含尿嘧啶DNA糖基化酶的聚合酶链反应检测血清HBV DNA

为探讨含ｄＵＴＰ／尿嘧啶ＤＮＡ糖基化酶（ｄＵＴＰ／ＵＤＧ）ＰＣＲ试剂（抗污染ＰＣＲ试剂，ＰＣＲ－ｄＵＴＰ／ＵＤＧ）抗ＰＣＲ产物污染的能力及其在临床检测中的应用，采用该试剂检测２０４份病毒性肝炎患者血清中ＨＢＶ ＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ试剂比较。结果显示：抗污染ＰＣＲ试剂有较强的抗污染能力，至少可阻止１００ｎｇ的ＰＣＲ产物的污染。该试剂与地伐辛素探针分子杂交所测结果的符合率（８９．３２％）高于普通ＰＣ     

用尿嘧啶－DNA－糖基化酶控制聚合酶链反应的产物污染

聚合酶链反应（ＰＣＲ）灵敏度极高，痕量的ＰＣＲ产物能污染新的ＰＣＲ体系（称为产物污染）导致假阳性结果，我们通过在所有的ＰＣＲ扩增中掺入ｄＵＴＰ使ＰＣＲ产物含“ｄＵ”，在以后的ＰＣＲ扩增前用尿嘧啶－ＤＮＡ糖基化酶（Ｕｒａｃｉｌ－ＤＮＡ－Ｇｌｙｃｏｌａｓｅ，ＵＤＧ）处理，然后加热去除ＵＤＧ活性防止了产物污染。ＵＤＧ切割磷酸糖骨架上的尿嘧啶，可阴止ＤＮＡ聚合酶对它的复制，而对普通ＤＮＡ（即含”ｄＴ”）无影响。因为ＵＤＧ不与ｄＵＴＰ反应，而且在ＰＣＲ扩增前加热变性失活，使含尿嘧啶的污染物的污染得到很好控制。     

含尿嘧啶DNA糖基化酶的聚合酶链反应检测血清HBV DNA

为探讨含ｄＵＴＰ／尿嘧啶ＤＮＡ糖基化酶（ｄＵＴＰ／ＵＤＧ）ＰＣＲ试剂（抗污染ＰＣＲ试剂，ＰＣＲ－ｄＵＴＰ／ＵＤＧ）抗ＰＣＲ产物污染的能力及其在临床检测中的应用，采用该试剂检测２０４份病毒性肝炎患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ试剂比较。结果显示：抗污染ＰＣＲ试剂有较强的抗污染能力，至少可阻止１００ｎｇ的ＰＣＲ产物的污染。该试剂与地戈辛素探针分子杂交所测结果的符合率（８９．３２％）高于普通ＰＣＲ与分子杂交所测的符合率（８１．４５％）。表明抗污染ＰＣＲ试剂的应用有利于防止ＰＣＲ产物的污染，提高ＰＣＲ的准确性和特异性。     

聚合酶链反应检测血清HBV—DNA

评价聚合酶链反应法检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义及其优越 性。方法：用ＰＣＲ法测定８１例血清ＨＢＶ标志物阳性的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与固相放射免疫测定法作比较。     

聚合酶链反应检测血清HBV—DNA

聚合酶链反应(Polymerase Chain re-action,pcr)是近年来发现起来的体外特异性DNA扩增技术，它可使极微量单拷贝的特定     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV—DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传梁科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原－抗体更加灵敏、可靠。     

尿嘧啶DNA糖基化酶在PCR防污染中的应用

1.PCR“残留污染” 在PCR操作过程中,最容易出现“污染”问题,原因主要有如下几种情况:①模板的交叉污染:在样品采集或处理中,气溶胶、加样器取样时的泡沫或其他原因引起样品或模板的交叉污染,造成假阳性,属于正常DNA(由A、T、G、C四种碱基组成)引起的污染;②扩增产物的污染:在扩增过程中,将碱基T置换成U,使得扩增产物为U-     

聚合酶链反应检测痰液TB—DNA的临床意义

利用聚合酶链反应，对１２５例呼吸疾病患者进行痰液中结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）片段的检测。结果显示：ＰＣＲ方法对活动性肺结核的诊断敏感性为８６．６７％，特异性为９４．９２％。陈旧性肺结核２例阳性。有６例患者痰ＴＢ－ＤＮＡ阳性，胸片未发现结核病灶。认为，ＰＣＲ方法为肺结核诊断提供了一项灵敏特异的诊断手段，而且在呼吸系统常见病的鉴别诊断上亦具有重要价值。     

用聚合酶链反应—微孔板杂交技术检测HBV DNA

目的：建立并优化ＨＢＶ ＤＮＡ的ＰＣＲ－微孔板杂交技术检测体系,使临床ＰＣＲ结果判定更加客观可靠。方法：采用碱裂解标本中的ＨＢＶ、玻璃粉吸附提纯模板ＤＮＡ,用５＇端标记生物素的引物进行ＰＣＲ,ＰＣＲ扩增产物与包被于微孔板中的靶基因杂交,酶标链霉亲和素与杂交体中的生物素结合后,用酶底物与所标记酶进行显色反应,最后通过测定其光密度来判定结果。结果：建立并优化的ＰＣＲ－微孔板杂交检测方法提高了检测的灵敏     

聚合酶链反应检测HBV—DNA的临床应用

目前,聚合酶链反应(PCR)技术在国内外已被公认为检测各种病原体的最佳手段,PCR在医学检验学中最有价值的应用领域,就是对感染性疾病的诊断。由于其灵敏度高,扩增产物污染致使其假阳性结果的可能性增加,特别在临床中对乙型肝炎病毒(HBV)的检测更易出现假阳性。对此,我们进行了ELISA法同步检测,对HBV-DNA在体内的复制情况有了进一步证实,为临床提供了更准确的依据。1　材料和方法1.1　标本来源　本院对外查体及各科室送检标本。男380例,女294例。取3ml静脉血离心取血清备用。1.2　试剂　西安第四军医大学基因研究所提供的HBV-DNAP…     

结核杆菌DNA聚合酶链反应技术的应用

结核杆菌ＤＮＡ聚合酶链反应技术的应用李秀珍莫英曼（贵阳医学院附院肺内科贵阳５５０００４）结核病是长期以来危害人类健康的常见病，以往结核病的实验室检查依赖于涂片和培养，现在由于免疫学和分子生物学在医学领域中的应用，使结核病诊断的准确性有了很大程度的提高...     

定量聚合酶链反应检测慢性乙型和丁型肝炎患者血清HBV DNA

本研究应用新型定量ＰＣＲＨＢＶ检测法－ＡｃｕＧｅｎ Ａｍｐｌｉｓｅｎｏｒ＾ＴＭ ＨＢＶ法对７０例慢性乙型与丁型肝炎病例进行血清ＨＢＶ ＤＮＡ水平测定，观察乙肝在丁肝病毒重叠感染时是否对ＨＢＶ ＤＮＡ复制存在抑制作用。实验结果：乙肝组（３４你）及丁肝组（３６例）定量ＰＣＲ测ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为８８．２％（３０／３４）和９１．７％（３３／３６）（Ｐ〉０．０５）。乙肝组ＨＢｅＡｇ阳性与抗ＨＢｅ阳性病例     

应用聚合酶链反应标记高活性DNA探针

聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)或称体外基因倍增技术,是一种在体外选择性地扩增特定DNA序列的新方法。它利用一对位于待扩增DNA序列两侧的取向相对的DNA引物,在DNA聚介酶的介导下,经过多次变性、退火和延伸过程的重复性循环,大量合成靶DNA序列。     

应用聚合酶链反应检测HBV—DNA的临床价值

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对５３０例乙肝患者（含１１８例病毒携带者）血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为１）ＨＢｓＡｇ“＋”、ＨＢｅＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为９６．８５％；２）ＨＢｓＡｇ“＋”、抗－ＨＢｅ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为４４．１２％；３）ＨＢｓＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为３５．８９％；４）ＨＢＶ标志物均阴性为１３．１１％；５）