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目的 初步研究建立磁捕法对传染性非典型肺炎又称严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒RNA的富集、纯化体系,以提高逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SARS冠状病毒RNA的敏感性。方法 根据国际基因库公布的SARS冠状病毒基因序列,自行设计引物、探针,体外克隆目的RNA片段作为标准物质;利用标准RNA以及模拟SARS血清标本的RNA,评价自行设计的SARS冠状病毒巢式RT-PCR检测体系和磁捕法SARS冠状病毒RNA富集检测体系的检测效果。结果SARS冠状病毒巢式RT-PCR检测体系,对于模拟血清SARS标本RNA的最低检测样本浓度为20拷贝/μl,而磁捕法SARS冠状病毒RNA富集检测体系的最低检测样本浓度为1拷贝/μl。结论 初步建立的磁捕法SARS冠状病毒RNA富集检测体系,可有效地对低浓度的RNA样本进行浓缩、纯化,有效提高SARS RT-PCR检测方法的敏感性。 相似文献
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朱庆义 《中国医学检验杂志》2005,6(4):342-344
严重急性呼吸综合症(severe acute respiratory svndrome,SARS)是由一种新发现的感染因子—冠状病毒(Coronavirus.CoV)所引起的,简称SARS冠状病毒(SARS-CoV)。自2002年11月在我国广东佛山地区发现首例SARS患者,随后在我国广州、山西、北京、内蒙等20多个省市传播蔓延,同时亦在亚洲、欧洲、美洲等世界范围内30多个国家和地区传播和蔓延。 相似文献
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荧光聚合酶链反应检测严重急性呼吸综合征冠状病毒的方法建立及临床初步应用 总被引:27,自引:5,他引:27
目的 建立荧光聚合酶链反应(F—PCR)检测严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒的方法,并探讨其临床应用价值。方法 根据公布的SARS冠状病毒基因序列,自行设计合成引物、探针,应用研制的SARS F—PCR诊断试剂盒,检测115份临床漱口液样本。结果 PCR扩增产物经测序证明与SARS冠状病毒基因序列完全一致。67例确诊SARS患者漱口液中49份为阳性118例密切接触者漱口液中8份为阳性;30名健康者漱口液均阴性。结论 建立的F—PCR检测SARS冠状病毒方法可成为SARS筛查和早期诊断的一种快速、准确、有效的检测方法。 相似文献
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)是一种可导致烈性传染病——新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的RNA病毒,该病毒感染早期隐匿、无症状,且潜伏期较长,影像显示肺部无典型改变甚至无改变。这给COVID-19的诊断和鉴别诊断带来了极大的困难。核酸检测作为临床唯一可用的“确诊标准”,因受到标本选择和方法学灵敏度等因素影响,导致假阴性率较高,结果引起众多质疑。如何理性看待核酸检测,甚至如何正确分析并接受实验室检测结果?在此战“疫”之前,医学检验在医疗中的作用,较少被外界关注。为此,该文就医学检验技术在SARS-CoV-2感染所致疾病诊疗中所起的作用进行述评。 相似文献
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广州不同人群血清SARS冠状病毒抗体研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 了解广州不同人群血清SARS冠状病毒 (SARS CoV)抗体水平。方法 用酶联免疫分析 (ELISA)和免疫荧光分析(IFA)对SARS临床确诊病人、病人接触者、野生动物销售人员及正常人群的血清SARS冠状病毒IgG抗体进行检测和分析。结果 SARS确诊病人、病人接触者、野生动物销售人员及正常人群的血清抗体阳性率分别为 6 8.7% (36 6 / 5 33)、4 .9% (13/ 2 6 7)、13.2 % (4 8/ 36 3)、2 .3% (7/ 310 ) ;抗体几何平均滴度 (GMT)分别为 15 6 .97、18.90、2 8.73、11.0 4 ;SARS病人、野生动物销售人员的抗体水平明显高于正常人群 (P <0 .0 1)。SARS病人的血清IgG抗体阳性率及抗体滴度随发病天数逐渐上升 ,15d后阳性率达6 5 .0 %以上 ,GMT超过 93.3,30~ 4 0d达峰值 (阳性率和GMT分别为 77.8%、189.3) ,15 0d左右仍维持较高水平。各年龄组和性别组的抗体水平无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 广州不同人群血清中都有不同程度的SARS冠状病毒IgG抗体 ,经过本次SARS流行 ,人群的免疫性有所提高。 相似文献
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目的 建立快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法。方法 采用异硫氰酸胍 玻璃粉法提取病毒RNA ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测SARS冠状病毒RNA。结果 2 4例SARS患者的粪便和痰液标本同时采用异硫氰酸胍 玻璃粉法和QIAGEN公司的试剂盒提取SARS冠状病毒RNA ,其粪便标本RT PCR的阳性率分别为 83.3% (2 0 / 2 4 )和 10 0 .0 % (2 4 / 2 4 ) ;痰液标本RT PCR的阳性率分别为 16 .7% (4 / 2 4 )和 2 0 .8% (5 / 2 4 )。异硫氰酸胍 玻璃粉法RT PCR的阳性率与洗脱温度有关。结论 异硫氰酸胍 玻璃粉法提取SARS冠状病毒RNA简便、快速、经济 ,可用于临床。 相似文献
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目的通过验证PCR抑制物对尿液中SARS病毒检出率有无影响,以探寻SARS病毒检出率低的原因,进而为完善实验室诊断方法和分析SARS排毒规律提供理论依据。方法将SARS病毒掺入到不同稀释度的病毒阴性尿标本中,再行荧光聚合酶链反应(荧光PCR)检测。结果4个不同稀释度SARS病毒阴性尿标本组及生理盐水组掺入SARS病毒使成临界值含量后,各组病毒检出率相等,检出的病毒核酸量无显著性差异(P〉0.05)。结论尿中不存在影响SARS病毒检测的PCR抑制物。 相似文献
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156例SARS患者血清抗SARS冠状病毒抗体的观测 总被引:2,自引:1,他引:2
本研究的目的是观察严重急性呼吸综合征 (severeacuterespiratorysyndrome ,SARS)患者抗SARS 冠状病毒 (SARS CoV)抗体IgG和IgM的产生及抗体效价变化特征 ,探索采集SARS痊愈患者抗血清的时机。应用ELISA方法对随机抽取的 156名SARS患者血清标本进行抗SARS CoV抗体IgG和IgM抗体效价测定。结果表明 ,156名SARS患者于病后 3至 9周期间 ,IgG抗体阳性率为 75.6% ,IgM抗体阳性率为 41.7% ,IgG和IgM抗体均阳性为 41% ,IgG和IgM抗体均阴性为 2 3 .7% ;IgG抗体阳性患者中抗体效价为 18.2 3± 2 4.72 ,IgM抗体阴性患者抗体效价为 2 .18± 1.13 ;IgG和IgM抗体效价与SARS患者的性别、年龄、病程、体温正常天数无显著相关性。结论 :并非所有SARS患者都能产生抗SARS CoV抗体 ,即使产生抗体 ,其效价的个体差异也较大 ,并不能通过性别、年龄、病程及体温正常天数等因素较准确地评估抗体的效价。因此 ,在SARS抗血清采集前 ,应重新进行抗体效价测定 ,遴选具有高效价抗SARS CoV抗体的SARS痊愈患者进行抗血清的采集 ,才能提高所采集的抗血清在临床的治疗效果 ,同时又可为患者抗体输注提供量化指标 相似文献
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目的 探讨严重急性呼吸综合征患者血清SARS冠状病毒抗体IgM、IgG检测意义。方法 应用ELISA法对16例SARS患者、147例发热隔离患者、23例体格检查健康者进行血清SARS抗体:lgM、IgG检测。结果 12例SARS患者单份标本中入院标本7例有4例检出SARS抗体IgM阳性,出院5例有3例检出SARS抗体IgG阳性,2例重症患者血清动态结果观察到,从入院到出院的标本均同时检测到高滴度的SARSIgM、IgG;2例轻症SARS患者各只检测到一次SARS抗体IgM弱阳性;发热隔离区患者有6例从入院至出院均检测到SARS抗体IgG,其中两例滴度较高。健康体检者无一例SARS抗体阳性。结论 ELISA检测SARS冠状病毒抗体IgM、IgG可作为一种辅助鉴定严重急性呼吸综合征患者的临床检测和确诊手段。 相似文献
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Chang SM Liu CL Kuo HT Chen PJ Lee CM Lin FJ Lin CC Lee CH Lu YT 《The Journal of emergency medicine》2005,28(4):395-402
To differentiate severe acute respiratory syndrome (SARS) from non-SARS illness, we retrospectively compared 53 patients with probable SARS and 31 patients with non-SARS who were admitted to Mackay Memorial Hospital from April 27 to June 16, 2003. Fever (> 38°C) was the earliest symptom (50/53 SARS vs. 5/31 non-SARS, p < 0.0001), preceding cough by a mean of 4.5 days. The initial chest X-ray study was normal in 22/53 SARS cases versus 5/31 non-SARS cases. SARS patients with an initially normal chest X-ray study developed infiltrates at a mean of 5 ± 3.44 days after onset of fever (21/22 SARS vs. 0/5 non-SARS). Rapid radiographic progression of unifocal involvement to multifocal infiltrates was seen in 22 of 24 SARS vs. 0 of 26 non-SARS patients (p < 0.0001). Pleural effusion was not present in any SARS patients but was seen in 6 of 26 non-SARS cases (p < 0.0001). Initial lymphopenia, thrombocytopenia, and elevated lactate dehydrogenase were all more common in SARS than non-SARS (p < 0.0001). They may help differentiate SARS from non-SARS if a reliable and rapid diagnostic test is not available. 相似文献
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目的分析江门市各类人群SARS冠状病毒血清IgG抗体水平。方法采集不同人群血标本,检测血清SARS冠状病毒IgG抗体。结果检测各类人群血清标本208份,SARS冠状病毒血清IgG抗体阳性53份,阳性率为25.48%;其中临床确诊SARS病人和高暴露人群阳性率分别为100.00%(47/47)和11.54%(6/52);临床发热的疑似病人及健康人群血标本,检测血清SARS冠状病毒IgG抗体,结果均为阴性。结论SARS冠状病毒是江门市本次SARS流行的主要病原体,在这次疫情暴发之前,人群对SARS冠状病毒普遍易感,江门市SARS监测和防控工作任务相当艰巨,面临极大的挑战。 相似文献
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目的:研究SARS患者康复期间心理症状影响因素的路径关系。方法:应用路径分析方法.采用艾森克人格问卷、社会支持评定量表、简易应对方式问卷、症状自评量表、生活事件量表等评定患者的心理症状及相关情况。结果:生活事件对心理症状总作用为0.405,心理干预、后遗症、职业、应对等因素直接或间接对心理症状产生较大作用,总作用分别为-0.412,0、536,0.312,-0.298。结论:生活事件对心理症状起到“扳机”作用,“后遗症”是导致康复期患者产生心理症状直接主要原因,心理干预对患者的心理症状起到一定的保护作用.应对方式、职业在一定程度上也影响心理症状的严重程度,多种相关因素整合在一起对患者的心理症状起作用。 相似文献
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目的 建立一种新的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)反应模式,以提高传染性非典型肺炎(SARS)冠状病毒检测的阳性率和研究病毒在机体的定位状态和致病机理。方法 采用两种RT-PCR反应模式检测SARS患者血浆、淋巴细胞、粪便以及肺组织中病毒核酸。结果 和常规PCR方法相比,新的PCR反应模式能显著提高标本中病毒的检出率,差别有统计学意义;急性期SARS患者淋巴细胞中病毒阳性率较高(84.6%);血浆中病毒阳性率较低(11.5%)。结论 新RT-PCR反应模式可能有利于早期诊断、筛检SARS病原体;淋巴细胞中病毒的检出率较高,提示此类标本可用于SARS实验室诊断,对分析和阐明SARS的发病机制亦可能有一定的指导作用。 相似文献