超声结合原卟啉IX对腹水型S180肿瘤细胞的损伤作用

目的:根据原卟啉IX(PpIX)在S180肿瘤细胞内的含量变化及亚细胞定位分析,研究聚焦超声结合PpIX对S180肿瘤细胞的损伤作用.方法:应用荧光分光光度法测定PpIX在S180肿瘤细胞内的富集;激光共聚焦扫描显微镜观察PpIX的亚细胞定位;台盼蓝拒染法检测超声结合不同浓度的PpIX作用后细胞的存活率;环境扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化.结果:PpIX在S180肿瘤细胞内的富集是一个动态变化过程,45 min达到最高点,此时为最佳声照处理时间点,且此时PpIX主要定位于细胞膜;超声激活PpIX对S180肿瘤细胞的杀伤作用明显大于单纯超声组,其膜损伤程度也更为严重.结论:细胞膜可能是超声激活PpIX作用的一个主要靶点.     

聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞杀伤作用的研究

采用频率为2.2 MHz及不同强度的聚焦超声激活原卟啉Ⅸ对小鼠腹水型S180肿瘤细胞的杀伤作用进行研究.台盼蓝拒染法检测了不同处理后细胞的相对存活率,通过扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构的变化.实验结果表明:单纯原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞几乎没有影响,单纯超声和超声结合原卟啉Ⅸ对细胞均有一定的损伤,肿瘤细胞受损程度随着声照强度的增加而加剧,并且在一定范围内随着原卟啉剂量浓度的加大,细胞受损也逐渐增强.当原卟啉Ⅸ浓度为120 μM时,超声激活原卟啉Ⅸ对腹水型S180肿瘤细胞的协同杀伤效应表现最为明显.     

聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞杀伤作用的研究

采用频率为2.2MHz及不同强度的聚焦超声激活原卟啉对小鼠腹水型S180肿瘤细胞的杀伤作用进行研究。台盼蓝拒染法检测了不同处理后细胞的相对存活率,通过扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构的变化。实验结果表明:单纯原卟啉对S180肿瘤细胞几乎没有影响,单纯超声和超声结合原卟啉对细胞均有一定的损伤,肿瘤细胞受损程度随着声照强度的增加而加剧,并且在一定范围内随着原卟啉剂量浓度的加大,细胞受损也逐渐增强。当原卟啉浓度为120μM时,超声激活原卟啉对腹水型S180肿瘤细胞的协同杀伤效应表现最为明显。     

聚焦超声激活原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞的杀伤作用

目的初步研究超声激活原卟啉IX(PPIX)对S180肿瘤细胞的杀伤作用,并探讨其作用的生物学机制。方法采用频率为2·2MHz,强度为3W/cm2的聚焦超声,结合120μmol/L的PPIX作用于S180肿瘤细胞,通过台盼蓝拒染法检测细胞的存活率;扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化;活性氧试剂盒检测细胞悬液中活性氧的生成量;酶化学方法检测细胞内几种抗氧化物酶活性的变化。结果同等条件下,超声结合PPⅨ对细胞的损伤显著高于单纯超声组,而单纯PPⅨ表现出无明显的细胞毒作用;酶化学方法显示,超声激活PPⅨ后细胞内的丙二醛(MDA)含量显著增加,而细胞内的抗氧化物酶类均有不同水平的下降,并且与处理后细胞悬液中活性氧的生成量相关。结论超声激活原卟啉Ⅸ产生的活性氧自由基作用于细胞膜,增加膜脂质过氧化水平,降低细胞内的抗氧化物酶的含量,可能是其损伤S180肿瘤细胞的主要因素之一。     

原卟啉Ⅸ介导的声动力疗法对S180 肿瘤细胞膜损伤研究

探讨频率为1.1 MHz、强度为3 W/cm2的聚焦超声,结合1 μg/mL的原卟啉Ⅸ（PpⅨ）对S180肿瘤细胞膜结构和功能的损伤作用。超声联合PpⅨ作用于S180肿瘤细胞后,通过酸性磷酸酶活力检测细胞生长活力;扫描电子显微镜观测细胞膜表面超微结构;生化分析方法检测Na⁺-K⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase活性,细胞膜唾液酸 (SA)及细胞内谷胱甘肽（GSH）含量;通过荧光酶标仪检测细胞线粒体膜电位及细胞色素C氧化酶含量。实验结果显示：与对照组（Control）、原卟啉Ⅸ组（PpⅨ）、超声组相比,超声联合PpⅨ处理组的细胞生长明显受到抑制,其酸性磷酸酶活力（OD值）由对照组063±003下降至0.34±0.01;细胞膜结构严重破坏,表现为微绒毛消失和胞质部分成分流失;膜表面重要成分如Na⁺-K⁺-ATPase和Ca²⁺-ATPase活性明显下降（P<0.05）,细胞膜唾液酸含量及胞内GSH水平急剧降低（P<0.01）。研究表明：超声联合PpⅨ作用于S180肿瘤细胞后,细胞膜蛋白受到严重破坏,部分膜蛋白流失。研究结果还提示：声动力处理后细胞线粒体膜电位水平显著降低（Rhodamin 123平均荧光强度由对照组14 082.78 ± 840.44下降至7 801.53± 409.15）;细胞色素C氧化酶活性由对照组的（0.015 6 ± 0.002 0）U/min/mg降低至（0.008±0.000 0）U/min/mg,提示线粒体也可能是超声联合PpⅨ对S180肿瘤细胞的作用靶点。     

超声激活原卟啉Ⅸ对S180肿瘤细胞膜功能的损伤研究

探讨超声结合原卟啉Ⅸ(PPⅨ)对S180肿瘤细胞膜功能的影响及其作用机制。采用频率为1.1 MHz,强度为3 W/cm2的聚焦超声,结合1μg/mL的PPⅨ作用于S180肿瘤细胞,借助于流式细胞仪,采用荧光探针DCFH-DA(2',7'-二氯双氢荧光素双乙酸酯)、FD500(异硫氰酸荧光素钠标记的右旋糖酐)、DiBAC4(3)和Fluo3-AM分别检测胞内活性氧生成量、细胞膜通透性、质膜电位及胞内游离Ca2+的浓度变化。研究结果表明,超声结合PPⅨ比单纯超声或单纯PPⅨ对细胞膜功能损伤作用都强,这种损伤作用可能与影响质膜功能的活性氧含量、细胞膜通透性、质膜电位以及胞内游离Ca2+浓度变化相关。     

聚焦超声激活原卟啉IX对S180 肿瘤细胞的杀伤作用

目的 初步研究超声激活原卟啉IX(PPIX)对S180肿瘤细胞的杀伤作用,并探讨其作用的生物学机制.方法 采用频率为2.2 MHz,强度为3 W/cm2的聚焦超声,结合120 μmol/L的PPIX作用于S180肿瘤细胞,通过台盼蓝拒染法检测细胞的存活率;扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化;活性氧试剂盒检测细胞悬液中活性氧的生成量;酶化学方法检测细胞内几种抗氧化物酶活性的变化.结果 同等条件下,超声结合PPIX对细胞的损伤显著高于单纯超声组,而单纯PPIX表现出无明显的细胞毒作用;酶化学方法显示,超声激活PPIX后细胞内的丙二醛(MDA)含量显著增加,而细胞内的抗氧化物酶类均有不同水平的下降,并且与处理后细胞悬液中活性氧的生成量相关.结论 超声激活原卟啉IX产生的活性氧自由基作用于细胞膜,增加膜脂质过氧化水平,降低细胞内的抗氧化物酶的含量,可能是其损伤S180 肿瘤细胞的主要因素之一.     

5-ALA在口腔鳞状细胞癌中诱导内生原卟啉Ⅸ荧光强度的研究

目的 应用酶标仪检测5-ALA在不同分化程度的人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中产生原卟啉Ⅸ(PpⅨ)的荧光强度,以期指导临床鉴别和诊断OSCC.方法 将2×104个SAS细胞接种到96孔板中,应用酶标仪检测不同浓度的PpⅨ水溶液荧光强度,制作PpⅨ浓度的标准曲线,计算判定系数R2.在SAS、HSC-3和HSC-4细胞中分别加入浓度为0、0.5、1、1.5、2mmol/L的5-ALA,孵育0、2、4、6、8、10小时后应用酶标仪检测细胞荧光强度.结果 酶标仪检测的荧光强度与PpⅨ含量呈线性相关(判定系数R2=0.9982),5-ALA在OSCC细胞中最佳的代谢浓度为1mmol/L,代谢时间为4小时.并且5-ALA在中分化的SAS细胞中产生的荧光强度显著高于高分化的HSC-3和HSC-4细胞(P＜0.05).结论 5-ALA在不同分化程度的OSCC细胞中产生不同的荧光强度,可辅助用于临床鉴别诊断OSCC.     

聚焦超声结合血卟啉对S180肿瘤细胞的杀伤作用

初步研究聚焦超声激活血卟啉对S180肿瘤细胞的杀伤作用,并探讨其作用的生物学机制。通过台盼蓝拒染法检测频率为2.2MHz的聚焦超声激活血卟啉作用于S180肿瘤细胞的存活率,筛选出最佳的超声处理参数,采用自由基清除剂检测超声激活血卟啉产生的起主要作用的活性氧成分,通过丙二醛含量测定法检测细胞内脂质过氧化含量变化。单纯血卟啉组表现出无明显的细胞毒作用;同等条件下,超声结合血卟啉组对细胞的损伤显著高于单纯超声组,且这种协同杀伤作用可以被组氨酸和甘露醇所抑制,而不被SOD抑制;同时,超声激活血卟啉后细胞内的脂质过氧化含量显著增加。超声结合血卟啉对S180肿瘤细胞有协同杀伤作用,可能由于声动力学处理过程中产生的活性氧自由基作用于细胞膜,增加膜脂质过氧化水平,最终导致细胞死亡。     

声化学激活血卟啉对S180肿瘤作用的研究

声化学激活血卟啉对Ｓ＿（１８０）肿瘤作用的研究马玉英，张伊立，张军平（陕西师范大学应用声学研究所，西安７１００６２）关键词：声化学；血卟啉；Ｓ１８０瘤细胞；抗肿瘤效应血卟啉是一种有机光敏剂，具有优先在肿瘤组织聚集的特点，用激光激活血卟啉的光动力学疗法...     

大蒜乳剂对小鼠S180腹水癌细胞作用的电镜和电镜细胞化学观察

本文证实大蒜乳剂具有显著抑制肿瘤的作用,荷瘤小鼠的生命延长率和抑瘤率分别为81％和72％。在此基础上,我们利用电镜和电镜细胞化学技术,观察大蒜乳剂对S180腹水癌细胞超微结构及几种酶活性的影响。单次用药后2、6小时,部分肿瘤细胞表面微绒毛肿胀、脱落,核染色质浓缩,胞质内出现大量空泡;48小时后,肿瘤细胞膜表面微绒毛肿胀,脱落现象仍很严重,但细胞核和细胞质的受损程度已经减弱;72小时受损肿瘤细胞恢复正常。连续4次给药后,肿瘤细胞数量明显减少,细胞体积变小,部分肿瘤细胞的损伤程度与单次用药后6小时基本相似。连续4次给药后,肿瘤细胞的碱性磷酸酶(AlPase)、5核苷酸酶(5Nase),葡萄糖6磷酸酶(G6-Pase)活性下降。实验结果证明,大蒜乳剂对小鼠S180腹水癌细胞有明显的细胞杀伤作用。     

白术对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达的影响

探讨白术对小鼠S180 肉瘤的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因bcl - 2表达的影响。用病理形态学及荧光免疫组织化学法 ,通过光镜进行形态学观察 ,共聚焦显微镜观察并计数表达bcl- 2基因的瘤细胞数。结果表明 :白术各剂量组对小鼠S180肉瘤组织具有抑制作用 ,细胞形态学观察显示 ,白术可促进肿瘤细胞的凋亡及坏死 ,并引发相应的炎细胞反应。而且 ,白术各剂量组能明显降低小鼠S180 肉瘤凋亡相关基因bcl- 2的表达。白术可能通过调控肿瘤细胞凋亡抑制基因bcl - 2的表达而实现抑瘤作用。     

葡萄籽原花青素提取物对HT22细胞糖氧剥夺损伤的保护作用

目的:通过研究小鼠海马神经元细胞系HT22细胞糖氧剥夺(OGD)后凋亡/自噬相关蛋白表达的变化,探讨葡萄籽原花青素提取物(GSPE)预处理对OGD诱导的HT22细胞损伤的保护作用。方法:将HT22细胞分为对照组、OGD组、OGD+GSPE组。CCK8法检测OGD不同时间(4、6、8 h)干预后HT22细胞的活性,确定后续实验中OGD时间; CCK8法检测同一OGD时间下,不同GSPE浓度(20、40、100、200μmol/L)处理后HT22细胞的活性,确定GSPE最佳浓度;免疫荧光技术标记Tubulin蛋白,观察细胞形态的改变; AnnexinⅤ-FITC/PI染色和TUNEL染色检测细胞凋亡;免疫荧光技术检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、LC3Ⅱ和Beclin1等蛋白的表达量变化; caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3相对活性。结果:观察细胞形态结果表明:对照组细胞形态完整、胞体较大,OGD组中细胞大量皱缩成团、胞体变小,OGD+GSPE组细胞状态较OGD组明显改善;观察细胞凋亡情况结果表明:和OGD组相比,GSPE预处理后的HT22细胞...