医院换药室生理盐水棉球细菌污染调查

乌鲁木齐市４所医院换药室的生理盐水棉球，启用前与启用后２ｈ内者均未检出细菌。启用４、６、８ｈ者检出率分别为７４％、８１５％与１０００％。     

臭氧水稳定性及杀菌性能的试验观察

以电解水法产生含臭氧的水溶液,最高浓度可达１９ｍｇ／Ｌ。开机后其浓度随水流速度增大而下降。臭氧水的半衰期在４℃、１０℃、２０℃与３０℃下分别为１３２、１２８、２７、６ｍｉｎ。１０ｍｇ／Ｌ臭氧水作用１ｍｉｎ,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的杀灭率均达１００％。浓度为２０ｍｇ／Ｌ与８０ｍｇ／Ｌ的臭氧水分别对绿脓杆菌与白色念珠菌作用１ｍｉｎ,杀灭率亦为１００％。浓度为１２０ｍｇ／Ｌ者对枯草杆菌黑色变种芽胞作用２０ｍｉｎ,杀灭率达９９９％。     

供应室发放无菌物品的盛物盘与请领单细菌污染调查

对医院供应室发放无菌物品的盛物盘与请领单，用棉拭涂抹法采样，进行了细菌污染检测。在对其实行消毒管理前，两者细菌检出率均为１００％。盛物盘与请领单表面细菌总数超标（≥５ｃｆｕ／ｃｍ２）率分别为９２５％（７４／８０）与８３０％（８３／１００）。检出的...     

从临床标本中定量检测泌尿生殖道支原体耐药性的研究

目的比较抗生素对临床标本中泌尿生殖道支原体抗菌作用。方法采用直接肉汤药盘法定量测定了临床标本中２１１株解脲脲原体（Ｕｕ）和５４株人型支原体（Ｍｈ）对８种抗菌药物的耐药性。结果２１１株Ｕｕ对四环素、强力霉素、氧氟沙星、环丙沙星、米诺环素、阿奇霉素、罗红霉素、交沙霉素耐药率分别为３８４％、２３２％、２０７％、６５４％、５１６％、０％、０９％及５７％；５４株Ｍｈ对四环素、强力霉素、氧氟沙星、环丙沙星、米诺环素、阿奇霉素、罗红霉素、交沙霉素耐药率分别为５９２％，４８．１％，３３３％，７５９％，５００％，１００％，１００％及２７８％。耐四环素的Ｕｕ株对强力霉素、环丙沙星、米诺环素都有交叉耐药，但对阿奇霉素、罗红霉素、交沙霉素无交叉耐药，耐四环素的Ｍｈ株对强力霉素、氧氟沙星、环丙沙星、米诺环素和交沙霉素有显著性交叉耐药。结论提示泌尿生殖道脲原体的耐药性监测，对指导临床治疗具有重要意义。     

高氧化还原电位酸性水杀灭微生物效果及其稳定性的试验观察

高氧化还原电位酸性水的氧化还原电位＞１１００ｍＶ，ｐＨ值＜２７。经检测，该水对无有机物保护的细菌繁殖体与白色念珠菌作用１～５ｍｉｎ，对枯草杆菌黑色变种芽胞作用２０ｍｉｎ，杀灭率均为１００％。用于擦拭工作台面或浸泡阴道窥器１～２ｍｉｎ，对自然菌的灭除率分别为８７９２％与７４８０％～８０４９％。放置室温下３ｄ，该水氧化还原电位明显下降，但ｐＨ值无明显变化。     

新疆红景天水提取液抗诱变作用的实验研究

用Ａｍｅｓ试验和小鼠骨髓细胞微核试验对新疆红景天水提取液进行抗诱变作用研究，结果表明：对２－氨基芴（２ＡＦ）和黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）诱发的ＴＡ９８和ＴＡ１００回复突变抑制率分别为３３％～１００％和２１％～４４％。微核抑制率为１９３％～５９１％。     

CA72—4在胃癌患者血清中检测的临床意义

探讨胃癌患者血清中肿瘤标志物ＣＡ７２４水平的表达及临床诊断价值。方法采用放射免疫法对５７例胃癌患者，２６例胃良性疾病及３０例正常人（健康助血员）进行了血清ＣＡ７２４水平的检测。结果胃癌、良性疾病及健康对照组血清中的ＣＡ７２４中位水平分别为５７（２５５～１５１５）Ｕ／ｍｌ、２１０（１６０～２６３）Ｕ／ｍｌ和１２１（０９１～１９２）Ｕ／ｍｌ，胃癌组较良性疾患及健康对照组，均达统计学上的显著意义（Ｐ＜００１）。以３７Ｕ／ｍｌ为界值，胃癌组与胃良性疾患的敏感度的分别为：６３２％（３６／５７）与７７％（２／２６），正常对照组中ＣＡ７２４水平均＜３７Ｕ／ｍｌ，胃癌组较良性疾病组及正常对照组的阳性率有显著性差异（Ｐ＜００１）。不同病理类型的胃癌阳性检出率也有差异，其中以未、低分化胃癌患者最高（１８／２５）７２％，浸润伴转移癌（１０／１４）７１４％，中高分化胃癌（７／１１）６３６％，其他胃癌如残胃癌、印戒细胞癌等（１／７）１４３％。结论ＣＡ７２４是一种具有临床诊断参考价值的胃癌标志物，其表达水平在不同病理类型中具有一定差别     

单一试剂光度法测定血清锌

目的　建立简便、灵敏、试剂稳定性好的分光光度法测定血清锌。方法　在表面活性剂 Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ１００ 存在下,用２（５溴２吡啶偶氮）５二乙氨基酚（５ Ｂｒ Ｐ Ａ Ｄ Ａ Ｐ） 作显色剂测定血清锌。结果　该方法显色络合物最大吸收波长为５５８ ｎｍ ,线性范围达４６ μｍｏｌ／ Ｌ,表观摩尔吸光数为１２９ ×１０５ Ｌ·ｍｏｌ－ １·ｃｍ － １ 。回收率为９８３ ％ ～１０１６ ％ ,批内变异系数（ Ｃ Ｖ） 和批间变异系数分别为２４ ％ 与３４ ％ ,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性, Ｙ＝ １０１８ Ｘ－ ０２６６ｒ＝ ０９９８ ５ , Ｐ＞ ００５ ;５６ 例健康人血清锌含量为１０３７ ～２４６９ μｍｏｌ Ｌ（珋ｘ ±２ｓ） 。结论　该法具有快速、简便、灵敏可靠等优点,适合临床应用。     

经静脉六氟化硫葡萄糖白蛋白左心超声造影实验研究

对９条闭胸狗，１条开胸狗经周围静脉分别注射声振葡萄糖白蛋白（ＳＤＡ）及含六氟化硫的声振葡萄糖白蛋白（ＳＤＡ－ＳＦ６），进行左心腔与心肌超声造影。结果：周围静脉注射ＳＤＡ－ＳＦ６５７次，左心腔显影５５次，显影率９６％；注射ＳＤＡ５４次，左心腔显影２７次，显影率５０％。ＳＤＡ－ＳＦ６组和ＳＤＡ组比较：左室持续显影时间分别为１５±２和４±１ｓ（Ｐ值＜０．００１），经肺时间分别为４．５±１．０和５．０±１．０ｓ（Ｐ值＜０．０１），左室显影强度分别为Ⅱ～Ⅲ级和Ⅰ级。心肌显影成功率ＳＤＡ－ＳＦ６为１００％，心肌显影强度为Ⅰ～Ⅱ级，而ＳＤＡ为０。另有４条狗作了主动脉根部非选择性造影，结果两种造影剂的心肌显影均为１００％，显影强度均达Ⅲ级     

远红外线加热对中药原粉消毒效果的实验观察

厚度为１．０与１．７ｃｍ的中成药原粉，分别经远红外线（２～２０μｍ）加热７０℃作用９０分钟与加热１００℃作用１２０分钟，细菌总数的减少分别＞９９．０％与＞９９．９％。经７０℃作用９０分钟，单味药粉挥发油损失１．０２％～５．１８％，其颜色、气味、折光率与旋光度变化不明显。     

Plasmid modifications in a tick-borne pathogen, Borrelia burgdorferi, cocultured with tick cells

We describe an in vitro system that will facilitate molecular analysis of the association between Lyme disease spirochetes and vector cells. We cocultured Borrelia burgdorferi continuously with two tick cell lines, RAE25 (from Rhipicephalus appendiculatus) and IDE8 (from Ixodes scapularis). A clone isolated after twenty-two passages with RAE25 cells had lost the largest (49 kb) plasmid, and probes containing information normally encoded on it, including genes for two surface proteins, hybridized to smaller plasmids. Spirochetes maintained with IDE 8 cells showed a new 43 kb plasmid that hybridized to a probe made from the 49 kb plasmid. After reisolation from hamsters, these spirochetes carried a large plasmid (100 kb) that hybridized with the 49 kb plasmid. These changes may illustrate a plasticity that enables B. burgdorferi to adapt to different environments.     

A PCR assay for discriminating Neisseria gonorrhoeaebeta-lactamase-producing plasmids

Oligonucleotide primers were developed for use in polymerase chain reaction (PCR) assays to differentiate three related, epidemic beta-lactamase-producing plasmids of Neisseria gonorrhoeae-the Asia-(7426 bp), Africa-(5599 bp) and Toronto-(5154 bp) type plasmids. One-hundred and two N. gonorrhoeae isolates with different plasmid profiles were tested-16 isolates carried the Asia plasmid, 41 isolates contained the Africa plasmid, 16 isolates contained the Toronto plasmid and 29 isolates contained no beta-lactamase-producing plasmids. Most (101/102) isolates also carried the gonococcal cryptic plasmid, while 27/102 and 44/102 isolates carried either the transfer plasmid or the tet M-containing plasmids, respectively. The assay was 100% sensitive and specific for identifying the correct plasmid type. This assay is useful for rapidly detecting the presence of gonococcal beta-lactamase-producing plasmids in clinical samples and discriminating them for epidemiological typing.     

CYP3 A5基因检测质控品制备及其应用研究

目的通过构建体外质粒DNA作为质控样品开展他克莫司代谢基因——细胞色素P450 3A5(CYP3A5)基因检测室间质量评价计划(简称室间质评),评估参评实验室检测能力及存在的问题,提高临床实验室CYP3A5基因的检测质量。方法利用基因工程技术体外构建含CYP3A5*3(rs776746)位点上、下游序列的重组质粒,筛选CYP3A5*3 AA和GG基因型分别作为野生型和突变型样品,两者等比例混合后作为杂合突变型样品,并制备质控样品盘开展室间质量评价。依据回报结果计算各实验室成绩,汇总不同样品的总体符合率,并分析不同检测方法的符合率和检测错误类型。结果体外构建的重组质粒经Sanger测序验证分别含CYP3A5*3位点野生型和突变型序列。2017年两次室间质评中成绩满分的实验室分别为93.33%(14/15)和100%(17/17)。两次室间质评中,样品检测的总体符合率分别为96%(72/75)和100%(85/85)。荧光分子杂交法检测的样品符合率均为100%; Sanger测序法检测样品符合率为90%(27/30)和100%(40/40)。结论制备的质控样品能够有效监测试剂检测性能,具有良好的适用性。各实验室在CYP3A5*3基因位点检测总体准确率较高,但个别实验室检测能力有待提高。室间质评计划能帮助实验室发现检测中存在的问题,提高检测质量。     

抑癌基因TCF21重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的：利用大肠杆菌BJ5183细菌内同源重组法构建重组腺病毒pAd-TCF21载体。方法设计TCF21cDNA 扩增引物,从真核表达载体pCMV-SPORT6.1-TCF21中扩增TCF21的DNA序列,与腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV进行连接,构成穿梭质粒pAdTrack-TCF21;然后再用经PmeI酶线性化的pAdTrack-TCF21转化含pAdeasy-1的超感受态AdBJ5183,采用细菌内同源重组法构建腺病毒质粒pAd-TCF21;筛选同源重组质粒阳性克隆,提取pAd-TCF21质粒经PacI酶切鉴定和PCR鉴定。结果线性化的pAdTrack-TCF21转化含pAdeasy-1的超感受态AdBJ5183,12~20h后获得了40%阳性重组质粒克隆,经酶切获得＞23kb的大片段和3.0 kb的特征性片段,PCR反应扩增出了540bp的片段,证明重组腺病毒质粒中已成功插入目的基因TCF21。结论细菌内同源重组法成功构建了含TCF21基因的重组腺病毒质粒,为下一步腺病毒介导的TCF21转染A549细胞的研究打下基础。     

土茯苓加减方对淋病奈瑟菌耐药质粒的消除作用

目的评价土茯苓加减方对淋病奈瑟菌耐药质粒的消除作用,为筛选安全、有效、经济的中药消质剂提供参考。方法四川省医学科学院.四川省人民医院皮肤病性病防治研究所性传播疾病(STD)实验室2005年2～12月收集的门诊淋病患者中分离鉴定的30株产β-内酰胺酶的淋病奈瑟菌菌株(PPNG)作为实验菌株(土茯苓加减方组),采用土茯苓加减方对PPNG进行耐药质粒消除;全国性病中心提供的WHO推荐淋病奈瑟菌标准菌株A、B、C、D、E作为质控菌株,采用传统消质剂十二烷基硫酸钠(SDS)作为对照(SDS组),评价PPNG经土茯苓加减方作用后对抗生素的敏感性改变情况以及土茯苓加减方的消质作用。结果土茯苓加减方组PPNG对青霉素、四环素、环丙沙星的耐药率由100%降低为60%～70%,差异均有统计学意义(P0.01);SDS组PPNG对青霉素和环丙沙星的耐药率下降为77%和80%(P值分别为0.024和0.011);土茯苓加减方对4.2、5.3和7.4kb质粒有不同程度消除作用,其中对5.3kb和7.4kb质粒的消除率达到20%左右;土茯苓加减方组总的质粒消除率为16.7%,SDS组总的质粒消除率为23.3%,但差异无统计学意义(P0.05)。结论土茯苓加减方对产β-内酰胺酶的淋病奈瑟菌耐药质粒具有一定消除作用,能够在一定程度上增强淋病奈瑟菌对抗生素的敏感性。     

Antimicrobial resistance in clinical isolates of Salmonella enterica serotype Enteritidis: relationships between mutations conferring quinolone resistance,integrons, plasmids and genetic types

In 481 clinical isolates of Salmonella enterica serotype Enteritidis collected from a Spanish region in 2000, 108, 83 and four isolates were resistant, respectively, to nalidixic acid, ampicillin or both. Nalidixic acid resistance was the result of DNA gyrase mutations involving the codons Asp-87 (97 isolates) and Ser-83 (15 isolates) of the gyrA gene; no mutations in parC were detected. In ampicillin-resistant strains, blaTEM genes located on plasmids and/or the chromosome were implicated. Five plasmids containing blaTEM1-like genes were identified, ranging from 7 to 100 kb, four of which were self-transferable; one of these contained a class 1 sul1 integron with an aadA1a gene cassette. This integron was also found on the chromosome of an isolate resistant to ampicillin, streptomycin and sulfadiazine. A relationship between a 40 kb self-transferable plasmid and strains of Salmonella Enteritidis phage type 6a with a distinctive RAPD profile was established.     

bcr/abl基因b3-a2型接合区cDNA的分离和序列分析

利用分子生物学方法,我们将K562细胞林bcr/abl mRNA 0.3kb的接合区cDNA片段用聚合酶链反应扩增并插入到质粒pGEM-4-Z载体中。经限制酶切分析和荧光标记M13引物法DNA序列测定,证实重组质粒pB3A2中有0.3kb的插入片段与K562 mRNA接合区序列完全一致。我们分离到的接合区DNA可用于bcr/abl基因的检测及其反义核酸抑制的研究。     

2株不同序列分型耐黏菌素大肠埃希菌耐药机制分析

目的探讨2株黏菌素耐药大肠埃希菌的耐药机制。方法采用Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定药敏系统鉴定细菌及检测常见抗菌药物敏感性,并检测菌株是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);用三维试验检测菌株是否产AmpC酶;用微量肉汤稀释法测定菌株对黏菌素的最低抑菌浓度(MIC);用PCR及测序检测耐药基因;多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的分子分型和同源性;接合试验和S1酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)对菌株的质粒特征进行分析。结果2株菌均对碳青霉烯类药物敏感,对黏菌素耐药,其中N408对头孢类药物耐药;PCR扩增和测序分析显示2株菌均携带mcr-1基因,且N408和N433分别携带blaCIT和blaTEM-1基因;2株菌质粒接合试验均成功,接合子均检测到mcr-1基因;MLST分析显示N408为ST453型,N433为ST8900型,PFGE显示为不同条带。S1-PFGE显示N408有2个质粒,N433有1个质粒。结论本地区已出现携带mcr-1基因黏菌素耐药大肠埃希菌,且可通过质粒在不同菌株间水平播散,应引起临床的重视,加强此类菌株的检测。     

2004～2005年南昌地区淋病奈瑟菌质粒谱型研究

目的：研究南昌地区淋病奈瑟菌质粒谱型的分布情况。方法：（1）采用碱裂解法提取淋病奈瑟菌质粒；（2）采用琼脂糖电泳法测定质粒分子量大小，并对菌株的青霉素耐药现象与4．5Md质粒的关系进行分析。结果：218株淋病奈瑟菌中有206株菌携带质粒，质粒总检出率为94．50％；质粒谱共分7型，以4．5Md＋2．6Md和24．5Md＋4．5Md＋2．6Md为主，分别占30．73％及24．77％，未检出3．2Md的R质粒。结论：南昌地区淋病奈瑟菌质粒谱型的分析对该地区淋病的防治有重要意义；4．5Md质粒与青霉素耐药密切相关。     

革兰阴性菌产CTX-M-3型超广谱β内酰胺酶分子传播机制的研究

目的 :了解革兰阴性菌产CTX M 3型超广谱β内酰胺酶 (ESBLs)的分子传播机制 ,为临床防治提供依据。 方法 :收集革兰阴性菌医院感染无重复株共 378株 ,进行药敏试验和ESBLs产酶株的检测 ;肠杆菌科基因组内重复一致序列 聚合酶链反应 (ERIC PCR)进行克隆株的DNA分型 ;质粒转移实验、质粒谱及耐药质粒酶切指纹分析、等电聚焦电泳、PCR扩增TEM、CTX M基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果 :ESBLs的检出率为 16 .9% (6 4 / 378) ,其中CTX M 3型产酶株占 2 0 .3% (13/ 6 4 ) ;CTX M 3基因定位在 6 6kb和 75kb 2种接合性质粒上 ,6 6kb的质粒同时携带TEM 1基因 ;从不同来源的CTX M 3产酶株中可以分离到同种耐药质粒 ,染色体DNA同源性分析显示其为不同的克隆株。结论 :CTX M 3型ESBLs产酶株的传播机制以质粒介导为主 ,并可能存在局部携带CTX M 3基因耐药质粒的爆发