奥曲肽抑制人肝癌细胞生长机制的探讨

生长抑素对肿瘤细胞的抑制作用受到人们越来越多的观注。奥曲肽 (Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ ,ＳＭＳ 2 0 1 995 )是体外合成的一种生长抑素 8肽。同天然的生长抑素 14肽相比 ,Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ具有作用更强、血浆半衰期长、作用时间更持久、使用方便等优点。近来的研究显示 ,Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ能抑制原发性肝癌的生长 ,且效果良好[1] ,但作用机理尚未明了[2 ] 。为此 ,我们观察在体外Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ能否诱导人肝癌细胞凋亡 ,从诱导肿瘤细胞凋亡的角度探讨其抑癌机理。一、材料与方法1 主要试剂与药物 :ＤＭＥＭ培养液 (美国Ｇｉｂ…     

三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的初步研究

目的：研究三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对肝癌细胞株Ｂｅｌ－７４０２的抑制增殖效应及凋亡诱导作用。方法：采用ＭＴＴ法检测药物对细胞的抑制作用、相差显微镜和电镜观察细胞形态变化、琼脂糖凝胶电泳测定ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ、流式细胞术检测细胞周期变化。结果：各浓度Ａｓ２Ｏ３组（０．２５～１６μｍｏｌ／Ｌ）均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关,其中浓度组为１０μｍｏｌ／Ｌ）均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关,其中浓度组为１０μｍｏｌ／Ｌ抑制率最大,９６ｈ时达８３．８９％,２μｍｏｌ／Ｌ Ａｓ２Ｏ３以抑制肝癌细胞的增殖为主,但在形态及生化方面未见凋亡改变;１０μｍｏｌ／Ｌ Ａｓ２Ｏ３作用１０ｈ可见形态学变化,４８ｈ可见ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ出现。流式细胞检查     

奥曲肽对人结肠癌细胞抑制及凋亡的影响

目的观察奥曲肽抑制人结肠癌SW620细胞增殖并诱导其凋亡的作用。方法奥曲肽作用于体外培养的SW620细胞后,通过MTT比色法测定细胞增殖抑制作用;采用AO/EB染色荧光显微镜观察奥曲肽诱导SW620细胞凋亡后的形态学改变;应用流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率。结果奥曲肽作用SW620细胞后,MTT检测显示细胞增殖活性受到明显抑制,且呈一定浓度依赖性;AO/EB染色可见典型凋亡小体,PI染色流式法显示细胞凋亡率明显上升。结论奥曲肽具有抑制体外培养人结肠癌SW620细胞增殖,并有效诱导其凋亡作用。     

六磷酸肌醇对人肝癌7402细胞凋亡的诱导

六磷酸肌醇 (IP6 )是高纤维食物的有效成分。流行病学调查表明 ,富含 IP6 的谷、豆类饮食与结肠癌、乳腺癌的发生呈负相关 :研究还发现 ,IP6 能抑制肝、肺、前列腺和其它脏器肿瘤的发生、发展和转移 [1 ] 。IP6 的抗癌作用已在体内外实验中得到证实 [2～ 4]。作者新近研究发现 ,体外 IP6 亦能诱导人肝癌 740 2细胞凋亡。材料与方法一、细胞系及细胞培养　肝癌细胞系 740 2由我所冻存。培养基为 RPMI- 16 40 ,含浓度为 10 %小牛血清 (CS杭州四季青 )、青链霉素终浓度各 10 0 U/ m l,置于 37℃、5 % CO2 培养箱中单层贴壁生长。二、细…     

康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的：探讨康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的作用。为康莱特注射液治疗肝癌提供理论依据。方法：采用免疫组织化学及透射电镜技术观察康莱特注射液对肝癌细胞凋亡的影响。结果：肝癌细胞经康莱特注射液培养24h后,其凋亡的百分率明显高于对照组和空白组,有显著性差异（P＜0．05）,且组织细胞凋亡在50％以上者占44．12％（15／34）,而对照组及空白组无1例凋亡超过50％;电镜相可见较为典型的细胞凋亡的形态学变化,细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,凋亡小体形成等。结论：康莱特注射液能诱导肝癌细胞发生凋亡;诱导细胞凋亡可是康莱特注射液治疗作用的重要机制。     

奥曲肽治疗晚期原发性肝癌的临床观察

目的 :观察生长抑素类似物奥曲肽治疗晚期肝癌的疗效及不良反应。方法 :全组共收集 4 5例患者。治疗组2 0例 ,,使用奥曲肽 0 1mg ,皮下注射 ,每 8小时一次 ,每周 5天 ,直至进展。对照组 2 5例 ,接受积极的支持治疗。 2个月进行 1次评价。结果 :治疗组 1例PR ,对照组 0例PR ,无显著性差异 (P >0 0 5 )。治疗组中位生存期为 7个月 ,对照组中位生存期为4个月 ,无显著性差异 (P >0 0 5 )。治疗组中位TTP为 5个月 ,对照组中位TTP为 3个月 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。生活质量治疗组较对照组有较明显提高 ,上消化道出血的发生治疗组明显减少。无明显副作用。结论 :奥曲肽治疗晚期肝癌有一定疗效。     

中药诱导肝癌细胞凋亡的研究进展

凋亡又称程序性死亡,是细胞在一定的生理和病理条件下,由基因控制的细胞死亡。细胞凋亡作为一种基本的生命现象,贯穿于个体生长、发育、死亡的整个生命过程中。细胞的增殖与凋亡是细胞生命活动中必然存在的相互关联、相互影响的两种基本现象,增殖与凋亡的动态平衡在维持机体组织器官正常的形态与功能中起着重要的作用。肝癌的发病机制与细胞增殖与凋亡的失衡有密切关系,肝癌的迅速生长是癌细胞增殖旺盛与凋亡减少的结果。近年的研究显示多种中药可诱导肝癌细胞的凋亡．本文就其研究进展作一回顾与展望。     

顺铂诱导人肝癌细胞凋亡机理研究

顺铂是多种化疗方案的核心药物,在对人卵巢癌细胞和大鼠肝癌细胞的研究中,发现其具有诱导凋亡的作用。本实验从细胞形态、ＤＮＡ裂解片段、细胞周期、ＤＮＡ断裂点末端标记,凋亡相关基因观察顺铂诱导人肝癌细胞凋亡的作用机理。1　材料与方法1.1　细胞培养及药物人肝癌细胞ＳＭＭＣ-7721,引自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库。在含10%小牛血清的ＲＰＭＩ-1640培养基(Ｇｉｂｃｏ产品),37℃,5%ＣＯ2条件下培养。顺氯氨铂(ｃｉｓｐｌａｔｉｎ,ＤＤＰ齐鲁制药厂出品,批号:960601),用含10%正常大鼠血清的ＲＰＭＩ-1640培养液配制,ＤＤＰ终…     

阿霉素诱导人肝癌细胞BEL—7402凋亡的观察

目的研究化疗药物阿霉素抗癌作用与癌细胞凋广的关系及意义。方法应用流式细胞仪、激光共聚焦扫描显微镜动态观察阿霉素对体外培养的人肝癌细胞BEL－7402的生长抑制作用与细胞凋亡的关系。结果阿霉素可阻滞人肝癌细胞BEL－7402从G0/G1期进入S期,诱导细胞凋亡。结论本研究显示阿霉素抗癌作用与诱导细胞凋亡有关。应用流式细胞仪、激光共聚焦扫描显微镜观察细胞凋亡是有效、可行的方法。     

奥曲肽诱导乳腺肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的初步阐明奥曲肽（Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ，ＳＭＳ２０１，９９５，商品名：善得定）与乳腺肿瘤细胞凋亡的关系。方法取手术切除的１６例女性乳腺癌标本，制备肿瘤单细胞悬液，加入善得定（０．１μｇ／ｍｌ）和三苯氧胺（１μｇ／ｍｌ），用ＤＮＡ断端标记法（ＴＤＴ法）分析药物及ＥＲ、ＰＲ对乳腺肿瘤细胞凋亡的影响。结果加入善得定４小时后凋亡率为１０．６±６．９％，１８小时为１４．３±８．８％，ＥＲ（＋）ＰＲ（＋）组４小时善得定凋亡率为１４．３±５．７％，１８小时为２０．２±７．１％，加用三苯氧胺后１８小时组凋亡率为２６．３±８．９％，而ＥＲ（－）ＰＲ（－）组４小时善得定组凋亡率为４．４±３．０％，１８小时为６．５±４．０％，加用三苯氧胺后１８小时组凋亡率为８．８±４．１％，与ＥＲ（＋）ＰＲ（＋）组相比有明显差异（Ｐ＜０．０５）。结论善得定可诱导乳腺肿瘤细胞凋亡，且短时间内即可达到一定的凋亡率，善得定对ＥＲ（＋）ＰＲ（＋）的乳腺肿瘤细胞较敏感，而对ＥＲ（－）ＰＲ（－）组则基本无影响，善得定加用三苯氧胺的治疗有望成为乳腺癌患者术后一个新的辅助生物治疗手段     

花椒提取物诱导肝癌细胞凋亡作用和分子机制研究

目的：研究花椒提取物ZBME诱导的肝癌细胞凋亡作用及其分子机制。方法：体外培养肝癌细胞HepG2细胞株。分为对照组（生理盐水）和ZBME处理组。不同浓度的ZBME处理体外培养肝癌细胞,通过相差倒置显微镜观察对照组和处理组细胞失巢凋亡和生长抑制。免疫印迹（ Western blotting）方法检测ZBME对细胞内抗凋亡蛋白Mcl-1、Survivin和Bcl-xL以及促凋亡蛋白Bax表达调控,基于Annexin V-PI双染的流式细胞分析统计 ZBME 诱导的细胞凋亡率。结果：在相差显微镜下,可以观察到 ZBME 能够显著诱导HepG2肝癌细胞株发生细胞凋亡和生长抑制。MTT检测细胞相对活性结果显示ZBME能诱导HepG2细胞增殖抑制。8μg/ml ZBME处理细胞48h增殖抑制率约40%（P﹤0.05）。Annexin V-PI染色表明ZBME能诱导细胞显著凋亡,8μg/ml ZBME 处理细胞48h凋亡诱导率约90%（P﹤0.05）。结论：ZBME能够诱导肝癌细胞凋亡和增殖抑制。ZBME抗癌作用可能通过下调致癌蛋白Mcl-1、Survivin和Bcl-xL以及上调抑癌蛋白Bax实现。     

流式细胞术分析苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡

目的 为探讨苦参碱抑制HepG2增殖的机制。方法 以不同浓度苦参碱作用于HepG2细胞不同时间用PI及AnnexinV-FTTC-PI双标记两法检测凋亡细胞,结果 0.8,1.5,2.0g/L苦参碱处理细胞72h,细胞均出现了凋亡峰,凋亡细胞分别为10.57,16.37,10.85%细胞早期凋亡检测;2.0,1.5,3.0g/L苦参碱分别作6h、12h、12h,凋亡细胞分别达7.7,8.6,15.7%;当3.0g/L苦参碱作用12h,坯 煞费苦心细胞达21.9%。结论 一定浓度苦参碱可诱导HepG2细胞凋亡,凋亡与坏死相伴存在并呈剂量和时间依赖性。     

TRAIL联合化疗药物诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

肿瘤坏死因子相关凋亡配体 (ＴＮＦｒｅｌａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ ,ＴＲＡＩＬ)是ＴＮＦ家族的成员之一 ,与ＴＮＦ和ＦＡＳＬ不同的是 ,它仅诱导转化细胞、肿瘤细胞和病毒感染细胞发生凋亡 ,对正常细胞则无明显的杀伤作用[1] 。而最近研究发现 ,人重组ＬＺ ＴＲＡＩＬ在体外能诱导人正常肝细胞凋亡[2 ] ,但其明显的肝脏毒性限制了它的肿瘤治疗作用。我们通过观察人重组ＴＲＡＩＬ蛋白及其联合化疗药物阿霉素、丝裂霉素及 5 氟尿嘧啶对肝癌细胞ＳＭＭＣ772 1、ＢＥＬ74 0 2及人正常肝细胞Ｌ0 2的凋亡诱导作…     

三氧化二砷诱导人肝癌细胞株凋亡的初步研究

细胞凋亡在肿瘤治疗学上的意义日益得到人们的重视.我们观察了中药砒霜的主要成分——三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌细胞株的诱导凋亡作用,以探索药物治疗肝癌的新途径.1.材料与方法:(1)药物:0.1%As_2O_3溶液(癌灵Ⅰ号),哈尔滨医科大学第一附属医院药剂科惠赠.(2)细胞株:人肝癌细胞株SMMC-7721.(3)方法:MTT法观察细胞的增殖率,AO/EB荧光染色观察细胞的形态学改变,流式细胞仪检测凋亡率及细胞周期变化.2.结果:As_2O_3对SMMC-7721肝癌细胞株的生长有显著抑制作用,抑制作用强度随浓度提高、作用时间延长而增加.经2μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml As_2O_3作用24h,SMMC-7721细胞株在荧光染色时,显微镜下均呈现典型的凋亡形态学改变,如核染色体凝结、固缩成块状,或染色体沿核膜成新月体形排列,或细胞核崩解碎裂,可见部分细胞呈出芽的表现.流式细胞促检测各实验组均见有亚G_1峰.细胞经1μg/     

奥曲肽治疗晚期原发性肝癌的疗效观察

目的:观察生长抑素类似物奥曲肽治疗晚期原发性肝癌的临床疗效.方法:收集40例晚期原发性肝癌患者,治疗组20例,使用奥曲肽0.2mg,皮下注射,每12小时1次,直至病情进展停药;对照组20例,仅接受积极的支持治疗,每1个月进行1次疗效评价,比较两组疗效.结果:治疗组中无CR,1例PR,4例MR,6例SD,9例PD.总有效率为25%;对照组中无CR、PR、MR,6例SD,14例PD,总有效率为O%,两组有显著性差异(P<0.05).治疗组中位生存期为6.5个月,对照组中位生存期为2.5个月(P<0.05);治疗组TTP为3.5个月,对照组1.5个月(P<0.05);治疗组较对照组患者的AFP水平明显下降(P<0.05),生活质量有明显提高,上消化道出血的发生率降低(P<0.05).结论:奥曲肽治疗晚期原发性肝癌能有效延长患者的生存期,提高生活质量.     

奥曲肽治疗晚期原发性肝癌的疗效观察

目的：观察生长抑素类似物奥曲肽治疗晚期原发性肝癌的临床疗效。方法：收集40例晚期原发性肝癌患者,治疗组20例,使用奥曲肽0.2mg,皮下注射,每12小时1次,直至病情进展停药;对照组20例,仅接受积极的支持治疗,每1个月进行1次疗效评价,比较两组疗效。结果：治疗组中无CR,1例PR,4例MR,6例SD,9例PD。总有效率为25%;对照组中无CR、PR、MR,6例SD,14例PD,总有效率为0%,两组有显著性差异（P〈0.05）。治疗组中位生存期为6.5个月,对照组中位生存期为2.5个月（P〈0.05）;治疗组TTP为3.5个月,对照组1.5个月（P〈0.05）;治疗组较对照组患者的AFP水平明显下降（P〈0.05）,生活质量有明显提高,上消化道出血的发生率降低（P〈0.05）。结论：奥曲肽治疗晚期原发性肝癌能有效延长患者的生存期,提高生活质量。     

三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞凋亡机制研究

目的 了解三氧化二砷（As2O3)诱导多发性骨髓瘤细胞（MM）凋亡的可能机制及其与维甲酸和干扰素的相互作用。方法 联合应用As2O3和巯基还原剂（DTT）、谷胱甘肽耗褐剂（BSO）、全反式维甲酸（ATRA）或干扰素（ＩＦＮ－α）处理MM细胞系RPM18226和U266细胞;应用台盼蓝拒染法计数细胞活力,经细胞形态学和流式细胞仪等判定细胞凋亡的程度;通过测定细胞内荧光染料Rhodamine123的色强度分析线粒体跨膜电位（△ψm)。结果 BSO可加强As2O3诱导的RPM18226和U266细胞线粒体△ψm下降和凋亡,而DTT则有部分拮抗的作用,ATRA诱导RPMI8226细胞闻过则喜亡,但它和As2O3之间无协同效尖,ATRA并不诱导U266细胞凋亡。此外,INF-α,既不抑制RPMIS226和U266细胞的生长和活力,也不改变As2O3对这些细胞的作用。结论 As2O3诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和巯基有关,但ATRA干扰素和As2O3无协同效应。     

大黄素在体外诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡的初步研究

背景与目的:大黄素(3-甲基-1,6,8-三羟蒽醌)是大黄等多种中药的有效成分之一。研究表明大黄素对于乳腺癌细胞、肺癌细胞的生长具有抑制作用,但目前大黄素抗肿瘤的作用机理尚不明确。本研究拟讨论大黄素在体外对肝癌细胞HepG2的作用及其机理。方法:应用MTT、软琼脂克隆形成、DNAladder凝胶电泳及流式细胞术等方法,研究中药单体大黄素对肝癌细胞HepG2生长增殖的影响以及作用机理。结果:大黄素在较低浓度可抑制肿瘤细胞的生长,MTT实验测得的半数抑制浓度(IC50)为(36±2.6)μg/ml。在软琼脂实验中,大黄素可以浓度依赖的方式抑制细胞克隆的形成。经DNAladder及流式细胞仪检测发现,大黄素能诱导HepG2细胞凋亡,与阴性对照相比,随着药物浓度从10μg/ml增加到20μg/ml,AnnexinV染色细胞显著增多,由27.3%增至59.6%;当药物浓度增至40μg/ml时,培养液中几乎无活细胞,由碘化丙啶和AnnexinV双重标记的凋亡后期以继发性坏死细胞为主。结论:中药单体大黄素在体外能抑制肝癌细胞HepG2的生长增殖,并能诱导该细胞凋亡。     

全反式维甲酸诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的初步研究

[目的]研究全反式维甲酸（ATRA）体外诱导人肝癌细胞株HepG2的凋亡及其作用机制。[方法]ATRA处理HepG2细胞。MTT法分析细胞增殖反应;Hoechst染色法检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞中caspase-9、caspase-3和NF-κB蛋白表达情况。[结果]A-TRA可抑制HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡,可上调细胞中caspase-9、caspase-3表达水平（P〈0.05）。[结论]ATRA可抑制HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与cas-pase-9、caspase-3表达上调有关。