卡巴胆碱对肠上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨卡巴胆碱对大鼠肠上皮细胞(intes- tinal epiIhelia cell,IEC)过氧化损伤的影响.方法:将H_2O_2加入IEC培养液中制成IEC过氧化损伤模型.实验设对照组、H_2O_2组(2.5 mmol/L)、卡巴胆碱组(卡巴胆碱100μmol/L).用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测IEC的存活率,测定培养液中测乳酸脱氢酶(LDH)和细胞中丙二醛(MDA)含量.结果:与对照组相比,H_2O_2组LDH(7.40±2.10 vs 0.81±0.12,P<0.01)、MDA水平显著增高(P<0.0 1),细胞活力明显降低(37.25%±0.80%vs 100%±0.13%,P<0.01).卡巴胆碱组与H_2O_2组相比,LDH漏出MDA形成明显减少(4.64±1.31 vs 7.40±2.10,P<0.01),细胞的细胞活力显著增加(78.70%±2.80%vs 37.25%±0.80%,P<0.01).结论:卡巴胆碱对大鼠IEC过氧化损伤具有保护作用.     

纳洛酮对肠缺血再灌流大鼠氧自由基的影响

目的探讨纳洛酮是否具有对抗肠缺血再灌流大鼠体内氧自由基的作用。方法选择成年雄性SD大鼠32只，随机分为假手术、肠缺血再灌流（I／R）及分别用生理盐水和纳洛酮干预后的肠I／R四组，分别测各组血浆及肺组织的丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果用纳洛酮干预后的肠I／R组大鼠MDA含量及SOD活力显著不同干I／R及I／R＋NS二组，而与假手术组相当。结论纳洛酮具有对抗肠I／R时氧自由基的作用，从而保护了肺组织免遭自由基的破坏。     

肠缺血灌流时异丙酚对肠上皮细胞凋亡的影响

目的:研究缺血再灌流时异丙酚对肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制.方法:96只成年♂Wistar大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌流 生理盐水组(I/R NS)和I/R 异丙酚组(I/R Pr).采用夹闭肠系膜上动脉(SMA)的方法制作肠缺血再灌流模型.以上各组分别在再灌流后0,30,60,120和240 min(每时间点8只)处死动物取肠袋组织.采用病理学方法观察肠上皮细胞损伤指数;原位DNA末端标记法(TUNEL)检测肠上皮细胞凋亡率的变化;免疫组化法检测肠上皮细胞Caspase-3,bcl-2表达的变化.结果:I/R Pr组与I/R NS组相比,肠上皮细胞病理变化较轻,肠上皮细胞的凋亡率明显下降(P<0.01),再灌流后0,30,60,120和240 min肠上皮细胞中Caspase-3阳性细胞数明显减少(104.4±5.3 vs 146.4±7.6;97.4±6.2 vs 130.4±7.4;134.4±5.1 vs 170.4±8.1;125.4±6.2 vs 160.4±9.5:101±5.8 vs 120.4±8.2,均P<0.01),而bcl-2阳性细胞数明显增加(13.34±4.12 vs 6.72±2.59;14.96±4.85 vs 8.24±3.13;15.29±5.28 vs 9.63±2.89;10.39±3.61 vs 9.63±2.89;10.39±3.61 vs 5.96±1.93;11.08±4.83 vs 6.87±2.43,均P<0.01).结论:异丙酚能抑制缺血再灌流时肠上皮细胞Caspase-3表达,而增加bcl-2表达,减少肠上皮细胞的凋亡.     

纳洛酮对肠缺血再灌流大鼠氧自由基的影响

目的探讨纳洛酮对抗肠缺血再灌流大鼠体内氧自由基的作用。方法成年雄性SD大鼠32只，随机分为假手术、肠缺血再灌流(I／R)及分别用生理盐水和纳洛酮干预后的肠：／R4组，分别测各组血浆及肺组织的丙二醛(MDA)含量，超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果用纳洛酮干预后的肠I／R组大鼠MDA含量及SOD活力显著不同于I／R及I／R NS两组，而与假手术组相当。结论纳洛酮具有对抗肠I／R时氧自由基的作用，从而保护了肺组织免遭自由基的破坏。     

异丙酚对缺血再灌注大鼠肠黏膜的保护作用

目的:研究缺血再灌注时异丙酚对大鼠肠黏膜的保护作用及可能机制.方法:96只成年雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注(I/R) 生理盐水组和I/R 异丙酚组.再灌流后0、30、60、120、240min(每时间点8只)处死动物取肠袋组织,采用病理学方法观察肠黏膜损伤指数,ELLSA检测检测肠黏膜TNF-α中含量变化;分光光度法测定肠组织中DAO含量的变化.结果:与I/R 生理盐水组相比,I/R 异丙酚组肠黏膜病理变化较轻,肠黏膜中TNF-α含量明显减少,60 min最明显(9.52±2.82 vs 12.08±3.64,P<0.01),肠袋组织DAO含量显著增加,60 min时差异显著(2.34±0.42 vs 0.98±0.49,P<0.01).结论:异丙酚能抑制缺血再灌注时肠黏膜中TNF-α的表达,减轻病理损害,对肠黏膜具有保护作用.     

卡巴胆碱对烧伤大鼠延迟复苏时补液量及脏器血流量的影响

目的研究卡巴胆碱对烫伤休克大鼠延迟复苏时补液量及脏器血流量的影响。方法将32只Wistar大鼠随机分为假烧伤组(A组)、标准组(B组)、对照组(C组)和卡巴胆碱组(D组),B、C、D组大鼠制备30%体表面积Ⅲ°烫伤烧伤模型。C组伤后半小时经口给予卡巴胆碱。烫伤后大鼠首先暴露颈静脉、动脉并切开插入无菌硅胶管,以微蠕动泵控制输入乳酸钠林格氏液,A组和D组按B组剂量或速度的1/2给予。A组只剪毛、行颈静脉、动脉切开插管,但不烫伤及补液。记录补液开始后0、1、2、4h各组的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、血细胞比容(Hct);测定肝、肾、肠组织血流量。结果 D组2h、4h后可明显降低HR,提高MAP,改善烧伤休克大鼠早期各脏器的血流量。结论卡巴胆碱能改善烧伤休克大鼠早期脏器的血流量,减少补液量需求,有助于烧伤后休克及并发症的防治。     

卡巴胆碱减轻大鼠烫伤休克期肠内补液时肠组织氧自由基的损伤

目的:研究拟胆碱药卡巴胆碱(carbachol,CAR)对大鼠烫伤休克期肠内补液时肠组织氧自由基损伤的影响.方法:38只♂ Wistar大鼠,采用沸水法(100℃,10 s)造成35%TBSAⅢ度烫伤.随机分为不复苏组(单烫组,n=8)、葡萄糖-电解质溶液(glucose electrolyte solution)复苏组(GES组,n=10)、单纯卡巴胆碱治疗组(CAR组,n=10)和GES CAR复苏组(GES/CAR组,n=10).两液体复苏组在伤后30 min将GES经十二指肠造口匀速泵入,按Parkland公式设定补液速率,CAR组和GES/CAR组在伤后30 min将CAR以60 μg/kg溶于0.5 mL生理盐水中一次注入十二指肠.所有大鼠在伤后4 h处死,取空肠组织测定脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde.MDA)含量、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)和髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性,并观察肠组织病理学变化.结果:烫伤后GES组肠组织XOD、MP0活性和MDA含量分别高于单烫组13.2%、21.3%和21.1%,并有统计学意义(P＜0.05);GES/CAR组XOD,MPO和MDA均较GES组明显下降(1.36±0.37 vs 2.5l±0.56;0.47±0.14 vs 0.83±0.21;3.97±1.57 vs 6.59±1.50,P＜0.01);CAR组各指标数值最低.肠组织病理损伤也表现为CAR组和GES/CAR组最轻,单烫组次之,GES组损伤最重.结论:卡巴胆碱能有效减轻烫伤休克大鼠肠内复苏时的肠道氧自由基损伤,机制可能与其抗炎作用和抑制黄嘌呤氧化酶活性、减少氧自由基生成有关.     

丙酮酸对缺血/再灌注大鼠心肌的保护作用

目的:探讨丙酮酸(Pyr)对缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌的影响及其可能的机制。方法:30只SD成年大鼠随机分为假手术(Sham)组、I/R组及I/R+Pyr组,每组10只。I/R+Pyr组大鼠于再灌前5 min,开始持续性静脉灌注Pyr 2 h[25 mg/(kg·h)]。再灌注2 h后,利用多道生理记录仪检测大鼠在体血流动力学指标:平均动脉压(MABP)、左室收缩压(LVSP)及左室最大收缩、舒张末压微分(±LV dP/dt max)。采用Western blot方法检测磷酸化-JNK(p-JNK)和总的JNK(t-JNK)表达。用原位缺口末端标记法(TUNEL)评价心肌细胞的凋亡。结果:I/R组的MABP、LVSP、±LV dP/dt max显著低于Sham组(P0.01),Pyr干预可增加I/R后MABP、LVSP及±LV dP/dt max的水平(P0.05)。与Sham组相比,I/R组大鼠左心室p-JNK的水平明显增高(P0.01);而Pyr可降低大鼠左心室p-JNK的水平(P0.01),并抑制心肌细胞凋亡(P0.05)。结论:Pyr可改善I/R大鼠心肌的功能,抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与抑制JNK信号的激活有关。     

缺血预处理对大鼠缺血再灌注肺损伤保护作用的研究

目的 探讨缺血预处理(IP)对大鼠缺血再灌注(I/R)肺损伤的保护作用.方法 清洁级SD大鼠36只随机分为假手术组(Sham组)、I/R组、IP+I/R组各12例,分别进行相应处理,观察髓过氧化物酶(MPO)活性、超氧化物歧化酶(MDA)活性,测量肺脏湿重/干重比值(W/D).结果 光镜下I/R组肺泡腔内明显出血、水肿,炎性细胞浸润明显,组织、细胞结构紊乱;IP+I/R组见少量炎性细胞浸润,少量肺泡间隔出现断裂,无明显出血、水肿,组织、细胞结构仍清晰.与Sham组比较,I/R组W/D增加、MDA活性降低、MPO升高,IP+I/R组与I/R组比较有统计学差异.结论 IP能够减轻大鼠I/R肺损伤,其保护作用可能通过改善肺毛细血管的通透性、减轻肺的氧化应激反应、减少中性粒细胞的聚集等机制得以实现.     

Attenuation of graft ischemia-reperfusion injury by urinary trypsin inhibitor in mouse intestinal transplantation

AIM: Ischemia/reperfusion (I/R) injury is one of the major obstacles for intestinal transplantation (ITx). Urinary trypsin inhibitor (Ulinastatin, UTI) suppresses proteases and stabilizes lysosomal membranes. We supposed that Ulinastatin would diminish I/R injury of intestinal graft. METHODS: UTI- treated group and untreated control group were investigated by histological assessment at 1.5, 4, 24, and 72 h after ITx. Myeloperoxidase (MPO) activity was used as the activity of neutrophils, and malondialdehyde (MDA) was used as an index of lipid peroxidation. TNFα and i-NOS mRNA expression in graft tissue were measured by semi-quantitative RT-PCR. CD11b+ Gr1+ cells in graft lamina propria were analyzed by flow cytometry. RESULTS: Histological scores of the graft showed that the tissue injury was markedly attenuated by UTI treatment at different time points after ITx, with reduced MPO and MDA value in the grafts. The expression of TNFα and i-NOS mRNA was profoundly inhibited, while the infiltration of CD11b+ Gr1+ cells into the intestinal graft was decreased in UTI group. CONCLUSION: Urinary trypsin inhibitor attenuates I/R injury in mouse intestinal transplantation by reducing monocytes infiltration and down-regulation of TNFα and i-NOS mRNA expression.     

热休克预处理对大鼠肠缺血-再灌注损伤的保护效应

目的:探讨全身热休克预处理对肠缺血-再灌注(ischemia/reperfusion,IR)损伤的保护作用.方法:将40只SD♂大鼠随机分为4组:正常体温 假手术对照组(CTRL,n=10),正常体温 肠IR组(IR,n=10),41.5℃-42℃热休克 假手术组(42C,n=10),41.5℃-42℃热休克 肠IR组(42IR,n=10).Western blot检测肠黏膜HSP72蛋白表达,原位末端缺口标记法(TUNEL)检测肠黏膜上皮细胞凋亡,比色法检测肠黏膜caspase-3活性,Annexin-V/PI法流式细胞仪检测外周血白细胞凋亡比例.结果:42C、42IR组HSP72蛋白表达水平比CTRL、IR组显著增高(1.59±0.32、2.71±0.64 vs 0.41±0.1、0_30±0.04.P<0.01).42IR组caspase-3活性.白细胞凋亡比例比IR组相比有显著性差异(1.16±0.31 vs 2.32±0.54;39.65%vs 16.94%;P<0.01),且42IR组肠黏膜上皮细胞凋亡指数比IR组明显减少.42IR组与42C、CTRL组之间,caspase-3活性,肠黏膜上皮细胞凋亡指数,白细胞凋亡比例均无明显差异.结论:全身热休克预处理对肠缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制可能与增加热休克诱导HSP72的表达和抑制外周血白细胞激活有关.     

蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血/再灌注损伤的保护作用

目的观察蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血／再灌注损伤的作用。方法采用结扎左冠状动脉前降支制备在体大鼠急性心肌缺血／再灌注损伤模型。30只雄性Wistar大鼠随机分为伪手术（Sham）组、缺血／再灌注（I／R）组和缺血／再灌注＋蛇床子素后处理（Ost）组。采用BL-410生物信号记录分析系统记录大鼠左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末压（LVEDP）及左心室压力上升和下降最大速率（＋dp／dtmax）等心功能数据。实验结束后腹主动脉采血,采用ELISA方法检测血清肌酸激酶同工酶（CK—MB）、肌钙蛋白I（cTnI）含量,应用透视电镜对左室心尖部心肌组织超微结构进行形态学观察。结果与Sham组相比,I／R组大鼠心肌超微结构发生明显改变,心脏收缩、舒张功能显著降低,血清CK—MB及cTnI含量均显著增高。与I／R组比较,Ost组大鼠心肌超微结构损伤明显减轻,心功能明显改善,血清CK—MB及cTnI含量显著降低。结论蛇床子素后处理对急性心肌缺血／再灌注所致的大鼠心肌损伤具有保护作用。     

Wound healing of intestinal epithelial cells

The intestinal epithelial cells(IECs) form a selective permeability barrier separating luminal content from underlying tissues.Upon injury,the intestinal epithelium undergoes a wound healing process.Intestinal wound healing is dependent on the balance of three cellular events;restitution,proliferation,and differentiation of epithelial cells adjacent to the wounded area.Previous studies have shown that various regulatory peptides,including growth factors and cytokines,modulate intestinal epithelial wound hea...     

Protective effects of Rheum tanguticum polysaccharide against hydrogen peroxide-induced intestinal epithelial cell injury

AIM: To describe the effect of Rheum tanguticum polysaccharide (RTP) on hydrogen peroxide-induced human intestinal epithelial cell injury. METHODS: Hydrogen peroxide (100 μmol/L) was introduced to induce human intestinal epithelial cell injury. Cells were pretreated with RTP (30,100,300 μg/mL) for 24 h before exposure to hydrogen peroxide. Cell viability was detected by MTT assay and morphological observation. Acridine orange staining and flow cytometry were performed to assess cell apoptosis. Lactate dehydrogenase (LDH) activity, production of malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD) activity were measured by spectrophotometry with corresponding assay kits. RESULTS: Following exposure to H2O2, a marked decrease in cell survival and SOD activity, increased production of MDA, LDH leakage and cell apoptosis were found. Pretreatment of the cells with RTP could significantly elevate cell survival, SOD activity and decrease the level of MDA, LDH activity and cell apoptosis. CONCLUSION: RTP may have cytoprotective and anti-oxidant effects against H2O2-induced intestinal epithelial cell injury by inhibiting cell apoptosis and necrosis. This might be one of the possible mechanisms of RTP for the treatment of ulcerative colitis in rats.     

脂联素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察脂联素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制.方法 32只8周龄雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、地尔硫革组和脂联素组,每组8只.(1)假手术组:只穿线,旷置90 min.(2)缺血再灌注组:先阻断血流30 min,再灌注60 min.(3)地尔硫(革)组和脂联素组:先阻断血流30 min,于再灌注开始时,从鼠尾静脉分别注射地尔硫(革)(3.5 μg·g~(-1)min~(-1))或脂联素(60 ng·g~(-1)·min~(-1)),注射2 min,再灌注60 min.各模型组于再灌注60 min后处死大鼠.测定心肌组织一氧化氮(NO),心肌组织半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)活性,心肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的含量,同时用透射电镜观察大鼠心肌线粒体结构.结果 (1)缺血再灌注组心肌组织中Caspase 3活性显著高于假手术组[(168.50±30.08)μmol/L比(53.25±11.41)μmol/L,P<0.01],AMPK活性、PPARγ含量均显著低于假手术组[(0.74±0.59)IU/ml比(25.63±4.61)IU/ml,P<0.01;0.1894比0.7949,P<0.01],心肌组织中NO含量显著低于假手术组[(6.359±1.355)μmol/L比(10.396±1.901)μmol.L,P<0.01].(2)脂联素组心肌组织中Caspase 3活性显著低于缺血再灌注组[(88.75±6.92)μmol/L比(168.50±30.08)μmol/L,P<0.01],AMPK活性、PPARγ含量均显著高于缺血再灌注组[(27.22 ±4.76)IU/ml比(0.74±0.59)IU/ml,P<0.01;0.8613比0.1894,P<0.01],心肌组织中NO含量显著高于缺血再灌注组[(15.755±1.045)μmol/L比(6.359±1.355)μmol/L,P<0.01].脂联素可保护急性心肌缺血再灌注过程中大鼠心肌细胞线粒体结构的完整性,上述作用优于地尔硫(革).结论 脂联素对缺血再灌注造成的心肌损伤有一定的保护作用,机制可能与其增加心肌细胞AMPK、PPARγ表达,以及抗心肌细胞凋亡作用有关.