大鼠脾淋巴细胞糖皮质激素受体的测定

建立了测定大鼠脾淋巴细胞糖皮质激素受体(GR)的方法。实验结果表明大鼠脾淋巴细胞具有和地塞米松结合的高亲和力、低容量的特异结合部位,最大结合量为6773±585特异结合部位/细胞,平衡解离常数(Kd)为5.05±1.70 nmol/L,受体-配体复合物具有温度依赖性核转位现象。本文为进一步研究糖皮质激素作用的分子机理以及GR的病理变化和生理调节提供了简便的方法。     

糖皮质激素受体基因多态性与重症肌无力的关系

目的 探讨糖皮质激素受体(GR)Bcl I、ER22/23EK基因多态性与重症肌无力(MG)的关系.方法 应用PCR产物直接测序方法检测MG患者组(MGG)61例和性别、年龄相匹配的健康对照组(HCG)57例的GR基因多态性分布特征.结果 Bcl I存在C-G突变、ER22/23EK存在G→A突变,Bcl I 3种基因型GG、CG、CC频率在MGG依次为3.3%、34.4%和62.3%;HCG依次为3.5%、38.6%和57.9%,两组间差异无统计学意义(P=0.887).G和C的等位基因频率在MGG分别为20.5%、79.5%;HCG为22.8%和77.2%,两组间差异无统计学意义(P=0.968).两组的基因型多态性分布均符合HaMy-Weinberg定律(P>0.05).ER22/23EK基因型在MGG和HGG组均为GG,未发现变异.结论 GR基因Bcl I、ER22/23EK多态性与MG发病均无明确相关性.     

原发性肾病综合征患者淋巴细胞糖皮质激素受体及基因测定的意义

目的 :研究原发性肾病综合征 (PNS)患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体α(GRα)水平及其部分基因结构与糖皮质激素 (GC)治疗反应的相关性。方法 :用放射配体结合法及聚合酶链反应 单链构像多态性 (PCR SSCP)、DNA测序法 ,分析 3 0例PNS患者及 2 0例正常对照外周血淋巴细胞GRα水平及其部分基因结构。根据对GC的治疗反应 (强地松 1mg/kg/d,8周 )分完全缓解、部分缓解、无效组。结果 :PNS患者GRα水平低于正常对照组。轻微病变及轻 中度系膜增殖性肾炎的患者 ,其病理类型与治疗反应之间无明显的相关性 ,但GRα水平在各治疗组有统计学差异 ,GRα水平高者对GC的治疗反应好。未发现GRα基因外显子 9有结构异常。结论 :外周血淋巴细胞GRα水平可预测PNS患者对GC的治疗反应。在PNS患者中未发现GRα基因外显子 9有结构异常     

实验性重症肌无力动物模型的建立

从牛骨骼肌中提取乙酰胆碱受体（ＡｃｈＲ），经用１２５Ｉ标记α银环蛇神经毒素（α Ｂｇｔ）鉴定受体活性良好。用ＡｃｈＲ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠建立实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）模型。与对照组比较，小鼠在临床表现、肌电图衰减效应、血清中抗ＡｃｈＲ抗体和脾细胞对ＡｃｈＲ增殖反应检测中，均出现明显的阳性标志。ＥＡＭＧ动物模型的建立为进一步探索重症肌无力（ＭＧ）免疫发病机制和药物防治研究奠定基础     

脑肿瘤周围水肿脑组织及外周血淋巴细胞糖皮质激素受体测定

目的:探讨脑肿瘤患者外周血淋巴细胞及水肿脑组织内糖皮质激素受体(GR)含量及相互关系。方法:应用放射免疫法测定32例脑肿瘤患者外周血淋巴细胞及瘤周水肿脑组织内GR的含量。结果:①手术前后外周血淋巴细胞GR的含量无统计学意义(P>0.05);②外周血淋巴细胞与水肿脑组织内GR含量无相关性;③激素治疗对外周血淋巴细胞及水肿脑组织内GR含量无明显影响。结论:外周血淋巴细胞GR含量不能反映瘤周水肿脑组织内GR含量;激素治疗对瘤周水肿脑组织内GR含量无任何影响。     

糖皮质激素对兔淋巴细胞β受体的影响

作者用自行标记的~(125Ⅰ)-(±)心得静作特异配基测定家兔外周血淋巴细胞β-肾上腺素能受体(β-AR)在糖皮质激素作用前后的变化情况。实验测得正常情况下家兔血淋巴细胞β-AR最大结合容量Bmax=1.36±0.36 fmol/10~6cells,KD=0.16±0.04nM,n=5。注射氢化泼尼松后Bmax=2.11±0.36fmol/10~6cells,KD=0.17±0.02nM,T检验表明两组Bmax值有显著差异,而KD无显著差异;停药三周复测,Bmax=1.22±0.22fmol/10~6cells,KD=0.18±0.07nM,表明已恢复到用药前的水平。     

重症肌无力患者外周血白细胞糖皮质激素受体α、β mRNA表达与激素疗效的关系

 目的 探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血白细胞(peripheral blood white cell,PBWC)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)α、β mRNA表达与糖皮质激素(glucocorticoid,GC)疗效的相关性。方法 采用实时定量RT-PCR方法对43例MG患者和14例正常对照者PBWC中的GR-α、β mRNA表达水平进行检测,发现全身型MG 28例,其中18例对治疗敏感,10例抵抗;眼肌型15例,其中10例对治疗敏感,5例抵抗。结果 在GC治疗敏感的全身型和眼肌型MG患者中,其GR-α mRNA表达水平均明显高于GC抵抗者;而GR-β mRNA在各组间的差异无统计学意义。结论 全身型和眼肌型MG患者的GC抵抗均可能与GR-α mRNA的表达水平下降有关,而与GR-β mRNA的表达水平无明显相关性。     

糖皮质激素对淋巴细胞受体表达的影响

目的观察糖皮质激素(GH)对淋巴细胞受体(GR)及亚型表达的影响。方法将10-5mol/L地塞米松(Dx)在淋巴细胞株Raji和Jurkat上作用3d,采用Westernblot方法检测GR在蛋白质水平上的变化,采用Realtime方法检测GR及其亚型在mRNA水平上的变化。结果应用Dx24h,总蛋白中GR表达明显减少,但在核蛋白中GR表达明显增多;在mRNA水平上hGRα亚型在用药前后无显著变化(P>0.05),hGRβ亚型量极微,几乎不能检测。结论GH影响GR的表达,GR活化后由细胞浆转入细胞核;hGRβ亚型的作用有待进一步研究。     

糖皮质激素对淋巴细胞受体表达的影响

目的 观察糖皮质激素(GH)对淋巴细胞受体(GR)及亚型表达的影响.方法 将10-5 mol/L 地塞米松(Dx)在淋巴细胞株Raji和Jurkat上作用3 d,采用Western blot方法检测GR在蛋白质水平上的变化,采用Real time方法检测GR及其亚型在mRNA水平上的变化.结果 应用Dx 24 h,总蛋白中GR表达明显减少,但在核蛋白中GR表达明显增多;在mRNA水平上hGRα亚型在用药前后无显著变化(P＞0.05),hGRβ亚型量极微,几乎不能检测.结论 GH影响GR的表达,GR活化后由细胞浆转入细胞核;hGRβ亚型的作用有待进一步研究.     

实验性重症肌无力小鼠模型的研究

目的:采用纯化乙酰胆碱受体(acetylcholine receptors, AChR)免疫小鼠建立实验性自身免疫性重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG)动物模型.方法:以亲和层析法从电鳐电器官提取和纯化AChR,并用其免疫接种BALB/C和C57BL/6小鼠,观察接种动物的临床症状、电生理变化以及血清AChR抗体水平的情况.结果:与对照小鼠相比,发病小鼠出现临床肌无力症状,重复神经电刺激(repetitive nerve stimulation, RNS)显示动作电位波幅衰减,血清AChR抗体水平升高.结论:用电鳐电器官提纯TAChR作为免疫原,成功诱导产生EAMG小鼠模型,C57BL/6小鼠较BALB/C小鼠易感.     

乙型肝炎患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体及血浆皮质醇…

应用放射配体结合测定法、放射免疫测定法测定１１０例乙型病毒性肝炎（乙肝）患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）与血浆皮质醇（Ｆ）的变化。其中急性重症肝炎２０例、慢性重症肝炎２０例，慢性迁延性肝炎２０例，慢性活动性肝炎５０例以及对照组４０例。结果表明：各类乙肝患者ＧＲ水平明显低于对照组，而血浆Ｆ高于对照组。同时测定２０例慢性活动性肝炎稳定期ＧＲ、Ｆ的变化，发现随病情的改善ＧＲ水平也升高，而血浆Ｆ无     

烧伤后小鼠血清皮质酮及肝组织糖皮质激素受体水平的变化

目的：探讨烧伤小鼠24h内肝组织糖皮质激素受体时相变化特点,方法：将60只BALB／c小鼠随机分为正常对照组和实验组，实验组造成背部Ⅲ度15％－20％烧伤，分别于伤后2，4，6，12，24h测定血清皮质酮浓度，采用Western blotting ,RT-CPR在蛋白和mRNA水平测定肝组织糖皮质激素受体。结果：烧伤小鼠血清皮质酮浓度4h达到高峰，24h仍未恢复正常；肝组织糖皮质激素受体在蛋白质水平明显降低4－6h降至最低，而mRNA水平仅仅在伤后2h有短暂降低，结论：烧伤应激引起小鼠血清皮质酮水平明显升高，其受体在蛋白及mRNA水平均可降低，但蛋白降低不主要发生在mRNA水平。     

大鼠外周血白细胞糖皮质激素受体的测定

为了测定糖皮质激素受体的结合参数，以利于今后进步探讨ＧＲ改变在某些疾病发生中的作用及对治疗的指导意义。材料和方法以「＾３Ｈ」地塞公为配基，建立了大鼠外周血ＧＲ的放射配体结合测定方法。结果Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合呈一直线，表观结合容量和平衡解离常数分别为（３３８７±３２８）位点细胞和（２。３５±１．１３）ｎｍｏｌ／Ｌ（ｘ±ｓ，ｎ＝５），「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合有明显的甾体特     

糖皮质激素对重症肌无力患者白细胞介素-6和乙酰胆碱受体抗体的影响

目的探讨糖皮质激素(GC)对重症肌无力(MG)患者白细胞介素-6(IL-6)和乙酰胆碱受体抗体(AchRab)的影响.方法采用ELISA法检测32例MG患者在用GC治疗前、治疗3个月后和20例正常对照者的血清IL-6和AchRab水平.结果MG患者血清IL-6和AchRab水平均显著高于对照组(P＜0.01)GC治疗能明显降低其水平(P＜0.05或P＜0.01),且对不同性别、年龄、病程、临床类型和不同预后的MG患者均有作用(P＜0.05或P＜0.01),但在GC治疗前后,预后差的MG患者血清IL-6和AchRab水平始终高于预后好者(P＜0.05).血清IL-6水平在AchRab阳性MG患者高于AchRab阴性患者(P＜0.05),且与AchRab滴度呈正相关(f=0.710,P＜0.01).结论GC可通过抑制MG患者体内IL-6和AchRab的产生,有效调节机体细胞免疫和体液免疫功能.