乳腺癌细胞来源Exosomes提取和鉴定

目的:从MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清中分离获得Exosomes,并进行形态学观察鉴定.方法:通过低速离心、高速离心、超滤及超高速离心等方法,从MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清中分离Exosomes,用透射电子显微镜观察其形态特征,Lorry方法蛋白定量,通过用免疫印记进行MHC分子鉴定.结果:MDA-MB-231乳腺癌细胞上清中分泌大量的Exosomes,电镜下观察呈椭圆形或圆形的双层膜的囊泡,直径为50～100 nm,具有完整的细胞膜.结论:用离心的方法可从MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清中提取Exosomes,有可能作为乳腺癌免疫治疗的潜在抗原.     

增强Exosomes免疫功能方法的研究进展

 Exosomes（EXO）是细胞内多囊泡体（MVB）膜内陷形成,并与细胞膜融合,分泌到胞外的膜性囊泡状小体。其内部和膜表面可携带多种信息传递和免疫激活因子,所以EXO的来源、作用途径和功能成为研究的焦点。在进一步了解EXO的生物学特性和功能的基础上,利用各种方法为EXO人工添加具有各种功能的因子,从而使EXO具有更强大的功能。将近年不同的人工方法和所添加的因子以及合成的EXO增进的功能特性进行了综述。     

肿瘤细胞疫苗及其研究进展

癌症复发与转移是恶性肿瘤治疗失败的主要原因之一。立足于整体,用肿瘤细胞疫苗（简称瘤苗）特异性主动免疫来调节和提高机体内固有抗肿瘤能力是目前正在积极探索的生物反应调节疗法（ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｐｏｎｓｅＭｏｄｉｆｉｅｒＴｈｅｒａｐｙ,ＢＲＭＴ）的...     

肿瘤细胞多向性抗药的研究进展

肿瘤细胞的抗药性是癌症治疗失败的重要因素之一。在肿瘤细胞的多种抗药类型中,尤以多向性抗药最为重要。本文从多向性抗药的本质、多向抗药的抗药表型、多向性抗药细胞的遗传学异常等方面综述了多向性抗药的研究近况。     

Exosomes联合卡介苗的体内抗肿瘤效应

目的: 探讨exosomes(Exo)联合卡介苗（bacillus CalmetteGuérin vaccine,BCG）的体内抗肿瘤效应。方法：通过密度梯度离心法分离和纯化E.G7OVA肿瘤细胞来源的Exo,Western blotting检测其蛋白成分。分别以Exo、BCG 、Exo+BCG、PBS免疫小鼠,以E.G7OVA细胞攻击,观察各组免疫保护效应;建立E.G7OVA荷瘤小鼠模型,观察各组免疫治疗效应。LDH法检测4组免疫小鼠脾细胞CTL细胞毒性。结果：Western blotting检测显示,Exo含有HSP60、OVA、HSC70和CD63分子;免疫保护实验结果显示,Exo+BCG组免疫小鼠90 d无瘤率显著高于Exo组和BCG组（60% vs 20%、0%,P<0.01）;免疫治疗实验结果显示,Exo+BCG对小鼠移植瘤的抑制显著强于Exo组和BCG组（P<0.01）。CTL检测结果显示, Exo+BCG免疫小鼠的CTL细胞特异性杀伤E.G7OVA细胞的活性显著高于其他各组（P<0.01）。结论： BCG作为免疫佐剂能显著增强exosomes的体内抗肿瘤效应。     

肿瘤细胞耐药基因研究进展

化疗是肿瘤有效治疗手段之一，有关资料统计，90％以上肿瘤患者死网或多或少都与耐药有关。因此研究肿瘤耐药起因、检测和判断哪些是耐药病人进而找出克服耐药方法，提高患者治疗率和生存率是当今肿瘤治疗迫切需要解决的重要课题。“八五”期间，我国把抗癌药耐药基因的研究列为攻关课题，承担单位是中国医学科学院血液学研究所，参加单位有中国医学科学院肿瘤研究所和北京市肿瘤研究所，下面介绍主要研究成果。一、基础研究方面1．建立耐药细胞株进行耐药基因表达的基础乃至临床研究都需要建立多药耐药（MDR）细胞系，一是为了建立检测耐…     

上皮来源的肿瘤细胞表达免疫球蛋白A

目的 证实上皮来源的肿瘤细胞表达免疫球蛋白,确定所表达的免疫球蛋白的类别。方法 采用免疫组化、Western blot及ELISA等方法检测MCF－7（人乳腺癌细胞系）、SW480（人结肠癌细胞系）、MGC（人胃癌细胞系）、HeLa(人宫颈癌细胞系）、CNE1－LMP1（稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系）、HNE2（鼻咽癌细胞系）和Tet-on-LMP1-HNE2(受四环素诱导可调控的鼻咽癌细胞系）等7种上皮来源的细胞系的细胞蛋白提取液及培养上清中的免疫球蛋白。结果 在7种上皮来源的瘤细胞系的蛋白提取液及培养上清中均检测到了人免疫球蛋白A。结论 上皮来源的肿瘤细胞表达免疫球蛋白A。     

循环肿瘤细胞研究进展

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)指自发或因诊疗操作进入外周血循环的肿瘤细胞。目前肿瘤患者外周血中CTCs已被证实可能是肿瘤转移的起源,在肿瘤转移环节中扮演重要角色。研究表明,CTCs的出现可作为一个独立的预后因素,并与有无复发转移有关。近年来,随着检测方法的改进、新技术的出现,使得CTCs检测的敏感性和特异性有了很大的提高,其在早期发现微转移、评估疗效与个体化治疗及预后等方面的应用价值已成为临床研究的热点。本文简要综述近年CTCs检测的研究进展及其临床应用状况。     

循环肿瘤细胞在肺癌中的研究进展

循环肿瘤细胞(CTC)具有与肿瘤原发灶内一致的细胞学和基因遗传学特征。 已发现CTC与肺癌的生物学行为、治疗以及预后密切相关,有望成为肺癌的又一新标记物和治疗的新靶点。本文对CTC在肺癌中的研究进展作一综述。     

循环肿瘤细胞研究进展

肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因之一，相同的治疗方案在同一肿瘤患者之间的疗效差异很大，造成这一现象的原因是恶性肿瘤之间的分子分型存在差异。随着精准医疗时代的到来，循环肿瘤细胞（CTC）检测技术应运而生，人类对恶性肿瘤的检测达到单细胞水平。与传统影像学检查、病理学检查及肿瘤标志物等相比，具有无创、多次、实时获取及整体性等优点；在疗效评估、个体化治疗、预后监测、肿瘤筛查等方面具有独特优势。作者概述常见CTC检测技术的特点及其临床应用现状，为临床提供参考。     

NKT细胞对肿瘤免疫调节的研究进展

自然杀伤T（NKT）细胞是一类重要的独立天然淋巴细胞亚群,不断有研究表明其在机体免疫应答过程中发挥重要作用。不同NKT细胞亚群及功能不断被发现,不同亚群对肿瘤免疫的影响不尽相同,各亚群之间的相互作用机制不十分清楚,有待进一步探索。深入了解NKT细胞在肿瘤免疫中的作用,对肿瘤的治疗有重要意义。     

人体肿瘤髓系来源抑制性细胞的研究进展

髓系来源抑制性细胞(MDSC)是一群来源于髓系的异质性未分化成熟的细胞;在感染、创伤、败血症,尤其是肿瘤等病理状态下,MDSC在血液、淋巴器官、脾脏及肿瘤等组织中大量聚集;MDSC可以通过多种机制抑制肿瘤免疫,MDSC在患者外周血的数量与肿瘤的分期、负荷、远处转移及患者的预后密切相关.然而关于MDSC的研究结果大部分来自小鼠实验,由于肿瘤患者MDSC的表型比较复杂,其研究进展相对缓慢.     

心理应激对肿瘤微环境中免疫细胞影响的研究进展

肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。应激状态下的人体通常会经历一些重要的生物效应,从而损害免疫系统,各种应激反应可以通过调节肿瘤微环境中的免疫细胞,例如自然杀伤细胞、树突状细胞、髓系来源抑制细胞(MDSCs)等,导致肿瘤进展。由于免疫细胞对人体的多项活动都起着重要的调节作用,并且其在肿瘤中的应用也具有十分重要的意义。本文就心理应激如何影响肿瘤微环境中的免疫细胞做一综述,旨在为肿瘤治疗提供新的思路。     

二甲双胍在肿瘤细胞代谢中的研究进展

二甲双胍是2型糖尿病的一线降糖药物,其机制主要通过抑制肝脏葡萄糖的输出,并提高机体外周组织对胰岛素的敏感程度,从而增加葡萄糖的摄取和利用.不仅如此,现在有研究认为二甲双胍还可能通过激活酶的信号系统而发挥多方面的代谢调节作用.近年来二甲双胍表现出了除降糖以外的多种作用,如抗炎、抗肿瘤、延长寿命、预防脱发以及改善肠道菌群失...     

胞外体与肿瘤免疫治疗

 【摘要】　胞外体（EXO）是真核细胞晚期内体分泌到细胞外的小囊泡体,负载了来源细胞的膜分子,蛋白分子以及一些参与信号转导的分子。不同来源的EXO其所负载的蛋白成分不同,其生物学特性也有所差异。以树突细胞（DC）为代表的抗原递呈细胞（APC）以及肿瘤细胞释放的EXO在机体免疫调节以及肿瘤免疫治疗中的作用研究近年来取得了较大进展。就EXO 的生物学特性及其在肿瘤免疫治疗中研究进展作一综述。     

脂肪细胞与肿瘤转移的关系研究进展

肥胖是威胁人们健康的主要慢性疾病之一,主要由脂肪组织扩增引起。在人体,脂肪组织是一个动态的内分泌器 官,负责能量稳态。过度肥胖通常会导致代谢紊乱、类固醇激素分泌改变、慢性亚临床炎症以及增加多种肿瘤的发病风险。肿 瘤细胞与脂肪细胞的微环境之间存在密切关系,一方面,脂肪细胞来源的细胞因子,如趋化因子配体 2、白介素⁃6、肿瘤坏死因 子 α、瘦素和脂联素等,可通过激活不同的信号通路促进肿瘤的侵袭转移能力;脂肪细胞来源的游离脂肪酸及脂滴可通过 FABP4、CD36等转运蛋白转移到肿瘤细胞中,提高肿瘤β氧化速率,产生大量能量,促进肿瘤细胞分裂增殖;另一方面,脂肪细 胞可使Treg细胞、CD8+ 细胞毒性T细胞、巨噬细胞发生代谢重编程,促进Treg细胞及M2型巨噬细胞增殖,抑制CD8+ 细胞毒性T 细胞杀肿瘤活性,从而导致肿瘤免疫逃逸;使中性粒细胞重编程,破坏血管内皮细胞的黏附,导致血管壁渗透性增加,有利于肿 瘤细胞穿过血管壁,转移到远处。本文主要探究脂肪细胞与肿瘤转移的关系,旨在为肿瘤治疗提供新的靶点。     

肿瘤干细胞研究进展

近年提出的肿瘤干细胞（TSC）学说认为肿瘤组织中存在极少量具有干细胞性质的癌细胞亚群,具有多向分化潜能和无限增殖及自我更新能力,是肿瘤发生、发展、侵袭、转移、复发及耐药的决定性因素。目前已在部分肿瘤分离鉴定出TSC的存在。TSC学说的提出将为最终根治肿瘤提供新靶点。     

Exosomes derived from human bone marrow mesenchymal stem cells promote tumor growth in vivo

Mesenchymal stem cells (MSCs) can promote tumor growth in a mouse xenograft model, but the exact mechanism remains unclear. In this study, we investigated the effects of bone marrow MSC-derived exosomes (MSC-exosomes) on tumor growth in vitro and in vivo. Our results showed that MSC-exosomes promoted tumor growth in vivo. MSC-exosomes enhanced vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in tumor cells by activating extracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2) pathway. Inhibition of ERK1/2 activation reserved the increase of VEGF level by MSC-exosomes. Our findings demonstrate a new mechanism through which MSC-exosome-mediated cell-cell interactions may contribute to tumor progression.