用免疫荧光McAb对286株脊髓灰质炎病毒标本进行定型诊断

用PcAb血清NT与F-McAb IF对286株Polio Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型病毒进行定型,结果两者的符合率Ⅰ型为100％,Ⅱ型和Ⅲ型均为99％。Ⅰ型与Ⅱ、Ⅲ型符合率的微小差异,可能是实验技术上的误差所致,也可能是McAb本身识别抗原表位的局限性所致。提示要得到真正理想的型特异McAb,必须用大量有代表性的毒株进行交叉试验。本试验证明,F-McAb IF可以代替PcAb参考血清NT作为Polio病毒的定型方法。IF比NT简单、快速、特异和敏感,是组装试剂盒的理想材料。     

用免疫荧光McAb对286株脊髓灰质炎病毒标本进行...

The serum neutralization test is a classical method used for typing poliovirus. Since 1987, some type-specific non-neutralization McAb's have been obtained in our laboratory, and were used in indirect immunofluorescence straining tests to detect serotypes I, II and III. A total of 286 poliovirus strains were typed by the indirect immunofluorescence test (IF) and neutralization test (NT). The results demonstrated that both tests were in agreement, suggesting that McAb IF could replace NT as an alternative typing diagnostic method: moreover, IF was easier to perform than NT. It is economical and rapid (the results can be read within 1-2 days as compared to 7 days for NT). The reagent is very stable and can be stored for two years at 4 degrees C or for two months at 37 degrees C.     

肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的建立与鉴定

用HFRSV血凝素免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,共获得56株分泌抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系。对其中10株细胞系应用血凝抑制试验证明有9株为特异性分泌抗HFRSV血凝素McAb的杂交瘤细胞系。应用微量细胞培养中和试验证明6株具有中和活性。z株(3D_8和3G_1)具有高滴度的血凝抑制活性和中和活性。10株HFRSV血凝素McAb均能与从不同疫区,不同宿主分离的HFRSV反应,说明HFRSV血凝素具有群共同性。     

抗登革Ⅱ型病毒单克隆抗体杂交瘤细胞的建立及应用

登革热是东南亚地区由虫媒病毒引起的重要传染病之一。我国在1985年～1987年间曾连续发生登革热Ⅱ型病毒的暴发流行。由于登革病毒具有型间和组间的共同抗原,所以用一般的动物免疫血清或免疫腹水抗体鉴定分型时,有相当的交叉反应。为了提高登革热病毒型诊断的特异性,克服型间交叉反应,我们于1987年开展了登革热Ⅱ型病毒单克隆抗体的研究。并建立了对登革     

流行性出血热病毒单克隆抗体在临床早期诊断中应用的研究

用IFAT检测77例临床诊断为EHF病人的外周血白细胞中的病毒抗原。阳性率为50.6％。2—5病日的早期病人阳性率为64.3％(27/42)。并发现,病日越早,病情越重,阳性率越高。试验中应用了抗EHF病毒McAb4B_9、4E_7、3H_4株。抗原阳性者对3种McAb的反应表现为5种类型。不同McAb对抗原的检出率不同,混合使用McAb可提高阳性检出率。在EHF病毒抗原阳性早期患者中,急性期血清特异性IgM抗体阳性率为96.3％。若联合检测EHF病毒抗原和急性期血清IgM抗体,可提高早期诊断的阳性率和准确性。     

血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测结果的影响

目的 比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度（CCID₅₀）检测结果的影响。方法 分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组（免疫吸附法）进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测（微细胞病变法）,检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,并使用处理血清组进行促细胞生长试验。最后分析不同血清对感染性滴度的影响。结果 6种未处理血清组病毒感染性滴度检测结果差异有统计学意义（P<0.01）,6种处理血清组病毒感染性滴度差异无统计学意义（P>0.05）。未处理组2号血清的中和抗体滴度为1：4,6号血清的中和抗体滴度为1：8,其余各组血清的中和抗体滴度均<1：4。6种处理血清组的中和抗体滴度均为1：2。血清促细胞生长试验显示6种处理组血清细胞生长趋势正常。结论 Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测前使用免疫吸附对血清进行预处理,可降低血清中存在的中和抗体对检测的影响,为比较不同实验室数据提供可能。     

流行性出血热病毒单克隆抗体的研制

采用流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）免疫Ｂａｌｅ／Ｃ小鼠得到的脾细胞与ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，获得分泌抗ＥＨＦＶ的单克隆抗体的杂交瘤细胞，其ＭｃＡｂ亚型为ＩｇＧ２ｂ杂交瘤细胞产生腹水效价为１：６４００，经６个用连续传代培养及液氮冻存６个月后复苏，产生抗体均稳定。     

呼吸道病毒单克隆抗体快速检测的应用

对310例成人和114例小儿呼吸道感染患者的鼻咽分泌物,应用系列单克隆抗体联接碱性磷酸酶抗碱性磷酸醇桥联技术(APAAP),检测呼吸道病毒抗原和血清病毒抗体的结果表明,成人呼吸道感染患者中33.2％属病毒感染;小儿肺炎和支气管炎患者54.3％是由病毒引起的。本法对临床病毒感染的诊治具有重要意义。     

肾综合征出血热病毒大鼠单克隆抗体制备及其对病毒抗原特性的…

用肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）免疫Ｌｏｕ／ｃ大鼠脾细胞与ＩＲ９８３Ｆ骨髓瘤细胞融合，获得１１株能分泌特异性体的杂交瘤细胞系。用放射免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ及免疫酶技术等对这一组大鼠单克隆抗体（单抗）进行了特性鉴定和病毒抗原性分析。发现１１株单抗中，９株为抗核壳蛋白（ＮＰ）特异性，２株为抗Ｇ２糖蛋白。大多数抗ＮＰ单抗无中和活性及血凝抑制（ＨＩ）活性，但有２株例外，具有一定程度的     

犬细小病毒单克隆抗体在治疗上的应用研究

用犬细小病毒单克隆抗体对287例患细小病毒性肠炎病上进行治疗，结果治愈279只，(治愈率达97．21%)，显著高于其他治疗方法的治疗效果。治疗机理主要是对体内病毒的中和作用和促进机体的主动免疫反应。此次研究可为动物乃至人类病毒性疾病的临床治疗开辟一条新的途径。     

肾综合征出血热病毒抗原性的单克隆抗体分析Ⅱ

采用汉坦病毒和日本B-1株病毒的多株McAb,对从中国流行性出血热疫区,比利时、瑞典流行性肾病流行区,以及美国、英国等地分离的20株肾综合征出血热病毒的抗原性进行比较分析,可清楚地将上述毒株分为Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ型,大致对应于按宿主动物来源分型的姬鼠型,大鼠型和(?)型.     

猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备猪细小病毒(PPV)杂交瘤细胞株,并对其分泌的PPV单克隆抗体进行鉴定。方法按常规方法制备并获得2株杂交瘤细胞。用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定,用间接ELISA、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)对其分泌的单克隆抗体进行效价测定、亚型鉴定和特异性鉴定。结果得到2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H9、1F9,染色体数目介于90～110之间。细胞上清效价均达1∶1×104,腹水效价均达1∶1×107,其亚型分别为IgG1、IgM,均为kappa链。2H9、1F9单抗与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒I型(PCV-1)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、乙脑病毒(JEV)等均无交叉反应。IPMA和IFA检测结果显示2H9、1F9单抗均能与接种于PK-15细胞的PPV发生特异性反应。结论成功制备了2株抗PPV杂交瘤细胞株,证实其产生的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性。     

五株流行性出血热病毒单克隆抗体的建立及其特性的研究

<正> 流行性出血热(EHF)是世界分布较广的传染病之一。多年来,国内外学者已经从不同地区、不同宿主分离出流行性出血热病毒,并且发现它们都具有共同的和差异较大的抗原成份。EHFV的抗原比较复杂,对其不同抗原决定簇的性质还认识不够,尚不能用抗原性作EHFV的分型。单克隆抗体是研究病毒抗原的一种良好工具,我们用从人血清中分离的陈株病毒免疫Balb/c小鼠制备了5株McAb,现将建株及其特性研究的初步结果报告如下。材料与方法一、细胞和病毒:骨髓瘤细胞sp~2/0—Ag14,曾经8—氮杂鸟嘌呤(8—Azaguanine)处理过,用含20％胎牛血清(FCS)的RPMI     

肠道病毒71型特异性单克隆抗体的制备及其在病毒鉴定中的应用

目的：建立肠道病毒71型（ EV71）特异性检测的免疫荧光方法用于病毒分离培养后的EV71鉴定,为EV71生物学特征研究和疫苗株的筛选奠定基础。方法：以EV71 VP1为免疫原制备单克隆抗体,用经测序鉴定的肠道病毒毒株建立EV71特异性免疫荧光方法;将不同地区收集的手足口病患儿的临床标本进行病毒分离,利用EV71特异性单抗进行分离培养后的病毒鉴定。结果：制备获得2株单抗,经鉴定其中1株3 E12为EV71特异性单抗;以此单抗建立的免疫荧光方法对EV71感染细胞呈阳性反应,而与柯萨基病毒A16和埃可病毒6等非EV71肠道病毒不反应。从104份手足口病临床标本中共分离到35株病毒,产生肠道病毒典型的细胞病变;用3E12特异性单抗免疫荧光鉴定分离病毒,其中29株为EV71,与RT-PCR验证结果完全一致。结论：成功制备获得EV71特异性单克隆抗体,以此单抗建立的EV71特异性免疫荧光方法敏感性高、特异性强,可用于分离培养EV71的鉴定。     

抗小鼠白血病病毒单克隆抗体的研制及其初步应用

用密度梯度离心提纯的小鼠白血病病毒(Murine Leukemia Virus，MuLv)免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术获得6株分泌抗MuLv单克隆抗体的杂交瘤细胞。经检测，它们所分泌的抗体类型分别为IgM(F10，D6，C12，A8)和IgG1(A9，B6)。腹水效价为10^-8～10^-5。相对亲和力分别为1．25ug／ml(F10)，1．30μtg／ml(D6)，1．20μg／ml(C12)，1．0μg／ml(As)，0．07μg／ml(A9)，0．001μg／ml(B6)。F10,D6,C12，和A8能识别相同或相近的抗原表位，A9和B6识别不同的抗原位点。特异性测定结果表明：6株MeAb与11种鼠源性病毒抗原脑膜炎病毒(LCM)；流行性出血热病毒(EHF)；鼠痘病毒(Ect．)；鼠肝炎病毒(MHV)；仙台病毒(Sendai)；呼肠孤癌病毒(Reo3)；鼠肺炎病毒(PVM)；细小病毒(MVM)；鼠腺病毒(MAd)；多瘤病毒(Polyoma)；脑脊髓炎病毒(GDVII)均无反应。将MuLv MeAb标记荧光素应用于实际检测，取得较好的实验结果。