用CTLL细胞~3H-TdR掺入法检测鼠麻风杆菌感染小鼠IL-2活性的初探

作者采用白细胞介素2(Interleukin 2,IL-2)依赖细胞株(Cytotoxic T-lymphocyte line,CTLL)~3H-TdR 掺入法,分别检测了正常的和鼠麻风杆菌(Mycobacterium lepraemurium,MLM)感染的BALB/c 小鼠脾细胞产生IL-2的能力及IL-2活性,以探讨麻风病的免疫抑制机理。结果表明:对 IL-2绝对依赖的 CTLL 细胞的增殖反应与加入 IL-2的含量呈正相关(r=0.9862);经MLM感染的小鼠的IL-2 活性明显降低,与正常小鼠比较,二者有显著性差异(P<0.001)。提示 IL-2活性降低可能与MLM 感染小鼠的免疫抑制现象有关。     

流式细胞术法与3H-TdR掺入法观察细胞增殖的相关性研究

目的:研究3H-TdR掺入法和流式细胞术法研究指标的相关性,探讨用流式细胞术法来替代3H-TdR掺入法的数据依据.方法:用3H-TdR掺入法和流式细胞术法对细胞DNA合成和有丝分裂进行检测.结果:流式细胞仪指标与3H-TdR掺入实验指标呈高度的正相关关系,相关系数分别为:PI与cpm相关系数为r=0.964;SPF与3H-TdR,掺入的相关悉数r=0.876,且经检验有统计学意义(P＜0.01).结论:主动脉平滑肌细胞增殖指数、S期细胞分数与3H-TdR掺入值密切相关.     

四物汤对小鼠脾细胞分泌IL-3和IL-2的促进作用

目的:研究四物汤对小鼠脾细胞分泌IL-3和IL-2的促进作用.方法:用3H-TdR掺入法和斑点杂交法,考察四物汤对刀豆球蛋白A(Con A)诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌IL-3和IL-2的影响.结果:四物汤可显著促进Con A诱导的脾淋巴细胞分泌IL-3和IL-2(P＜0.01,P＜0.05),促进淋巴细胞中IL-3 mRNA的表达.结论:四物汤能增强小鼠的造血功能.     

鼻咽癌患者IL—2活性及IL—2R表达的测定

本实验检测了15例鼻咽癌患者放射治疗前后及正常人的IL-2活性及IL-2R表达能力,结果发现鼻咽癌病人IL-2活性及IL-2R表达均明显地低于正常人。且在放疗后进一步下降。     

人芽囊原虫感染小鼠血清中IL-17水平的动态观察

目的 观察小鼠感染人芽囊原虫后血清中白细胞介素17（IL-17）水平的动态变化,从细胞因子的角度来探讨IL-17在人芽囊原虫感染中的意义。方法BABL／C小鼠120只随机分为实验组、免疫抑制剂组、对照组,每组各40只,三组小鼠分别于感染后第2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、10d、12d、14d各取4只,采用ELISA试剂盒检测小鼠血清中IL-17水平。结果免疫抑制剂组和对照组小鼠血清中IL-17的含量在不同感染时期基本处于稳定水平（P〉0．05）,而感染后不同时期的实验组小鼠血清IL-17水平出现升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,其中第4d、5d、6d的表达分别高于免疫抑制剂组和对照组（P〈0．05）,且第5d达到高峰。结论提示了IL-17可能在人芽囊原虫早期感染中发挥了重要作用。     

Serum IL-2 in chronic hepatitis B virus infected patients and its association with disease activity

Association of serum Interleukin -2 (IL-2) levels with the activity of chronic hepatitis B (CHB) was evaluated in this study. We studied 45 subjects in the Department of Hepatology, Bangabandhu Sheikh Mujib Medical University, Dhaka. They were divided into three groups. Group A consisted of 15 CHB patients with raised Alanine aminotrasferase (ALT) (> 80 iu/L), Group B consisted of 15 CHB carrier with normal ALT (< or =40 iu/L) and Group C consisted of 15 healthy subjects with normal ALT. Serum IL-2 level was measured in all groups. IL-2 level was detected in 14(93.33%) subjects in group A and 2(13.33%) subjects in group B. IL-2 level was undetectable in all the subjects in group C. The association between IL-2 level and activity of chronic hepatitis B was observed by statistical analysis (Z-test). There is significant difference between group A and group B (p<0.001) and also in group A and group C (p<0.001), but no significant difference between group B and group C (p>0.05). Our results support the observation that IL-2 level can be used as a marker of activity in CHB patients as IL-2 level was significantly detected in the patients of group A.     

IFN-γ与TNF联合在小鼠体内抗结核菌能力的研究

目的 :研究IFN -γ和TNF对结核分枝杆菌感染小鼠的疗效及部分作用机制。方法 :小鼠感染结核分枝杆菌后第 5天给予IFN -γ和 /或TNF治疗 ,观察治疗后半数死亡时间、一定时间内的死亡率、脾内活菌数 ,检测Mφ产生NO水平 (用Griess试剂 )。结果 :联用IFN -γ和TNF组与单纯攻毒组比较明显延长感染小鼠半数死亡时间、降低感染小鼠 35天内的死亡率、显著减少感染小鼠脾内活菌数 ,Mφ产生NO水平明显增加。 结论 :IFN -γ和TNF联用对结核分枝杆菌感染小鼠产生保护效应 ,其机制可能与增强Mφ释放NO水平有关。     

旋毛虫感染小鼠IL-4、IL-5的表达及嗜酸性粒细胞体外杀伤旋毛虫肌幼虫的实验观察

【目的】探讨感染旋毛虫小鼠嗜酸性粒细胞（Eosinophil,Eos）在体外对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用及脾细胞中IL-4和IL-5的表达。【方法】制作旋毛虫感染小鼠模型,采用体外培养法,按分组设计在96孔细胞培养板的板孔中加入感染旋毛虫小鼠外周血提取的Eos、旋毛虫肌幼虫、血清（对照血清或经不同条件处理的血清）及含有10%灭活小牛血清的PRMI1640培养液,连续培养2d。显微镜下,在12、24、48h等时相观察小鼠Eos对旋毛虫肌幼虫的影响;用RT-PCR方法检测感染旋毛虫小鼠脾脏中IL-4、IL-5的mRNA含量,观察这两种细胞因子的表达情况。【结果】在体外培养的条件下,单纯Eos对旋毛虫肌幼虫无杀伤作用,在免疫血清参与下,Eos对幼虫的杀伤作用明显增强,在灭活IgE前后,Eos的杀伤作用明显改变,在灭活补体和IgE后Eos的杀伤作用明显减弱,与单纯Eos的情况无差别。感染组小鼠脾脏中IL-4和IL-5mRNA的含量均明显高于对照组。【结论】Eos对旋毛虫肌幼虫杀伤的过程需要免疫血清的参与,且IgE是Eos发挥ADCC效应所依赖的重要免疫球蛋白,IgG可能在Eos发挥ADCC效应的过程中并没有明显作用。感染旋毛虫小鼠脾脏细胞IL-4和IL-5表达量明显升高。     

IL-17A在肺部铜绿假单胞菌感染小鼠中的表达及其意义

目的:探讨IL-17A在肺部铜绿假单胞菌感染小鼠中的表达及其作用.方法:30只SPF级昆明白雌性小鼠,随机分成对照组和模型组,模型组小鼠气管内滴入铜绿假单胞菌悬液,对照组小鼠气管内滴人生理盐水,造模后第3、9、24 h通过心脏采血处死小鼠,每次各5只.将小鼠的肺组织制做成病理切片,HE染色观察肺组织炎症变化,免疫组化法检测肺组织IL-17A的表达,ELISA法检测小鼠血清中IL-17A的浓度.结果:①与对照组相比,随着时间变化,模型组肺泡结构破坏逐渐加重,肺泡腔炎症细胞浸润逐渐明显.②与对照组相比,模型组肺组织IL-17A各个时间点的表达明显增加,随着时间的延长而增加(P＜0.05).③与对照组相比,模型组血清中IL-17A的浓度在造模后3h无明显差异,造模后9h和24 h明显升高,差异有统计学意义.④血清中IL-17A与肺泡炎积分呈正相关(r=0.852,P=0.00).结论:IL-17A可能通过炎症细胞的募集参与了铜绿假单胞菌肺部感染的炎症反应及早期对病原菌的清除过程.     

旋毛虫感染小鼠血清IL-2含量变化的动态观察

目的 :通过测定白细胞介素 - 2 (IL - 2 )的含量 ,探讨小鼠感染旋毛虫后特异性细胞免疫功能的变化。方法 :将 80只小鼠随机平均分为实验组和对照组两组 ,每组 4 0只。实验组每只小鼠喂食感染旋毛幼虫 2 0 0条 ,对照组小鼠不做处理 ,分别于小鼠感染旋毛虫后第 1、2、3、4周随机取实验组和对照组小鼠各 1 0只 ,常规眼眶静脉取血分离血清 ,用放射免疫法测定其IL - 2的值。结果 :①对照组IL - 2含量在各周之间均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。②实验组IL - 2含量在感染后第 1周低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,在第 2、3、4周均低于相应对照组 (P <0 .0 1 )。③实验组IL - 2含量随感染时间的延长而呈逐渐下降趋势。结论 :实验组IL - 2含量在感染各期均低于对照组 ,表明宿主的特异性细胞免疫功能降低 ,且随感染时间的延长而呈不断下降趋势 ,提示旋毛虫在感染宿主后破坏和逃避了宿主的免疫系统和免疫功能 ,给其在宿主中的生存和发育等创造了有利条件 ,对宿主造成进一步的损害。     

Study on IL-4, IL-5 and IL-10 in liver and bone marrow of mice infected withSchistosomiasis Japonica

Summary  To compare Th2 cytokines levels in livers and bone marrow of mice infected withSchistosomiasis Japonica and understand their implication, ABC immunohistochemical staining technique and multimedia pathologic pictures analysis were used to detect the IL-4, IL-5 and IL-10 derived from livers and bone marrow of infected mice. Results showed that in the livers of infected mice, IL-4, IL-5 and IL-10 were obviously increased over time. The level of IL-4 was increased most among the 3 indicators. In bone marrow of infected mice, however, even though IL-4 was slowly increased over time, it was lower than that of livers in 10th and 12th week. The level of IL-5 was higher than that of livers during 12th weeks. Before 10th weeks IL-10 was elevated. After 12th week IL-10 was decreased and obviously lower than that of livers. It is concluded that in mice infected withSchistosomiasis Japonica, the immune response occurred mainly in the liver. Therefore, in bone marrow, IL-5 showed obvious auto-secretion. It might be related to its biological ability to induce B cell division and eosinophil differentiation.     

IL-6RFP 在小鼠血吸虫感染中对肝细胞的保护作用

目的：探讨鼠白介素6受体融合蛋白（mIL-6RFP）在BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中对肝细胞的保护作用。方法通过亲和层析方法获得可阻断白介素-6（IL-6）的mIL-6RFP,经人类肝癌细胞（HepG2）IL-6刺激及阻断实验检测纤维蛋白原（fibrinogen,FGG）和结合珠蛋白（haptoglobin, HP）的 mRNA 表达变化,体外验证重组蛋白 mIL-6RFP 的生物活性。建立 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型,于感染第24天起经尾静脉注射 mIL-6RFP,隔天注射每次100μg／只,感染第42天剖杀小鼠。HE 染色法检测小鼠肝脏肉芽肿面积,荧光定量 PCR 法检测小鼠肝组织 IL-1β、IL-13、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和趋化因子1（CXCL1）的 mRNA 表达,连续监测法检测小鼠肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）。结果 HepG2细胞实验显示 mIL-6RFP 可降低IL-6对该细胞的刺激作用,显著下调 FGG 和 HP 的表达（P＜0．05）。在小鼠感染模型中阻断 IL-6后,肝功能指标 ALT和 AST 与溶剂对照组相比均显著下降（P ＜0．05）,肉芽肿病变无显著性差异。结论在 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中 mIL-6RFP 可明显改善肝细胞功能,但对肉芽肿形成未见明显作用。     

莱姆病螺旋体感染小白鼠病理变化的初步观察

目的研究小白鼠被莱姆病伯氏疏螺旋体感染后的病理变化。方法取实验组和对照组小白鼠的肝、脾、肾和脑组织样本,分别放入中性福尔马林中固定,常规石蜡包埋、切片,HE染色,在光学显微镜下观察病理变化。结果实验组5只小白鼠的肝小叶内及小血管旁均有程度不同的淋巴细胞浸润灶,灶内肝细胞萎缩、坏死、消失,脑组织除4号小白鼠发现大脑皮质深部有一个较大的淋巴细胞浸润灶,在不同切面上均见该灶位于小血管旁外,其余均未见异常。对照组脏器组织均正常。结论莱姆病伯氏疏螺旋体进入小白鼠体内可侵犯多脏器组织。     

IL-22和IL-2在四甲基哌啶减轻三氯乙烯致敏小鼠肝损伤中的表达

目的 探讨腹腔注射四甲基哌啶(Tempol)对三氯乙烯(TCE)致敏小鼠肝损伤中的白细胞介素(IL)-22、IL-2及丙二醛(MDA)水平的影响.方法 40只6～8周龄Balb/c雌性小鼠随机抽样分成空白组、溶剂组、TCE组和TCE+Tempol组,建立TCE经皮致敏模型,TCE+Tempol组动物在末次激发前腹腔注射...     

Bone marrow stromal cell line co-transfected with IL-2 and IL-3 genes can accelerate restoration of T-cell immunity in allo-BMT mice

Background After T-cell depleted allogeneic bone marrow transplantation, impaired immune reconstitution is a major cause of morbidity and mortality in the recipient. The purpose of this study was to observe the effects of the gene-engineered bone marrow stromal cell line QXMSC1-IL-2+IL-3 on the reconstitution of T-cell immunity in allo-BMT mice.Methods The bone marrow stromal cell line QXMSC1 was co-transfected with IL-2 and IL-3 genes using a Tet-on gene expression system. T lymphocyte subset counts per spleen were analyzed by flow cytometry. Lymphocyte proliferation response to ConA was examined to evaluate T-cell function. CDR3 spectratyping techniques were performed to evaluate TCR repertoire diversity at various time points post-transplantation.Results Gene engineered bone marrow stromal cell line QXMSC1-IL-2+IL-3 could express IL-2 and IL-3 ［1300 ng·day（-1）·10（-6） cells and 1100 ng·day（-1）·10（-6） cells, respectively］ under the control of doxycycline. QXMSC1-IL-2+IL-3 in combination with allogeneic bone marrow could significantly increase the counts of CD4+ and CD8+ T cell, 1.72 and 1.27-fold respectively at week 3 compared with TCD-BMT group (P&lt;0.01); make CD4+/CD8+ ratio return to normal level at week 4; enhance splenocytes mitotic response to ConA (P&lt;0.01), and accelerate restoration of TCR repertoire diversity in the lethally irradiated mice (P&lt;0.05).Conclusion The gene transduced stromal cell line QXMSC1-IL-2+IL-3 is able to accelerate T-cell immunity in allo-BMT mice.     

结核分枝杆菌H37Ra菌株感染小鼠脾组织IL-35 mRNA表达及其意义

目的:探讨H37Ra菌株感染后小鼠脾脏IL-35 mRNA的表达情况,分析其在结核分枝杆菌(M.tb)感染中的作用与意义。方法:将清洁级C57B/L6小鼠分为对照组、感染4周组和感染8周组,每组10只。采用H37Ra菌株感染后,观察小鼠一般状况与肺组织病理,并检测肺部感染细菌数及脾组织IL-35的mRNA表达水平。结果:H37Ra菌株感染小鼠在不同时段其脾组织IL-35(EBI3亚基和P35亚基)的mRNA表达均高于对照组(P<0.01),感染8周组的脾组织IL-35的mRNA表达水平更高(P<0.01)。结论:结核分枝杆菌H37Ra菌株感染小鼠后脾组织IL-35 mRNA表达水平升高,IL-35表达可能与结核分枝杆菌感染密切相关。     

厦门市82株结核分枝杆菌MLVA基因分型分析

目的分析厦门市结核分枝杆菌的分子流行病学特征,为肺结核病控制提供科学的分子流行病学等信息。方法选择15个可变数目串联重复位点（Variable number tandem repeats,VNTR）位点,对来源于厦门市的临床分离菌株DNA进行检测,检测结果使用BioNumerics（Version4.5）软件进行聚类分析。结果82株结核分枝杆菌被分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ等6大基因群,以Ⅰ群为主,包含63（76.8%）个株菌;流动人口结核分枝杆菌基因群为Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ,常驻人口为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ;流动人口与常驻人口的结核分枝杆菌VNTR基因型存在一定差异,但均以Ⅰ群为主。Ⅰ群菌株耐药性与其他基因群的耐药性差异无统计学意义（P〉0.05）。结论初步证实厦门市结核分枝杆菌菌株存在明显的基因多态性,流动人口与常驻人口流行株均以Ⅰ群流行为主,应加强此类菌株流行的监控。     

Macrophage activation of lymphoma-bearing mice by liposome-mediated intraperitoneal IL-2 and IL-6 gene therapy

Objective To investigate the antitumor mechanism of interleukin-2 (IL-2) and interleukin-6 (IL-6) gene therapy. Methods Liposome encapsulated IL-2 DNA and IL-6 DNA were intraperitoneally (i.p.) injected into mouse lymphoma cell line (EL-4) lymphoma-bearing mice. Macrophage function (MФ) from the mice was assessed. Results Cytotoxicity, major histocompatibility (MHC) Ⅱ expression and IL-1 and TNF secretion of the macrophages all augmented after i.p. injection of liposome encapsulated IL-2 DNA or IL-6 DNA. More efficient activation of macrophages was observed in mice treated with liposome encapsulated IL-2 DNA than IL-6 DNA. IL-2 gene therapy combined with IL-6 gene therapy showed the maximal activation of macrophages in the lymphoma-bearing mice.Conclusion IL-2 and IL-6 gene therapy can relieve the supression of macrophages of the lymphoma-bearing mice, and efficiently activate the antitumor immune responses.