大鼠耳蜗螺旋神经节神经元GABA_A受体激活电流的特性

目的研究大鼠耳蜗螺旋神经节神经元GABAA受体激活电流的特性。方法采用全细胞膜片钳记录技术,观察离体培养大鼠螺旋神经节神经元上GABAA受体激活电流的特点。结果不同浓度的GABA可诱出螺旋神经节神经元的内向电流,该电流可被10μM荷包牡丹碱可逆性阻断。GABA诱导出的内向电流幅度随着浓度（10、50、100、500μM）的增大而增大。结论耳蜗螺旋神经节神经元可诱出GABAA受体电流,GABA诱导的GABAA受体电流呈浓度依赖关系。     

异丙酚对大鼠脊髓背角神经元TTX敏感型钠通道失活和去失活效应的影响

目的：观察异丙酚对急性分离的大鼠脊髓背角神经元TTX敏感型钠通道电流的影响及相关机制。方法：取出生后7d的雄性SD大鼠,击昏后断头取脊髓腰膨大部位,分离背角神经元,应用全细胞膜片钳记录模式记录钠电流。距离神经细胞100μm施加0.3-30μmol/L不同浓度的异丙酚,应用-10mV（持续30 ms）刺激电压诱发钠电流,求出异丙酚对钠电流的半效抑制浓度（IC50）。观察异丙酚对钠通道失活效应的影响时,应用从-80mV至-20mV的预刺激电压（阶差为10mV,持续30ms）,再应用0mV刺激电压（持续30ms）诱发钠电流产生,向神经细胞施加IC50水平的异丙酚。观察异丙酚对钠通道去失活效应的影响时,应用-10mV的预刺激电压（持续30ms）,再给予-10mV、持续30 ms的刺激电压诱发钠电流产生,两刺激电压的间隔时间为2-24ms。结果：异丙酚可浓度依赖性地抑制TTX敏感型钠电流,其IC50为（5.35±0.25）μmol/L。钠通道失活实验中,预刺激电压在-60mV到-40mV范围内,IC50水平的异丙酚可显著抑制由刺激电压（0mV）诱发的钠电流（P〈0.05）。钠通道去失活实验中,两刺激的间隔时间在2-6ms之间时,IC50水平的异丙酚可显著性抑制由刺激电压（-10mV）诱发的钠电流（P〈0.01,P〈0.05）。结论：异丙酚可抑制大鼠脊髓背角电压依赖性钠通道电流,这一作用与促进钠通道的失活和抑制钠通道的去失活有关。     

γ-氨基丁酸及拮抗剂对大鼠黑质致密部神经元活动的影响

目的:研究γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric Acid,GABA)和GABAA受体阻断剂荷包牡丹碱(Bicuculine,Bic)对大鼠黑质致密部(pars compacta of substantia nigra,SNc)神经元自发放电活动的影响。方法:采用微电泳及细胞外记录方法观察GABA和Bic对SNc神经元自发放电活动的影响。结果:GABA使42个受试神经元自发放电活动几乎完全停止。在30个受试神经元中,Bic使22个神经元放电频率加快,6个神经元无作用,2个神经元受到抑制。在35个受试神经元中,微电泳GABA期间给予GABAA受体阻断剂Bic,其可使91.43%神经元放电频率加快。结论:GABA能投射对SNc神经元有抑制作用,GABAA受体阻断剂Bic能拮抗GABA的抑制作用。     

羟丁酸钠在大鼠海马脑片缺氧/复氧损伤中的保护作用机制

目的：研究羟丁酸钠（SO）在大鼠海马脑片缺氧/复氧（H/R）损伤中的保护作用,揭示SO在缺血性脑损伤中的保护作用机制。方法：采用大鼠海马脑片H/R损伤模型。设正常对照组,H/R组,SO1、10、100μmol/L组,NCS-382100μmol/L＋SO100μmol/L（NCS-382＋SO）组、NCS-356100μmol/L（NCS-356）组。测定脑片孵育液中乳酸脱氢酶（LDH）释放率,γ-氨基丁酸（GABA）、谷氨酸（Glu）含量;脑片进行TTC染色计算组织损伤百分率;HE染色观察组织病理形态学变化,流式细胞仪测定细胞内钙;酶组织化学法检测一氧化氮合酶（NOS）的表达。结果：SO明显降低H/R海马脑片LDH释放率（P〈0.01）,提高TTC染色的A490值,降低组织损伤百分率（P〈0.01）,升高GABA/Glu比值（P〈0.01）,减轻H/R所致的组织病理损伤。H/R组脑片细胞内钙荧光强度和NOS阳性神经元明显高于正常对照组（P〈0.01）;SO100μmol/L组、NCS-356组细胞内钙荧光强度较H/R组显著减弱（P〈0.01）,NOS阳性神经元的数目明显减少（P〈0.01）。用γ-羟基丁酸（GHB）受体选择性阻断剂NCS-382后再使用SO,细胞内钙荧光强度、NOS阳性神经元的数目均接近H/R组。结论：SO对大鼠海马脑片H/R损伤有明显的保护作用,其机制可能与升高GABA/Glu比值,激动GHB受体抑制细胞内钙的增高及NOS的表达有关。     

莫达非尼对大鼠海马神经元I_(GABA)的抑制作用机制

目的研究新型促醒药莫达非尼对培养的大鼠海马神经元GABAA受体介导的电流(IGABA)的影响。方法在培养的海马锥体神经元上,进行全细胞膜片钳记录。结果GABA引起电流能被GABAA受体的竞争性阻断剂荷包牡丹碱阻断。单独给予莫达非尼时,明显地抑制了内向电流IGABA。而格列本脲预处理海马神经元后,再单独给予莫达非尼,发现莫达非尼对于IGABA的抑制作用被逆转。结论新型促醒药莫达非尼不同于传统的兴奋剂,莫达非尼对于神经元的保护作用可能与ATP敏感性钾离子通道的开放有关。     

奥硝唑对映体对小鼠中枢抑制作用的机制探究

目的:探讨右奥硝唑中枢抑制效应与脑内γ-氨基丁酸(gamma amino butyric acid,GABA)系统的关系。方法:经不同剂量右/左奥硝唑处理后使用N,N-二甲基二吖啶硝酸盐(1-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide,MQAE)荧光探针检测原代培养小鼠皮层神经元氯离子浓度,并通过western blot方法检测GABAA受体亚基的表达。尾静脉注射给予右/左奥硝唑后测定小鼠高架十字迷宫行为。结果:右奥硝唑剂量依赖性激活小鼠皮层神经元的氯离子通道,经右奥硝唑处理后的皮层神经元能增加GABAA受体α1亚基的水平,且右奥硝唑有潜在的抗焦虑活性。结论:右/左奥硝唑中枢作用不同,右奥硝唑较强的中枢抑制作用可能与激活GABA系统有关。     

依托咪酯对小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发放电活动的影响

<正>依托咪酯(etomidate,ET)是一种作用强、短效的非巴比妥类静脉麻醉药,常用于麻醉诱导和门诊手术麻醉。研究表明,ET可直接或间接作用于丘脑皮层神经元GABAA受体,产生GABA样的作用,或增强GABA与GABAA受体结合所引起的效应,减少神经元动作电位的发生频率~([1])。ET明显抑制初级感觉皮层锥体细胞电压门控Na~+通道,减小Na~+电流,提示ET可能通过抑制初级感觉皮层神经元Na~+通道,降低神经元兴奋性~([2]),而ET影响小脑皮层神经元功能的文     

The Modeling of Isolating Rabbit Left Atrial Myocytes and Analysis of Electrophysiological Characteristics

目的:建立离体免左心房肌细胞的急性分离模型并分析其电生理特性.方法:健康成年家兔10只,通过Langendoff灌流系统,经冠状动脉灌流、酶解消化法分离兔左心房肌细胞,应用膜片钳全细胞模式记录细胞膜动作电位(AP)、内向L型钙通道电流(ICaL)和快钠通道电流(INa),分析APD90和APD50时程大小及随频率的适应性变化;分析ICaL和INa的电流密度-电压(I-V)曲线特征.结果:收获的单个左心房肌细胞形态良好,成功记录到典型的AP、ICaL和INa.AP静息电位为(-62.8±2.4)mV.随着刺激频率增加,APD90和APD50均相应缩短,与基础刺激频率1 Hz比较,在4 Hz和5Hz时明显缩短(P＜0.05).ICaL电流密度(pA/pF)为-4.79±1.28.INa电流密度(pA/pF)为-118.41±16.67.ICaL在-40 mV去极化电压下开始激活,在+10 mV处电流达最大峰值,反转电位在+40～+50 mV范围.INa激活电位在-60 mV处,-40 mV处电流达最大峰值,反转电位在+20～+30 mV范围.结论:此模型分离的左心房肌细胞具有正常的电生理活性和特征,可用于研究房颤的电重构及离子通道重构现象.     

异丙酚对大鼠前扣带回突触传递的影响

目的探讨异丙酚对大鼠前扣带回突触传递的影响。方法应用全细胞膜片钳技术,在成年大鼠前脑前扣带回区域(ACC)脑片上观察异丙酚对ACCⅡ/Ⅲ突触传递的影响。结果不同浓度的异丙酚能够剂量依赖性的显著增强ACCⅡ/Ⅲ层神经元GABA能微小抑制性电流(mIPSC)的幅度和半波宽,但对其频率没有显著影响。而对于微小兴奋性的突触后电流(mEPSC),异丙酚对ACCⅡ/Ⅲ层神经元mEPSC的频率,幅度半波宽都无显著影响。结论异丙酚对ACCⅡ/Ⅲ层神经元兴奋性突触传递没有直接的影响,但是却可以通过延长GABA受体的平均开放时间和增加突触后GABAA受体的数目来增强抑制性突触传递的效果。     

几种静脉麻醉药对GABA能神经元的Phasic／Tonic抑制的影响

γ-氨基丁酸（gama-amino butyic acid ,GABA ）是广泛存在于中枢神经系统中一种重要的抑制性神经递质,参与调控睡眠和镇静等作用,主要通过作用于 GABAA 离子型亚基受体发挥生理效用。GABAA 受体属配体门控离子通道受体,通过增加神经细胞膜对氯离子和碳酸根离子的通透性,使细胞膜外高浓度的阴离子顺浓度梯度产生内向流动,从而引起突触后的超极化反应,导致神经元的兴奋性降低,这种由突触内的GABAA 型受体短暂的或“阶段性”的激活突触囊泡释放GABA ,从而产生的抑制,称为Phasic抑制,也是 GABAA 受体介导抑制性作用的经典途径。而近年来,研究者们提出了一种GABAA 受体介导的新型抑制作用即Tonic抑制［1］,它是由于轴突末梢保持一种持续少量的GA-BA释放,细胞外低浓度GABA 的环境能持续性的激活突触外的GABAA 受体引起的生理效应。本篇拟综述突触内和突触外GABAA 受体在控制神经元兴奋性的独特作用以及与全麻机制相关的最新研究进展。