福尔马林固定组织电镜标本制作法

本文介绍了一种能使福尔马林固定、石蜡包埋的组织达到电镜观察要求的样品制备方法。对于取材新鲜、固定及时的石蜡包埋组织,脱蜡后再以４％戊二醛固定２４ｈ,１％锇酸后固定１￣２ｈ,再常规丙酮脱水、Ｅｐｏｎ８１２包埋、超薄切片,可获得基本上符合诊断要求的超微结构。此外,本文还对该方法的要点及注意事项进行了讨论。     

浅谈病理教学切片制作技术

目的以同一慢性肾盂肾炎组织进行病理教学切片取材、切片制作和常规医检取材,并进行切片制作比较,以探讨病理教学切片取材、切片制作技术的可行性和可靠性。方法昆明医学院第二附属医院病理科提供医检肾脏组织,分2组取材进行切片制作：（1）教学组：病理教学切片要求每个蜡块连续切片150-200片;取材范围为2cm×1cm,组织块厚0．4cm;切片制作全部手工操作,要求组织块固定、冲洗、脱水、透明、浸蜡、切片均与常规医检制片不同。（2）医检组：主要用于病理诊断,取材范围为1cm×1cm,组织块厚0．2cm;切片制作快而好,可用全自动脱水机固定、脱水、浸蜡;切片数量HE染色3～5片,特殊染色和免疫组化10～20片。结果病理教学切片与常规医检切片效果均符合中华医学会切片制作要求。结论病理教学切片制作技术可行、可靠。     

应用Spurr树脂包埋剂结合多次离心技术制备血液电镜标本

目的：探讨Spurr树脂包埋剂是否适合制备血样电镜样品。方法：多次离心技术制备血样，并对原始的Spurr配方进行改良。改变增塑剂乙二醇二甘油醚的量，调节包埋块的硬度，使其适合制备体液样品的电镜超薄切片。结果：超薄切片上红、白细胞排列紧密，每个视野可见多个细胞。与常规的Epon树脂包埋剂相比，明显增加了可供观察的信息量。细胞的结构清晰，未见明显的聚合损伤以及人工假象等。结论：Spurr树脂包埋剂是制备血样电镜标本的良好包埋剂。     

制作和选择锐利玻璃切片刀的体会

在透射电镜生物样品制备过程中,超薄切片是最基本的常规制样技术。要想切出厚度仅有30～40nm的超薄切片并不是一件容易的事。除了要求电镜制样人员在取材、固定、脱水、浸透、包埋等步骤严格保证质量外,最关键的是制作并选择出锐利的玻璃切片刀。现结合自己的制作经验谈几点粗浅体会: 1.制作玻璃刀所用的玻璃条必须为不含杂质的硬质玻璃,其厚度要求为5～6mm,最好选用进口玻璃条。     

制作和选择锐利玻璃切片刀的体会

在透射电镜生物样品制备过程中，要想切出厚度仅有30nm～40nm的超薄切片，最关键的是制作并选择出锐利的玻璃切片刀。现结合我们的制作经验谈几点体会：     

滴管式超薄切片染色法

超薄切片染色是电镜生物样品制备过程中的重要环节,染色的好坏直接影响到电镜观察。在常规铅染色过程中常因空气中微量的二氧化碳介入,与染液中的铅反应,形成颗粒大小不等的碳酸铅沉淀附着在超薄切片上污染切片、污染严重时甚至无法观察。为此,人们为了克服超薄切片的污染问题采用了一系列措施,但这些措施各有不足之处。我们在工作实践中,并在有关文献的启示下,制作了一种封闭式超薄切片染色器,经近1年的使用,效果良     

非生物标本的电镜样品制备及超切技术的探讨

目的：探讨非生物标本的电镜样品制备及超薄切片技术。方法：选择无色透明纤维，黑色纤维及无色透明薄膜等材料，进行脱水，环氧树脂包埋，超薄切片。结果：切出满意切片，并在电镜下拍摄出高质量的照片。结论：根据非生物标本的特性成功地进行了电镜样品制备及超薄切片，使材料科学的超微结构研究成为可能。     

福尔马林固定组织电镜标本制作法

本文介绍了一种能使福尔马林固定、石蜡包埋的组织达到电镜观察要求的样品制备方法。对于取材新鲜、固定及时的石蜡包埋组织,脱蜡后再以4 % 戊二醛固定24 h ,1 % 锇酸后固定1 ～2 h ,再常规丙酮脱水、Epon812 包埋、超薄切片,可获得基本上符合诊断要求的超微结构。此外,本文还对该方法的要点及注意事项进行了讨论     

电镜诊断的快速制样方法

讨论用于临床诊断的透射电镜生物样品快速制样方法。对正常及病变组织进行前固定、漂洗、后固定、漂洗、脱水、浸透及包埋聚合、超薄切片、铀铅双染过程实验研究。从固定到聚合过程只需5h,组织和细胞的各种超微结构保存良好。     

电镜半薄切片染色液的改良及应用

电镜是观察组织细胞超微结构的一种手段。但由于切片太小，有时难于观察到目标结构，为此需大量制备样品造成工作量大且消耗多。为使超薄切片能精确地切到目标部位，在行超薄切片前要做半薄切片进行定位。一般是在超薄切片机上切取数张1—2μm厚的切片进行染色观察。半薄切片的染色常规方法有：甲苯胺兰染色法、天青Ⅱ美兰染色法、H-E染色法和Giemsa染色法等，无论哪种方法都需预先做脱树脂处理，     

制备电镜超薄切片的技巧

超薄切片是电镜技术中基本而关键的步骤,想获得一张完美的切片,要在实际工作中不断摸索、总结并提高。初学者在实际操作中常遇到种种困难。为此,笔者将工作实践中掌握的一些操作技巧予以介绍。１切片前的准备工作１．１包埋块制备迅速准确地取材及固定是制样中首要步骤...     

快速制作常规石蜡切片

常规石蜡切片是临床病理诊断的重要手段。如何在较短的时间内制作出薄而清晰的常规石蜡切片 ,对病理医师作出正确的病理诊断 ,提高诊疗质量具有重要意义。笔者在临床病理实践中 ,吸收前辈的技术经验并结合工作实际 ,将常规的 3ｄ时间出片改为 1ｄ ,并在常规固定、浸蜡、染色、透明中对时间及方法进行适当的调整和改造 ,制作的切片薄、平整 ,染色清晰。1　方法(1 )取材 :每日上午 8点取材 ,组织块厚 0 .1～0 .3 μｍ为宜 ,大块组织取材大小不超过盖玻片 (2 .5ｃｍ) ,小块组织能肉眼观察到即可 ;(2 )固定 :将取好的组织块放入固定液 (2 0 %甲…     

制作石蜡组织切片取材注意事项浅谈

石蜡组织切片制作广泛应用于形态学实验教学用片及医院病理检查切片制作过程中，而取材是切片制作的第一关，取材的好坏直接影响到最后切片制作的效果。     

透射电镜样品取材应注意的问题

医学超微结构是一个不断被刷新的形态学领域,透射式电子显微镜技术被广泛地应用于生物医学的研究中。生物医学的研究对象很多,有组织、细胞、微生物及生物大分子等等,在做这些电镜样品超薄切片前的制样过程时间长而复杂,尤其对取材有严格的要求。标本的质量好坏,直接影响到观察和超微病理诊断的正确性,值得格外重视,因此对标本制备的每一个步骤都要重视。而标本的收集则为制备工作的第一步,它的好坏直接影响到标本制备的后续步骤与最后结果。在实际工作中有些十分珍贵的样品,由于固定原因,样品大小不符和规定或部位不准确,造成超薄切片的定…     

小标本的固定、脱水、包埋技巧

随着现代医学的发展，内镜活检及穿刺活检小标本越来越多，小标本的切片制作已成为外检病理工作的重要问题．我们抽查了本科20余年的小标本切片，对小标本的固定．取材、脱水、透明．浸蜡，包埋、切片．染色等过程进行了总结分析。认为固定不及时和采用95％的酒精固定可影响切片染色效果．采用95％酒精固定以及脱水，透明、浸蜡不当可使组织变脆，影响切片质量．包埋不当则组织不易切全，影响诊断．建议10％中性福尔马林克分固定，专用脱水机处理标本，按粘膜方向进行包埋．多块组织者要使各组织块保持在同一平面，每张切片要捞取不同层次的组织片10片以上．     

小鼠早期胚胎细胞超薄切片制备法

目的 探讨小鼠早期胚胎细胞超薄切片的制备方法，观察不同时期小鼠早期胚胎细胞的超微结构变化。方法 在体视显微镜下固定，清洗小鼠早期胚胎细胞，3％－4％琼脂预包埋，常规脱水，渗透，包埋，超薄切片后，透射电镜下观察。结果 准确性高，只需几个胚胎细胞即能做出超薄切片。结论 电镜下胚胎细胞超微结构保存良好。     

超声快速石蜡切片探讨

在日常病理检验工作中，为满足手术中的需要，常常要求病理科在较短的时间里作出准确的病理报告。目前国内手术中快速病理诊断多用冷冻切片或传统的加温快速石蜡切片技术，但冷冻切片中易出现细胞肿胀等人为假象，而传统加温快速石蜡切片制备过程复杂、安全性差，且易造成组织收缩和变硬。为解决以上问题，我科自2002年应用XD-Ⅵ型快速病理标本处理仪制作快速石蜡切片，方便快捷，收到了良好效果。     

精子超薄切片技术方法探讨

本文采用自己改良的精子超薄切片方法．对人的精子100多例进行了试验。结果表明：此方法比用常规的超薄切片方法切制的优良，在电镜下容易找到精子，完整的精子数目较多，固定良好，细微结构清晰，反差强，成像理想。     

快速石蜡切片取材不当的原因与对策

目的提高快速石蜡切片确诊率。方法选200例快速石蜡切片，通过与常规石蜡切片的诊断结果对照，对每例快速石蜡切片的诊断结果做出评价。分析误诊和未能确诊病例中取材不当的原因并提出纠正方法。结果200例快速石蜡切片确诊186例（93．0％），误诊5例（25％），未能确诊9例（4．5％）。误诊和未能确诊病例中由取材不当所致者10例（71．4％）。取材不当的原因为：①多成份肿瘤取材不全。②未发现隐匿病灶。③未取到良性肿瘤的恶变部位。④未取到受肿瘤侵犯的切线或淋巴结。⑤取材表浅，未达癌灶部位。③所取组织无法用于诊断。结论影响快速石蜡切片诊断的主要原因为取材不当。针对性取材，多点取材和协商取材是纠正取材不当的有效方法。     

三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响

目的对比三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响,优选大、小鼠肠道组织切片固定液。方法选择三种常用的固定液:10%中性福尔马林固定液,Bouin’s固定液,改良Davidson’s固定液,对SD大鼠和KM小鼠小肠组织进行固定,常规制作石蜡切片、HE染色,对比观察其染色效果。结果三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量存在影响,单纯福尔马林固定的切片存在肠粘膜上皮脱落、坏死的假象;Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液则可避免这一假象的出现,而且切片结构更精细、清晰,但是,HE染色的色彩不如单纯福尔马林固定液的鲜艳。结论 Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液固定的大、小鼠肠道组织的石蜡切片质量优于10%中性福尔马林固定液。