慢性缺氧对幼鼠心肌CaM CaMKII及细胞内Ca2+活动的影响

目的：急性缺血缺氧可致心功能受损和心律失常,钙离子在其中起重要作用,慢性缺氧对心功能及心肌细胞内钙离子活动同样产生影响,但机制不同。该研究拟通过慢性缺氧动物模型,研究慢性缺氧对心肌细胞内钙调素（calmodulin, CaM）、钙/钙调素依赖性蛋白激酶II （calcium/calmodulin-dependent protein kinase II ,CaMKII）的表达及其对细胞内Ca2+活动的影响,深入了解慢性缺氧对心脏功能及电活动的影响机制。方法：通过吸入低浓度含氧气体（FiO2：10％）建立慢性缺氧大鼠动物模型。在实验1周和3周时,应用RT-PCR,Western Blot方法分别检测对照组和慢性缺氧组动物心肌细胞内CaM和CaMKIIγ、CaMKIIδ mRNA和蛋白表达;分离并培养正常心肌细胞和缺氧3周细胞,应用激光共聚焦法分别检测两种心肌细胞内Ca2+活动,同时应用CaMKII特异性抑制剂KN-62,观察CaMKII在慢性缺氧下对心肌细胞内Ca2+活动的影响。结果：实验1周和3周时,慢性缺氧大鼠心肌细胞内CaM和CaMKIIγ、CaMKIIδ的mRNA和蛋白表达均较正常动物高（P<0.01）;在缺氧1周和3周组动物间CaM和CaMKIIδ也存在差异（P<0.01）,但CaMKIIγ无差异（P>0.05）。激光共聚焦研究发现,慢性缺氧心肌细胞内Ca2+活动其钙波振幅虽和正常心肌细胞无差异(P>0.05),但钙波时程延长（P<0.01）;应用KN-62后,慢性缺氧动物钙波振幅和时程改变较明显（P<0.01）。 结论：慢性缺氧可使大鼠心肌细胞内CaM和CaMKII合成代偿性增加,保持大鼠心肌细胞内钙稳态,从而在一定时期内维持心功能稳定。但随缺氧时间延长,心功能可受损并可致心律失常。     

哮喘患儿外周血单个核细胞内钙调素含量的变化

目的研究哮喘儿童外周血单个核细胞(PBMC)内钙调素(CaM)含量的变化,探讨CaM与儿童哮喘的关系。方法用三氟拉嗪(TFP)作荧光标记物,用流式细胞仪检测23例哮喘发作期和临床症状缓解期外周血PBMC内活性CaM含量。结果1.哮喘儿童发作期外周血PBMC内CaM含量(61.35±15.56)明显低于缓解期(198.73±30.04)及对照组(137.88±20.77),差异有显著性意义(P<0.001)。2.哮喘儿童缓解期外周血PBMC内CaM含量高于对照组,差异有非常显著性意义(t=7.86 P<0.001)。结论CaM在哮喘发病机制中起重要作用,其机制可能与细胞内调节细胞内外游离钙离子浓度比值的自稳态调节能力有关。     

婴幼儿肺炎并心力衰竭发病机制的实验研究

目的观察肺炎时心肌细胞跨膜L型钙电流与细胞内Ca2 含量的动态改变,探讨肺炎并心衰的可能发生机制。方法取50日龄Wistar大鼠,经气管注入金黄色葡萄球菌,建立肺炎模型。急性酶解分离出右室心肌细胞。1.以Fluo-3-AM标记细胞内Ca2 ,分为生理盐水对照组、接种后24、72h肺炎组,应用黏附细胞仪研究肺炎对静息和收缩状态下细胞内Ca2 含量的影响。2.另分接种后24、120h肺炎组及对照组,记录各组细胞膜L型钙电流。结果1.肺炎组24h静息状态心肌细胞内Ca2 含量无显著改变,而72h肺炎组显著增高(P<0.001);加入KCl后2.5min,24h肺炎组心肌细胞内Ca2 含量增加比率显著低于对照组(P<0.05),5.0、7.5、10.0min,两者无显著性差异。而72h肺炎组增加比率在前10min内均低于对照组。2.肺炎组与对照组24h电流峰值无差异,120h时则显著高于对照(P<0.001)。结论重症肺炎时右室心肌细胞发生钙代谢障碍,静息期心肌细胞内Ca2 浓度增高,而收缩状态下Ca2 含量增加比率下降,可能是心肌细胞舒张、收缩功能障碍的重要机制;心衰后期,心肌细胞钙内流增大,可能是病变发展的重要机制。     

缺氧及肺动脉高压患儿左心室心肌细胞凋亡及凋亡相关基因的表达

目的研究慢性缺氧性疾病及肺动脉高压(PAH)患儿左心室心肌细胞凋亡及相关基因的表达。方法以因缺氧性疾病而死亡的新生儿为研究对象,以交通意外死亡儿童为正常对照组。慢性缺氧性疾病患儿入院后多普勒超声测肺动脉收缩压(PASP)和肺动脉平均压,根据PASP分为单纯缺氧组和缺氧-PAH组(PASP>4.0 kPa为PAH)。患儿死亡后取左心室心肌组织采用Tunnel末端标记法检测细胞凋亡指数,用原位杂交法及SP免疫组化法测定Fas、FasL、bax、bcl-2、caspase-3凋亡相关基因的mRNA和蛋白表达。结果(1)单纯缺氧组和缺氧-PAH组心肌细胞凋亡指数高于正常对照组(P<0.01),但单纯缺氧组和缺氧-PAH组之间无差异;(2)缺氧组和缺氧-PAH组心肌细胞Fas、FasL、bax、caspase-3的mRNA和蛋白表达均高于正常对照组(P均<0.01),bcl-2的mRNA和蛋白表达稍高于对照组,但无统计学意义;各基因mRNA和蛋白表达在单纯缺氧组和缺氧-PAH组之间无差异;(3)缺氧-PAH组PASP与心肌细胞凋亡指数呈正相关(r=0.478,P<0.05)。结论各种小儿疾病所致缺氧可致左心室心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达改变,PAH可致凋亡加重。     

钙及钙调蛋白依赖性激酶在神经元缺氧损伤中的作用

目的：探讨钙及钙调蛋白依赖性激酶（calmodulin dependent kinase,CaMK）在神经元缺氧损伤中的作用及机制。方法：体外培养大鼠胚脑皮质神经元,随机分为单纯缺氧组及钙阻滞剂干预组,其中钙阻滞剂干预组采用尼莫地平（nimodipine）、MK-801分别阻断L-VSCC受体、NMDA受体的传导,采用MTT法测定各组神经元缺氧前后细胞活性,用Fluo-4AM荧光探针测定各组细胞内钙离子浓度的变化,Western blot检测CaMKⅡ及CaMKⅣ的表达。结果：尼莫地平及MK-801组细胞活性较单纯缺氧的对照组高;尼莫地平可迅速降低缺氧神经元的细胞内钙, MK-801可长时间降低缺氧神经元的细胞内钙。尼莫地平可抑制CaMKⅡ的表达,MK-801对CaMKⅡ的表达无明显影响,但可抑制CaMK Ⅳ的表达。结论：尼莫地平和MK-801可分别通过抑制CaMKⅡ和CaMKⅣ表达实现对缺氧神经元的保护作用。［中国当代儿科杂志,2007,9（4）：324-326］     

野百合碱致右心衰竭幼鼠Connexin43的变化及卡托普利和坎地沙坦的干预作用

目的 探讨Connexin43(Cx43)在野百合碱(MCT)致右心衰竭幼鼠中的变化及卡托普利和坎地沙坦的干预作用.方法　50只SD幼鼠腹腔注射MCT诱发肺动脉高压(PAH),随机分为心衰4周组(E1组)、心衰6周组(E2组)、卡托普利组(C1组)、坎地沙坦组(C2组)和二药联合组(C3组).另20只幼鼠腹腔注射9 g·L-1盐水作为对照,分为正常对照4周组(N1组)和正常对照6周组(N2组).测定每组存活幼鼠的血流动力学和相关生理指标,采用ELISA法检测其血清Cx43水平,免疫组织化学法和 RT-PCR法测定其右心室心肌组织Cx43和Cx43 mRNA的表达.结果　E1组与N1组比较,右心室肥厚指数、中心静脉压(CVP)、右心室收缩压 (RVSP) 显著升高,右心室压最大上升速率 (RVdp/dt) 显著降低,右心室心肌细胞排列紊乱、肌浆溶解,并可见空泡变性,右心衰竭模型成功.E1组血清Cx43水平、右心室心肌组织Cx43和Cx43 mRNA均较N1组降低.E2组与N2组比较,CVP、RVSP显著增高,RVdp/dt显著降低,血清Cx43水平、右心室心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA均降低.E2组与E1组比较,右心室肥厚指数、CVP、RVSP持续增高,RVdp/dt持续降低,E2组血清Cx43、右心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA进一步降低.C1组、C2组与E2组比较,血流动力学改善,右心室肥厚减轻,血清Cx43水平、右心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA均增高.C1组、C2组分别与C3组比较,血流动力学、血清Cx43水平、右心室心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA表达比较差异均无统计学意义.结论　PAH致右心衰竭时,Cx43参与心力衰竭的发生发展,随着心力衰竭的加重,其表达进一步降低;Cx43在幼鼠血清、右心室心肌组织中的水平具有一致性;卡托普利或坎地沙坦可能通过促进Cx43的表达缓解压力负荷性右心衰竭,二者比较无明显差异,联合用药并不能提高疗效.     

还原型谷胱甘肽对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用

目的探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对缺氧／复氧（A／R）心肌细胞的保护作用及机制。方法建立大鼠心肌细胞A／R损伤模型，随机分为5组：A组为正常对照组；B组为A／R组，缺氧2h。复氧1h；C、D、E组为处理组，加入GSH分别使其终浓度为40、80、160mg／L后A／R。用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性，硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛含量，荧光法测定细胞内钙离子浓度变化，采用RT-PCR检测白介素-1βmRNA和肿瘤坏死因子-αmRNA表达变化。结果与A组相比，B组心肌细胞内钙离子浓度明显升高，差异有非常显著性（P〈0．01）；心肌细胞培养液中超氧化物歧化酶活性下降、丙二醛含量升高，差异有非常显著性（P〈0．01）；白介素-1βmRNA和肿瘤坏死因子-αmRNA表达迅速增强，差异有非常显著性（P〈0．01）。与B组比，D、E组上述变化明显减轻，差异有非常显著性（P〈0．01）。结论GSH对A／R心肌细胞有保护作用，其作用在一定范围内呈剂量依赖关系。     

缺氧缺糖可导致培养的乳鼠心肌细胞凋亡

目的　心肌细胞凋亡是许多心血管疾病发生与演变的细胞学基础 ,成为心血管疾病研究中的一个热点问题。国内外研究表明心肌缺血后再灌注可导致心肌细胞凋亡 ,但缺血是否引起心肌细胞凋亡尚有争议。该研究旨在探讨心肌缺氧损伤时是否发生心肌细胞凋亡。方法　取 2～ 4d的新生SD乳鼠心室肌进行心肌细胞培养 ,采用模拟“缺血模型” ,分不同时间段缺氧缺糖组和正常对照组观察 ,用AnnexinV FITC/PI双染色流式细胞术(Flowcytomeutry ,FCM)、Hoechst/PI荧光染色镜检判断细胞凋亡。用原子吸收法测定细胞内钙、镁含量。 结果　FITC AnnexinV/PI双染色法FCW检测 ,缺氧 11.5 ,12 .5 ,13.5和 14 .5h早期凋亡细胞比例分别为 (10 .7±0 .4 5 ) % ,(13.7± 0 .71) % ,(15± 0 .5 4 ) %和 (17.2± 0 .6 7) % ,比正常对照组 (3.5 7± 0 .2 6 ) %明显增高 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;Hoechst/PI染色计数心肌细胞凋亡指数 ,缺氧 11.5 ,14 .5h分别为 18± 2 .4 ,2 5± 3.8高于正常对照组 3.75± 0 .96 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;缺氧缺糖各组与对照组相比心肌细胞内钙含量高、而镁含量低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,但不同时间段缺氧缺糖心肌细胞内钙、镁含量变化差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　在缺氧缺糖模拟“缺血     

钙调神经磷酸酶信号通路介导大鼠慢性缺氧致右心室心肌凋亡的机制

目的研究钙调神经磷酸酶(CaN)介导慢性缺氧致右心室心肌凋亡的作用机制。方法SD大鼠30只分为慢性缺氧组、环孢素处理组(CsA,10 mg.kg-1.d-1,腹腔注射)及正常对照组。慢性缺氧组、CsA处理组大鼠均置于缺氧仓内连续缺氧21 d(95～105 mL.L-1O2),正常处理组常温常压常氧饲养21 d。3组大鼠均取右心室,行右心室心肌组织石蜡切片,观察心脏形态学,Western blot及RT-PCR检测各组右心室心肌凋亡指数(AI)、CaNβ亚基(CnAβ)蛋白及mRNA、凋亡蛋白Bcl-2蛋白及mRNA和激活T细胞核因子3(NFAT3)蛋白水平。结果1.缺氧21 d后,CsA处理组大鼠凋亡指数(AI)显著高于慢性缺氧组(P<0.01),且慢性缺氧组AI显著高于正常对照组(P<0.01)。2.慢性缺氧组大鼠右心室心肌CnAβ蛋白及mRNA表达、NFAT3蛋白水平均高于正常对照组及CsA处理组(Pa<0.01)。3.CsA处理组凋亡蛋白Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均显著低于慢性缺氧组(Pa<0.01),且慢性缺氧组凋亡蛋白Bcl-2 mRNA表达和蛋白水平也均显著低于正常对照组(Pa<0.05)。...     

急性缺氧性肺动脉高压兔心肌细胞凋亡和相关基因的表达

目的探讨急性缺氧性肺动脉高压(PAH)兔模型心肌组织的细胞凋亡,以及基因bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3在左室心肌细胞中的表达。方法采用呼吸机建立急性缺氧肺动脉高压兔模型,分为对照组(n=10)和缺氧PAH组(n=20),采用TUNEL标记法检测兔模型心肌组织中的凋亡细胞,并运用免疫组化及原位分子杂交技术研究基因bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3在左室心肌细胞中的表达。结果缺氧PAH组左室心肌细胞凋亡指数为(17±3),明显高于对照组(2±0.3);缺氧PAH组左室心肌Bax、Fas、FasL和Caspase-3蛋白和mRNA表达显著上调,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01),缺氧PAH组左室心肌bcl-2蛋白和mRNA表达呈弱阳性。结论细胞凋亡参与了急性缺氧肺动脉高压的发生及发展,急性缺氧性PAH发生后,促凋亡基因和抑制凋亡基因的表达在左心室的平衡被打破。     

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌细胞血小板源生长因子-β受体与细胞外信号调节激酶表达的影响

目的 观察川芎嗪对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌细胞血小板源生长因子-β(PDGF-β)受体、细胞外信号调节激酶 (ERK1/2) 表达的影响,探讨其治疗心肌肥大的作用机制.方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,分为AngⅡ组(以 10-7 mol/L AngⅡ刺激)、川芎嗪组(10-7 mol/L AngⅡ加10 mg/L川芎嗪刺激)及对照组(正常培养的心肌细胞).3组分别培养24 h,收集心肌细胞,采用[3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,免疫印迹法测定其PDGF-β受体、ERK1/2表达.应用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 3组间心肌细胞蛋白合成速率比较有显著性差异(F=20.71 P<0.01),其中AngⅡ组较对照组显著增加(P<0.01),川芎嗪组较AngⅡ组显著降低(P<0.01); AngⅡ组心肌细胞PDGF-β受体表达水平较对照组显著增加(P<0.01),川芎嗪组心肌细胞PDGF-β受体表达显著低于AngⅡ组 (P<0.05);AngⅡ组心肌细胞ERK1/2表达显著高于对照组(P<0.01),川芎嗪处理后AngⅡ诱导的心肌细胞ERK1/2表达较AngⅡ组显著降低 (P<0.01).结论 川芎嗪可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞PDGF-β受体与ERK1/2的表达,这可能是川芎嗪治疗心肌肥大的重要机制之一.     

TRAIL及其受体DR5在病毒性心肌炎小鼠心肌组织中的表达和意义

目的 研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体5(DR5)在病毒性心肌炎小鼠心肌组织中病变不同时期的表达及与细胞凋亡的关系.方法 建立病毒性心肌炎小鼠模型,于注射病毒后第7、10、14、21、28天取心肌组织,HE染色做心肌病理积分,TUNEL法检测凋亡细胞百分率,免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌组织中TRAIL和DR5蛋白及mRNA的表达.结果 病毒感染组小鼠和正常对照组小鼠心肌组织中均存在TRAIL和DR5蛋白和mRNA的表达.病毒感染后第14天,病毒感染组小鼠心肌组织中TRAIL蛋白表达高于同期正常对照组(P<0.05)和第7天病毒感染组(P<0.05),组间比较差异有统计学意义(F=9.17,P<0.01).病毒感染后第10、14、21天,病毒感染组小鼠DR5蛋白表达高于同期正常对照组(P<0.01)和第7天病毒感染组(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=13.32,P<0.01).且TRAIL和DR5蛋白的表达与心肌病理积分、心肌细胞凋亡率密切相关(P<0.05).病毒感染组第10天TRAIL mRNA表达高于同期正常对照组(P<0.01)和第7天病毒感染组(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=10.86,P<0.01).病毒感染组第10、14天DR5 mRNA表达高于同期正常对照组(P<0.01)和第7天病毒感染组(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=22.75,P<0.01).结论 病毒性心肌炎小鼠发病中期,TRAIL及其受体DR5在心肌组织中出现高表达,且与病理积分、心肌细胞凋亡率成正相关,TRAIL及其受体DR5可能通过调控心肌细胞凋亡参与病毒性心肌炎的病理过程.     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌细胞凋亡及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的变化

目的 了解缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的变化.方法 通过结扎7 日龄新生大鼠一侧颈总动脉,吸入低浓度氧复制缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的动物模型,并没假手术对照(NC)组,两组分别于HIBD后1 h、4 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d取心脏组织,应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,SP法检测心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达.结果 NC组偶见心肌阳性凋亡细胞1～4个/mm~2,各时间点阳性细胞数差异无统计学意义(F=0.5,P>0.05).HIBD组12 h心肌阳性凋亡细胞开始增多,为(14.40±3.21)个/mm~2;72h达高峰,为(26.80 ±2.28)个/mm~2,12～72 h各时间点阳性凋亡细胞明显高于NC组(P<0.05);7 d阳性细胞数减少,但仍高于NC组.NC组大鼠心肌组织Bax呈阳性表达,Bcl-2呈弱阳性表达.HIBD组Bax于24 h开始增高.72 h表达最明显,7 d时表达有所降低,24 h～7 d表达高于NC组(P<0.05);Bel-2于24 h表达开始增高,以后缓慢增高,72 h达高峰,24 h～7 d较NC组表达增高,差异有统计学意义(P<0.05).HIBD组Bcl-2/Bax比值逐渐降低.Bax、Bcl-2的表达与凋亡细胞数之间均星直线正相关(r=0.921、0.980,P均<0.01).Bcl-2/Bax的比值与凋亡细胞数无相关性(r=0.702,P>0.05).结论 HIBD新生大鼠心肌细胞存在凋亡,心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达增加,且与心肌细胞凋亡有关.     

NF-κB经典信号通路介导铁过载对沙鼠心肌细胞线粒体的损伤

目的通过检测铁过载沙鼠心肌细胞内NF-κB经典信号通路关键物质的水平及电镜观察线粒体损伤程度,探索NF-κB经典信号通路是否介导了铁过载损伤心肌细胞线粒体的过程。方法将24只蒙古沙鼠随机分为4组,分别为对照组(不进行任何干预)、溶剂对照组(腹腔注射生理盐水)、铁过载组(腹腔注射右旋糖酐铁16周)及铁过载+PDTC组(腹腔注射右旋糖酐铁,同时注射PDTC 16周)。Western blot方法检测心肌细胞中NF-κB经典信号通路的关键物质IκB-α、p-IκB-α、胞浆p65及胞核p65的水平;电镜观察各组心肌细胞线粒体形态学改变并行Flameng评分。结果 (1)与其它3组比较,铁过载组p-IκB-α、胞浆p65水平降低,胞核p65水平明显增高,差异有显著性(P0.05);(2)铁过载组线粒体Flameng评分高于其它3组,差异有显著性(P0.05);铁过载+PDTC组线粒体Flameng评分高于对照组和溶剂对照组,但低于铁过载组,差异有显著性(P0.05)。结论铁过载能够激活沙鼠心肌细胞NF-κB经典信号通路,从而损伤心肌细胞线粒体。     

四氢生物蝶呤抗幼鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的　观察四氢生物蝶呤(BH4)对未成熟缺血再灌注心肌的保护作用。方法　建立幼鼠离体全心缺血再灌注动物模型,80 只幼鼠随机分为实验组(BH4 停搏液)和对照组(St.ThomasⅡ液),每组40只。测定缺血前、缺血再灌注30min、缺血再灌注60min、缺血再灌注120min时的冠状动脉流出量。取缺血前、缺血30min、缺血再灌注60min时的心肌测定丙二醛(MDA)含量。测定缺血前、缺血30min、缺血再灌注30min、缺血再灌注60min、缺血再灌注120min心肌的一氧化氮(NO)浓度、心肌细胞内核因子κB(NF κB)表达以及心肌细胞间粘附分子1( ICAM 1)的含量。对比研究BH4停搏液与St.ThomasⅡ液的心肌保护效果。结果　在相应时间点,BH4组冠脉流出量的恢复率和心肌NO的浓度均显著高于对照组(P<0.05);而心肌MDA和ICAM -1含量以及心肌细胞内NF -κB的表达均显著低于对照组(P<0.05)。结论　含BH4 心脏停搏液较St.ThomasⅡ液对未成熟心肌具有更好的保护效果。其机制可能与增加NO的产量,抑制心肌细胞NF -κB表达以及降低心肌ICAM- 1的含量有关。     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织α1肾上腺素受体亚型mRNA表达的研究

目的 了解α1肾上腺素受体(α1-adrenergicreceptor，α1-AR)三种亚型α1A-AR，α1B-AR和α1D-AR mRNA在大鼠肺组织的表达位置及缺氧性肺动脉高压发病过程中大鼠肺组织α1-AR亚型mRNA相对表达量的改变情况。方法 采用雄性Wistar大鼠55只，随机分为正常对照组(n=10)，缺氧2周组(n=13)、缺氧4周组(n=10)，生理盐水组(n=10)，酚妥拉明组(n=12)，应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT．PCR)法，检测各组大鼠肺组织α1-AR三种亚型mRNA的相对表达量。应用组织原位杂交技术检测α1-AR三种亚型在正常大鼠肺组织中的表达部位。结果 (1)随缺氧时间的延长，肺动脉压力升高。(2)各实验组大鼠肺组织中α1-AR亚型mRNA的表达均以α1A-AR为主，α1B-AR次之，α1D-AR含量最少。(3)随缺氧时间的延长，α1A-AR和α1B-AR两种亚型mRNA相对表达量升高，缺氧2、4周组与对照组差异有显著性，缺氧2、4周组间差异亦有显著性。(4)随缺氧时间的延长，α1D-ARmRNA的相对表达量增多，但缺氧组与对照组相比差异无显著性。(5)酚妥拉明组与生理盐水组比较，α1A-AR，α1B-AR和α1D-AR三种亚型mRNA的相对表达量差异均无显著性。(6)正常大鼠外周肺组织中三种α1-AR亚型的mRNA主要表达于肺小动脉和小静脉平滑肌细胞及内皮细胞。结论 实验提示，α1肾上腺素受体亚型α1A-AR，α1B-AR可能参与了大鼠缺氧性肺动脉高压的形成，对α1肾上腺素受体亚型的深入研究对肺动脉高压的干预治疗有一定的临床意义。     

间歇性缺氧诱导SD幼鼠遗尿模型的实验研究

目的 利用间歇性缺氧诱导幼年Sprague-Dawley幼鼠,探索建立遗尿模型可行性.方法 20 d雄性SD鼠24只,体重(45±4.7)g,随机分成间歇性缺氧组和对照组,各12只.实验组行间歇性缺氧4周,对照组暴露于空气,于1、2、3、4周及停止缺氧后1周监测.监测内容:①两组幼鼠清醒和睡眠脑电图;②睡眠遗尿及觉醒功能;③清醒排尿次数及性状.结果 ①两组幼鼠睡眠期和清醒期脑电图差异明显,无病理性波形出现;②间歇性缺氧组12只幼鼠因觉醒功能障碍,均发生遗尿,缺氧停止,遗尿消失;对照组觉醒功能正常,0例遗尿(P＜0.05);③第3、4周,间歇性缺氧组清醒排尿次数高于对照组(P＜0.05),有间歇性排尿.结论 SD幼鼠间歇性缺氧后因觉醒障碍发生遗尿,且伴有排尿次数增多和间歇性排尿等症状,符合遗尿儿童临床特征,故利用间歇性缺氧诱导SD幼鼠,建立动物模型基本可行.     

卡维地洛对体外柯萨奇病毒B3致心肌细胞凋亡与Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的探讨卡维地洛对体外柯萨奇病毒B3(CVB3)致心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法采用差速贴壁法培养原代Wistar乳鼠心肌细胞。实验分为正常对照组、病毒组、卡维地洛组及美托洛尔组。正常对照组仅加入不含血清的DMEM培养液,后3组于CVB3感染心肌细胞后分别加入不含血清的DMEM培养液、无血清培养基配制的卡维地洛、美托洛尔溶液。72h后在倒置相差显微镜下观察各组心肌细胞的形态、搏动速率;采用黄嘌呤氧化酶法测定其心肌细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定其心肌细胞培养液中丙二醛(MDA)水平,流式细胞术检测其心肌细胞凋亡率,免疫细胞化学法检测其心肌细胞内Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果1.与病毒组比较,卡维地洛组心肌细胞搏动速率明显提高(P<0.05)、凋亡率明显降低(P<0.05),心肌细胞培养液中SOD活性显著升高(P<0.05)、MDA水平明显降低(P<0.05);美托洛尔组与病毒组比较,心肌细胞搏动速率、凋亡率、心肌细胞培养液中SOD活性、MDA水平均无统计学差异(Pa>0.05);2.与病毒组及美托洛尔组比较,卡维地洛组心肌细胞内Bcl-2蛋白表达增多,而Bax蛋白表达减...     

复方丹参注射液对小鼠心肌保护作用的研究

目的　探讨复方丹参注射液对小鼠心肌的保护作用。方法　２５ 只小鼠，随机分成缺氧组，丹参治疗组和对照组，实验２ 周后，取新鲜心肌标本，测琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ），三磷酸腺苷（ＡＴＰ） 酶，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），应用光镜和电镜观察心肌病理性变化。结果　缺氧组ＳＤＨ 和ＡＴＰ酶减少，ＬＤＨ 升高，心肌间质水肿，心肌细胞线粒体肿胀，肌丝排列紊乱，丹参治疗组，心肌酶和心肌超微结构与对照组相比均无显著性差异。结论　复方丹参对小鼠心肌缺氧损伤有保护作用。     

心肌营养素-1在大鼠缺血再灌注心肌中的表达及神经调节蛋白-1对其表达的促进作用

目的研究大鼠缺血再灌注心肌中心肌营养素-1(CT-1)的表达及神经调节蛋白-1(NRG-1)对其表达的影响。方法制备大鼠缺血再灌注心肌模型,分为模型组(n=8),NRG-1预处理组(n=9),假手术组(n=8)和正常对照组(n=10)。利用RT-PCR技术检测各组CT-1 mRNA表达,计算CT-1 mRNA相对量,并作统计学处理。结果模型组CT-1 mRNA结果(63.96±9.34)高于假手术组(36.16±5.43)和正常对照组(36.84±4.64),三者比较差异有显著性(F=47.37 P<0.01);NRG-1预处理组(89.49±6.99)高于模型组,差异有显著性(t=6.43 P<0.01)。结论大鼠心肌缺血再灌注后CT-1 mRNA表达升高,其原因可能是缺血再灌注激活机体内源性保护机制,NRG-1预处理对心肌的保护作用可能与提高心肌细胞中CT-1的表达有关。实用儿科临床杂志,2006,21(1):29