胃癌转移淋巴结奥沙利铂体外化疗药敏性与多种耐药相关因子表达的关系

目的:探讨胃癌淋巴结转移灶肿瘤细胞对奥沙利铂的体外化疗药敏性与多种多药耐药相关因子表达的关系.方法:分离提取54例胃癌新鲜肿瘤组织及转移淋巴结中的肿瘤细胞,进行肿瘤细胞培养化疗药敏性实验,同时用免疫组织化学法检测原发灶、淋巴结转移灶多药耐药相关因子P-gp、GST-π、p53、Survivin和Bcl-2的表达.结果:奥沙利铂对胃癌淋巴结转移灶肿瘤细胞的抑制率低于原发灶(P<0.05).P-gp、GST-π和Bcl-2在淋巴结转移灶中表达程度均高于原发灶(P均<0.05),而p53和Survivin在肿瘤原发灶、转移灶中的表达强度无显著性差异(P均>0.05);P-gp、p53、Bcl-2表达在胃癌原发灶、淋巴结转移灶中均呈正相关(γ分别为0.3424、0.7123、0.4548,P均<0.05),而GST-π、Survivin在两种组织间表达强度无明显相关性(P均>0.05).胃癌原发灶奥沙利铂对肿瘤细胞的药物抑制率与P-gp、GST-π和Survivin表达强度呈负相关(P均<0.05),三者对药物抑制率影响作用依次为GST-π>P-gp>Survivin;转移淋巴结中仅发现Survivin表达强度对药物抑制率有影响,与药物抑制率呈负相关(P<0.05).结论:胃癌淋巴结转移灶中,奥沙利铂对肿瘤细胞抑制率和多药耐药相关因子的表达均显示出与原发灶不同的异质性变化,肿瘤原发灶与转移灶中影响奥沙利铂药敏性的主要因子也不相同,术后辅助化疗及实现多药耐药逆转应针对淋巴结转移灶进行.     

肝癌细胞γH2AX水平与电离辐射敏感性的研究

目的:探讨磷酸化组蛋白(γH2AX)的表达水平,预测肝癌细胞对于电离辐射的敏感性.方法:以不同剂量X射线照射肝癌细胞系HepG2.215,流式细胞术检测肝癌细胞中表达γH2AX的细胞分数;免疫细胞化学法检测肝癌细胞中γH2AX灶点数,MTT比色法检测放射线照射后的细胞活性.结果:肿瘤细胞经X射线照射后,γH2AX的表达呈剂量依赖性,随照射剂量的增高而增高;γH2AX的表达水平与细胞死亡率呈正相关(r2=0.984,P<0.05),即γH2AX的表达越高,细胞的死亡率越高.结论:γH2AX表达水平预测肝癌细胞对于放射线治疗的敏感性有较高的可行性和可靠性.     

老年胃癌原发灶与淋巴结转移灶体外化疗药敏性的差异及意义

目的比较老年胃癌原发灶与淋巴结转移灶体外化疗药敏性的差异并探讨其意义。方法对35例伴淋巴结转移的老年胃癌患者(≥60岁)和31例对照组胃癌患者(<60岁)的肿瘤原发灶、淋巴结转移灶进行MTT法原代细胞培养化疗药敏性实验,比较不同病灶肿瘤细胞对11种化疗药物敏感性的差异。结果老年组患者有6/11种化疗药物对原发灶、淋巴结转移灶的肿瘤细胞抑制率不同(均P<0.05),其中L-OHP、CDDP、MMC、THP对转移淋巴结肿瘤细胞抑制率明显低于原发灶(均P<0.05),PTX、EPI对原发灶肿瘤细胞抑制率明显低于淋巴结转移灶(均P<0.05)。与对照组比较,原发灶5-FU、PTX、EPI、MMC、MTX对老年患者肿瘤细胞抑制率低于对照组(均P<0.05);转移灶中5-FU、L-OHP、CDDP对老年患者肿瘤细胞抑制率较对照组降低(均P<0.05)。结论老年胃癌淋巴结转移灶对化疗药物敏感性与原发灶及对照组比较均存在异质性;老年肿瘤原发灶的化疗药敏性结果不能准确反映转移淋巴结的耐药性。     

磷酸化组蛋白预测肝癌细胞对某些化疗药物的敏感性

目的: 探讨以磷酸化组蛋白（phosphorylated H2AX,γH2AX）为检测指标预测肝癌细胞HepG2.215对依托泊苷、多柔比星、丝裂霉素和顺铂等化疗药物敏感性的可行性和可靠性。方法：分别以质量浓度指数梯度为1、2、4、20的依托泊苷、多柔比星、丝裂霉素和顺铂等4种化疗药物作用于肝癌     

374例恶性肿瘤患者化疗药物敏感性研究

摘 要：［目的］ 研究临床常用的抗肿瘤化疗药物对不同恶性肿瘤的抑制率,为临床个体化治疗提供参考。［方法］ 采用MTT法测定了化疗药物对374例恶性肿瘤患者原代肿瘤细胞的抑制率,比较不同药物在不同肿瘤中抑制率的差异,分析药物抑制率与年龄、性别的关系,观察药物对肿瘤细胞的抑制而产生的形态变化。［结果］ 不同药物对同一肿瘤的抑制率不同,差异有统计学意义（P＜0.05）。其中,肺癌对紫杉醇、洛铂、吉西他滨较敏感;乳腺癌对卡培他滨、顺铂、表阿霉素、奥沙利铂较敏感;头颈部癌对5氟尿嘧啶、博来霉素、异环磷酰胺较敏感;神经胶质瘤对卡莫司汀、顺铂、替尼泊苷较敏感;卵巢癌对奥沙利铂、阿霉素、表阿霉素较敏感。对男性肺癌的平均抑制率（30.71%）高于女性患者（29.38%）,差异有统计学意义（t＝2.188,P＝0.029）。在乳腺癌、卵巢癌患者中,年龄与抑制率呈负相关。同类或不同药物作用下,瘤细胞均发生形态学改变,对瘤细胞产生程度不同的抑制作用,表现为明显的个体差异性。［结论］ 不同个体对抗肿瘤药物的敏感性具有明显差异,药物敏感性试验对临床选择化疗药物具有参考价值。     

胃与大肠癌体外药物敏感性与临床病理特征关系的探讨

目的:研究消化道肿瘤体外化疗药敏性与其临床病理因素的关系.方法:时35例胃癌、37例大肠癌进行MTT法肿瘤细胞原代培养药物敏感性实验,同时检测了癌组织P-gp、GST-π和p53蛋白的表达.结果:9种化疗药物对肿瘤细胞抑制率在性别、肿瘤直径间差异变化均不明显,P均>0.05;5-氟尿嘧啶(5-FU)、奥沙利铂(L-OHP)、表柔比星(EADM)、吡柔比星(THP)和丝裂霉素(MMC)对<65岁者的肿瘤抑制率高于≥65岁者(P均<0.05)}5-FU、Vp-16、L-OHP、EADM和THP对胃癌的抑制率高于大肠癌,P<0.05;5-FU、Vp-16、PTX、L-OHP和DDP对低分化腺癌的抑制率高于高中分化癌(P<0.05);仅HCPT、L-OHP的抑制率在Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期,P值为0.047和0.007;高中分化腺癌组织中P-gP和GST-π表达明显高于低未分化癌(u=0.002 1、u=0.007 5,P<0.01).结论:胃肠道癌耐药性与患者的年龄、组织学分级有关,消化道肿瘤临床病理部分特征也具有一定预测肿瘤化疗敏感性的价值.     

还原型辅酶Ⅰ对抗肿瘤药物抑制人胃癌细胞的影响

[目的]研究还原型辅酶Ⅰ(NADH)对抗肿瘤药物抑制人胃癌SGC-7901细胞活性的影响.[方法]用MTT法观察NADH和抗肿瘤药物氟尿嘧啶、鬼臼乙叉甙、顺铂、表阿霉素、丝裂霉素对人胃癌SGC-7901细胞活性的抑制率.[结果]NADH可明显降低氟尿嘧啶、鬼臼乙叉甙、顺铂、表阿霉素的肿瘤细胞抑制率(P＜0.05).并且可显著提高人胃癌细胞对丝裂霉素的化疗敏感性(P＜0.01).[结论]NADH可能是肿瘤化疗过程中的重要调节剂.     

MTT法研究肿瘤细胞对化疗药物敏感性的临床意义

目的　研究肿瘤细胞对化疗药物敏感性的临床意义。方法　应用改良的 MTT法分析 2 7例恶性肿瘤患者新鲜肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。结果　 19例胃癌和 8例肺癌患者均以高敏感性药物联合化疗 3个疗程后 ,总有效率是 89.5 %和 87.5 % ,与对照组 ( 5 2 .9%和 5 6.8% )之间具有显著差别 ( P<0 .0 5 )。结论　改良的 MTT法能更准确、简便、快速地检测肿瘤细胞对化疗药物敏感性 ;能充分反映各种化疗药物对肿瘤细胞的杀伤或抑制肿瘤细胞增殖作用。可指导临床合理选择化疗方案 ,为个体化治疗提供重要理论依据     

凝血酶对A549细胞增殖和顺铂凋亡效应影响的实验研究

目的:研究凝血酶在体外对非小细胞肺癌细胞(A549)增殖、化疗药物顺铂疗效的影响及其机理.方法:非小细胞肺癌细胞株A549与不同浓度的凝血酶(0.05-3U/ml)共培养,按不同分组加入顺铂(30mg/ml)和水蛭素(0.05-10U/ml).在不同的时间,采用MTT比色法检测细胞生长活性,细胞增殖程度;采用流式细胞术检测凝血酶对顺铂杀伤肿瘤细胞作用的影响.结果:凝血酶在一定浓度范围内(0.05-1.5 U /ml)可促进A549增殖,72 h后增殖效应明显;在增殖浓度范围内可抑制顺铂对肿瘤细胞A549的凋亡作用.结论: 凝血酶在一定浓度范围内诱导A549细胞增殖,并减弱化疗药物顺铂对该细胞的杀伤作用.     

肿瘤药敏试验与临床病理及疗效的关系

目的 从不同肿瘤患者、组织学来源和病理类型等方面探讨肿瘤药敏试验与恶性肿瘤化疗药物敏感性的关系,以及药敏试验对肿瘤患者选择不同化疗药物治疗的意义.方法 回顾性分析本院1991～2006年用MTT法检测的468例恶性实体肿瘤细胞对不同化疗药物敏感性的阳性结果,研究其与临床治疗用药的关系,并观察远期生存率.结果 同一种肿瘤的不同个体、5种不同组织来源的肿瘤、3种消化系统肿瘤和相同病理类型低分化腺癌的不同实体瘤之间对化疗药物的敏感性均不同(P＜0.05).胃癌、肺癌的3年生存率和卵巢癌的5年生存率敏感组高于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);肝癌5年生存率敏感组低于对照组,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 恶性肿瘤对化疗药物的敏感性不同,化疗药敏实验与临床常用有效药物相关性较好,有助于临床筛选有效药物,排除不敏感药物,有利于选择有效的化疗方案.     

顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞化疗作用的对照研究

目的 比较化疗药物顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞增殖的抑制作用,探讨子宫颈癌细胞的体外敏感性差异.方法 选用人子宫颈癌SiHa、HeLa 细胞进行体外培养, 以0.01～20 mg/L浓度顺铂作用24、48小时,利用WST-8方法分别测定SiHa和HeLa细胞生长抑制率的变化.结果 顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞生长均有抑制作用,并在一定范围内呈浓度和时间依赖性.各浓度顺铂作用24小时,SiHa和HeLa细胞的抑制率无明显差异;而作用48小时,SiHa细胞的抑制率低于HeLa细胞(P<0.05或P<0.01).结论 SiHa细胞比HeLa细胞对化疗药物顺铂更容易耐药.     

恶性肿瘤患者化疗敏感性筛选的临床意义

目的 研究不同种类的恶性肿瘤患者对22种化疗药物的敏感性,筛选敏感性化疗药物,为临床化疗用药提供参考。方法 182例患者的恶性肿瘤细胞分别用22种化疗药物作用24～48h,药物依据临床血浆高峰浓度（PPC）配制;采用MTT法检测肿瘤细胞抑制率,评价药物敏感性。结果 在药物浓度1.0PPC和细胞浓度3～5×105／ml的测试条件下,7种不同化疗药物对40例恶性神经胶质瘤细胞的抑制率均不同,其中BCNU、TMZ、VM26的抑制率较高,7种药物的敏感率由高到低依次为BCNU＞TMZ＞DDP＞VM26＞VCR＞CBP＞VP16;13种化疗药物对59例卵巢癌细胞的抑制率不同,其敏感率由高到低依次为L OHP＞TPT＞TAX＞ADM＞TXT＞GEM＞CBP＞CTX＞IFO＞LBP＞DDP＞PYM＞EADM;6 种化疗药物对19例骨及软组织肿瘤细胞的抑制率相近,MTX和TAX的抑制率达到40％以上,药物敏感率由高到低依次为ADM＞MTX＞IFO＞DDP＞TAX＞DTIC;8种药物对64例头颈部肿瘤细胞的抑制率不同,药物敏感率由高到低依次为PYM＞CTX＞BLM＞DDP＞5 FU＞VP16＞VCR＞TAX。结论 肿瘤患者对化疗药物的敏感性存在明显的个体差异,同一种药物对不同恶性肿瘤细胞作用的抑制率均不同,不同药物的敏感率在不同肿瘤中的比例均不同。化疗前对不同恶性肿瘤患者进行个体化疗敏感性筛选是必要的,可以有效避免盲目用药,减少毒副作用,提高疗效和生存质量。     

细胞凋亡荧光染色法检测肿瘤化疗药物敏感性并与MTT法的比较

本文根据化疗药物诱导肿瘤细胞产生凋亡的机制,采用细胞凋亡荧光染色法(AFS)分别检测了卵巢癌细胞株(3AO)、部分肺癌患者分离的癌细胞药物敏感性,并和传统的ATT法进行比较.用不同浓度的顺铂诱导3AO凋亡、两种方法学之间没有显著性差别(P>0.05);但用于肺癌患者分离的肿瘤细胞进行药物的筛选时,有显著性差别(P相似文献   

MTT法在非小细胞肺癌优化治疗方案中的应用

目的:通过非小细胞肺癌体外原代细胞的培养,对其常用的化疗药物进行敏感性检测,探讨不同化疗药物之间的敏感性差异,筛选出最佳的化疗药物或联合化疗方案。方法:应用MTT显色分析法测定40例非小细胞肺癌实体瘤标本对9种化疗药物及其组成的联合化疗方案的敏感性或耐药性,并比较结果。结果:非小细胞肺癌化疗敏感性个体差异较大。联合化疗药物的敏感性明显优于单药,P=0.038。各药物平均抑制率由高到低的顺序依次为DDP HCPT>DDP VP16>HCPT>DDP NVB>DDP ADM IFO>ADM>CTX ADM VCR>DDP>NVB>VP16>CBP>IFO>VP16 CBP>VCR>CTX。无论是单药组间比较,还是联合药物组间比较,其敏感性的差异均有显著差异,均P<0.01。结论:体外肿瘤细胞药敏试验对临床肿瘤化疗用药有很强的指导性,并能发现耐药病例。对非小细胞肺癌患者进行化疗时,应尽量选择联合用药方案。     

转化生长因子诱导的基因蛋白与肿瘤耐药的相关性

目的：探讨转化生长因子诱导的基因蛋白与肿瘤耐药的相关性。方法：分别用载有 TGFBI 基因质粒以及空质粒转染人卵巢癌细胞株 SKOV3,采用 Western blot 技术检测转染后两组细胞 TGFBI 蛋白的表达情况,用 MTT 法检测不同浓度紫杉醇、顺铂对上述两组细胞的抑制率,采用流式细胞技术检测紫杉醇对上述两组细胞凋亡的影响。结果：用载有 TGFBI 基因质粒转染细胞后其 TGFBI 蛋白表达情况显著高于用空质粒转染细胞后 TGFBI 蛋白的表达。在紫杉醇、顺铂同种药物浓度下,TGFBI 转染后细胞抑制率显著高于空质粒转染细胞（P <0.05）。TGFBI 质粒转染细胞凋亡率为（67.35±12.36）%,而空质粒转染细胞凋亡率为（50.21±14.85）%,TGFBI 质粒转染细胞凋亡率显著高于空质粒转染细胞凋亡率（P <0.05）。结论：TGFBI 高表达能够降低人卵巢癌细胞 SKOV3的耐药性,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,有助于促进肿瘤细胞的凋亡。     

肿瘤患者外周血有核细胞对化疗药物的敏感性

目的 研究恶性肿瘤患者外周血细胞对化疗药物的敏感性,为临床筛选化疗方案、实行肿瘤个体化疗提供依据.方法 应用MTT法体外测定160例癌患者外周血(淋巴细胞及粒细胞)标本对临床常用化疗药物的敏感性.结果 ①5种癌患者外周血淋巴细胞和粒细胞对同一化疗药物敏感率呈正相关性,且均有统计学意义(P＜0.05).②胃癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌患者的外周血淋巴细胞及粒细胞对试验化疗药物敏感性差异有统计学意义(P＜0.05),而肝癌、淋巴瘤(NHL)检测结果差异未有统计学意义(P＞0.05).③HCPT在非小细胞肺癌和TAX、Vm-26在卵巢癌患者的外周血药敏试验中,粒细胞较淋巴细胞对化疗药物抑制率高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肿瘤患者外周血细胞体外药敏试验对临床肿瘤化疗用药有一定预见性,有助于临床医师筛选有效化疗药物,制定合理化疗方案,为个体化疗用药提供了重要的参考依据.     

miR-181d 对小细胞肺癌化疗药物敏感性的影响

目的:探讨miR-181d 在调节小细胞肺癌化疗敏感性中的作用。方法:通过QRT-PCR和Westernblot检测小细胞肺癌敏感细胞株H 69及耐药细胞株H 69AR中miR-181d 的差异表达。上调H 69AR细胞中的miR-181d 表达,检测miR-181d 和BCL 2表达;通过CCK 8 检测细胞对各种化疗药物（ADM、DDP 、VP- 16）的敏感性变化,QRT-PCR检测87例小细胞肺癌组织标本中miR-181d 表达,所有患者均接受EP方案（依托泊苷＋顺铂）化疗,分析其与患者预后及生存时间的关系。结果:miR-181d 在H 69AR及对化疗耐药患者中呈低表达,同时伴随着BCL 2 高表达（P < 0.001）。 上调miR-181d 能降低BCL 2 表达水平,增加H 69AR细胞对化疗药物（ADM、DDP 、VP- 16）的敏感性（P < 0.01）。 miR-181d 的表达与肿瘤的分期、对化疗药物的敏感性及生存时间相关（P <0.001）,高表达miR-181d 的患者总生存时间（OS）和无进展生存时间（DFS）较低表达者延长（P < 0.001）。 结论:miR-181d 可能在小细胞肺癌多药耐药中发挥着重要的作用,miR-181d 可望作为评价小细胞肺癌疗效的预测指标。      

肿瘤药敏试验与临床病理及疗效的关系

目的从不同肿瘤患者、组织学来源和病理类型等方面探讨肿瘤药敏试验与恶性肿瘤化疗药物敏感性的关系,以及药敏试验对肿瘤患者选择不同化疗药物治疗的意义。方法回顾性分析本院1991～2006年用MTT法检测的468例恶性实体肿瘤细胞对不同化疗药物敏感性的阳性结果,研究其与临床治疗用药的关系,并观察远期生存率。结果同一种肿瘤的不同个体、5种不同组织来源的肿瘤、3种消化系统肿瘤和相同病理类型低分化腺癌的不同实体瘤之间对化疗药物的敏感性均不同（P〈0.05）。胃癌、肺癌的3年生存率和卵巢癌的5年生存率敏感组高于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;肝癌5年生存率敏感组低于对照组,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论恶性肿瘤对化疗药物的敏感性不同,化疗药敏实验与临床常用有效药物相关性较好,有助于临床筛选有效药物,排除不敏感药物,有利于选择有效的化疗方案。     

N-乙酰半胱氨酸对支气管上皮细胞辐射致癌模型DNA氧化损伤和存活率的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)对人支气管上皮细胞辐射致癌模型BERP35T-1细胞DNA氧化损伤和存活率的影响。方法:运用Western blot法检测人支气管上皮细胞BEP2D,RH22和BERP35T-1,以及用不同浓度NAC(0～2mmol/L)作用BERP35T-1 48 h后,细胞内DNA双链断裂产物γH2AX的表达水平变化;免疫细胞化学法检测1 mmol/L NAC作用BERP35T-1不同时间(0～48 h)后细胞内DNA氧化损伤产物8-OH-dG的表达水平;DCFH-DA荧光探针标记结合流式细胞仪检测1mmol/L NAC作用BERP35T-1 48 h后细胞内活性氧(active oxygen radicals,ROS)水平变化;二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测空白对照组、药物组(1 mmol/L NAC作用48 h)、照射组(2 Gyγ射线照射)和联合作用组(1 mmol/L NAC预处理48 h后+2 Gyγ射线照射)BERP35T-1细胞的存活率差异。结果:与BEP2D细胞相比,RH22和BERP35T-1细胞中γH2AX表达增强(P0.01);BERP35T-1较RH22中γH2AX表达增强(P0.01);1～2 mmol/LNAC作用BERP35T-1细胞48 h后,细胞中γH2AX的表达受到显著抑制(P0.01);1 mmol/L NAC作用BERP35T-1细胞24～48 h可显著下调细胞内8-OH-dG的表达(P0.05或P0.01);1 mmo1/L NAC作用BERP35T-1细胞48 h后,细胞内ROS水平显著降低(P0.05);药物组与空白对照组相比,BERP35T-1细胞存活率降低(P0.01);联合作用组与单纯照射组相比,BERP35T-1细胞存活率增高(P0.05)。结论:抗氧化剂NAC可能通过提高恶性转化细胞BERP35T-1的抗氧化能力,降低细胞内ROS和DNA氧化损伤水平,促进基因组稳定性,部分逆转BERP35T-1细胞的恶性表型,并降低其辐射敏感性。     

MTT法在非小细胞肺癌优化治疗方案中的应用

目的:通过非小细胞肺癌体外原代细胞的培养,对其常用的化疗药物进行敏感性检测,探讨不同化疗药物之间的敏感性差异,筛选出最佳的化疗药物或联合化疗方案.方法:应用MTT显色分析法测定40例非小细胞肺癌实体瘤标本对9种化疗药物及其组成的联合化疗方案的敏感性或耐药性,并比较结果.结果:非小细胞肺癌化疗敏感性个体差异较大.联合化疗药物的敏感性明显优于单药,P=0.038.各药物平均抑制率由高到低的顺序依次为DDP+HCPT＞DDP+VP16＞HCPT＞DDP+NVB＞DDP+ADM+IFO＞ADM＞CTX+ADM+VCR＞DDP＞NVB＞VP16＞CBP＞IFO＞VP16+CBP＞VCR＞CTX.无论是单药组间比较,还是联合药物组间比较,其敏感性的差异均有显著差异,均P＜0.01.结论:体外肿瘤细胞药敏试验对临床肿瘤化疗用药有很强的指导性,并能发现耐药病例.对非小细胞肺癌患者进行化疗时,应尽量选择联合用药方案.