导向大黄素脂质体对急性重症胰腺炎胰腺腺泡细胞自体吞噬现象研究

本研究观察导向在黄素脂质对急性重症胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞中自体吞噬现象的影响。用超微结构，ＣＭＰ酶细胞化学和形态计量技术观察重症状胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞和自体吞噬现象，并观察应用导向大黄素脂质体后的自体吞噬现象。结果示发病３小时后，细胞浆内自噬体和自体吞噬泡增多，初级溶酶体比例高于次级溶酶体，６小时后，自体吞噬泡数量及体积明显增多增大，内含物为细胞器或髓鞘样结构，ＣＭＰ酶阳性反应部位以次级溶酶体为     

类固醇激素与中枢神经系统

以往认为，皮质醇、皮质酮、雄激素、雌激素和孕激素等类固醇激素仅由肾上腺皮质、性腺和胎盘组织合成与分泌。近年来的研究发现，中枢神经系统也能合成与分泌各种类固醇激素。两种来源的类固醇激素相互配合，共同调节机体新陈代谢、生长发育、生殖等各种生命活动；维持体内各器官、系统功能的正常进行。同时证实，不仅中枢神经系统调控外周类固醇激素的分泌，外周源性类固醇激素也调控中枢神经系统的功能活动。     

痢疾杆菌细胞内存活机制研究进展

细菌侵染宿主细胞后,宿主对入侵细菌的识别与杀灭决定了细菌的命运。病原菌侵入宿主细胞后,通过改变吞噬体囊泡进入宿主细胞的胞质内,从溶解的吞噬体逃逸以获得复制的场所。然而,这些细胞内的外来者,受到宿主固有免疫系统的监视,如由Nod/CARD家族蛋白介导的、通过激活NF-κB诱导的炎症反应。最近的研究表明,自体吞噬作用,一种主要降解细胞内蛋白质和(或)细胞器的降解系统,同样可以识别入侵细菌。事实上,除非细菌能逃逸自吞噬体膜的包围,否则最终通过自体吞噬作用由自吞噬溶酶体降解。本文综述了痢疾杆菌感染上皮细胞的最新进展,集中讨论痢疾杆菌对抗自体吞噬降解并在细胞内存活的策略。     

酮康唑对牛肾上腺皮质培养细胞类固醇激素分泌的抑制作用

酮康唑对牛肾上腺皮质培养细胞类固醇激素分泌的抑制作用吕卓人马秀萍张进安我们以牛肾上腺皮质单层培养细胞为模型，观察酮康唑（ＫＣ）对皮质醇、醛固酮和哇巴因分泌的影响，以探讨其在临床上作为类固醇激素抑制剂的可能性和新的应用前景。一、材料和方法１．牛肾上腺皮...     

人早孕胎盘滋养细胞培养及hCG分泌

人胎盘绒毛滋养细胞是一种特殊的内分泌细胞,在整个妊娠期间都有旺盛的内分泌功能,可分泌多种含氮激素和类固醇激素,这些激素共同作用,调节胎儿和母体生理功能,在妊娠维持中起了重要作用。本实验室建立了一种简便经济,可靠的早孕胎盘滋养细胞离体培养方法,可用来研究胎盘功能的调控。我们观察了肾上腺素、促性腺激素释放激素(GnRH)及甾体激素对滋养细胞分泌 hCG 的影响。     

肾上腺的CT检查方法

一肾上腺的生理功能 肾上腺虽是一个腺体,但其皮质和髓质从胚胎发生、细胞成分、分泌的激素以及调节机制上却是两个独立的内分泌腺,其生理功能主要通过其分泌的激素或介质发挥作用.肾上腺皮质激素隶属于类固醇激素,均以环戊烷多氢菲为基础,以四个环相连.这类激素包括球状带分泌的以11-去氧皮质酮为代表的盐皮质激素;由束状带分泌的以氢化可的松和可的松为代表的糖皮质激素;由网状带分泌的雄激素和雌激素为代表的性激素.盐皮质激素的主要作用是调节水电解质平衡,具有强烈的储钠排钾作用;糖皮质激素的主要作用是调节糖、蛋白质、脂肪的代谢,动员脂肪,促进蛋白质分解,糖原异生等.     

自噬及其作用的相对性

自噬,“自我吞噬”,即细胞能够吞噬包裹细胞自体成分或外来病原体,用于降解、清除或能量循环.这一现象所涉及的两个重要阶段——自噬体形成和溶酶体降解内容物,其发现及机制分别获得了2016年和1974年的诺贝尔生理学或医学奖,彰显这一生命现象的重要性.从酵母到人类细胞,自噬这一保守的细胞过程均发挥着重要的生理功能.自噬功能异常会导致很多病理性改变,与感染、肿瘤、神经退行性改变及缺血性疾病等都有着密切和重要的关系;并且在不同疾病或同一疾病的不同病理阶段,自噬发挥着复杂甚至相对的作用.     

库欣综合征的诊疗

正库欣综合征是一组由皮质醇异常升高所引起的体征和症状。皮质醇是一种类固醇激素帮助人体对机体和情绪的应激做出反应,调节血压和食物代谢。皮质醇分泌具有日间变动的特点,早8点达高峰,午夜最低。皮质醇由皮质,即肾上腺的外层合成。肾上腺是位于肾脏顶部的小腺体,呈三角形,它是内分泌系统,合成和分泌激素,调节机体的多个器官和组织。肾上腺皮质合成类固醇激素、醛固酮及雄激素,雄激素主     

抑制素(Inhibin)

男性分泌FSH的调节是个复杂的过程。用类固醇抑制FSH只有在其剂量也抑制黄体激素(LH)时才发生。也观察到用X线选择性破坏生精细胞,结果FSH升高而LH不升高。曾有人认为睾丸产生一种激素调节垂体FSH的产生。Mastins和Rocha 1951年称此种激素为雄激素(Androhormone)。1952年McCullagh称之为抑制素,1942年 Klinefelter等称之为X-激素。选择性破坏生精细胞的方法方法很多,其结果是使FSH水平升高。方法有:X-线照射,首先是1932年Mottram和Cramer应用照射39     

胃肠激素

一、前言内源性信息传递物质(化学信使),如果不是在腺体内生成,而是在器官组织中或分散在全身的单个细胞内生成者,都称为组织激素(Eeldberg,1955)。有人把胃肠激素看做是组织激素的一种,因为胃肠激素是由散在胃肠粘膜中的内分泌细胞在受到摄入食物和消化食糜的刺激时分泌的,它们调节消化道的运动和消化腺的分泌。胃肠激素可通过血流的转运到     

自噬在槲皮素诱导人乳腺癌MCF-7细胞死亡中的作用

目的研究自噬在槲皮素诱导的人乳腺癌MCF-7细胞死亡中的作用。方法用不同浓度的槲皮素处理人乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法测定槲皮素对MCF-7细胞增殖的抑制作用;应用MDC荧光染色观察给药后MCF-7细胞的自噬征象;应用JC-1荧光染色观察给药后MCF-7细胞的线粒体变化;检测乳酸脱氢酶（LDH）漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）阻断自噬后槲皮素抑瘤作用的变化。结果槲皮素对MCF-7细胞增长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;槲皮素给药后早期可诱导MCF-7细胞发生自噬及线粒体变化;在槲皮素给药前和给药后阻断自噬,槲皮素对MCF-7细胞的细胞毒性作用均增强。结论槲皮素能明显抑制MCF-7细胞的生长,并诱导其发生自噬,伴随线粒体发生变化。由槲皮素引发的自噬能够明显保护MCF-7细胞,减少因槲皮素导致的细胞死亡。     

Liraglutide prevents high glucose level induced insulinoma cells apoptosis by targeting autophagy

Background  The pathophysiology of type 2 diabetes is progressive pancreatic beta cell failure with consequential reduced insulin secretion. Glucotoxicity results in the reduction of beta cell mass in type 2 diabetes by inducing apoptosis. Autophagy is essential for the maintenance of normal islet architecture and plays a crucial role in maintaining the intracellular insulin content by accelerating the insulin degradation rate in beta cells. Recently more attention has been paid to the effect of autophagy in type 2 diabetes. The regulatory pathway of autophagy in controlling pancreatic beta cells is still not clear. The aim of our study was to evaluate whether liraglutide can inhibit apoptosis and modulate autophagy in vitro in insulinoma cells (INS-1 cells).

Methods  INS-1 cells were incubated for 24 hours in the presence or absence of high levels of glucose, liraglutide (a long-acting human glucagon-like peptide-1 analogue), or 3-methyadenine (3-MA). Cell viability was measured using the Cell Counting Kit-8 (CCK8) viability assay. Autophagy of INS-1 cells was tested by monodansylcadaverine (MDC) staining, an autophagy fluorescent compound used for the labeling of autophagic vacuoles, and by Western blotting of microtubule-associated protein I light chain 3 (LC3), a biochemical markers of autophagic initiation.

Results  The viability of INS-1 cells was reduced after treatment with high levels of glucose. The viability of INS-1 cells was reduced and apoptosis was increased when autophagy was inhibited. The viability of INS-1 cells was significantly increased by adding liraglutide to supplement high glucose level medium compared with the cells treated with high glucose levels alone. 

Conclusions  Apoptosis and autophagy were increased in rat INS-1 cells when treated with high level of glucose, and the viability of INS-1 cells was significantly reduced by inhibiting autophagy. Liraglutide protected INS-1 cells from high glucose level-induced apoptosis that is accompanied by a significant increase of autophagy, suggesting that liraglutide plays a role in beta cell apoptosis by targeting autophagy. Thus, autophagy may be a new target for the prevention or treatment of diabetes.

     

自噬与2型糖尿病相关性的研究进展

自噬是细胞对内外界环境压力变化的一种反应,是细胞内的物质成分被溶酶体降解的过程。近年研究发现自噬在2型糖尿病的发生发展中起着重要作用,与胰岛13细胞的数量和胰岛素的分泌密切相关,是一种细胞的自我保护机制,自噬的激活与调节对于维持胰岛B细胞的结构和功能方面必不可少。此外,研究发现一些治疗2型糖尿病的药物也参与了自噬途径的调节。因此,本文就自噬在维持胰岛13细胞结构和功能中重要作用,自噬通路的调节,以及自噬与2型糖尿病药物的相关性等方面进行综述。     

自噬在白藜芦醇调节胶质瘤干细胞辐射敏感性中的作用

目的研究白藜芦醇联合x射线对胶质瘤干细胞辐射抗性的影响。方法采用甲基四唑蓝（MTT）法检测白藜芦醇和X射线对胶质瘤干细胞增殖的抑制作用;光镜下观察胶质瘤干细胞的形态变化;采用Hoechst荧光染色观察凋亡小体;采用单丹磺酞尸胺（MDC）染色和Westernblot分析自噬在x射线诱导胶质瘤干细胞死亡中的作用。结果MTT检测结果显示,与阴性对照组和单独X射线处理组相比,白藜芦醇联合X射线可明显抑制胶质瘤干细胞生长（均P〈0．05）;在加入自噬抑制剂3-MA后,胶质瘤干细胞抑制率下降（P〈0．05）。显微镜下观察联合处理组的细胞形态,细胞不再成球形生长;Hoeehst33258荧光染色结果显示,联合处理组细胞出现凋亡形态;MDC染色结果显示,联合处理组细胞出现大量自噬泡;Westernblot分析结果显示,联合处理组细胞的Bel一2表达减少（P〈0．01）,LC3Ⅱ／LC3I的比值增大（P〈0．01）。结论白藜芦醇可提高胶质瘤干细胞的辐射敏感性,白藜芦醇联合X射线处理可诱导胶质瘤干细胞发生凋亡和自噬;自噬对于提高胶质瘤干细胞的辐射敏感性起到重要作用。     

p62基因缺失对人脂肪间充质干细胞成脂的促进作用

目的：探讨p62基因缺失对人脂肪间充质干细胞（hADSCs）自噬活性的影响,阐明脂肪分化的分子机制。方法：应用Ⅰ型胶原酶消化法从人大腿皮下脂肪抽吸液中分离培养hADSCs,使用80 μmol·L^-1油酸（OA）联合地塞米松和胰岛素对hADSCs进行成脂诱导;将hADSCs分为对照组和p62基因缺失组,p62基因缺失组hADSCs转染p62 shRNA慢病毒载体,对照组hADSCs转染hADSCs空载体。采用CCK-8实验绘制2组细胞的生长曲线并观察细胞增殖活性变化;应用尼罗红染色观察脂滴的形成（尼罗红脂滴染色阳性细胞数）,Western blotting法检测成脂标志转录因子C/EBPα和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型/微管相关蛋白1轻链3Ⅰ型（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）蛋白表达,磺酰成二胺（MDC）染色检测2组细胞成脂中的自噬活性（MDC染色阳性细胞数）,采用LC3与Mitotracker Red荧光共定位检测2组细胞的线粒体自噬活性,使用环孢菌素A（CsA）分别抑制2组细胞线粒体自噬活性并进行成脂诱导,光镜下计数含脂滴细胞数。结果：分离培养的细胞呈多角形或梭形,传代后细胞呈漩涡状排列;OA诱导hADSCs成脂后,细胞内有大量脂滴形成。CCK-8实验,在培养6 d后p62基因缺失组细胞增殖活性较对照组明显降低（P<0.01）。2组细胞诱导成脂后,与对照组比较,p62基因缺失组hADSCs中尼罗红脂滴染色阳性细胞数增多,C/EBPα蛋白表达水平升高（P<0.01）,MDC染色阳性细胞数明显升高（P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平升高（P<0.01）,细胞中LC3的点状化和颗粒化增多,与线粒体的共定位现象增加。使用CsA抑制线粒体自噬后,光镜下观察,p62基因缺失组含脂滴细胞数降低到与对照组接近的水平。结论：p62基因缺失可通过增强总自噬及线粒体自噬促进hADSCs的成脂。     

药物介导的自噬改变对肿瘤细胞放射敏感性的影响

放射治疗诱导的自噬与导致细胞死亡的凋亡起到的作用不同,其具有既可以导致细胞死亡又可以保护细胞生存的双重性。自噬这一过程在放射治疗和辐射毒性中的抗肿瘤效应还不明确。一系列药物试验已经证实诱导或者抑制自噬,直接影响细胞毒性和放射治疗的效果,同时发生的目标性自噬和凋亡似乎进一步增强了放射治疗的抗肿瘤效应。本文就调节放射诱导的自噬在肿瘤细胞中作用的研究进展进行简要综述。     

自噬缺陷在动脉粥样硬化中作用研究进展

自噬是一种亚细胞过程,在溶酶体降解蛋白质受损细胞器如线粒体过程中发挥重要作用。它对蛋白质和线粒体功能的调节和维持细胞稳态至关重要,而其失调则涉及多种疾病,如动脉粥样硬化。最近有研究表明,无论动脉粥样硬化斑块中是否存在自噬刺激因子（例如活性氧、氧化脂质和细胞因子）,动脉粥样硬化进展期间都存在自噬缺陷。本综述重点介绍了动脉粥样硬化自噬缺陷的原因和后果,特别是对巨噬细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞的影响,对治疗动脉粥样硬化的自噬靶标可能具有重要意义。     

低氧诱导的大鼠嗅黏膜来源嗅鞘细胞自噬及其对细胞增殖能力的影响

目的: 探讨低氧诱导SD新生鼠嗅黏膜来源嗅鞘细胞(OECs)自噬的发生,分析自噬对细胞增殖能力的影响。方法: 采用酶消化法和改良的Nash差速贴壁法分离提纯培养SD新生鼠嗅黏膜来源OECs,利用免疫荧光法鉴定细胞属性和纯度。以低氧条件(氧浓度为2％)培养的SD新生鼠嗅黏膜来源OECs作为低氧处理组,以正常条件下培养的OECs作为对照组,采用自噬抑制剂3-MA处理后的OECs继续在低氧条件下培养作为3-MA低氧处理组。相差显微镜下观察各组细胞形态;Western blotting法检测对照组、4h低氧处理组和8h低氧处理组OECs中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、自噬标志蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ和自噬标志基因Beclin-1的蛋白表达水平;采用CCK-8法检测对照组、3-MA低氧处理组、低氧处理组和3-MA低氧处理组OECs的增殖能力。结果: 在对照组、低氧处理组和3-MA低氧处理组经分离提纯的OECs均呈梭形,表现为典型的双极、三极细胞形态,3组间无明显差异。OECs呈NGFRp75和GFAP阳性,纯度为87%;与对照组比较,低氧处理组OECs中HIF-1α表达水平升高(P<0.05),LC3Ⅰ/Ⅱ和Beclin-1表达水平升高(P<0.05);与低氧处理组比较,3-MA低氧处理组OECs增殖能力降低。结论: 低氧诱导的自噬可降低SD新生鼠嗅黏膜来源OECs的增殖能力。     

CD147通过Beclin-1抑制前列腺癌PC-3细胞自噬

目的: 通过建立饥饿诱导的自噬模型,探讨CD147对前列腺癌PC-3细胞自噬作用的影响,并阐明其作用机制。 方法: 通过饥饿诱导方式建立自噬细胞模型。实验分为阴性对照组和RNAi干扰CD147组(PC-3/shCD147组)。GFP-LC3质粒转染观察细胞自噬斑点形成情况,免疫印迹技术检测自噬蛋白LC3和Beclin-1表达,台盼蓝排斥实验检测细胞死亡率。 结果: 与阴性对照组比较,PC-3/shCD147组GFP-LC3斑点细胞数增加(P<0.01),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ(P<0.01)和Beclin-1(P<0.05)表达水平升高;与阴性对照组(22.3%±3.5%)比较,PC-3/shCD147组细胞死亡率(38.4%±3.1%)明显升高(P<0.05)。 结论: 在前列腺癌PC-3细胞中,CD147通过Beclin-1抑制饥饿诱导的自噬过程,减少细胞自噬的发生。     

JAK2/STAT3信号通路对胃癌血管生成的影响

目的探讨酪氨酸激酶2/信号转导和转录激活因子3（JAK2/STAT3）信号通路对胃癌血管生成的影响。方法选择胃癌根治术病人30例,收集胃癌组织、癌旁组织以及正常组织,体外检测JAK2/STAT3信号通路对细胞自噬以及细胞活力的影响,以及自噬蛋白对胃癌细胞分泌血管生成因子的影响。结果胃癌组织中pJAK2、pSTAT3表达水平高于癌旁组织及正常组织;加入JAK2/STAT3信号通路阻滞剂后,胃癌细胞自噬能力、细胞活力明显减弱（P < 0.01）;过表达自噬蛋白Beclin-1后胃癌细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）和血小板衍化生长因子（PDGF）水平明显高于抑制组（P < 0.01）;而过表达自噬蛋白LC3后,VEGF、PDGF水平与抑制组差异无统计学意义（P>0.05）。结论JAK2/STAT3信号通路通过调控细胞自噬影响胃癌微血管生成能力,可能是通过激活Beclin-1提高VEGF、PDGF的表达水平。