用琼脂糖凝胶电泳快速检测轮状病毒RNA

本研究用琼脂糖凝胶电泳快速检测轮状病毒(RTV)RNA,并与聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了比较。对115例婴幼儿腹泻的粪便检测结果表明,腹泻粪便中的轮状病毒RNA经浓缩后琼脂糖凝胶电泳的阳性率与聚丙烯酰胺凝胶电泳的阳性率无明显差异,并且证明了用琼脂糖凝胶电泳检测RTV的RNA比聚丙烯酰胺凝胶电泳速度快、简单和经济,特别适用于临床上用于诊断RTV的感染,且可以在电泳过程中随时观察RTV的RNA的泳动情况和型别。     

用PAGE电泳法检测腹泻婴幼儿粪便中轮状病毒RNA

目的　探讨婴幼儿轮状病毒感染诊断方法。方法　用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)检测轮状病毒RNA。结果　 41份腹泻婴幼儿粪便标本中有 16份为RNA阳性 ,阳性率为 39%。结论　用PAGE电泳方法检测轮状病毒RNA准确可靠 ,不易出现假阳性     

用琼脂糖凝胶电泳快速检测轮状病毒RNA

本研究用琼脂糖凝胶电泳快速检测轮状病毒ＲＮＡ，并与聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了比较。对１１５例婴幼儿腹泻的粪便检测结果表明，腹泻粪便中的轮状病毒ＲＮＡ经浓缩后琼脂糖电泳的阳性率与聚丙烯酰胺凝胶电泳的阳性率无明显差异。并且证明了用琼脂糖糖凝胶电泳检测ＲＴＶ的ＲＶＮ比聚丙烯酰胺凝胶电泳速度快、简单和经济，特别适用于临床上用于诊断ＲＴＶ的感染，且可以在电泳过程中随时观察ＲＴＶ的ＲＮＡ的泳动情况和型别。     

针对bcl—2RNA核酶体外切割反应的琼脂糖凝胶电泳

用琼脂糖凝胶电泳检测外ｂｃｌ－２ｃＤＮＡ和ＲＺＤＮＡ转录物与鉴定核酸的体外切割活性，方法：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果：琼脂糖凝胶电泳可见核酶和ｂｃｌ－２ＲＮＡ转录物及其切割ｂｃｌ２ＲＮＡ后的产物，结论：琼脂糖凝胶电泳是一种可用于外转录物与初步鉴定核酸切割活性的简便方法。     

一种快速鉴定RNA质量的方法

目的　建立一种快速鉴定RNA完整性的方法。方法　在常规琼脂糖凝胶电泳的基础上 ,结合甲醛变性琼脂糖凝胶电泳加以改进而成。结果　提取的总RNA用此方法电泳后可得到 2 8S、18S、5 .8S(5S)三条清晰的rRNA条带。结论　此方法可以达到对RNA完整性进行快速鉴定的目的。     

应用PAGE技术分析武汉市婴幼儿轮状病毒分子流行病学特征

对1996年4月～1997年3月期间就诊于武汉市儿童医院的1683例门诊腹泻患儿粪便标本进行了轮状病毒RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。在515份标本中检出了轮状病毒RNA,阳性率为30.60%。所检出的轮状病毒2个组中,以第二亚组多见,占98.25％,2个亚组又可进一步分为五种电泳型,即S、L1、L2、L3、L4型,5种电泳型中以L1型为主,占轮状病毒RNA阳性病例的56.12%。对患儿临床表现、年龄与阳性率进行比较发现,呕吐、咳嗽、粪检时镜下脂肪球的发生均与轮状病毒感染密切相关(P<0.005),且发病以2岁内为易感年龄。     

斑点酶联免疫吸附试验的建立和应用

建立了一种快速检测轮状病毒抗原的新技术——斑点酶联免疫吸附试验.用兔抗人轮状病毒IgG包被硝酸纤维素膜,然后直接浸入粪标本中反应,随后与酶标兔抗人轮状病毒IgG作用,再用底物显色,根据斑点颜色深浅,肉眼即可判断阳性或阴性结果,不需要任何特殊仪器设备.将该法与常规ELISA及聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了比较,结果表明,与常规ELISA结果的符合率为98.11%,与聚丙烯酰胺凝胶电泳的符合率为90.57%,而且更为快速、敏感、经济、简便,易于在基层推广和现场应用.     

虫草属分子聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测研究

目的分析虫草属分子聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测效果,建立一种用于虫草属的DNA分子指纹高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测方法。方法分别对虫草属分子聚丙烯酰胺凝胶电泳的凝胶终浓度、胶电泳步骤、胶固定方案、胶染色方法、胶显色步骤进行分析,确定利于虫草属分子聚丙烯酰胺凝胶DNA多态性展现的方案。结果确定虫草属分子聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测方案,分别为聚丙烯酰胺凝胶浓度为6%、银染染色液为0.3%的AgNO3、胶显色步骤中显影液为强碱NaOH和0.5%的甲醛溶液,且NaOH的浓度为2%。结论本研究所建立的银染检测及显带体系适用于虫草属基因组聚丙烯酰胺凝胶电泳研究。     

武汉市门诊腹泻病例中轮状病毒的分布及其电泳型分析

1985年10月至1986年1月,在武汉市两所医院肠道门诊,收集了449例急性腹泻病人的粪便标本,用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行核酸分析,结果发现75例婴儿轮状病毒RNA阳性,检出率16.70％。在这些阳性粪样中获得了8种不同的电泳图型。从时间.年龄和性别的分布表明,短电泳型是武汉地区的优势型。未检出成人轮状病毒。     

重庆地区婴幼儿腹泻轮状病毒RNA的分析

轮状病毒基因组RNA经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析可分出11个RNA片段。分析该病毒基因组RNA之PAGE图谱类型对了解轮状病毒引起的地区流行规律具有重要意义。Herring等报告可省去密度梯度离心纯化病毒颗粒等步骤直接从病儿粪便中提取轮状病毒RNA做PAGE分析。目前,这种方法己用于轮状病毒感染病人的快速诊断和分子流行病学的调查。     

催化系统对聚丙烯酰胺凝胶聚合的影响

目的探讨不同的催化系统对不同酸碱条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)凝胶聚合的影响。方法采用不同剂量的过硫酸铵(AP)四甲基乙二胺(TEMED)催化系统组合和过硫酸铵(AP)硫酸亚铁(FeSO4)-抗坏血酸(VC)催化系统组合,进行碱性PAGE和酸性PAGE,观察各组凝胶聚合所需时间。结果AP-TEMED在碱性电泳中应用,0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED用量,凝胶聚合在0.5h内完成;在酸性电泳中应用时,0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED用量,凝胶聚合在2h内完成。AP-VC-FeSO4催化系统应用于酸性电泳时设计的10组用量,48h均未发现凝胶形成。结论AP-TEMED催化系统在碱性PAGE中的效果好于酸性PAGE。在碱性电泳中,以0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED为宜;在酸性电泳中,以0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED为宜。     

金钱白花蛇可溶性蛋白凝胶电泳图谱的研究

对金钱白花蛇进行几种凝胶电泳研究,根据聚丙烯酰胺胶电泳（ＰＡＧＥ）谱带的位置和数目进行品种鉴别;用改进的十二烷酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）测定其主要蛋白质成分分子量;用等电聚焦电泳（ＩＦＥ）测定其主要蛋白质成分的等电点（ＰＩ）。清晰的电泳谱带及相应数据为商品蛇真伪鉴别提供了科学依据。     

Agilent 2100 Bioanalyzer在人乳头瘤病毒检测中的应用

目的探讨Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(简称Bioanalyzer)在人乳头瘤病毒(HPV)的PCR检测和分型中的应用。方法先分别进行通用引物介导PCR(GP-PCR)和型特异性引物介导PCR,扩增HPV高保守区(L1区)的共同序列和各型(包括HPV6、11、16和18型)的特异性序列,然后分别用常规的琼脂糖凝胶电泳技术和Bioanalyzer对PCR产物进行检测,并比较两种检测方法的准确度、重复性和灵敏度。结果Bioanalyzer在确定片段长度时的准确度和重复性比琼脂糖凝胶电泳高,前者的准确度在95%以上,后者仅为85%;Bioanalyzer的检测灵敏度比琼脂糖凝胶电泳高100倍。结论Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对HPV进行特异、准确、稳定、灵敏的检测和型别鉴定,具有重要的推广价值。     

琼脂糖凝胶区带电泳应用于蛋白尿的分析

目的：运用琼脂糖凝胶区带电泳进行蛋白尿的分析。方法：采用血清琼脂糖凝胶区带电泳技术分析未经处理和处理后的蛋白尿样本。结果：通过对95例临床尿蛋白阳性标本进行琼脂糖凝胶区带电泳，可粗略区分出溢出性蛋白尿2例、选择性蛋白尿30例、非选择性蛋白尿63例，5例健康组未检出蛋白峰。结论：该法简便快速，在蛋白浓度较高时有很好的重复性，可用于尿蛋白的分析，经透析浓缩处理后的样本电泳效果更好。     

小鼠胸腺组织细胞凋亡DNA电泳特征的观察

为了观察细胞凋亡后细胞基因组的特征性变化及其特点，应用地塞米松制备了在体小鼠胸腺组织细胞凋亡的模型，结果显示细胞ＤＮＡ经电泳后出现典型的梯形条带，尤以在地塞米松诱导６ｈ最为典型，且结果稳定，个体差异小。     

大鼠足阳明胃经循经部位发现特异蛋白电泳条带的实验研究

目的:通过蛋白质凝胶电泳技术,寻找大鼠循经部位与非循经部位蛋白质条带的差异,证实循经部位是否存在特异蛋白.方法:在大鼠足阳明胃经循经部位与非循经部位选取皮下结缔组织,提取蛋白质制备电泳样品,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,观察二者蛋白电泳条带差异.结果:在电泳图谱中可观察到大鼠循经部位存在特异蛋白电泳条带(非循经部位不存在).结论:初步证明大鼠足阳明胃经循经部位存在特异蛋白质.     

金黄色葡萄球菌CCC型及OC型质粒的检测

采用已报道的金黄色葡萄球菌质粒DNA的检测方法(简称LL法)。从1982年在南京地区临床分离的131株金黄色葡萄球菌中的125株(95.4%)中检出质粒,可分为21质粒谱。经单向及双向二步琼脂糖凝胶电泳法鉴别,按分子量共有16个CCC型质粒带(P_1～P_(16))。用改良的LL法制备E.coli V517菌株质粒DNA,建立了简便的测定金黄色葡萄球菌质粒DNA分子量的参考系统。结果表明:要本实验条件下,P_1～P_(16)的分子量为1.42 Md～22.24±0.73 Md;以含有14.88、2.66±0.06 Md质粒谱的菌株较常见,占总数的25.2%;2.66±0.06 Md的质粒最常见,在73.3%的菌株中检出。     

Differential analysis of two-dimensional gel electrophoresis profiles of spermatozoa protein in human normal motility sperm and idiopathic asthenospermia

Objective: To evaluate the application of two-dimensional electrophoresis in the research of differentially expressed proteins in the human asthenospermia. Methods: Two-dimensional gel electrophoresis was performed on 4 normal sperm samples from healthy men and 4 sperm samples from 4 asthenospermia patients. After silver staining, the differential expression proteins were analyzed by PDQuest 2D analysis software. Results: Six differential protein spots were identified. Four spots showed increased expression in the control gels compared with the patient gels. Conclusion: The protein profiles of differential expression between the normal spermatozoa and idiopathic asthenospermia were established and some differential proteins were found. The data of this study would establish the better fundament for further isolation and identification of differentially expressed proteins in human asthenospermia sperm.