泛素-蛋白酶体途径对烫伤脓毒症大鼠肠道炎症反应与屏障功能的作用研究

目的研究泛素-蛋白酶体途径对烫伤脓毒症大鼠肠组织核转录因子-κB（NF-κB）活化、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达以及血浆二胺氧化酶（DAO）活性的作用。方法采用30％总体表面积（TBSA）Ⅲ度烫伤合并内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烫伤哝毒症。60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烫伤哝毒症模型组、泛素-蛋白酶体抑制剂N-乙酰亮氨酰亮氨酰正亮氨酸（ALLN）组、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯（PDTC）组。采用凝胶电泳迁移率改变分析法（EMSA）分析肠组织NF—κB活性；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肠组织TNF-α含量；采用分光光度法检测血浆DAO活性。结果各组肠组织NF—κB活性于伤后1h均明显增强，并达到高峰（P均〈0．01）．之后呈现下降趋势；两种抑制剂均可显著降低伤后1h和2hNF-κB的活性。ALLN可明显降低伤后1h肠组织中TNF—α含量（P〈0.01）。两种抑制剂对伤后1h和2h血浆I）AO活性均无明显影响。结论早期使用泛素-蛋白酶体抑制剂可降低烫伤脓毒症大鼠肠组织NF—κB活性．降低肠组织中炎症反应．但对肠组织屏障功能无保护作用。     

烫伤脓毒症大鼠肾脏核转录因子-κB活化与肾损伤关系的研究

目的研究烫伤脓毒症大鼠肾脏核转录因子-κB (NF-κB)活化与肾损伤的关系.方法采用30%总体表面积Ⅲ度烫伤加内毒素攻击制备烫伤脓毒症大鼠模型.54只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烫伤脓毒症1、2、6、12和24 h组,烫伤脓毒症1、2和6 h+NF-κB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)组.采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测肾组织NF-κB活性;采用酶联免疫吸附法检测血浆及肾组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化;采用自动生化分析仪检测血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)含量.结果肾组织NF-κB活性于烫伤脓毒症后1 h明显增强并达到高峰(P<0.01),PDTC可显著降低烫伤脓毒症后1 h NF-κB的活性.烫伤脓毒症后1 h和2 h血浆及肾组织中TNF-α水平均明显增高(P均<0.01),PDTC可显著降低伤后血浆TNF-α水平(P均<0.01),对肾组织中TNF-α水平影响不明显.烫伤脓毒症后BUN及SCr含量均明显增高(P均<0.01),PDTC对BUN和SCr含量均无显著影响.结论 NF-κB抑制剂可降低烫伤脓毒症大鼠肾组织NFκB活性,但对肾脏功能无明显保护作用.     

性别差异对脓毒症大鼠肝脏核因子-κB活化的影响

目的探讨性别差异对脓毒症大鼠肝脏组织核因子-kB(NF-kB)活化的影响。方法取40只清洁级Wistar大鼠,雌雄各半,采用腹腔注射内毒素(LPS)5mg/kg制作脓毒症大鼠模型,利用凝胶阻滞迁移分析方法(EMSA)检测肝脏组织NF-kB的活化情况,同时检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及雌二醇(E2)含量。结果正常雌雄性大鼠肝脏组织有NF-kB的微弱活化,同时血清中TNF-α及ALT含量较少,各项指标在两组大鼠间差异无显著性(P＞0．05);脓毒症状态下各项指标明显升高,但是雌性大鼠各项指标的变化明显低于雄性(P＜0．01);相关分析表明,雌雄性脓毒症大鼠肝脏组织NF-kB的活化以及血清中TNF-α,ALT含量均与相应组别大鼠血清中E2含量呈显著负相关(P＜0．05)。结论脓毒症大鼠肝脏组织NF-kB的活化及血清中TNF-α,ALT含量存在性别差异,内源性雌激素可能介导了对雌性脓毒症大鼠肝脏的保护作用。     

核因子κB在黄芩苷对脓毒症大鼠肾脏保护中的作用

目的：探讨核因子κB（NF-κB）在黄芩苷对脓毒症大鼠肾脏保护中的作用及其机制。方法：采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备SD大鼠脓毒症模型。实验大鼠随机分成假手术组、模型组、黄芩苷干预组（每组各24只）,每组大鼠再随机分为CLP术后0h、3h、6h、24h4个亚组（每组各6只）。黄芩苷组在造模后立即经腹腔注射黄芩苷120mg/kg,共2mL液体,假手术组和模型组则腹腔注射等量0.9%氯化钠液。每组大鼠在4个时间点（CLP术后0h、3h、6h、24h）采集血标本和肾组织标本。HE染色观察肾组织病理改变;检测血清肌酐水平和用免疫组织化学法测定肾组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）、NF-κB在肾组织内的水平。结果：与假手术组相比,模型组大鼠血清肌酐浓度及肾组织TNF-α、NF-κB水平均显著升高（P〈0.05）,术后3h即开始升高并持续至术后24h;术后24h肾组织HE染色显示肾小管区大量炎症细胞浸润。与模型组相比,黄芩苷干预组术后3h、6h和24h血清肌酐浓度及肾组织TNF-α、NF-κB水平均显著降低（P〈0.05）;肾脏组织的炎症病理改变也显著减轻。结论：脓毒症大鼠早期血清肌酐升高与肾组织中TNF-α、NF-κB水平升高有关;脓毒症早期应用黄芩苷治疗对脓毒症大鼠肾脏保护作用的机制可能与降低肾组织NF-κB水平,减轻炎性反应有关。     

线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用及其可能机制.方法 72只SD大鼠随机(随机数字法)分为2组:(1)阴性对照组18只,腹腔注射无菌生理盐水;(2)脓毒症组,按大肠杆菌内毒素注射后6、12、24 h分为3个亚组,各18只.取心脏组织,光镜和电镜下观察组织病理学和超微结构的变化,TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数,免疫印迹法检测核转录因子-κB (NF-κB) p65的表达,黄嘌呤氧化酶法测定线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法检测线粒体还原型谷胱甘肽(GPx)活性,硫代巴比妥酸法测定线粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,OxyBlot TMas蛋白氧化检测试剂盒观察线粒体蛋白氧化.结果 脓毒症大鼠心肌有炎症细胞浸润,细胞水肿及空泡形成,并且在24 h最明显;心肌细胞凋亡指数和核蛋白NF-κB p65活化均显著增加(P＜0.05).脓毒症大鼠心肌线粒体损伤明显,至24 h病变最严重,线粒体膜破碎,线粒体嵴消失,大量空泡形成.脓毒症大鼠心肌线粒体抗氧化酶SOD和GPx活性显著下降(均P＜0.05),线粒体脂质过氧化和蛋白氧化均显著增加(均P＜0.05),并呈时间依赖性.结论 线粒体损伤在脓毒症心肌细胞凋亡中发挥重要作用,其作用机制可能与线粒体抗氧化物酶活性降低,活性氧产生过多和聚集有关.     

脓毒症大鼠心肌细胞炎症因子的变化及其意义

目的:观察脓毒症大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的变化特点并探讨其意义.方法:36只SD大鼠随机分成对照组和脓毒症组,以脂多糖(LPS)腹腔注射制备大鼠脓毒症模型,酶联免疫分析法检测不同时段心肌TNF-α含量,化学比色法测定不同时段心肌NO、SOD、MDA含量.结果:脓毒症大鼠心肌TNF-α、NO、MDA含量较对照组明显升高(P<0.05),心肌SOD较对照组明显降低(P<0.05).结论:脓毒症大鼠心肌细胞TNF-α、NO、MDA表达明显增加,SOD明显减少,可能导致脓毒症心功能不全的发生.     

核因子κB及其在脓毒症器官衰竭中的作用

真核细胞转录因子κB（nuclear factor κB,NF-κB）是一种普遍存在于真核细胞中具有序列特异性二聚体结构的转录因子,在脓毒症多种免疫调节因子的表达中发挥关键作用。细菌产物和细胞因子受体,如肿瘤坏死因子（TNF-α）受体和白细胞介素（IL）1受体,通过与Toll样受体（toll-like receptor,TLR）相互作用启动信号转导途径导致核内NF—κB积聚,并使负责细胞因子、趋化因子、黏附分子、调亡因子等基因的转录增加。     

大黄对脓毒症大鼠核因子-kB活化的抑制作用

目的:探讨脓毒症时肠道组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及核因子-κB(NF-κB)活性的相关性,揭示大黄治疗脓毒症的有效机制.方法:采用盲肠结扎穿孔术制备大鼠脓毒症模型.分别在术后1、3、6、12、24、48 h活杀大鼠取肠黏膜组织,用酶联免疫吸附法测TNF-α、MCP-1的含量,用凝胶电泳迁移法测NF-κB的活性.在脓毒症模型基础上加用大黄治疗,分别于治疗后12、24、48、72 h活杀大鼠,用同样的方法检测TNF-α、MCP-1含量及NF-κB活性. 结果:脓毒症大鼠肠黏膜NF-κB活性及TNF-α、MCP-1含量均较相应对照组明显升高(P均<0.01);大黄治疗后能明显抑制升高的NF-κB活性和TNF-α、MCP-1含量(P均<0.05).结论:TNF-α、MCP-1是脓毒症早期激活的细胞因子,其释放与NF-κB活性密切相关;大黄可通过抑制NF-κB活性、减少炎症细胞因子释放而达到抑制炎症反应的作用.     

p38 MAPK抑制剂对脓毒症大鼠肝损伤的保护作用

目的探讨脓毒症肝损害的原因及p38 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂的保护作用.方法采用盲肠结扎并穿刺 (CLP)来制作脓毒症模型.在不同时相点观察大鼠肝功能[谷丙转氨酶(ALT)]、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)浓度.结果 CLP术后血清TNF-α、IL-1β进行性升高,ALT也显著升高.血清ALT、TNF-α、IL-1β呈显著正相关.应用p38MAPK抑制剂SB203580后,血清TNF-α、IL-1浓度显著降低,同时血ALT减低.结论 TNF-α、IL-1的大量释放是脓毒症肝损害的原因之一,通过调控p38MAPK信号通路可对脓毒症鼠肝损害起保护作用.     

大黄素对脓毒症大鼠保护作用的实验研究

目的探讨大黄素对于脓毒症大鼠的保护作用。方法将健康大鼠随机分为三组,A组：假手术组;B组：盲肠结扎穿刺（CLP）组;C组：CLP大黄素治疗组。造模72h后分别测定各组血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血浆和腹腔白蛋白浓度、肠系膜微静脉流速等并观察肠粘膜损伤程度。结果CLP后大鼠血浆TNF-α浓度、白蛋白渗出率明显升高,而B组升高较C组明显（P〈0.01）,肠粘膜损伤评分变化也有相同趋势（P〈0.017）;肠系膜微静脉流速减慢,血浆白蛋白浓度降低,而B组下降较C组明显（P〈0.05）。结论大黄素能减轻CLP所致脓毒症大鼠的炎症反应和肠粘膜的损伤。     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤中的作用

目的　探讨核因子 (NF) κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤小鼠发病中的作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠急性肺损伤模型。LPS注射后 0、 1、 3、 6、 12测定肺湿重 /干重比值 (W/D) ,迁移率改变电泳法检测肺组织NF κB活性 ,同时酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF) α、白介素 (IL) 10浓度 ,RT PCR检测mRNA表达。结果　LPS注射后 ,W/D比值明显增高 ,6h升高最明显 (4 82± 0 10 ) ,显著高于LPS注射前 (3 6 7± 1 0 4 ,P <0 0 5 )。LPS注射后肺组织核蛋白NF κB活性明显增强 ,6h达到峰值 (40 5 7± 6 2 4 ) ,显著高于LPS注射前 (44 8± 30 9,P <0 0 5 )。肺组织匀浆TNF α和IL 10浓度分别在LPS注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 (197 1± 5 2 4 )pg/ml和 (6 4 9± 39 7)pg/ml,显著高于LPS注射前 [分别为 (6 1 2± 10 7)pg/ml和 (71 6± 15 9)pg/ml]。与LPS注射前比较 ,LPS注射后 3～ 12h ,肺组织匀浆TNF α和IL 10mRNA表达显著增高。肺组织病理显示肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性。结论　LPS导致肺组织NF κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与急性肺损伤发生     

烫伤脓毒症大鼠肾脏核转录因子-kB活化与肾损伤关系的研究

目的 研究烫伤脓毒症大鼠肾脏核转录因子-kB（NF-kB）活化与肾损伤的关系。方法采用30％总体表面积Ⅲ度烫伤加内毒素攻击制备烫伤脓毒症大鼠模型。54只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烫伤脓毒症1、2、6、12和24h组，烫伤脓毒症1、2和6h＋NF-kB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯（PDTC）组。采用凝胶电泳迁移率改变分析法（EMSA）检测肾组织NF-kB活性；采用酶联免疫吸附法检测血浆及肾组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的变化；采用自动生化分析仪检测血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）含量。结果肾组织NF-kB活性于烫伤脓毒症后1h明显增强并达到高峰（P〈0．01），PDTC可显著降低烫伤脓毒症后1h NF-kB的活性。烫伤脓毒症后1h和2h血浆及肾组织中TNF-α水平均明显增高（P均〈0．01），PDTC可显著降低伤后血浆TNF-α水平（P均〈0．01），对肾组织中TNF-α水平影响不明显。烫伤脓毒症后BUN及SCr含量均明显增高（P均〈0．01），PDTC对BUN和SCr含量均无显著影响。结论NF-kB抑制剂可降低烫伤脓毒症大鼠肾组织NF-kB活性，但对肾脏功能无明显保护作用。     

痰热清注射液对脓毒症大鼠核因子-κB活性及生存率的影响

目的:探讨痰热清注射液对脓毒症(sepsis)大鼠核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性及生存率的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔术(cecum ligation perforation,CLP)制备脓毒症模型。112只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和痰热清治疗组,观察模型组及痰热清治疗组大鼠术后7 d的生存率。用ELISA法检测各组NF-κB活性和IL-6的水平。结果:痰热清治疗组7 d生存率明显高于模型组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠外周血单个核细胞NF-κB活性在CLP后2 h明显升高,6 h达到高峰,各时点与假手术组比较差异有显著性(P<0.01);IL-6水平在CLP后6 h明显升高,12 h达到高峰,除2 h时点外,各时点与假手术组比较差异有显著性(P<0.01);与模型组比较,除2 h时点外,痰热清治疗组NF-κB活性和IL-6水平明显降低(P<0.01)。模型组大鼠外周血单个核细胞NF-κB活性与血浆IL-6水平呈明显正相关(r=0.625,P<0.01)。结论:痰热清注射液可明显抑制脓毒症大鼠NF-κB活性及IL-6水平,提高脓毒症大鼠的生存率。     

健心方对核因子-kB活性的影响

目的；观察脂多糖对CHO-K1细胞核因子-kB活性的影响及健心方含药血清对脂多糖刺激的调节作用。 方法：①实验于2005-03／05在解放军广州军区武汉总医院实验中心和南方医科大学附属南方医院肿瘤中心实验室完成。选用清洁级SD大鼠12只。随机将鼠分为2组：动物治疗组和动物对照组，每组6只。②动物治疗组给予3．2kg／L健心方口服液（水煎醇提法制备，主要成分：黄芪、太子参、川芎、当归、葶苈子、云苓、桂枝、香附等），动物对照组用等量生理盐水以获得空白对照血清。灌胃体积均为10mL／kg。1d剂量分2次服。连续给药3d，第4天1次服用全天剂量后采血制备含药血清和空白对照血清。③体外培养CHO-K1细胞，分为6组：对照组：转染质粒（pNF-kB-TA-Lue和pCMV-β-半乳糖苷酶共0．5μg）后加用脂多糖刺激；感染1组：转染质粒并加含Toll样受体4全长的重组腺病毒感染；刺激1组：转染质粒并加含Toll样受体4全长的重组腺病毒感染后用脂多糖刺激；治疗组：转染质粒、加含Toll样受体4全长的重组腺病毒感染并用脂多糖刺激后加用古药血清干预；感染2组：转染质粒并加含Toll样受体4细胞外段的重组腺病毒感染；刺激2组：转染质粒并加含Toll样受体4细胞外段的重组腺病毒感染后用脂多糖刺激。（4）检测各组细胞核因子-kB相对活性，即相对发光值（荧光索酶强度值/β-半乳糖苷酶值）。⑤数据作完全随机设计方差分析，组间比较用LSD检验和Dunnett（双侧）检验。 结果：大鼠12只均进入结果分析。荧光素酶报告基因检测结果表明，相对发光值：对照组细胞明显高于感染1组（3560&;#177;57，1634&;#177;38，P〈0．05）；刺激1组细胞明显高于对照组、感染1组（8767&;#177;82，P〈0．05，0．01）；感染2组、刺激2组细胞明显低予对照组（530&;#177;74，536&;#177;71，P〈0．05）；治疗组明显低于刺激1组（1820&;#177;24，P〈0．05），但明显高于刺激2组（P〈0．05），略低于转染后对照组，但差异不明显（P〉0．05）。 结论：健心方古药血清可部分拮抗脂多糖导致的核因子-kB激活作用；Toll样受体4是脂多糖激活细胞的关键受体，健心方含药血清的拮抗作用可能是通过阻断了Toll样受体4对脂多糖的识别造成的。     

健心方对核因子-κB活性的影响

目的:观察脂多糖对CHO-K1细胞核因子-κB活性的影响及健心方含药血清对脂多糖刺激的调节作用。方法:①实验于2005-03/05在解放军广州军区武汉总医院实验中心和南方医科大学附属南方医院肿瘤中心实验室完成。选用清洁级SD大鼠12只。随机将鼠分为2组:动物治疗组和动物对照组,每组6只。②动物治疗组给予3.2kg/L健心方口服液(水煎醇提法制备,主要成分:黄芪、太子参、川芎、当归、葶苈子、云苓、桂枝、香附等),动物对照组用等量生理盐水以获得空白对照血清。灌胃体积均为10mL/kg。1d剂量分2次服,连续给药3d,第4天1次服用全天剂量后采血制备含药血清和空白对照血清。③体外培养CHO-K1细胞,分为6组:对照组:转染质粒(pNF-κB-TA-Luc和pCMV-β-半乳糖苷酶共0.5μg)后加用脂多糖刺激;感染1组:转染质粒并加含Toll样受体4全长的重组腺病毒感染;刺激1组:转染质粒并加含Toll样受体4全长的重组腺病毒感染后用脂多糖刺激;治疗组:转染质粒、加含Toll样受体4全长的重组腺病毒感染并用脂多糖刺激后加用含药血清干预;感染2组:转染质粒并加含Toll样受体4细胞外段的重组腺病毒感染;刺激2组:转染质粒并加含Toll样受体4细胞外段的重组腺病毒感染后用脂多糖刺激。④检测各组细胞核因子-κB相对活性,即相对发光值(荧光素酶强度值/β-半乳糖苷酶值)。⑤数据作完全随机设计方差分析,组间比较用LSD检验和Dunnett(双侧)检验。结果:大鼠12只均进入结果分析。荧光素酶报告基因检测结果表明,相对发光值:对照组细胞明显高于感染1组(3560±57,1634±38,P<0.05);刺激1组细胞明显高于对照组、感染1组(8767±82,P<0.05,0.01);感染2组、刺激2组细胞明显低于对照组(530±74,536±71,P<0.05);治疗组明显低于刺激1组(1820±24,P<0.05),但明显高于刺激2组(P<0.05),略低于转染后对照组,但差异不明显(P>0.05)。结论:健心方含药血清可部分拮抗脂多糖导致的核因子-κB激活作用;Toll样受体4是脂多糖激活细胞的关键受体,健心方含药血清的拮抗作用可能是通过阻断了Toll样受体4对脂多糖的识别造成的。     

The potential role of Staphylococcal enterotoxin B in rats with postburn Staphylococcus aureus sepsis

Staphylococcal enterotoxin B (SEB) is an important member of the superantigen family, which exerts a number of pathological effects in the human, as well as susceptible animals. The present study was conducted to observe the time course and tissue distribution of SEB in postburn Staphylococcus aureus infection; meanwhile, the relationship between SEB and multiple organ dysfunction was also studied. Eighty-six male Wistar rats were randomly divided into four groups as follows: normal control group (n = 10); scald control group (n = 10); postburn sepsis group (n = 50) in which rats inflicted with 20% total body surface area (TBSA) III degrees scald followed by SEB-producing S. aureus challenge were further divided into 0.5-, 2-, 6-, 12-, and 24-h subgroups, with 10 rats in each subgroup; and SEB monoclonal antibody (MAb) treatment group (n = 16) in which a dose of 4 mg/kg SEB MAb was given intravenously just before S. aureus challenge, and the rats were further divided into 2- and 6-h subgroups. It was found that after thermal injury combined with S. aureus infection, SEB was widely distributed to the liver, kidneys, lungs, and heart, exacerbating the pathophysiology of multiple organ dysfunction induced by postburn sepsis. At the same time, the gene and protein expressions of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and interferon-gamma (IFN-gamma) were also markedly upregulated in various tissues. Early treatment with SEB-specific MAb-MAb2D(1)-could markedly decrease SEB levels in plasma as well as in various tissues, and could significantly reduce the 6-h mortality rate (17.64% [3/17] vs. 55.6% [20/36], P = 0.02). These data suggested that neutralization of SEB is effective in ameliorating S. aureus sepsis and subsequent multiple organ damage, which might be attributed to its inhibitory effect on inflammatory mediator formation.     

生物喋呤对烫伤脓毒症大鼠一氧化氮合成的影响

目的：探讨生物喋呤BH4在金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）脓毒症中的生物学效应，阐明BH4对一氧化氮（NO）诱生的调控作用。方法：76只Wistar大鼠随机分为正常对照组（n=10)、烫伤对照组（n=10)、烫伤后金葡菌感染组（n=40)和羟基嘧啶（DAHP）拮抗组（n=16)。无菌留取动物肝、肺组织采用RT－PCR方法检测三磷酸鸟苷环水解酶I（GTP－CHI）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS)基因表达，同时测定组织中BH4和NO的水平。结果：烫伤后金葡菌感染组动物肝、肺组织中GTP－CHI基因表达明显上调，BH4产生显著增加，iNOS mRNA表达和NO的水平亦明显升高，DAHP组GTP－CHI基因表达上调和BH4合成NO的产生亦明显下降。结论：烫伤后金葡菌感染可诱导体内BH4的合成，BH4在基因和蛋白水平调控着iNOS所介导的NO大量生成，从而对金葡菌脓毒症的病理过程起促进作用。     

鼠脑缺血再灌注时葛根素对核因子κB表达的影响

背景：近年研究证明，炎症反应是脑缺血再灌注损伤的主要机制之一，核因子κB作为一种转录因子在脑缺血再灌注炎症反应中起着调控多种炎性细胞因子表达的关键作用。先期实验表明，葛根素具有抗氧自由基和神经细胞凋亡的作用，如果还具有抗炎作用，则可进一步阐述葛根素的脑保护作用机制。目的：探讨葛根素在全脑缺血再灌注损伤中对核因子κB的影响。设计：随机平行对照设计。单位：卫生部北京医院急诊科、华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科、华中科技大学同济医学院的病理学教研室、实验动物中心和公共卫生学院卫生统计学教研室。材料：实验于2003—04／12在同济医学院病理学教研室进行。将健康清洁级的Wistar大鼠75只随机分为假手术组，脑缺血再灌注组和葛根素组3组各25只，每组按再灌注的时间又分为2，6，12，24和48h共5个观察时间点，每个时间点5只大鼠。方法：①假手术组：不电凝双侧椎动脉，分离双侧颈总动脉不夹闭，不给药。②脑缺血再灌注组：电凝双侧椎动脉后用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉10min后松开，行再灌注，在再灌注开始时腹腔注射1mL的生理盐水，以后每隔6h注射1次。③葛根素组：处理程序同脑缺血再灌注组，只是将生理盐水改为葛根素100mg／kg。主要观察指标：在大鼠全脑缺血10min后再灌注2，6，12，24和48h时，用免疫组织化学法检测海马CA1区核因子κB和抑制蛋白κB的活性；用原位杂交法检测肿瘤坏死因子αmRNA的表达，用苏木精-伊红染色检测存活神经元数目。结果：经补充后75只大鼠进入结果分析。①核因子κB的活性：脑缺血再灌注组再灌注2h即明显升高，6h达到高峰，48h仍高于假手术组（P均〈0．01）；葛根素组在各个时间点均低于脑缺血再灌注组（P〈0．01）。②肿瘤坏死因子αmRNA的表达：脑缺血再灌注组再灌注2h即明显升高，12h达到高峰，48h仍高于假手术组（P均〈0．01）；葛根素组在再灌注6～48h均低于脑缺血再灌注组（P〈0．01）。③抑制蛋白κB的活性：脑缺血再灌注组再灌注2h有明显下降，6h降至最低点，以后逐渐升至2h水平，葛根素组在各个时间点均高于脑缺血再灌注组（P〈0．01或0．05）。④存活神经元数目：脑缺血再灌注组随再灌注时间的延长而逐渐减少（P均〈0．01）。在各对应时间点，葛根素组均多于脑缺血再灌注组（P〈0．05或0．01）。结论：全脑缺血再灌注时，葛根素可通过抑制抑制蛋白κB的降解及核因子κB的活性，下调肿瘤坏死因子αmRNA的表达。抑制炎症反应而起到脑保护作用。     

鼠脑缺血再灌注时葛根素对核因子κB表达的影响

背景:近年研究证明,炎症反应是脑缺血再灌注损伤的主要机制之一,核因子κB作为一种转录因子在脑缺血再灌注炎症反应中起着调控多种炎性细胞因子表达的关键作用.先期实验表明,葛根素具有抗氧自由基和神经细胞凋亡的作用,如果还具有抗炎作用,则可进一步阐述葛根素的脑保护作用机制.目的:探讨葛根素在全脑缺血再灌注损伤中对核因子κB的影响.设计:随机平行对照设计.单位:卫生部北京医院急诊科、华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科、华中科技大学同济医学院的病理学教研室、实验动物中心和公共卫生学院卫生统计学教研室.材料:实验于2003-04/12在同济医学院病理学教研室进行.将健康清洁级的Wistar大鼠75只随机分为假手术组,脑缺血再灌注组和葛根素组3组各25只,每组按再灌注的时间又分为2,6,12,24和48 h共5个观察时间点,每个时间点5只大鼠.方法:[1]假手术组:不电凝双侧椎动脉,分离双侧颈总动脉不夹闭,不给药.[2]脑缺血再灌注组:电凝双侧椎动脉后用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉10 min后松开,行再灌注,在再灌注开始时腹腔注射1 mL的生理盐水,以后每隔6 h注射1次.[3]葛根素组:处理程序同脑缺血再灌注组,只是将生理盐水改为葛根素100 mg/kg.主要观察指标:在大鼠全脑缺血10 min后再灌注2,6,12,24和48 h时,用免疫组织化学法检测海马CA1区核因子κB和抑制蛋白κB的活性;用原位杂交法检测肿瘤坏死因子αmRNA的表达,用苏木精-伊红染色检测存活神经元数目.结果:经补充后75只大鼠进入结果分析.[1]核因子κB的活性:脑缺血再灌注组再灌注2 h即明显升高,6 h达到高峰,48 h仍高于假手术组(P均＜0.01);葛根素组在各个时间点均低于脑缺血再灌注组(P＜0.01).[2]肿瘤坏死因子αmRNA的表达:脑缺血再灌注组再灌注2 h即明显升高,12 h达到高峰,48 h仍高于假手术组(P均＜0.01);葛根素组在再灌注6～48 h均低于脑缺血再灌注组(P＜0.01).[3]抑制蛋白κB的活性:脑缺血再灌注组再灌注2 h有明显下降,6 h降至最低点,以后逐渐升至2 h水平,葛根素组在各个时间点均高于脑缺血再灌注组(P＜0.01或0.05).[4]存活神经元数目:脑缺血再灌注组随再灌注时间的延长而逐渐减少(P均＜0.01).在各对应时间点,葛根素组均多于脑缺血再灌注组(P＜0.05或0.01).结论:全脑缺血再灌注时,葛根素可通过抑制抑制蛋白κB的降解及核因子κB的活性,下调肿瘤坏死因子αmRNA的表达,抑制炎症反应而起到脑保护作用.