山豆根对小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6生长、增殖的影响

目的研究山豆根对小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6生长、增殖的影响。方法培养小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6并随机分为对照组和处理组,对照组用不含药物的RMPI1640培养基进行处理,处理组分别采用含有400μg/ml、500μg/ml、600μg/ml、700μg/ml、800μg/ml山豆根提取物的RMPI1640培养基进行处理。采用细胞增殖抑制实验、黏附实验、侵袭重组基底膜实验、趋化性运动实验观察山豆根提取物对黑色素瘤细胞B16-BL6增殖、黏附、侵袭和转移的影响。结果山豆根提取物终浓度为700、800μg/ml时,B16-BL6细胞增殖生长OD值明显低于对照组(t=2.526,4.371,P0.05);山豆根提取物终浓度为500、600、700、800μg/ml时,黏附能力OD值明显低于对照组(t=4.856,8.515,8.926,12.357,P0.05),侵袭细胞数明显低于对照组(t=4.661,9.824,12.460,16.300,P0.05),趋化性运动细胞数明显低于对照组(t=2.698,3.906,6.012,7.974,P0.05)。结论山豆根具有抑制小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6增殖、黏附、侵袭和转移的能力,且与药物剂量呈依赖性关系。     

当归对黑色素瘤细胞粘附、侵袭、运动和转移能力的影响

目的:研究中药当归对小鼠黑色素瘤高转移细胞B16-BL6生长、粘附、侵袭、运动、转移能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT法测定当归对B16-BL6细胞增殖能力的影响,采用细胞粘附实验、重组基底膜侵袭实验、趋化性运动能力实验以及小鼠黑色素瘤自发性转移模型,观察当归对B16-BL6细胞生长、粘附、侵袭、运动及转移能力的影响。结果:当归水提液能显著抑制B16-BL6细胞的增殖;对B16-BL6细胞与基底膜成分LN的粘附有双向调节的作用;对B16-BL6细胞穿越基底膜的运动能力有显著抑制作用但对B16-BL6细胞侵袭基底膜能力没有显著影响。低剂量当归能明显减少小鼠肺转移结节数目,减轻肺转移程度。结论:当归提取液能够抑制黑色素瘤高转移细胞株B16-BL6的转移,作用可能与其能够抑制B16-BL6细胞外基质的粘附以及降低B16-BL6的运动能力有关。     

莪术对黑色素瘤细胞转移相关能力的影响

目的:研究中药莪术对小鼠黑色素瘤高转移细胞B16-BL6转移相关能力的影响。方法:分别采用cck-8法、细胞粘附实验、重组基底膜侵袭实验、趋化性运动能力实验以及小鼠黑色素瘤自发性转移模型,观察莪术对B16-BL6细胞生长、粘附、侵袭、运动及转移能力的影响。结果:莪术水提液在较高浓度下能显著抑制B16-BL6的增殖;显著抑制B16-BL6对LN的粘附能力,侵袭性及趋化性运动能力,显著抑制黑色素瘤的在体生长及肺转移。结论:莪术水提液能够抑制黑色素瘤高转移细胞株B16-BL6的转移,可能与其能够抑制B16-BL6与细胞外基质的粘附以及降低B16-BL6的侵袭性和运动能力有关。     

狼毒提取液对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞体内转移能力的影响

目的:探讨狼毒提取液对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞转移能力的影响。方法:分别以荷B16小鼠模型和小鼠恶性黑色素瘤B16细胞实验转移为模型,C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、狼毒15.0,20.0 g·kg-1组及环磷酰胺组,检测ip狼毒提取液(EFE)对小鼠B16细胞移植瘤生长和肺转移的影响。免疫组化法分析狼毒提取液对荷B16小鼠移植瘤中抑癌转移因子人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)及促转移因子蛋白激酶B(p-Akt)表达水平的影响。结果:狼毒提取液明显抑制B16细胞的生长,并能显著抑制其肺转移。ip狼毒提取液15.0,20.0 g·kg-1给药14 d,对B16生长的抑制率分别为52.9%,63.6%(环磷酰胺的抑制率为59.5%);对B16细胞肺转移的抑制率分别为37.4%,63.5%(环磷酰胺的抑制率为56.8%)。免疫组织化学法检测结果显示,狼毒提取液组胞质中p-Akt褐黄色颗粒较空白对照组少见,而PTEN胞浆着黄色则较空白对照组多见。结论:狼毒提取液的抗癌转移效果可能部分与其下调促转移因子p-Akt,上调抑癌转移因子PTEN的表达有关。     

蛇葡萄素体内外对小鼠B16黑色素瘤侵袭和转移的抑制作用

目的 :研究蛇葡萄素对B16小鼠黑色素瘤体内外抗侵袭和转移的作用。方法 :B16细胞由尾静脉注入C5 7BL/ 6小鼠体内建立实验性肺转移模型 ,蛇葡萄素以 3个剂量从接种瘤细胞前一天腹腔给药 ,连续 18d ,于停药后第 2天观察肺转移瘤灶数。B16细胞经蛇葡萄素处理 3d ,用具有聚碳酸酯和重建基底膜 (Matrigel)的Tran swell小室侵袭模型 ,研究药物处理后细胞侵袭、趋化运动、粘附能力的改变。结果 :剂量为 15 0 ,200 ,250mg·kg^-1的蛇葡萄素可抑制小鼠肺转移瘤灶形成 ,与溶剂对照组比 ,抑制率分别为 30.97% ,40.58% ,61.16% (P<0.0 5)。经 20,40,80μmol·L^-1各浓度蛇葡萄素处理后 ,对B16细胞侵袭人工基底膜的抑制率分别为 36.06% ,59.58% ,79.09% (P<0 .01) ;对细胞的趋化运动抑制率分别为 51.59% ,56.51% ,66.75% (P<0.01) ;显著降低B16细胞与基质成分层粘连蛋白、纤维粘连蛋白及Matrigel的粘附作用。 结论 :蛇葡萄素具有抑制黑色素瘤的侵袭和转移的作用。     

蜂王浆冻干粉含药血清对小鼠B16BL6黑色素瘤细胞增殖的影响

目的:观察蜂王浆冻干粉含药血清对小鼠B16BL6黑色素瘤细胞增殖的影响。方法:蜂王浆冻干粉大鼠灌胃1d、3d10d的含药血清与小鼠B16BL6黑色素瘤细胞体外培养,MTT比色法观察对细胞增殖的影响。结果:给药10d组血清能显著抑制B16BL6细胞的增殖,不灭活血清作用强于灭活血清,其抑制效应呈剂量依赖性,40%浓度作用最强。而给药1d、3d组血清抑制效应不明显。结论:蜂王浆冻干粉含药血清能抑制B16BL6细胞的增殖,其效应随大鼠给药时间的延长而增强,提示蜂王浆刺激机体产生自体活性物质在其抑瘤效应中发挥重要作用。     

丹参不同有效成分对黑色素瘤细胞增殖活力和细胞周期影响的研究

目的:检测不同浓度的丹参酮I、丹参酮IIa、隐丹参酮对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖活力的影响;测定丹参酮I、丹参酮IIa、隐丹参酮对B16细胞周期的影响。方法:采用甲基噻唑基四唑比色法(MTT法)及显微镜细胞观察法检测丹参酮I、丹参酮IIa、隐丹参酮对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖的抑制作用。通过流式细胞仪检测丹参三种成分对B16细胞周期的影响。结果:不同浓度(2.5μg/m L、5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L、30μg/m L)的丹参酮I、丹参酮IIa和隐丹参酮均能显著抑制黑色素瘤细胞B16的增殖活性,且呈明显的剂量效应和时间效应。丹参酮I的抑瘤效果最显著,其72 h的IC50仅为0.25μg/m L。高浓度(30μg/m L)的丹参酮I、丹参酮IIa和隐丹参酮均可在作用24 h后抑制小鼠黑色素瘤B16细胞的有丝分裂,主要阻滞于G1期,但其作用效果不显著。结论:不同浓度(2.5μg/m L、5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L、30μg/m L)的丹参酮I、丹参酮IIa和隐丹参酮均能显著抑制黑色素瘤细胞B16的增殖活性并阻滞其细胞周期,且具有剂量依赖性。高浓度(30μg/m L)的丹参酮I和丹参酮IIa均可显著引起小鼠黑色素瘤B16细胞的凋亡,其中丹参酮I效果最显著。     

南蛇藤对鼠黑色素瘤B16BL6细胞增殖抑制及凋亡诱导作用研究

目的：探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物对鼠黑色素瘤B16BL6细胞增殖的抑制作用以及对细胞凋亡的影响。方法：采用MTT法测定细胞增殖,通过AO/EB染色法观察细胞的凋亡形态,应用流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果：南蛇藤乙酸乙酯提取物可以抑制鼠黑色素瘤B16BL6细胞增殖,诱导其凋亡,呈剂量依赖性,并且与药物作用时间呈正相关。结论：南蛇藤乙酸乙酯提取物能够抑制鼠黑色素瘤B16BL6细胞增殖,诱导其凋亡。     

茯苓多糖对B16黑色素瘤人工肺转移模型的影响

[目的]探讨茯苓多糖对B16黑色素瘤小鼠人工肺转移的影响,并对其作用机制进行初步研究。[方法]C57BL/6小鼠接种B16黑色素瘤,分为茯苓多糖高、低剂量组、顺铂组、模型组,茯苓多糖高、低剂量组分别给予每只小鼠茯苓多糖0.5 mg、0.33 mg,顺铂组给予顺铂0.04 mg,模型组给予生理盐水,接种瘤细胞后第2天开始尾静脉注射给药,隔天给药1次。观察小鼠一般状态,造模后21 d取肺,计数肺表面转移灶个数、HE染色检测肺微小转移灶个数,并检测外周血白细胞数量及脾质量、脾指数。[结果]顺铂能够抑制肺转移,同时降低小鼠体质量、外周血白细胞数量、脾质量和脾指数。而茯苓多糖高、低剂量组对B16荷瘤鼠的体质量无明显影响,茯苓多糖高剂量可明显降低肺表面转移灶个数,茯苓多糖高、低剂量可减少肺微小转移灶个数,高剂量组外周血白细胞数量明显降低,低剂量组与模型组无统计学差异,低剂量可增加B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数,高剂量对B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数无明显影响。茯苓多糖高、低剂量组脾质量和脾指数均高于顺铂组。[结论]茯苓多糖能够抑制尾静脉注射B16荷瘤小鼠肺转移,增加其脾质量和脾指数,无明显增加其外周血白细胞数量的作用,推测活化外周血白细胞,增强免疫功能可能参与茯苓多糖抑制肿瘤转移的机制。     

三氧化二砷抑制小鼠B16黑色素瘤肺转移作用的研究

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）对小鼠B16黑色素瘤肺转移的抑制作用。     

丹参药材指纹图谱研究

目的:对天士力制药集团商洛丹参基地的丹参进行指纹图谱研究,并与市售丹参药材指纹图谱进行比较。方法:HPLC法建立丹参水溶性提取物的指纹图谱。结论:10批商洛丹参药材指纹图谱均符合国家药品监督局2000年颁发的关于中药材指纹图谱技术要求,并与市售丹参药材指纹图谱有明显区别。     

复方丹参注射液增强白血病细胞放射敏感性作用的研究

探讨复方丹参注射液对白血病细胞放射敏感性的影响。方法：采用半固体琼脂集落选培养及流式细胞仪法，观察ＨＬ６０细胞株及新鲜白血病细胞经过药物作用后，其放射敏感性的变化。结果；复方丹参注射液与ＨＬ６０细胞混合培养后照射，细胞存活曲线斜率的倒数，放射剂量为２Ｇｙ时的活存比率分别由１．５３，０．３４降至０．９３，０．１２，细胞凋亡显著增多；     

丹参的微波提取研究

[目的]研究用微波提取丹参优化工艺。[方法]以丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA和水溶性成分丹参素、原儿茶醛为指标，用均匀试验设计法对丹参的微波提取工艺进行优化。并与传统工艺比较。[结果]丹参以6倍量95％乙醇、微波功率320W提取30min，药渣再以12倍量水，320W微波提取两次对丹参酮ⅡA，丹参素和原儿茶醛三种指标成分的提取量，相当于或优于现行法的提取量。[结论]用微波提取丹参酮ⅡA较易，而对水溶性成分丹参素和原儿茶醛相对所需时间较长。     

丹参注射液对硫唑嘌呤大鼠肝损伤的保护作用

大鼠ipAza15mg/(kg·d)(Ⅰ组)及合用丹参8g/(kg·d)(Ⅱ组).观察血清肝功能指标及MDA、全血GSH的变化。结果1周和2周时Ⅰ组ALT,AKP,MDA均明显升高,ALB.GSH明显降低;Ⅱ组接近正常对照组水平。表明丹参对Aza的肝损伤有保护作用。     

丹参对肝癌转移复发防治作用的研究

目的：观察丹参对ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株（７７２１细胞）侵袭粘附能力和对裸鼠人肝癌切除术后转移复发的影响。方法：以流式细胞仪测量丹参对７７２１细胞表面细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ）－１）的表达的影响。经细胞侵袭实验观察央参地ＳＭＶＣ－７７２１细胞侵袭运动能力及对己与纤维连接蛋白（ＦＮ）粘附的７７２１细胞脱落的影响。以ＭＴＴ法测量丹参对７７２１细胞与ＦＮ粘附的影响。以细胞粘附实验观察丹在对７７２     

丹参药材HPLC指纹图谱研究

目的建立丹参药材的高效液相指纹图谱分析方法。方法采用反相高效液相色谱法，以梯度洗脱的方式，60min内在同一谱图中同时完成水溶性成分和脂溶性成分的指纹图谱建立。结果通过对11批江苏洋马镇GAP药材基地的丹参药材的测定，标定了14个共有峰，并对其中具有代表性的活性成分丹参素，原儿茶醛，丹参酮ⅡA与S峰（丹酚酸B）的相对峰面积进行了限定。结论该方法准确可靠，重现性好，为更好地控制丹参药材的内在质量提供了科学依据。     

不同产地丹参的HPLC和TLC图谱分析

目的:根据丹参药材的HPLC和TLC图谱,分析比较不同产地丹参成分的异同。方法:采用HPLC和TLC法测定不同产地的丹参成分。结果:不同产地丹参的成分不一,含量不同,其中代表性成分丹参酮ⅡA含量差异较大,山东青岛的丹参酮ⅡA含量最高,是陕西商洛(含量最低)含量的3.5倍。结论:两种方法鉴别特征很显著,且操作简便,重现性好。该测定结果可为临床和科研单位选用丹参提供参考依据。     

丹参山楂药对对大鼠动脉粥样硬化的影响

目的:观察丹参和山楂提取物(水浸膏)单煎及其合煎对大鼠动脉粥样硬化(AS)的影响。方法:Wistar大鼠随机分为对照组和造模组,造模组在高脂饮食的基础上采用腹腔注射VD3叠加卵清白蛋白激发免疫反应的方法诱发大鼠AS模型。造模8周确定造模成功后将造模组分为模型组、血脂康组、丹参组、山楂组、丹参山楂合煎剂组,各组灌胃给予相应药物4周。实验12周后检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量,血管活性物质一氧化氮(NO)、血管内皮素(ET)、6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)以及炎性因子C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。苏木素伊红(HE)染色观察主动脉组织形态学变化。结果:与模型组相比,各给药组TC,TG,LDL-C,MDA,ET,TXB2水平以及TXB2/PGF1α比值降低,HDL-C,SOD,NO,6-keto-PGF1α水平升高,CRP,IL-6,IL-8含量有不同程度的降低,对于TNF-α的释放未见明显影响。各药可见不同程度的抑制主动脉血管壁病理变化。结论:丹参山楂药对可以干预大鼠AS的形成,同时降低血脂水平,其作用可能与抗氧化作用及抑制炎性因子的释放有关。     

丹参对成纤维细胞成骨的扫描电镜观察

目的:阐明丹参对成纤维细胞成骨功能的影响。方法:用皮肤纯化的成纤维细胞作体外培养,分丹参组与对照组,在扫描电镜下观察。结果:0.2%、0.3%浓度的丹参能明显促使成纤维细胞由梭形向鳞片形方向转化,细胞量增多,胶原合成分泌增加,但未见骨结节形成。结论:适当浓度的丹参对成纤维细胞有促增殖、促分化、增加其功能活性的作用,但不能作为诱导因子来诱导成纤维细胞成骨潜能的显示。