最大摄氧量和体重;基础值组大鼠在首次最大摄氧量测试结束后24 h取材,.安静对照组和运动干预组大鼠在干预第4、8周最大摄氧量测试结束后24 h进行取材,心脏称重后以心脏重量与体重比值计算心肌指数(心脏重量/体重,mg/g),采用Western Blotting检测心肌细胞凋亡与增殖相关蛋白...     

有氧运动和膳食控制对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨有氧运动联合膳食控制对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法:选用6周龄雄性SD大鼠62只,随机抽取8只大鼠作为正常对照组(C组),喂以标准饲料;其余54只在喂饲高脂高糖膳食的基础上,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ),建立2型糖尿病动物模型。然后将2型糖尿病大鼠随机分成4组:DM对照组(DM组,n=9)、DM+运动锻炼组(DME组,n=10)、DM+膳食控制组(DMD组,n=10)和DM+运动锻炼+膳食控制组(DMED组,n=10)。DM组大鼠继续喂饲高脂高糖饲料,不进行运动锻炼;运动锻炼采用每天60 min、每周6天的无负重游泳运动;膳食控制采用与DM组等量的标准饲料。12周后,检测各组大鼠空腹血糖(FPG)水平、心肌细胞凋亡指数、心肌组织Bcl-2和Fas含量。结果:①DM组心肌细胞凋亡指数和Fas含量显著高于C组(P<0.01),Bcl-2含量显著低于C组(P<0.05)。②通过双因素方差分析,有氧运动或膳食控制可以显著降低糖尿病大鼠心肌细胞凋亡指数和Fas含量(P<0.01),升高Bcl-2含量但无统计学意义(P>0.05),而有氧运动联合膳食控制对降低糖尿病大鼠心肌细胞凋亡指数和Fas含量、升高心肌组织bcl-2含量具有显著的交互作用(P<0.01)。结论:①糖尿病大鼠心肌细胞凋亡增加,而心肌组织Bcl-2含量降低和Fas含量升高可能是心肌细胞凋亡增加的重要机制。②长期有氧运动或膳食控制可以显著降低糖尿病大鼠心肌细胞凋亡,且有氧运动联合膳食控制对减少糖尿病大鼠心肌细胞凋亡具有显著交互作用。同时,升高心肌组织Bcl-2含量、降低心肌组织Fas含量可能是长期有氧运动联合膳食控制减少心肌细胞凋亡发生的重要机制。     

金属硫蛋白对大鼠重复高G应激后心肌细胞凋亡及心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的探讨金属硫蛋白（MT）对＋Gz暴露后心肌细胞凋亡及其Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法将16只Wistar雄性大鼠随机分为＋Gz组和＋Gz＋MT组，每组各8只，两组均经受6次峰值为＋10Gz的G暴露，每次30S，间隔1min。＋G：＋MT组大鼠在＋Gz暴露前72h和48h腹腔注射21％乳酸锌0．3μmol／kg以诱导体内MT合成：＋Gz组鼠给予等量生理盐水。应用极谱法测定心肌MT含量，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸末端标记法观察两组心肌细胞凋亡，应用免疫组织化学法观察Bcl-2和Bax蛋白的表达，并结合彩色病理图像分析系统进行Bcl-2和Bax蛋白的表达分析。结果与＋Gz组比较，＋Gz＋MT组心肌MT含量明显增高（P〈0．05），心肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显降低（P〈0．05），Bcl-2表达明显增高（P〈0．05）。结论MT可以通过影响心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白表达，减少高＋Gz暴露后的心肌细胞凋亡。     

Detection of cardiomyocyte apoptosis in forensic autopsy cases

The purpose of the present study was to determine reliable parameters for the detection of apoptotic cells for use as a diagnostic marker during the early stage of acute myocardial infarction (AMI) in forensic autopsy cases. Myocardial tissues taken from forensic autopsy cases were examined by immunohistochemical and molecular-biological methods using the terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP biotin nick end-labelling (TUNEL) and the DNA laddering methods. In cases of AMI with a time period between 2 h from onset to death and 20 h post-mortem time, the nuclei of cardiomyocytes were stained positive with the TUNEL method and DNA fragmentation of myocardial cells was detected by agarose gel electrophoresis. Similar findings were obtained in cases of carbon monoxide (CO) intoxication. However, no apoptotic cells were found in other cases such as methamphetamine (MAP) intoxication, tetrodotoxin intoxication, alcohol intoxication, asphyxia, head injury, heart injury or myocarditis. These findings suggested that it would be possible to apply TUNEL-positive cells as a diagnostic marker during the early stages of AMI. Received: 30 January 2001 / Accepted: 26 June 2001     

肼致心肌成纤维细胞凋亡作用机制的研究

目的观察肼作用于体外培养心肌成纤维细胞的凋亡情况并探讨其机制。方法将新生大鼠心肌成纤维细胞培养标本分为对照组和肼处理组。用2mmol／L浓度的肼处理细胞72h后Hoeehst33258染色，荧光显微镜下观察凋亡细胞核的变化；膜蛋白V／磺化丙啶双染流式细胞仪检测细胞凋亡率和坏死率；Rodamine123荧光染色流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位的变化；Western blot检测凋亡相关蛋白Bax／Bob2和Caspase-3表达的变化。结果肼处理后的细胞与对照组相比，出现明显的细胞凋亡的核浓缩、核聚集形态；细胞凋亡率和坏死率与对照组比较差异均有显著性；细胞内线粒体膜电位降低；Bax表达增高、Bcl-2表达降低、Caspase-3表达增高。结论肼可引起心肌成纤维细胞凋亡，并可能通过线粒体通路即肼损伤线粒体引起Bcl-2表达降低，Bax表达增加致使线粒体膜通透性转换孔开放，膜电位降低，细胞色素C释放入胞浆，激活Caspase-3，引起细胞凋亡。     

蛋白酶激活受体-2对缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡的影响

目的探讨蛋白酶激活受体-2(PAR-2)活化对缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡的影响及细胞外信号调节激酶(ERK)1/2在此过程中的作用。方法40只雄性SD大鼠随机均分为5组(n=8):假手术组,I/R组,PD组(0.3mg/kgERK1/2通路制剂PD98059),PAR-2AP组(3mg/kgPAR-2激活肽SLIGRL-NH2),PD+PAR-2AP组。建立大鼠在体心肌I/R模型。采用末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测各组凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,Western blotting检测各组大鼠心肌组织中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达水平。结果与假手术组相比,I/R组、PD组、PAR-2AP组、PD+PAR-2AP组的凋亡指数,Bcl-2、Bax蛋白表达及p-ERK1/2水平均明显增高(P<0.01)。与I/R组比较,PAR-2AP可使凋亡指数和Bax蛋白表达降低,而使Bcl-2的表达和p-ERK1/2水平增加;与PAR-2AP组比较,PD+PAR-2AP组凋亡指数和Bax蛋白表达增加,Bcl-2的表达和p-ERK1/2水平降低。PAR-2AP抑制凋亡...     

悬吊大鼠后肢骨骼肌等长收缩功能变化的动态特征

目的观测模拟失重1、2和4周大鼠比目鱼肌与趾长伸肌收缩性能的变化,并分析萎缩比目鱼肌收缩性能变化的可能机制.方法采用离体骨骼肌肌条灌流技术,观测比目鱼肌与趾长伸肌的等长收缩功能.结果悬吊1周大鼠比目鱼肌即出现萎缩,悬吊2周与4周进一步萎缩,在各时间点两组的差别均具有显著性或非常显著性意义.比目鱼肌等长收缩的最大张力在悬吊第1周仅呈降低趋势[对照组(1.76±0.18)g/mm2,悬吊组(1.46±0.26)g/mm2,P＞0.05],第2周的降低具有显著性意义[(1.25±0.09)g/mm2,P＜0.05],第4周则进一步降低[(0.90±0.06)g/mm2,P＜0.01].悬吊1周组大鼠趾长伸肌的最大张力未改变,2周与4周组的降低具有非常显著性意义(P＜0.01).悬吊1、2和4周组大鼠比目鱼肌等长收缩达到最大张力一半的时间与同步对照组相比,两组间的差别均无显著性意义(P＞0.05),但是,悬吊1与2周组达到最大张力的时间与从张力峰值到舒张75%的时间缩短(P＜0.05),悬吊4周组则进一步缩短(P＜0.01).与同步对照组相比,悬吊组趾长伸肌的时间参数均未发生改变(P＞0.05).结论由于比目鱼肌最大张力的降低与其萎缩在发生时间上不同步,而等长收缩的时间参数却较早发生改变,提示模拟失重萎缩比目鱼肌中调节性收缩蛋白可能较早发生改变,进而影响收缩性能.     

多西紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡及对PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨多西紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡及对磷脂酰肌醇 3-激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）信号通路的影响。方法选择人卵巢癌细胞株HO-8910,按照多西紫杉醇药物浓度分为Ho组（0 μg/mL）、Hd组（10 μg/mL）、Hz组（20 μg/mL）、Hg组（80 μg/mL）,RT-PCR、Western Blot法分别检测PI3K、AKT水平、蛋白表达变化,Transwell法、MTT法检测HO-8910细胞的迁移、活力变化,流式细胞仪测定HO-8910细胞凋亡率。结果Ho组PI3K、AKT水平高于其他3组,4组差异有统计学意义（P<0.05）;Ho组PI3K、AKT蛋白最高,其余3组PI3K、AKT蛋白表达从低至高依次为Hg组、Hz组、Hd组,4组差异有统计学意义（P<0.05）;Hg组细胞凋亡率最高,其次为Hd组、Hz组、Ho组,4组调亡率差异有统计学意义（P<0.05）;Ho组细胞迁移能力最高,其次为Hd组、Hz组、Hg组,4组细胞迁移能力差异有统计学意义（P<0.05）;Ho组细胞增殖能力最高,其次为Hd组、Hz组、Hg组,4组增殖能力差异有统计学意义（P<0.05）。结论多西紫杉醇可促进HO-8910细胞大量凋亡,其作用机制可能为通过抑制PI3K/AKT信号通路活性来实现的。     

Changes in the mitochondrial oxidative enzyme activity in the skeletal muscles od rats during the recovery period after hypokinesia of varying duration

Enzyme activity was measured in 164 white rats exposed to hypokinesia of varying duration. NAD- and NADP-dependent isocitrate dehydrogenases (ICDH) decreased on hypokinesia day 7 and returned to normal on recovery days 4-5. Their enzyme activity was diminished on hypokinesia day 15. NAD- and NADP-dependent ICDH returned to normal on recovery days 11 and 7, respectively. Activity of alpha-ketoglutarate dehydrogenase (KGDH) and succinate dehydrogenase (SDH) decreased immediately after hypokinesia and remained lowered till day 18. Activity of pyruvate dehydrogenase (PDH) was decreased on recovery days 1-3 and increased on days 9-17. After 30-day hypokinesia PDH activity was lower than normal on recovery days 2-14. 30-day hypokinesia led to reduction of ICDH, KGDH, and SDH. NADP-dependent ICDH returned to normal on recovery day 12 and other enzymes during the third week of readaptation. These results suggest that during recovery the enzymes that are responsible for energy metabolism restoration are first to return to normal.     

Omi/HtrA2在食管癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的探讨Omi/HtrA2蛋白在食管鳞癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法对95例经病理确诊为食管鳞癌患者的正常组织、癌旁组织及癌组织进行Omi/HtrA2蛋白半定量免疫组化分析,用TUNEL法检测石蜡切片中肿瘤细胞凋亡情况,通过统计学软件SPSS 11.0进行结果分析,确定食管癌中Omi/HtrA2表达对肿瘤细胞凋亡的影响。结果①Omi/HtrA2在食管正常组织、癌旁组织、鳞癌组织的阳性表达率分别为22.50%、27.50%、74.74%。②Omi/HtrA2蛋白在不同组织中的表达情况进行两两比较,发现癌组织的阳性率与正常组织、癌旁组织比较,有显著性差异（P〈0.05）,正常组织与癌旁组织阳性率比较未见有显著性差异,无统计学意义（P〉0.05）。③Omi/HtrA2表达阳性者细胞凋亡指数明显高于Omi/HtrA2表达阴性者（P〈0.01）。结论 Omi/HtrA2参与了食管鳞癌的发生、发展,可以作为判断食管鳞癌预后的指标,Omi/HtrA2在食管癌细胞的凋亡中发挥凋亡促进作用。     

促红细胞生成素对脑创伤后细胞凋亡和Caspase-3活性的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠创伤性脑损伤的治疗作用及对细胞凋亡和Caspase-3活性的影响之间的关系。方法制作SD大鼠自由落体脑挫裂伤模型，设立假手术组、rhEPO治疗组和对照组，分别应用透射电镜、流式细胞技术和荧光四肽底物法检测各组大鼠脑挫伤灶旁细胞凋亡情况及Caspase-3活性。结果脑外伤后存在细胞凋亡，细胞凋亡的发生在伤后24h达到高峰，rhEPO治疗组在伤后24h和48h细胞凋亡发生率低于相应的对照组（P〈0．05）；rhEPO治疗后12，24和48h大鼠脑挫伤灶旁细胞Caspase-3活性均低于各自时间点对照组（P〈0．05或0．01）。结论rhEPO治疗对创伤性脑损伤后细胞凋亡的发生及Caspase-3的活性有影响，抑制细胞凋亡及Caspase-3活性下降很可能是rhEPO对创伤性脑损伤治疗作用的重要机制。