多发性内分泌腺瘤2A型家系中ret原癌基因突变的分子筛查

目的 探寻2个多发性内分泌腺瘤2A型（MEN2A）家系发病的分子机制。方法 提取1982年和1992年中山大学附属第一医院收集的2个MEN2A家系共9名成员外周血基因组DNA，对ret原癌基因21个外显子进行聚合酶链反应（PCR），PCR产物进行直接测序。结果 家系1中2例患者存在ret原癌基因exonll的C634R突变，exon2的A45A和exon13的L769L 2处多态性；家系2中1例患者存在ret原癌基因C634Y突变，exon2的A45A存在多态性，另外筛查出其子为该基因突变携带者。结论 本研究2个家系存在exonll的C634位点突变，达到MEN2A基因水平上的诊断，对其临床治疗及其后代的早期诊断有重要指导意义。     

人类GNAS1基因突变的研究进展

GNAS1通过不同的启动子和共同的2~13号外显子转录产生Gsα,NESP55,XLαs等多种基因产物,主要产物是异源三聚体的Gsα,介导激素等多种细胞外因子的细胞内信号转导。GNAS1的种系失活性突变会导致Albright遗传性骨营养不良症(AHO)。活化的体细胞突变会导致以环磷酸腺苷(cAMP)为有丝分裂信号的细胞增殖,经典的表现为McCune-Albright综合征(MAS)。A366S突变发生在男性患者可表现为假性甲状旁腺功能减退症Ⅰa型(PHPⅠa)和睾丸中毒症并存。组织特异性的激素抵抗可能是由于组织特异性的GNAS1印记缺陷所致。     

中国汉族人Brugada综合征患者SCN5A基因Ⅳ区一个新的突变

背景Brugada综合征是一种易导致猝死的具有遗传倾向的疾病，与编码心肌钠通道的基因突变有关。目的研究中国Brugada综合征患者SCN5A基因的碱基改变情况。方法对15例先证者及家系进行直接SCN5A基因测序。DNA来源于患者外周血白细胞。全部28个外显子通过设计的40对引物进行PCR扩增，扩增后的产物直接测序。结果在一个家系上发现了一个错义突变，即G5080A（R1628Q），该突变导致心肌细胞钠通道的α亚基第IV结构域的第4片段发生改变。在150个正常对照者未发现此碱基改变。结论G5080A（R1628Q）可能是中国Brugada综合征患者SCN5A基因新的突变位点。     

湖南地区肝豆状核变性基因突变热区的序列检测与分析

目的检测湖南地区汉族人群肝豆状核变性患者（WD）ATP7B基因常见突变种类和形式。方法提取22例WD患者外周血基因组DNA，聚合酶链反应（PCR）扩增ATP7B基因第5、8、12及13号外显子并进行DNA直接测序检测，应用在线BLAST软件分析。结果22例患者中共发现15例患者存在基因突变。其中10例患者存在8号外显子2273G→T杂合突变（即Arg778Leu），且均伴有2250C→G多态（即Leu770Leu，均为杂合子），未发现纯合突变。12号外显子中共发现2855G→A多态（即Arg952Lys）7例（杂合突变4例，纯合突变3例），其中1例合并12号外显子2828G→A杂合突变（即Gly943Asp），另3例合并Arg778Leu杂合突变。13号外显子2975C→T杂合突变（即Pro992Leu）1例。5号外显子未发现突变。结论Arg778Leu是湖南地区汉族WD患者的突变热点，5号外显子为非突变热点。     

乙型肝炎病毒基本核心启动子突变与基因型的关系

目的研究乙型肝炎病毒（HBV）基本核心启动子（BCP）突变与HBV基因型的关系。方法随机选取我院68例慢性乙型肝炎患者外周血,采用荧光定量PCR结合TaqmanMGB探针技术检测HBV基因型,并用基因扩增和DNA测序方法检测BCPT1762／A1764双突变。结果68例患者HBV分型中,B基因型20例,C基因型46例,B、C混合型1例,未分型（非B非C型）1例。66例B、C两基因型中,B基因型组T1762／A1764双突变5例,突变率25．0％（5／20）,C基因型组T1762／A1764双突变24例,突变率52．2％（24／46）,C基因型T1762／A1764双突变率明显高于B基因型（P〈0．05）。结论苏州地区慢性乙型肝炎患者基因型以C型和B型为主,C基因型比B基因型更易发生T1762／A1764双突变。     

以肝肿大为主要表现的Ⅰa型糖原累积病家系研究分析

目的对一个以肝肿大为主要表现的Ⅰa型糖原累积病（GSD 1a）家系进行基因突变研究和分析。方法收集GSDⅠa患者家系资料和亲属外周血标本，PCR法扩增葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）基因的5个外显子，并测序比对基因序列的变化。结果结合临床表现、肝组织学检查及家系分析，患者诊断明确。基因结构分析显示，患者p6-Pase基因5号外显子密码727G→T／1071C→A（A331E）复合突变。在其父辈家系中存在5号外显子727G→T杂合子突变，导致剪切点突变；其母辈家系中存在5号外显子1071C→A杂合子突变，导致第331位密码子编码的A转变为E。结论患者的祖父及外祖母为首发突变者。727G→T／1071C→A（A331E）复合突变是该家系发病的分子生物学基础。     

妊娠期急性脂肪肝关键酶长链脂肪酸氧化酶编码基因突变在我国汉族人群中的表现

目的：研究我国汉族人群患妊娠期急性脂肪肝（AFLP）的产妇及其新生儿线粒体脂肪酸氧化代谢中的线粒体三功能蛋白酶（MTP）ɑ亚单位的长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶（LCHAD）G1528C及C1132T位点的突变情况。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）分析12组AFLP的产妇外周血和/或脐血/新生儿外周血MTPα亚单位编码基因中G1528C及C1132T位点的突变情况。结果12组AFLP患者血标本MTPα亚单位的G1528C及C1132T位点经检测后,未见基因突变。结论西方人种患AFLP者中常见的MTPα亚单位的G1528C及C1132T位点突变可能不是中国人种AFLP患病的常见的突变位点,MTP缺陷存在种族差异。     

RET原癌基因点突变所致多发性内分泌腺瘤病2B型一例家系研究

目的：研究1例中国家系中RET原癌基因点突变与多发性内分泌腺瘤病2B型（MEN－2B）发病的相互关系及其遗传特征。方法：收集1例MEN－2B患者术后甲状腺髓样癌肿瘤组织和外周血DNA标本及其父母外周血DNA标本运用PCR和逆转录PCR技术以及直接基因测序技术对上述标本中RET原癌基因16号外显子区域进行分子检测。结果：在患者肿瘤组织（c)DNA及其外周血DNA中均检测到RET原癌基因16号外显子918密码子处基因点突变,即：918Met(ATG）→Thr(ACG).且由基因测序图示,该突变为杂合子错义突变。而患者父母外周血DNA样本中均未发现上述RET原癌基因突变。结论：与国外报道相似,在中国MEN－2B患者中,也找到了RET原癌基因16号外显子基因点突变918Met(ATG)→Thr(ACG)。虽然其发病具有遗传倾向,但同样存在散发病例。MEN－2B发病的基因检测应成为该病的诊断治疗以及患者一级亲属早期诊断和临床干预的分子基础。     

线粒体DNA ND1基因nt3394 T→C突变与老年人2型糖尿病

目的：了解线粒体烟酰胺腺嘌呤脱氧核苷酸（NADH）脱氢酶第一亚单位（ND1）基因中339位点T→C突变与我国老年人2型糖尿病的关系。方法：收集无血缘关系的208例老年2型糖尿病患者，同时以180例无糖尿病家族史的老年糖耐量正常者作为对照，用聚合酶链反应扩增。限糖尿病患者，同时以180例无糖尿病家族史的老年糖耐量正常者作为对照，用聚合酶链反应扩增、限制性内切酶HaeⅢ消化进行点突变筛选。结果：发现9例患者存在线粒体DNA ND1基因3394位点T→C突变（4．3％），非糖尿病者中仅有1例突变（0．6％），两组比较差异有显著性（P＜0．05）。结论：线粒体DNA ND1基因中3394位点T→C突变可能与我国老年人2型糖尿病的发病有关。     

血管紧张素Ⅱ1型受体基因A1166/C多态性与冠心病病变程度的相关性研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）基因A1166／（2多态性与冠心病（CHD）及其病变程度的关系、方法应用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RELP）检测法，测定109例冠心病病人及106例对照者的AT1R基因型。结果冠心病组与对照组AA、AC基因型频率和等位基因频率A、C比较均无统计学意义（P〉0．05）；从冠状动脉病变积分和受累血管数两方面分析冠心病病变程度与基因变异的关系，AA、AC基因型和A、C等位基因频率在不同病变程度间也无统计学意义（P〉0．05）。结论AT1R基因A1166／C多态性与冠心病及其病变程度可能无关联.