阿法替尼对人乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

  目的  探讨酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）阿法替尼（afatinib）对乳腺癌细胞增殖、周期及凋亡的影响,并就阿法替尼与吉非替尼（gefitinib）对乳腺癌细胞的作用进行比较。  方法  应用MTT法检测人乳腺癌细胞系MCF-7、T47D、MDAMB-231细胞活性,流式细胞术的PI染色法检测细胞周期变化以及Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,通过Western blot法检测蛋白表达情况。  结果  阿法替尼对MCF-7、T47D、MDA-MB-231细胞均有明显的抑制作用,IC₅₀分别为0.101、0.141、0.887 μmol/L。阿法替尼对T47D、MDA-MB-231细胞作用24 h后G₀/G₁期细胞比例明显升高,细胞凋亡率增加,晚期的凋亡率分别为88.9%、58.1%,并可促进细胞凋亡通路蛋白PARP、caspase-3发生剪切。阿法替尼、吉非替尼使MDA-MB-231细胞的EGFR磷酸化水平受到明显抑制,相同浓度下,阿法替尼作用较吉非替尼更强、持续时间更长。  结论  阿法替尼可显著抑制乳腺癌细胞增殖、促进其凋亡,且具有明显的量效关系,较吉非替尼具有更有效的作用。      

circCLK3/miR-216a-5p对乳腺癌MDA-MB-453细胞影响分析

目的 探讨circCLK3/miR-216a-5p分子轴对乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其可能作用机制。方法 收集2020-02-01-2022-05-31天津医科大学肿瘤医院63例经病理确诊为乳腺癌的患者癌及癌旁组织(距癌周≥5 cm)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测乳腺癌患者癌及癌旁组织标本与MDA-MB-453细胞中circCLK3和miR-216a-5p的表达量;体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-453,将si-NC、si-circCLK3、miR-NC和miR-216a-5p分别转染至MDA-MB-453细胞,将si-circCLK3+anti-miR-NC和si-circCLK3+anti-miR-216a-5p分别共转染至MDA-MB-453细胞;双荧光素酶报告实验检测circCLK3与miR-216a-5p的靶向关系;MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭能力;蛋白质印迹法检测MDA-MB-453细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达量。结果 与癌旁组织(0.96±...     

c-Met抑制剂SGX523诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞系的凋亡

目的:研究c-Met小分子抑制剂SGX523对人乳腺癌细胞株的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法:以不同浓度的SGX523作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase-3）、PARP的表达和c-Met及Akt磷酸化水平的变化。结果:SGX523能明显抑制乳腺癌细胞的增殖（P<0.05）,其对MDA-MB-231细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)值为（0.767±0.115）μmoL/L。SGX523处理MDA-MB-231细胞48 h后,可诱导乳腺癌细胞凋亡和细胞周期G₀/G₁期阻滞。同时,SGX523可促进凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP的剪切,并有效抑制c-Met及AKT的磷酸化水平,呈一定的剂量依赖关系。结论:c-Met抑制剂SGX523通过诱导凋亡和G₀/G₁期阻滞来抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长,其机制可能与c-Met/PI3K/AKT信号转导通路的磷酸化水平受抑制相关。     

PXD101对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡影响的机制探讨

  目的  探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂PXD101对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、细胞周期及凋亡的影响及分子机制研究。  方法  应用不同浓度PXD101处理培养的乳腺癌细胞株MCF-7, 通过赛唑蓝比色(MTT)法和平板克隆形成实验检测药物对细胞增殖的影响; HoechSt33342荧光染色法观察细胞形态变化; 流式细胞仪PI染色法检测细胞周期变化以及AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况; Westen blot检测p21、CyclinB1、PARP、Bcl-2以及Bax的蛋白表达。  结果  PXD101以剂量时间依赖性抑制MCF-7细胞的增殖; 荧光显微镜观察发现细胞核碎裂, 出现凋亡小体; 0、0.1、1、10μmol/L PXD101作用24 h后, G₂/M期细胞比例增加, 分别为(12.66±1.55)%、(20.63±1.32)%、(23.20±1.82)%、(32.19±2.37)%(P < 0.05), 凋亡细胞也增加(P < 0.05);p21表达增多, CyclinBl表达减少, PARP剪切明显增加, Bcl-2表达减少, Bax表达增加。  结论  PXD101在体外条件下能够明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖, 诱导细胞周期阻滞及凋亡, 并呈剂量依赖性。      

芹菜素诱导乳腺癌T47D细胞系p53依赖性凋亡及G2/M期阻滞

  目的  探讨芹菜素（apigenin）对乳腺癌T47D细胞系凋亡及细胞周期的影响。  方法  常规培养T47D细胞, 用四甲基偶氮唑盐法（MTT法）检测芹菜素对乳腺癌T47D细胞系细胞增殖的影响。荧光染色法观察凋亡细胞的形态变化。流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布。Western blot检测不同浓度（0、10、20、40、80 μM）芹菜素对凋亡及周期相关蛋白表达的影响。  结果  随着芹菜素浓度的增加, 芹菜素对T47D细胞的增殖抑制作用明显增强（P < 0.05）; 凋亡荧光染色及流式细胞仪显示, 芹菜素能够诱导乳腺癌T47D细胞凋亡, 随着其浓度的增高, 各组凋亡率分别为（2.41±0.072）%、（10.87±0.028）%、（18.02±0.056）%、（37.05± 0.092）%和（78.38±0.082）%, 与对照组相比, 差异有统计学意义（P < 0.05）; 流式周期分析显示, 芹菜素能够使T47D细胞系G₂/M期阻滞, 随着芹菜素浓度的增高, 不同浓度组细胞G₂/M期所占的比例逐渐增加, 差异有统计学意义（P < 0.05）; Western blot显示p53、p21、Bax和p-Cdc2的含量及Caspase-3, PARP剪切明显增加, 而Bcl-2、CyclinB1及Cdc2的含量却显著减少。  结论  芹菜素能够诱导乳腺癌T47D细胞系p53依赖性凋亡及G₂/M期阻滞, 从而明显抑制其增殖。      

长链非编码RNA FAM201A靶向miR-488-3p对胃癌细胞生物学行为及放射敏感性的影响

  目的  探讨长链非编码RNA（lncRNA）序列相似性家族201-成员A（family with sequence similarity 201-member A，FAM201A）靶向miR-488-3p对胃癌细胞生物学行为及放射敏感性的影响。  方法  选取2014年1月至2017年1月间于莱阳中心医院确诊并进行胃癌根治性切除手术（术前均未经过放疗和化疗治疗）的胃癌患者的肿瘤组织标本和配对的非癌性黏膜标本63例，采用qRT-PCR检测63例胃癌组织和与其对应的癌旁组织中FAM201A及miR-488-3p的表达水平。构建抑制FAM201A表达的MGC803胃癌细胞株。四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力。用不同辐射强度（0、2、4、6和8 Gy）射线照射抑制FAM201A表达的MGC803细胞，克隆形成实验检测细胞存活分数，绘制单击多靶模型拟合曲线。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证FAM201A和miR-488-3p的靶向关系。  结果  与癌旁组织相比，胃癌组织中FAM201A的表达水平显著升高，miR-488-3p的表达水平显著降低。抑制FAM201A可显著抑制MGC803细胞增殖、迁移和侵袭，促进其凋亡，增加MGC803细胞的放射敏感性。FAM201A可靶向负性调控miR-488-3p表达。抑制miR-488-3p能够逆转抑制FAM201A对细胞MGC803增殖、凋亡、迁移侵袭和放射敏感性的影响。  结论  抑制lncRNA FAM201A通过靶向miR-488-3p可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭，促进胃癌细胞凋亡，并增加其放射敏感性。FAM201A有望成为胃癌的新型分子靶点。      

miR-4728-3p通过PI3K/AKT信号通路调控DOT1L基因抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨miR-4728-3p通过调控类端粒沉默干扰体-1(disruptor of telomeric silencing 1-like,DOT1L)基因对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:使用乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231及人正常乳腺细胞MCF-10A。转染MCF-7和MDA-MB-231细胞随机分为NC组(转染miR-4728-3p-NC)和敲低组(转染miR-4728-3p-inhibitor)。利用RT-qPCR技术检测不同的细胞中miR-4728-3p和DOT1L的表达量改变情况。集落克隆形成实验和EDU实验可以同时检测体内各个细胞异常增殖的情况;TUNEL荧光标记检测法和流式细胞术实验可以同时检测不同组癌细胞的凋亡变化;划痕实验和Transwell实验可以同时检测到在各个细胞内因不同处理而可能产生的细胞迁移率和侵袭力的改变;Western blot检测与细胞凋亡状态相关细胞蛋白以及与细胞通路凋亡相关细胞蛋白p-AKT和p-PI3K相对表达的含量。结果:在乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231以及SKBR3中发现miR-4728-3p和DOT1L的表达高于人正常乳腺细胞MCF-10A(P＜0.05)。转染细胞miR-4728-3p后,与NC组细胞进行实验比较,发现敲低组细胞中miR-4728-3p和DOT1L的表达量明显降低,且敲低组细胞的增殖能力明显减弱,细胞凋亡率明显升高,细胞迁移能力大大降低。敲低组的细胞凋亡活性蛋白相对表达明显发生变化。其中p-AKT与p-PI3K蛋白均被抑制激活。RT-qPCR和Western blot实验验证DOT1L是miR-4728-3p的下游靶向基因。结论:敲低miR-4728-3p可以下调DOT1L的表达从而促进乳腺癌细胞凋亡,抑制乳腺癌细胞增殖,同时使乳腺癌细胞侵袭和迁移能力减弱。     

circ_0001361靶向miR-486-3p对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘 要：［目的］ 探讨circ_0001361靶向miR-486-3p对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。［方法］ 通过集落形成实验、流式细胞术、CCK-8法评估circ_0001361和miR-486-3p对乳腺癌MDA-MB-231细胞克隆、凋亡以及细胞活力的影响。双荧光素酶检测circ_0001361与miR-486-3p的相互作用。［结果］ 干扰circ_0001361表达显著性促进细胞凋亡（7.16%±0.65% vs 25.27%±2.32%,P<0.001）、上调miR-486-3p表达（0.96±0.06 vs 3.08±0.29,P<0.001）、降低细胞光密度值（0.82±0.07 vs 0.44±0.04,P<0.001）和克隆形成数（84.47±7.23 vs 39.69±3.76,P<0.001）。过表达circ_0001361显著性下调miR-486-3p表达（1.00±0.00 vs 0.45±0.05,P<0.001）、促进细胞凋亡（7.36%±0.66% vs 20.44%±2.17%,P<0.001）、降低细胞细胞光密度值（0.86±0.06 vs 0.51±0.05,P<0.001）和克隆形成数（89.62±7.35 vs 45.81±4.48,P<0.001）。circ_0001361与miR-486-3p直接结合。下调miR-486-3p表达显著性减弱干扰circ_0001361对MDA-MB-231细胞克隆形成数、凋亡率和细胞光密度值的影响（P<0.001）。［结论］ 干扰circ_0001361通过促进miR-486-3p表达来诱导乳腺癌细胞凋亡,并抑制其增殖。     

长链非编码RNA-MALAT1对前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响

 目的 探讨长链非编码RNA-MALAT1对激素依赖性前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 以激素依赖性前列腺癌细胞PC3和LNCaP为研究对象，对细胞进行MALAT1过表达及干扰处理，并通过MTT、流式细胞仪、基质胶和平板克隆等方法检测MALAT1过表达或干扰对细胞生物学行为的影响。Western blot检测MALAT1对与细胞周期及凋亡相关蛋白Cyclin D1、Bcl-2、Bax及p-ERK1/2表达的影响。结果 与对照组比较，MALAT1组细胞的增殖能力明显增强（P<0.01），克隆形成能力、血管生成能力增强，G₀/G₁期细胞数量增多，凋亡率降低；si-MALAT1组细胞增殖能力明显低于对照组（P<0.01），克隆形成能力、血管生成能力减弱，G₀/G₁期细胞数量减少，凋亡率升高。结论 MALAT1对前列腺癌的发生发展有促进作用，抑制MALAT1表达可能对前列腺癌的治疗具有重要意义。     

miR-370-3p靶向HDAC4调节卵巢癌SKOV3细胞的生长和代谢研究

  目的  研究miR-370-3p对卵巢癌（ovarian cancer,OC）细胞的生长和代谢的作用及机制。  方法  选取2017年2月至2019年2月23例于郑州人民医院行OC切除术患者的组织标本,RT-qPCR检测OC组织和细胞中miR-370-3p和组蛋白脱乙酰酶4（histone deacetylase 4,HDAC4）mRNA的相对表达量,双荧光素酶试验检测miR-370-3p与HDAC4的靶向关系,蛋白印迹法检测Ki- 67、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、裂解caspase-3、Bax、HDAC4蛋白表达水平,CCK-8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡率,Seahorse XF24分析仪分析细胞糖酵解能力和线粒体功能,建立移植瘤动物模型,测定移植瘤体积和重量,免疫组织化学法检测Ki-67和caspase-3表达水平。  结果  在OC组织和细胞中miR-370-3p低表达,HDAC4高表达。miR-370-3p靶向下调HDAC4表达。miR-370-3p过表达显著减少SKOV3细胞增殖,增加细胞凋亡,下调PCNA和Ki-67蛋白表达,上调裂解caspase-3和Bax蛋白表达,降低糖酵解速率和糖酵解能力,升高基础呼吸速率和最大呼吸速率。在小鼠体内,miR-370-3p过表达减小移植瘤体积和重量,增加Ki-67阳性细胞比率,减少caspase-3阳性细胞比率,降低糖酵解速率和糖酵解能力,升高基础呼吸速率和最大呼吸速率。  结论  miR-370-3p通过靶向下调HDAC4来抑制OC细胞的生长和代谢。      

血清miR-6861-5p检测在乳腺癌临床诊治中的价值探讨

  目的  研究miR-6861-5p在乳腺癌患者血清中的表达,并探讨miR-6861-5p表达在乳腺癌患者临床诊治中的价值。  方法  通过实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）检测2012年1月至2015年6月山东省德州市第二人民医院112例乳腺癌患者、37例乳腺良性病变和53例健康女性血清miR-6861-5p相对表达量,分析血清miR-6861-5p表达与乳腺癌患者临床病理和术后复发之间的关系,并探讨其表达对乳腺癌的临床诊断价值。  结果  乳腺癌患者血清miR-6861-5p相对表达量为（7.99±1.63）,显著高于良性病变患者（6.45±1.06）（P＜0.05）和健康研究对象（6.43±1.28）（P＜0.05）;血清miR-6861-5p表达与乳腺癌患者淋巴结转移、肿瘤组织ER、PR和HER-2表达、TNM分期、分子分型以及组织学分期显著相关（均P＜0.05）;肿瘤切除后乳腺癌患者血清miR-6861-5p表达量显著降低;治疗前血清miR-6861-5p诊断乳腺癌的敏感度和特异度分别为69.6%和77.8%,且与乳腺癌患者术后复发率有关。  结论  miR-6861-5p在乳腺癌患者血清中表达上调,是术前乳腺癌诊断、肿瘤分期、癌细胞转移和术后监测乳腺癌复发的潜在生物标志物。      

miRNA-31-5p和SATB2的表达对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响机制

  目的  探讨微小RNA-31-5p（microRNA-31-5p,miRNA-31-5p）和核基质结合蛋白质2（special AT-rich sequence-binding protein 2,SATB2）在乳腺癌中的表达,以及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。  方法  选取2017年3月至2020年12月于天津医科大学总医院收治行外科切除的80例乳腺癌患者的临床病理资料,定量反转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测乳腺癌组织标本和各细胞系中miRNA-31-5p和SATB2 mRNA表达。双荧光素酶实验证明miRNA-31-5p和SATB2的关系。细胞实验分为正常组（未行任何干预）,miRNA-31-5p-agomir-对照组（细胞转染miRNA-31-5p-agomir-NC）,miRNA-31-5p激动剂组（细胞转染miRNA-31-5p-agomir）,pcDNA3.1组（细胞转染miRNA-31-5p-agomir+pcDNA3.1-SATB2）。EDU染色、Transwell小室实验检测各组细胞的体外增殖与转移活性;裸鼠皮下种植乳腺癌模型检测细胞的体内生长、转移能力;Western blot检测SATB2、E-钙黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的表达。  结果  与癌旁组织和乳腺正常细胞相比,miRNA-31-5p在乳腺癌组织和乳腺癌细胞中的表达下降,SATB2 mRNA表达升高;miRNA-31-5p能靶向调控SATB2表达;与正常组相比,miRNA-31-5p激动剂组细胞的体外增殖与转移以及体内生长与转移能力均明显下降,SATB2和Vimentin的表达降低,E-cadherin的表达升高,而转染pcDNA3.1-SATB2后可部分逆转这一抑制作用,差异均具有统计学意义（均P<0.05）。  结论  miRNA-31-5p在乳腺癌中的表达降低,SATB2的表达升高,过表达miRNA-31-5p后能明显抑制MDA-MB-231细胞的体外增殖与转移、体内生长与转移能力,但转染pcDNA3.1-SATB2可部分逆转这一抑制作用。      

miR-182-5p在膀胱癌中的表达及其机制

目的:探究miR-182-5p及FOXO3在膀胱癌中的表达意义及其参与膀胱癌可能的机制.方法:收集2017年6月至2019年6月64例于郑州人民医院行手术切除膀胱癌患者的组织标本和临床资料,采用RT-qPCR检测膀胱癌组织及膀胱癌细胞中的miR-182-5p和FOXO3表达,按照其表达水平分为miR-182-5p高表达...     

miR-520c-3p靶向Rab22a抑制肺腺癌细胞迁移和侵袭的研究

目的:探讨miR-520c-3p对肺腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响.方法:选取2010年2月至2015年1月天津医科大学肿瘤医院肿瘤生物样本库118例肺腺癌患者标本.RT-qPCR检测miR-520c-3p及靶基因Rab22a mRNA的表达.Transwell检测肺腺癌细胞侵袭能力的变化.通过生物信息预测miR-520...     

膀胱癌组织中miR-512-3p、Livin的表达及其与含蒽环类药物新辅助化疗疗效的关系

目的:检测膀胱癌患者癌组织中微小RNA-512-3p(miR-512-3p)、Livin表达水平,探讨miR-512-3p、Livin表达水平与含蒽环类药物新辅助化疗效果的关系.方法:选取2011年06月至2015年01月在本院泌尿科经病理检查确诊为膀胱癌患者52例作为研究对象.所有患者术前均使用含蒽环类药物新辅助化疗...     

乳腺癌患者血浆中三种microRNA的表达水平分析

  目的  分析乳腺癌患者血浆、血清中三种microRNA（miRNA）的表达水平,探讨血浆、血清中miRNA表达水平之间关系以及血浆中miRNA作为乳腺癌肿瘤标志物的可行性。  方法  于2010年12月至2011年3月间收集符合入选条件的31例患者的血液标本,分离血浆、血清,提取其中miRNA,通过定量PCR,检测其中miR-31、miR-155及miR-200c表达水平。  结果  三种miRNA在血清、血浆中表达水平基本相同;乳腺癌患者血浆中的miR-155较非乳腺癌表达上调,miR-200c表达下调;两组间miR-31表达差异无统计学意义;miR-155的表达与肿瘤的大小、淋巴结转移、临床病理分期、ER、PR表达状态有关;miR-200c的表达与肿瘤的大小、淋巴结转移、临床病理分期、ER表达状态有关,与PR的表达状态无关;miR-31的表达与肿瘤的大小有关,与淋巴结转移、临床病理分期、ER、PR表达状态无关。  结论  乳腺癌患者血清、血浆中三种miRNA的表达水平相同;血浆中三种miRNA的表达与乳腺癌的临床病理特征密切相关,因此血浆中miRNA有望成为乳腺癌新一代的肿瘤标志物。      

血清外泌体miR-148a联合miR-106a检测用于胃癌筛查的研究探讨

  目的  寻找合适的外泌体miRNA作为肿瘤生物标志物，辅助临床进行胃癌筛查。  方法  将miR-148a及miR-106a作为潜在标志物，研究两种miRNA在癌组织及癌旁组织表达的差异性。选取2017年9月至2018年9月在福建省立医院诊治的初诊胃癌术后标本共37对（胃癌组织及癌旁组织）进行组织学miRNA检测。选取初诊胃癌患者83例为胃癌组，良性病变的患者78例为对照组，全部进行血清外泌体miRNA检测。  结果  与癌旁组织相比，癌组织中miR-148a表达水平降低，miR-106a表达水平升高，联合检测2-△△CP[△CP=CP_{（miR-148a）}-CP_{（miR-106a）}]值降低。与对照组相比，胃癌患者中血清外泌体miR-106a表达水平降低，联合检测2-△△CP值升高。血清外泌体联合检测2-△△CP值对胃癌组和对照组鉴别的曲线下面积[AUC为0.844（95%CI:0.782~0.905，P < 0.001）]，大于miR-148a及miR-106a单独检测，其cut-off值为0.315 3，敏感度为91，6%，特异度为64.1%。  结论  血清外泌体miR-148a联合miR-106a检测的2-△△CP值可以作为胃癌筛查的手段。      

HOXD3在乳腺癌细胞干性和化疗耐药性中的作用及机制研究

  目的  探讨HOXD3表达对乳腺癌细胞干性的影响,并研究HOXD3表达与乳腺癌细胞化疗耐药的关系。  方法  收集2006年1月至2008年12月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院87例乳腺癌患者组织标本。采用免疫组织化学染色法检测乳腺癌细胞和组织中HOXD3表达;采用RT-PCR、Western blot和免疫荧光染色法检测HOXD3在顺铂或阿霉素耐药细胞系MDA-MB-231和MDAMB-435中的表达水平,分析HOXD3过表达对乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-435的干细胞生物标志物表达水平的影响;采用MTT法和集落形成实验分析HOXD3在乳腺癌细胞化疗耐药中的作用。  结果  乳腺癌组织中HOXD3 mRNA相对表达量显著高于癌旁正常组织,乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-435和MCF-7的HOXD3 mRNA相对表达量均高于正常乳腺上皮细胞系MCF-10A（均P < 0.05）。顺铂或阿霉素耐药的细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-435的半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC₅₀）分别为（20.82±0.05）μmol/L和（19.69±0.47）μmol/L,或（32.26±0.23）mmol/L和（26.08±0.55）mmol/L,均高于对应原始细胞系（均P < 0.05）;耐药倍数分别为2.47和3.10倍,或1.86和2.08倍。HOXD3过表达MDA-MB-231、MDA-MB-435的肿瘤球体数目、干细胞生物标志物的表达水平均明显增加（均P < 0.05）。  结论  HOXD3过表达对乳腺癌细胞干性的维持及化疗耐药性的发生发挥重要的作用,为制定针对肿瘤干细胞的分子靶向治疗提供理论参考。