降钙素受体研究进展

骨质疏松症所致的骨折是中老年人,尤其是中老年妇女致残致死的重要原因之一。基因通过影响峰值骨量和与年龄相关的骨量减少,在决定骨密度方面起着重要的作用,人们一直希望通过候选基因法寻找与骨质疏松发病显相关的基因。降钙素（LCT）是人体调节钙代谢和骨转换的重要激素,降钙素受体（calcitonin receptors,CTR）在骨骼中主要分布在破骨细胞及其前体细胞上,调节体内骨代谢和维持钙平衡。因此降钙素受体基因已成为当今较瞩目的研究方向,对降钙素受体基因多态性与骨密度关系的研究在国际上开始引起重视。本对CTR的结构、功能、信号转导及其与骨密度的关系做一综述。     

LRP16基因启动子活性分析

本研究的目的在于分析LRP16基因不同启动子区域的活性，为深入研究LRP16基因的表达调控机制奠定基础。在NCBI的人类基因组数据库中截取并下载LRP16基因转录起始位点5侧翼区2．7kb的基因组序列，设计PCR引物，从健康外周血单个核细胞中克隆和亚克隆了LRP16基因的启动子分子。对各个长度相差400bp左右的亚克隆启动子片段调控荧光素酶表达的作用强度进行比较分析。结果获得了与GeneBank序列一致、长度为2．6kb的LRP16基因启动子DNA序列，其主要调控序列在LRP16基因转录起始位点5侧翼区的-200至-600bp。结论：LRP16基因启动子是一个典型的Ⅱ型启动子，其启动子活性在-200至-600bp区域最强。     

护骨素基因A163G多态性与北京地区老年人群骨密度的关系

背景：护骨素基因是骨质疏松症的候选基因,其基因多态性存在种族差异。目的：探讨北京地区老年人群中护骨素基因启动子区域A163G位点多态性与骨密度的关系。方法：选取307名老年受试者,采用双能X射线骨密度吸收仪测定股骨近端、腰椎及前臂骨密度,取其外周血提取DNA,采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性方法测定护骨素基因A163G多态性,并进行基因测序。采用单因素方差分析比较不同基因型对应的骨密度变化,逐步回归法分析骨密度的相关因素。结果与结论：在绝经后老年女性受试者中,腰椎、股骨Inter区,AA型骨密度高于AG或GG型,老年男性受试者中,各基因型所对应的骨密度,没有明显差异。提示护骨素基因启动区域A613G多态性与绝经后老年女性骨密度有一定关联。     

高通量测序法检测胃癌患者融合基因LRP5-LITAF

目的了解胃癌发病过程中融合基因表达水平的变化,探讨其在胃癌的发病机制中的作用。方法用Illumina高通量测序仪对早期胃癌患者组织及匹配的癌旁组织进行RNA测序,以检测差异基因表达水平及结构变化。结果在胃癌组织中发现1 590个基因上调和709个基因下调;功能富集分析表明,这些差异表达基因富集于细胞周期、肿瘤侵入与扩散有关的基因实体(gene ontology,GO)注释中;且在约40%(2/5)的胃癌患者的癌组织中发现融合基因LRP5-LITAF。结论发现了胃癌发病过程中的大量差异表达基因及融合基因LRP5-LITAF,为胃癌的辅助诊断及靶向治疗提供了初步实验依据。     

护骨素基因A163G多态性与北京地区老年人群骨密度的关系

背景:护骨素基因是骨质疏松症的候选基因,其基因多态性存在种族差异.目的:探讨北京地区老年人群中护骨素基因启动子区域A163G 位点多态性与骨密度的关系.方法:选取307 名老年受试者,采用双能X 射线骨密度吸收仪测定股骨近端、腰椎及前臂骨密度,取其外周血提取DNA,采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性方法测定护骨素基因A163G 多态性,并进行基因测序.采用单因素方差分析比较不同基因型对应的骨密度变化,逐步回归法分析骨密度的相关因素.结果与结论:在绝经后老年女性受试者中,腰椎、股骨Inter 区,AA 型骨密度高于AG 或GG 型,老年男性受试者中,各基因型所对应的骨密度,没有明显差异.提示护骨素基因启动区域A613G 多态性与绝经后老年女性骨密度有一定关联.     

急性白血病LRP15基因启动子区甲基化及其表达分析

为了探讨LRP15基因在急性白血病（AL）患者中的表达情况及其与启动子区CpG岛甲基化的关系，采用甲基化特异PCR（MSP）方法检测AL患者LRP15基因启动子区甲基化状态，并用RT—PCR方法检测该基因在这些患者中的表达情况。结果发现，LRP15基因在缓解与非缓解状态白血病患者中的表达分别为47．6％和16．7％，其启动子区甲基化比例分别为38．1％和72．2％。LRP15基因的表达与其启动子区甲基化之间无相关（P=0．0087）。结论：AL患者LRP15基因启动子区的甲基化不完全是导致LRP15基因表达沉默的原因。     

护骨素基因T245G多态性与老年人骨密度关系的部位及性别差异

背景:作为骨折发生的重要临床预测因子,骨密度在一定程度上由遗传因素决定.护骨素基因是骨质疏松症发病中的重要候选基因.目的:探讨护骨素基因T245G多态性与骨密度的相关性.方法:选取2008-09/2010-04在北京大学人民医院进行常规查体的老年人281名,其中男182名,女99名.应用PCR-RFLP结合DNA测序检测护骨素基因T245G多态性,使用双能X射线骨密度测量仪测定受试者腰椎、髋部标准位置及前臂的骨密度.同时收集受试者的生化指标及临床观察项目.应用ANOVA方法分析护骨素基因T245G多态性与各检测指标的关系.结果与结论:在老年男性及绝经后女性中,T245G基因T,G等位基因频率分布差异无显著性意义(P > 0.05).在老年男性中,GG和TG基因型具有较高的腰椎骨密度,而TT基因型的腰椎骨密度较低(P < 0.05),Ward's三角区及前臂骨密度在各基因型间差异无显著性意义(P > 0.05).在绝经后女性中,T245G多态性与骨密度无关,说明护骨素基因与老年男性腰椎骨密度有关.     

老年代谢综合征与骨代谢及骨密度的相关性研究

目的探讨老年代谢综合征(MS)与骨代谢及骨密度的关系。方法选择老年MS患者157例为MS组,健康体检者192例为对照组,测量腰围、空腹血糖(FBG)、血胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等,ELISA法检测血清骨钙素(OC)、甲状旁腺素(PTH)、骨碱性磷酸酶(B-ALP),双能X线骨密度测量仪检测骨密度。结果 MS组骨密度T值及OC、B-ALP均显著低于对照组,PTH显著高于对照组。各代谢指标正常组与异常组之间骨密度比较发现:血压、TG、腰围异常组患者骨密度显著低于正常组患者,其余代谢组分的正常组与异常组骨密度无统计学差异。结论 MS主要通过肥胖、血脂、血压代谢异常引起体内与骨代谢相关的因子如甲状旁腺素、骨碱性磷酸酶等的改变进而导致骨代谢异常、骨密度下降。     

骨硬化素对骨生成作用的研究进展

骨生成的调节是一个复杂的由众多多肽因子参与的病生理过程。骨动态平衡的维系受多基因、多细胞网络调节。某几个基因的突变如LRP5、维生素D受体和PTH受体可导致骨形成与骨吸收紊乱。这些基因所编码的蛋白与各种生长因子相互作用控制细胞增殖,促进成骨细胞表型的发育,从而影响成骨细胞活性或细胞生存[1]。骨硬化素(sclerostin,SO)是硬化性骨化症(sclerosteosis,SOST)基因表达的一种蛋白产物。近年来,研究发现SO在骨生成发生机制方面具有重要的作用[2,3]。一、SOST基因的介绍SOST由Hausen在1967年首次提出,是一种罕见的骨病。它不…     

γ-氨基丁酸B2受体基因rs3750344多态与汉族人骨密度及骨矿量的关系

目的探讨γ-氨基丁酸B2受体(GABABR2)基因第二外显子rs3750344单核苷酸多态性（SNP）与骨密度的关联。方法425名健康志愿者采用双能X线骨密度仪测量全身各个部位的骨密度和骨矿量,用Taqman基因分型平台进行rs3750344基因分型。结果SNP rs3750344位点TT、TC及CC基因型携带者个体的上肢、下肢、躯干、肋骨、骨盆和全身总骨密度、骨矿量均依次显著增加。结论GABABR2基因rs3750344多态的C等位基因增加汉族人骨密度骨及骨矿量的水平。     

Pax5基因与血液系统肿瘤

Pax5基因在人类肿瘤尤其是血液系统肿瘤中存在染色体易位、基因重排、异常高频突变、启动子异常甲基化等形式的异常表达。了解Pax5基因在B-NHL、MM、B-ALL等血液系统恶性肿瘤中的异常表达情况对于认识血液恶性肿瘤的致病机制以及研究Pax5在诊断分期和治疗监测的临床应用价值具有重要意义。     

降钙素受体基因多态性与原发性骨质疏松的相关性

目的：骨质疏松是多基因调控疾病，峰值骨量达到和骨量丢失均受遗传因素影响。观察山东半岛地区汉族人群降钙素受体Alu-Ⅰ基因多态性各基因型频率及其与骨质疏松的关系，探讨原发性骨质疏松症的遗传易感因素。 方法：试验于2005—06／2007—06在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。①试验对象：选取332名长期居住在山东半岛地区无亲缘关系的汉族人群，纳入标准：健康门诊查体人员、原发性骨质疏松症及原发性骨质疏松症所致骨折患者：患者对试验知情同意。排除标准：各种继发性骨质疏松症：影响骨代谢相关疾病史；服用影响骨代谢药物等。其中骨质疏松合并骨折75例作为骨质疏松性骨折组，余257例经过骨密度测定确定骨量，按骨质疏松诊断标准（骨密度测定值比同性别峰值骨密度均值降低2，5个标准差）分为骨量正常组（n=201）及骨质疏松组（n=56）。②试验方法：应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析技术测定257名山东半岛汉族成年人和75名骨质疏松性骨折患者降钙素受体基因型，用双能X射线吸收法测定腰椎、股骨颈、粗隆间、Ward’s三角和大转子区等部位的骨密度值。结果：纳入受试者332人，均进入结果分析。①本试验人群降钙素受体基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg定律（x^2=0．47，P=0．493）。基因型频率分布依次为CC型占89.5％，CT型占10，5％，TT型占0％。②年龄与不同部位骨密度值之间呈负相关（P〈0．01），体质量指数与骨密度值之间呈正相关（P〈0．01），在将年龄和体质量指数进行校正后发现女性CC基因型较CT基因型在ward’s三角区有较高的骨密度（P〈0．05），骨量正常组各基因型与骨质疏松性骨折组之间差异无显著性意义（P〉0．05）。 结论：山东半岛汉族女性降钙素受体基因型与骨密度之间存     

维生素D受体基因多态性与肾性骨病

肾性骨病 (renal bone disease,RBD)是慢性肾功能衰竭引起的一种骨代谢障碍性疾病。它是一种多因素疾病 ,包括钙磷代谢紊乱 ;活性 VD(Vitamin D)缺乏或抵抗 ;继发性甲状旁腺功能亢进 (secondary hyperparathyroidism,SPTH) ;酸中毒及氟、铝中毒等。肾性骨病的主要特征之一是骨密度 (bonemineral density,BMD)减低。研究结果显示约有 46 %～ 6 2 %的骨密度由遗传因素决定 [1 ] 。双生子研究显示 ,峰值骨量的6 0 %～ 80 %由遗传因素决定 [2 ,3 ] ,普遍认为在遗传因素多基因影响中 ,维生素 D受体 (vitam in D receptor,VDR)基因多态性…     

LRP16基因对慢性髓系白血病K562细胞促增殖作用的研究

本研究探讨超表达LRP16基因对人慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。采用RT—PCR法扩增人LRP16基因开放阅读框（open reading frame,ORF）片段,将其连接到pGEM—T质粒以构建LRP16基因ORF—pGEM—T重组载体。再将测序鉴定过的LRP16基因ORF插入pcDNA3．1^＋质粒以构建LRP16基因ORF—pcDNA3．1^＋重组表达质粒,转染K562细胞,建立稳定超表达LRP16基因的K562细胞系。用M1Tr法测定细胞存活率并绘制生长曲线,流式细胞术检测细胞周期。结果表明：成功扩增出人LRP16基因ORF片段,并构建LRP16基因ORF—pcDNA3．1^＋重组表达质粒;建立稳定超表达LRPl6基因的K562细胞系;超表达LRPl6基因具有促进K562细胞增殖的作用,且这种促增殖作用部分是通过促进细胞由G0期进入S期而实现的。结论：超表达LRP16基因可促进K562细胞增殖。     

护骨素基因T245G多态性与老年人骨密度关系的部位及性别差异水

背景：作为骨折发生的重要临床预测因子,骨密度在一定程度上由遗传因素决定。护骨素綦凶是骨质疏松症发病中的晕要候选摹闲。目的：探讨护骨索基因T245G多念性与骨密度的相关性。方法：选取2008-09／2010-04往北京大学人民医院进行常规查体的老年人281名,其中男182名,女99名。应用PCR-RFLP结合DNA测序榆测护骨素基因T245G多态件,使用-烈能X射线骨密度测量仪测定受试者腰椎、髋部标准位置及前臂的。旨密度。同时收集受试者的生化指标及临床观察项目。应用ANOVA方法分析护骨素基因T245G多态性与各检测指标的关系。结果与结论：在老年男性及绝经后女性中,T245G基因T,G等化基凶频率分布差异无显苫性意义（P〉0.05）。在老年男性中,GG和TG基凶型具仃较高的腰椎骨密度,而TT基吲型的腰椎骨密度较低（P〈0.05）,Ward＇S三角区及前臂骨密度在各基因型问差异无显著件意义（P〉0.05）。北绝经后女性中,T245G多念性与骨密度无关,说明护骨索基凶与老年男性腰椎骨密度仃关。     

北京地区汉族妇女绝经前后护骨素基因多态性与骨密度的关系

背景：原发性骨质疏松症是多基因遗传性疾病，但是调节骨量的基因需进一步研究。目的：探讨护骨素基因启动子区基因多态性与中国北京地区绝经前后妇女骨密度之间的关系。设计：前瞻性调查研究。单位：北京协和医院。对象：选择2002—07在北京协和医院健康体检的495名北京地区无亲缘关系的汉族妇女，其中绝经前妇女为306名，年龄20-39岁，绝经后妇女（指自然停经1年以上者）为189名，年龄50-84岁。所有受试对象均对检测项目知情同意。方法：①骨密度测量：应用双能X线骨密度测量方法，观察对象均采取仰卧位，采用骨密度仪测量其后前位第1-4腰椎及股骨近端，包括股骨颈、ward’s三角和大转子部位的骨密度值。②基因分型：提取两组受试对象外周血DNA，初步确定护骨素基因分型。并取部分PCR产物送上海博亚有限公司测序，验证基因型，观察两组受试对象护骨素基因型的分布频率及其与骨密度的关系，并用Logistic回归作病因学进一步分析观察绝经后妇女护骨素基因多态性与骨质疏松的关系。主要观察指标：①两组受试对象护骨素基因型的分布频率，及其与骨密度的关系。②绝经后妇女护骨素基因多态性与骨质疏松的关系。结果：纳入受试对象495名，全部进入结果分析。①两组受试对象OPG基因型和等位基因分布频率无明显差异，两组总体基因型分布频率依次为163A→G位点，AA型为70．1％，AG型为26．9％，GG型为3．0％；245T→G位点TT型为71．3％，TG型为25．9％，GG型为2．8％。绝经前妇女在163A→G位点，AA组在L2-4股骨颈、ward’s三角和大转子的骨密度低于GG＋AG组，在245T→G位点，TT组与GG＋TG组相比各部位的骨密度也低，但均无统计学差异（P〉0．05）。绝经后妇女163位点AG＋GG组在L2-4股骨颈、Ward’s三角和大转子的骨密度均显著低于AA组（P〈0．05）；245位点TG＋GG组在股骨颈、Ward’s三角和大转子的骨密度显著低于TT组（P〈0．05）。②绝经后妇女163位点AG＋GG组在L2-4、Ward’s三角是骨质疏松的危险因素（OR=2．045，2．956，P〈0．05，95％可信限1．05—6．7），245位点TG＋GG组在L2-4、Ward’s三角、大转子是骨质疏松的危险因素（OR=2．059，2．859，2．123，P〈0．05，95％可信限1．04—6．5）。结论：北京地区绝经后妇女护骨素基因启动子区的163和245位点为变异型G等位基因时，股骨颈、Ward’s三角和大转子的骨密度较低，变异型G等位基因与绝经后妇女骨密度降低相关。     

电压门控氯离子通道7基因致综合征性耳聋相关骨硬化症机制的研究进展

电压门控氯离子通道7(chloride voltage-gated channel 7,CLCN7)基因突变可使陷窝内酸化不能,造成骨溶解障碍,从而导致以全身骨密度增高为特征的骨硬化症及溶酶体储积疾病等.而硬化骨压迫损伤神经、中耳负压及耳硬化等均可导致耳聋.该文将介绍CLCN7基因及CLCN7蛋白结构功能、骨溶解过程(...     

应用糖皮质激素患者护骨素基因T950C多态性与骨量的关系

目的：分析应用糖皮质激素患者护骨素基因启动子T950C单核苷酸多态性与骨密度及骨生化指标的相关性。 方法：选择2004-03／2005—06在哈尔滨医科大学附属第二医院肾内科就诊的应用糖皮质激素六七个月的慢性肾小球肾炎患者138例，另外选择126例门诊健康体检者作为正常对照组，调查和取样均征得两组受试者本人同意。应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性方法测定两组观察对象护骨素基因启动子T950C的基因型；应用双能X射线骨密度仪测定两组观察对象股骨、疆椎等部位的骨密度；同时检测骨代谢生化指标，测定血清骨钙素应用放射免疫法，测定甲状旁腺激素应用化学发光法。 结果：进入结果分析应用激素组138例，正常对照组126例。①两组观察对象护骨素基因型的分布：启动子T950C发现TT、TC、CC3种基因型，各基因型分布频率正常对照组为TT26．98％，TC48．41％，CC24．61％，应用激素组为TT27．54％，TC48．55％，CC23．91％，两组间比较差异无显著性意义（P〉0．05）。②T950C不同基因型观察对象骨密度．生化指标的比较：正常对照组3种基因型之间骨密度比较。差异无显著性意义（P〉0．05）；应用激素组各部位骨密度呈现CC〉TC〉TT的趋势，但差异无显著性意义（P〉0．05）。两组各基因型之间骨代谢生化指标的差异均无显著性意义（P〉0．05）。 结论：应用糖皮质激素患者的护骨素基因T950C基因型与正常人群比较无明显差异，提示护骨素基因T950C基因型与肾小球肾炎的发病无关；护骨素基因T950C多态性与各部位骨密度无明显相关，推测可能与应用糖皮质激素后的骨量丢失无关。     

RACE技术在钓取白血病相关基因LRP16全长cDNA中的应用

LRP16是我们应用甲基化敏感的限制性界标基因组扫描（restrection landmark genomic scanning,RLGS)技术时发现的一个与白血病复发相关的新基因。为钓取这一新基因的全长cDNA,本实验采用cDNA末端快速扩增法（rapid amplification of cDNA end,RACE)。通过对RACE法若干步骤进行优化,克隆得到了LRP16基因cDNA的5’-与3’-非翻译区,进而获得其全长及完整的开放阅读框架,并作为新基因被GenBank收录。上述结果表明,RACE技术是钓取未知基因全长cDNA敏感而快速的方法,尤其是对5’-及3’-非翻译区的钓取更具有实用性。     

坐骨神经和股神经离断、后肢固定对大鼠降钙素基因相关肽水平及骨密度的影响

目的：明确失神经、固定对大鼠降钙素基因相关肽水平及骨密度的影响,探索失神经和固定引起的骨质疏松的可能机制。方法：10周龄SD雄性大鼠96只,随机分为3组,每组4个时间点,每时间点8只。失神经支配组接受双侧坐骨神经和股神经切断术,固定组大鼠双侧后肢利用石膏管型固定,对照组大鼠接受假手术。主要观察指标：造模后第1、10、30、60天各组大鼠胫骨骨密度和降钙素基因相关肽的变化及降钙素基因相关肽水平与骨密度水平相关性。结果：①降钙素基因相关肽：造模后第10、30、60天失神经支配组大鼠胫骨降钙素基因相关肽的水平低于对照组(P< 0.05—0.01);而固定组仅造模后第30天与对照组之间存在显著性差异(P<0.05)。造模后第10、60天固定组高于失神经支配组(P<0.05—0.01)。②骨密度：与对照组相比,失神经支配组、固定组造模后第30、60天骨密度降低(P<0.05—0.01);失神经支配组和固定组造模第30天骨密度开始下降,60d后下降明显,组内比较差异有显著性意义(P<0.05—0.01)。③失神经后降钙素基因相关肽与骨密度水平变化高度相关(P<0.05);而固定后降钙素基因相关肽与骨密度水平变化无明显相关性（P>0.05）。结论：失神经可导致骨组织降钙素基因相关肽水平下降,降钙素基因相关肽水平下降是失神经性骨质疏松的可能机制之一;固定引起的骨质疏松的发生与降钙素基因相关肽的变化无关。