Hedgehog信号通路在胃癌中的研究进展

Hedgehog信号通路是来自内胚层的信号分子之一,在个体胚胎发育诱导、模式的形成和细胞命运的决定中起着关键的作用,信号紊乱会导致各种组织器官畸形.在个体发育成熟后,Hedgehog信号通路只在特定的部位表达,与器官正常功能的维持、机体内环境的稳定有着密切的关系.然而,越来越多的研究显示Hedgehog信号通路与肿瘤的发生发展有着密切的关联.已有研究报道胃癌中也明显存在Hedgehog信号通路的异常活化.本文从Hedgehog信号通路过度表达的机制、成员突变、非经典Hedgehog信号通路、胃癌干细胞、上皮间质转化等方面出发,将近几年来Hedgehog信号通路与胃癌发生发展关联方面的研究进展进行报道.     

TGF-β1 Snail E-cadherin及N-cadherin在胃癌中的表达及意义

目的：探讨TGF—β1、Snail、E—cadherin及N—cadherin在胃癌中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学法检测96例胃癌组织及80例癌旁组织中TGF—β1、Snail、E—cadherin、N—cadherin的表达，并与临床病理资料做对照分析，结果：胃癌组织中TGF—β1、Snail、E—cadherin及N—cadherin阳性表达率分别为63．5％、83.3％、37．5％、44．8％，癌旁组织分别为28．8％、41.3％、100％、11.3％。四种蛋白在胃癌组织及癌旁组织的表达差异均有显著性（P〈0．05）。E—cadherin表达的降低及TGF—β1、Snail、N—cadherin表达的升高与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关（P〈0．05）、N—cadherin与TGF—β1蛋白的表达呈正相关，并且与E—cadherin的表达呈负相关E—cadherin与TGF-β1、Snail的表达均呈负相关（P〈0．05）。结论：TGF—β1、Snail蛋白的高表达、E—cadherin蛋白的低表达与N—cadherin的反常表达与胃癌的浸润和转移有密切的关系；在胃癌的发展过程中．E—cadherin向N—cadherin转化及TGF—β1、Snail表达可能发挥重要作用．     

Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在乳腺癌中的表达及其意义

目的 探讨Hedgehog信号通路转录因子Gli1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学染色检测Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在102例乳腺浸润性导管癌及30例癌旁正常组织中的表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果 Gli1蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为75.5％（77／102）,高于癌旁正常组织的26.7％（8／30）,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。Gli1蛋白的表达与腋窝淋巴结转移、雌激素受体（ER）表达有关（P＜0.05）,而与患者的年龄、绝经状况、肿瘤直径、病理分期、组织学分级、孕激素受体（PR）及人表皮生长因子受体-2（HER-2）表达状况均无关（P＞0.05）。结论 Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在乳腺癌组织中存在高表达,其一定程度上对ER表达起到负向调节作用。     

Snail基因在不同分化程度胃癌细胞中的表达及其意义

目的探讨Snail基因在不同分化程度人胃癌细胞中的表达及意义。方法分别以0ng/ml、5ng/ml、10ng/mlTGF-β1处理未分化、低分化、中分化的人胃癌细胞株,RT-PCR法测定Snail基因的表达。结果在0ng/ml浓度TGF-β1刺激下,不同分化程度人胃癌细胞SnailmRNA表达有显著性差异,随着肿瘤分化程度的降低,SnailmRNA表达水平增高;在5ng/ml浓度TGF-β1刺激下,不同分化程度人胃癌细胞SnailmRNA表达有显著性差异,随着肿瘤分化程度的降低,SnailmRNA表达水平增高;在10ng/ml浓度TGF-β1刺激下,不同分化程度人胃癌细胞SnailmRNA表达有显著性差异,随着肿瘤分化程度的降低,SnailmRNA表达水平增高。结论 Snail在分化程度越低的胃癌细胞中表达水平越高,Snail可以作为判断肿瘤恶性程度的辅助标志。     

上皮性肿瘤细胞中Snail与E-cadherin的表达及其与体外侵袭性的关系

目的 研究上皮性肿瘤细胞Snail与E-cadherin的表达以及与瘤细胞表型、转移潜能的关系。方法 采用Northern blot、共聚焦激光显微镜研究6株不同组织来源、不同分化程度及转移潜能的上皮性肿瘤细胞、1株正常上皮细胞、1株成纤维细胞中Snail与E-cadherin mRNA和蛋白表达与定位;Boyden小室体外侵袭实验反映细胞的转移潜能。结果 在分化程度较高的癌细胞和对照正常上皮细胞中,E-cadherin mRNA与蛋白表达较强,而Snail表达缺如;在分化程度低、转移潜能高的癌细胞和对照成纤维细胞中,E-cadherin、Snail mRNA及蛋白表达与上述情况相反。E-cadherin多定位于细胞胞浆和胞膜,Snail主要定位于胞核和胞浆。结论 在上皮性肿瘤细胞中E-cadherin和Snail在mRNA与蛋白表达水平上存在逆反关系,且与细胞分化、转移潜能相关。     

Twist在胃癌黏膜组织的表达及在上皮间质转化中的作用

目的:观察上皮间质转化因子Twist在胃癌中的表达情况以及与胃癌恶性生物学行为的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测59例胃癌组织中Twist,上皮源性标记物E-cadherin,间叶源性标记物Vimentin的表达,并分析与各临床病理因素之间的关系。结果:59例胃癌组织中Twist阳性表达率为74.6%(44/59),29例观察到E-cadherin表达的降低,同时7例观察到Vimentin表达上调。Twist的表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05);而且Twist表达与E-cadherin表达降低(P<0.05)和Vimentin的表达上调(P<0.05)之间都存在相关性。结论:Twist可能通过调控上皮间质转化从而在胃癌的侵袭转移过程中发挥作用。     

音猬因子、Ptch1基因在胃癌中的表达及临床意义

目的:研究胃癌组织中音猬因子（Shh）、Patched1(Ptch1)基因的表达及意义。方法:采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westem blot检测98例胃癌组织和配对的癌旁组织中Shh、Ptch1 mRNA和蛋白的表达情况。结果:RT-PCR检测结果显示,Shh、Ptch1 mRNA在胃癌中相对表达量分别为0.687±0.057、0.594±0.046,在胃癌旁组织中分别为0.314±0.025、0.293±0.074（P＜0.05）。Western blot检测结果显示,Shh、Ptch1蛋白在胃癌中的相对表达量分别为0.525±0.057、0.481±0.046,在胃癌旁组织中分别为0.236±0.025、0.215±0.074。胃癌组织Shh、Ptch1 mRNA和蛋白平均表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;Shh、Ptch1 mRNA和蛋白表达水平与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度和淋巴结转移明显相关（P＜0.05）,与患者年龄、性别和肿瘤直径无明显相关（P＞0.05）。结论:胃癌组织中Shh、Ptch1蛋白呈高表达,Shh、Ptch1蛋白的高表达可能与胃癌的发生及发展有关。     

Shh和Gli-1在人乳腺癌MCF-7耐药细胞株中的表达及意义

目的 研究Shh和Gli-1在人乳腺癌耐药株中的表达情况,探讨Hedgehog信号通路与乳腺癌耐药的关系。方法 高浓度间歇诱导法建立人乳腺癌耐药细胞株MCF-7／PTX,MTT法检测紫杉醇（PTX）对MCF-7与MCF-7／PTX细胞的半数抑制浓度（IC50）。实时定量PCR（QPCR）检测MCF-7、MCF-7／PTX细胞中Shh、Gli-1 mRNA的表达。Western blotting检测MCF-7、MCF-7／PTX细胞中Shh、Gli-1蛋白的表达。结果 PTX 对 MCF-7细胞的IC50为（0.10±0.02）mg／L,对 MCF-7／PTX细胞的 IC50为（5.30±0.01）mg／L;耐药指数为53.0。Shh mRNA在MCF-7、MCF-7／PTX细胞中的表达量分别为0.78±0.12和1.45±0.56（P＜0.01）;Gli-1 mRNA在MCF-7、MCF-7／PTX细胞中的表达量分别为1.86±0.02和3.56±0.26（P＜0.01）。Shh 蛋白在MCF-7、MCF-7／PTX细胞中的表达量分别为0.58±0.06和1.03±0.22（P＜0.01）;Gli-1 蛋白在MCF-7、MCF-7／PTX细胞中的表达量分别为1.17±0.12和2.78±0.09（P＜0.01）。结论 人乳腺癌耐药细胞株MCF-7／PTX高表达Shh、Gli-1,化疗药物可能通过上调Hedgehog信号通路相关蛋白及基因介导乳腺癌耐药,针对该信号通路的靶向治疗将是克服乳腺癌耐药的一个新的选择。     

喉鳞癌组织Snail mRNA与E-cadherin mRNA表达及其临床意义的探讨

目的:观察Snail mRNA与E-cad-herin mRNA在喉鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用原位分子杂交方法,分别检测Snail mRNA与E-cadherin mRNA在60例喉鳞癌、30例不典型增生和20例慢性炎症组织中的表达。结果:Snail mRNA在喉鳞癌中的表达高于不典型增生和慢性炎症组织中的表达,而E-cadherin mRNA在喉鳞癌中的表达低于不典型增生和慢性炎症组织中的表达,差异均有统计学意义,P值均<0.05;Snail mRNA、E-cadherin mRNA与喉鳞癌甲状软骨累及淋巴结转移、TNM分期、T分期、临床分型、病理分级有关(P值均<0.05),而两者均与性别、年龄、肿瘤大小无关,P值均>0.05;喉鳞癌Snail mRNA和E-cadherin mRNA的表达呈明显负相关,r=-0.504,P<0.05。结论:E-cadherin mRNA低表达与Snail mRNA高表达可能是喉黏膜恶性转变以及喉鳞癌发生浸润转移的重要生物学标志,联合检测E-cadherin mRNA和Snail mRNA对预测喉鳞癌浸润转移有重要意义。     

Snail、E-cadherin在膀胱尿路上皮癌中的表达及其与膀胱癌复发的关系

目的:研究膀胱尿路上皮癌中Snail与E-cadherin的表达,并探讨其与膀胱癌复发的关系.方法:应用免疫组化方法,检测40例膀胱尿路上皮癌组织和20例癌旁组织中Snail、E-cadherin的表达情况,并分析与临床病理资料的关系.结果:膀胱尿路上皮癌组织中Snail的阳性率(80%)显著高于癌旁组织(45%)(P＜0.05),Snail的表达与膀胱 尿路上皮癌不同临床分期、病理分级、肿瘤数量、远处转移及复 发有关(P＜0.05);膀胱尿路上皮癌组织中E-cadherin的阳性率(27.5%)显著低于癌旁组织(65%)(P＜0.05),E-cadherin的表达与膀胱尿路上皮癌不同临床分期、病理分级、肿瘤数量及远处转移有关(P＜0.05).膀胱尿路上皮癌组织中Snail与E-cadherin的表达呈负相关(P＜0.05).结论:Snail高表达及E-cadherin低表达与膀胱尿路上皮癌的浸润和转移密切相关,Snail有可能作为膀胱尿路上皮癌复发的重要生物学标志.     

锌指转录因子Snail及E-钙黏附素在食管鳞癌中的表达及意义

目的：检测锌指转录因子Snail及E-钙黏附素（E-cadherin）蛋白在食管鳞癌中的表达,分析其与食管鳞癌侵袭、转移的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测Snail及E-cadherin在62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果：食管鳞癌组织中Snail及E-cadherin蛋白表达均与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中Snail蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低,分别为79.0%（49/62）、48.4%（15/31）、17.7%（11/62）,组间比较差异有统计学意义（χ²=50.129,P<0.01）;而E-cadherin蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次升高,分别为40.3%（25/62）、71.0%（22/31）、95.2%（59/62）,组间比较差异有统计学意义（χ² =48.426,P<0.01）。进一步相关性分析表明：Snail和E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈负相关。结论：Snail及E-cadherin蛋白的异常表达可能与食管鳞癌的发生、发展密切相关,二者的联合检测有可能作为食管鳞癌侵袭、转移的重要生物学标志。     

Snail与E-cadherin在上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨Snail与E-cadherin蛋白表达在上皮性肿瘤中的临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法,研究150例人肝癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌临床标本及30例相应正常组织中Snail与E-cadherin蛋白的表达及定位。结果:在上述5种组织中,Snail主要表达于癌组织细胞核、细胞质,相应正常组织往往缺如,且在肝癌、乳腺癌中Snail表达与肿瘤转移有一定的相关性,并与E-cadherin表达呈负相关。E-cadherin定位于细胞膜,在肝、乳腺的正常组织中E-cadherin强表,相应癌组织中其表达往往下降或缺如;而在宫颈癌、内膜癌与卵巢癌中,E-cadherin表达与癌变无明显相关性。结论:Snail、E-cadherin的表达在肝癌、乳腺癌中具有重要意义,Snail有可能作为肝癌、乳腺癌肿瘤转移的生物学标志。     

COX-2、E-Cadherin、VEGF在大肠癌中的表达及意义

[目的]探讨COX-2、E-cadherin、VEGF在大肠癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学Envision法检测85例大肠癌和10例正常大肠黏膜组织中COX-2、E-cadherin、VEGF的表达。[结果]85例大肠癌中COX-2、E-cadherin、VEGF的阳性率分别为77.6%、34.1%和67.1%,和正常大肠黏膜相比有显著差异(P<0.01)。大肠癌中COX-2、VEGF、E-cadherin的表达在不同Dukes’分期、淋巴结转移状态均有显著差异(P<0.01)。E-cadherin和VEGF的表达在不同浸润深度下也均有差异(P<0.05)。E-cadherin与VEGF、COX-2的表达均呈负相关(r=0.28,r=0.41,P<0.01);COX-2与VEGF的表达正相关(r=0.51,P<0.01)。[结论]COX-2、E-cadherin、VEGF在大肠癌的发生、发展中起着重要作用,三者联合检测可为大肠癌恶性程度和预后的判断提供有效证据。     

Twist ARF和E-cadherin在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Twist、ARF、E-cadherin蛋白在大肠癌组织中的表达与临床病理参数的关系。同时分析Twist、ARF、 E-cad?herin与大肠癌生长,侵袭转移之间的关系。方法：采用免疫组织化学SP染色方法对60例大肠癌标本及60例正常大肠黏膜标本分别进行Twist、ARF、E-cadherin蛋白检测。结果：Twist在肿瘤组织中的阳性表达率明显高于正常大肠黏膜（P<0.05）;ARF及E-cadherin在肿瘤组织中的阳性表达率明显低于正常大肠黏膜 （P<0.05）,差异有统计学意义。Twist的表达与大肠癌的病理学分级、肠壁浸润深度、有无淋巴结转移、TNM分期相关 （P<0.05）。ARF、 E-cadherin的表达与大肠癌的病理学分级、肠壁浸润深度、有无淋巴结转移、 TNM分期、 有无远处转移相关 （P<0.05）。Twist与ARF共同阳性者10例,共同阴性者8例,两者呈显著性负相关 （r=0.806, P=0.004）。Twist与E-cadherin共同阳性者3例,共同阴性者7例,两者呈显著性负相关 （r=0.754, P=0.006）。结论：Twist的过度表达,ARF、E-cadherin蛋白的表达缺失在大肠癌的发生及侵袭转移中起重要的作用, Twist通过调节ARF/MDM2/p53途径抑制细胞凋亡促进肿瘤细胞形成, 同时影响E-cadherin的表达而促进上皮-间质转化现象,参与大肠癌的发生和转移。     

Expression of TGF-β1, Snail, E-cadherin and N-cadherin in Gastric Cancer and Its Significance

OBJECTIVE To investigate the expression of TGF-β1,Snail,E-cad-herin and N-cadherin in gastric cancer(GC),and to examine its relationship to malignant features of the tumors. METHODS The expression of TGF-β1,Snail,E-cadherin and N-cadherin proteins was detected in GC and adjacent tissues by immunohistochemical staining,and compared with the clinico-pathological data. RESULTS Positive rates of expression for TGF-β1,Snail,E-cadherin and N-cadherin were 63.5%,83.3%,37.5%and 44.8%in GC,and 28.8%, 41.3%,100%,11.3%in adjacent tissues,respectively.The expression of all four proteins showed a significant difference between the GCs and adjacent tissues(P<0.05).The positive rate of TGF-β1,Snail and N-cadherin,or the negative rate of E-cadherin expression was significantly related to the differentiated degree,histological type,invasion and metastasis of GC.In addition,the expression of N-cadherin was positively related to that of TGF-β1, but negatively related to that of E-cadherin.There was negative correlation between expression of E-cadherin and TGF-β1 and Snail in GC(P<0.05). CONCLUSION The over-expression of TGF-β1 and Snail and decreased expression of E-cadherin and the abnormal expression of N-cad-herin were involved in the process of invasion and metastasis of GC.The data showed that E-cadherin might switch to N-cadherin.TGF-β1 and Snail might play a fundamental role in the process.     

Gli1和Foxm1在胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Hedgehog信号通路分子Gli1与转录因子Foxm1在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:收集临床胃癌病理标本70例及其相应癌旁正常组织30例,采用免疫组化SP法检测Gli1与Foxm1蛋白在胃癌及正常组织中的表达,分析两者的相关性,RT-PCR检测两者mRNA在胃癌组织与正常组织的表达情况.结果:Gli1和Foxm1在正常胃粘膜组织中低表达或者不表达,Gli1和Foxm1在胃癌中的表达明显高于正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05).Glli1在胃癌中的表达与组织分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05),而Foxm1在胃癌中的表达仅与淋巴结转移相关(P<0.05),两者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、浸润程度无显著相关(P>0.05).且Gli1和Foxm1在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.897,P<0.05).结论:Gli1和Foxm1在胃癌中的高表达可能与胃癌的发生发展有关,两者的正相关说明在胃癌的发生中两者有协同及相互调节的作用.两者联合检测可以成为胃癌检测、判断预后的指标,对新药物的开发及对胃癌化疗有一定的指导作用.