超声波对小鼠胚泡着床影响的研究

本实验证明频率800kHz,声强1.75W/cm~2连续超声波在着床前单纯照射小鼠子宫部一次(一分钟),可显著地抑制着床,二次照射可完全阻遏着床。用放射免疫法测定小鼠着床前外周血中雌二醇和孕酮含量,结果表明照射组与对照组间无显著性差异。提示抗着床作用与这两种激素在外周血中的浓度无关。光镜、电镜下观察到的子宫内膜形态学变化为大量白细胞浸润;内膜腔上皮微绒毛减少、消失;糖蛋白衣过早地被清除;膜性结构线粒体及内质网的损害等,这些形态学变化可能是影响着床的重要因素。     

抗孕酮甾体RMI12,936及有关化合物在大鼠抗生育作用的进一步研究

在妊娠大鼠已证明,RMI12,936(17β羟基7α甲基雄甾酮)具有抗生育作用。由于能引起妊娠,假孕或用促性腺激素处理的大鼠的卵巢增生,提示其直接作用于卵巢起到抗生育作用。进一步研究假设,该化合物抑制卵巢的孕酮合成。在体及离体应用RMI12,936,均使卵巢的匀浆中产生7α甲基睾丸酮,后者也具有抗生育作用,并可能是由于抑制孕酮的利用所致。作者试图进一步确定,RMI12.936的作用是否仅由于抑制孕酮的合成,7α甲基睾丸     

Ghrelin影响小鼠胚泡着床的体外实验研究

目的:探讨Ghrelin在小鼠妊娠围植入期子宫表达的变化及其对胚胎着床的影响。方法:用免疫组化方法检测Ghrelin蛋白在小鼠妊娠围植入期子宫表达的变化;采用体外胚泡培养方法,观察重组Ghrelin蛋白对胚泡的孵化、黏附与扩展率的影响。结果:在小鼠妊娠的第1至2天,Ghrelin蛋白主要于腔上皮和腺上皮表达,随妊娠进展,其表达水平逐渐下降。体外胚泡培养48h时,与正常对照组相比[孵化率、黏附率和扩展率分别为(61.25±5.27)%、(71.45±6.56)%和(43.26±5.87)%],Ghrelin重组蛋白可明显抑制胚泡的孵化率[(20.36±4.78%),P<0.01]、黏附率[(53.23±4.98)%,P<0.01)]及扩展率[(18.34±7.12)%,P<0.05]。结论:Ghrelin可抑制胚泡孵化、黏附与扩展及抑制胚泡植入。     

935MHz微波电磁辐射对小鼠胚泡着床的影响

目的:探讨935MHz微波电磁辐射对小鼠胚泡着床的影响。方法:将受精后雌鼠暴露于不同强度、不同时间的935MHz微波辐射,采用逆转录聚合酶链反应法检测围着床期(受精后4d)子宫内膜白血病抑制因子(LIF)mRNA的表达。结果:570μW/cm2(4h/d)辐射组、1400μW/cm2(4h/d)辐射组与对照组相比,LIFmRNA表达均有显著降低(P<0.01),同时与二组强度各自2h/d辐射组比较也有明显减弱(P<0.01)。结论:935MHz微波电磁辐射可影响LIFmRNA表达,进而破坏胚泡着床,并具有一定的剂量反应关系及累积效应。     

在人月经周期各个阶段收集的子宫冲洗物对小鼠离体胚泡的影响

在大鼠和小鼠,着床取决于胚泡与内膜发育的紧密的同步化。在这两种动物以及兔、羊、母牛和猪,子宫只有很短的时期接受胚泡,而干扰同步化在±2天以上,则极少发生着床。这些发现形成了现代节育途径的基础,目的在于发展一些药物以加速妇女卵运输的速率。作者试图评价人子宫冲洗液对离体胚泡的影响。从正常经产妇女在月经周期的各个阶段收集子     

对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的研究

目的:建立胚泡着床障碍小鼠模型,并研究其子宫内膜容受性。方法:于妊娠d4上午利用米非司酮诱导昆明小鼠胚泡着床障碍,12h后处死小鼠,观察小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,利用光镜观察小鼠子宫内膜形态结构,采用免疫组化SP法检测子宫雌、孕激素受体(ER、PR)表达,采用RT-PCR检测子宫ER、PR基因表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数明显降低,子宫内膜发育明显受抑制;子宫内膜腺体、间质ER、PR表达范围和强度均显著降低。结论:米非司酮能成功诱导建立胚泡着床障碍模型,其着床期子宫内膜发育受抑制,子宫内膜容受性降低,胚泡着床失败。     

保胎液对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜降钙素表达的影响

目的:观察保胎液对胚泡着床障碍模型小鼠子宫内膜降钙素水平的影响.方法:采用米非司酮小鼠受精卵着床障碍模型.将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药组和保胎液(高、中、低3种剂量)治疗组,从妊娠第1天起分别给予0.9％氯化钠溶液、地屈孕酮和保胎液(高、中、低3种剂量)灌胃治疗.于妊娠第4天上午皮下注射米非司酮,每只0.08 mg.正常组不予任何处理.于妊娠第5天取小鼠的子宫组织,运用实时荧光定量PCR技术检测小鼠子宫内膜降钙素的含量.结果:模型组降钙素表达量与正常组、中药高剂量组、中剂量组及西药组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).中药高、中剂量组分别与西药组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);中药中剂量组与正常组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);中药中剂量组降钙素水平明显高于高、低剂量组(P＜0.05).结论:保胎液可以调节小鼠子宫内膜降钙素的表达量,特别是中剂量效果最明显,从而改善受精卵着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进受精卵着床.     

sLe~X抗体对小鼠胚泡在E-选择素上黏附和扩展的影响

目的:探讨E-选择素及其配体在着床中的作用。方法:建立小鼠胚泡的体外培养模型,在倒置相差显微镜下观察不同条件下小鼠胚泡在细胞外基质E-选择素上黏附、扩展的改变。结果:小鼠胚泡能在一定浓度E-选择素上黏附、扩展,E-选择素对胚泡的脱透明带有促进作用。结论:确定了E-选择素体外实验的最佳作用浓度。小鼠胚泡在特定浓度的E-选择素上能黏附、扩展,但这种作用能被sLe~X 抗体所阻断,并呈浓度依赖性。     

小鼠胚泡着床相关基因的差减筛选

目的:筛选新的小鼠胚泡着床相关基因。方法:对孕4.5 d小鼠着床和非着床位点的子宫内膜组织进行PCR差减。获得了2个新的在小鼠胚泡着床位点高表达的EST(EST8和EST81)。结果:EST8在孕4.5 d小鼠着床位点、肝脏中表达较高,在非着床位点和卵巢中亦有微量表达。EST81主要在孕4.5 d小鼠子宫着床组织和卵巢中表达,其它各种组织中也有微量表达。用PCR方法获得了相应的全长。cDNA,长度分别为1665bp和1364bp。结论:用差减筛选获得的两种cDNA是孕小鼠着床相关基因,其功能有待进一步研究。     

着床期兔胚泡对子宫内膜糖蛋白影响的研究

本文应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，蛋白质免疫印渍技术及以凝集素为探针对一侧输卵管结扎兔着床期子宫内膜糖蛋白进行了研究。结果表明１．ｃｏｎＡ－ｂｉｎｄｉｎｇＧＰｓｏｓ非着床侧略高于着床侧。２．ＷＧＡ－ｂｉｎｄｉｎｇＧＰ着床侧各条带扫描后峰值均高于非着床侧。３．分子量为９７．３ＫｄＰＮＡ－ｂｉｎｄｉｎｇＧＰｗ和８５．９ＫｄＰＮＡ－ｂｉｎｄｉｎｇＧＰＳＤＳ着床侧明显高于非着床侧，而３８．５ＫｄＰＮＡ－ｂｉｎｄｉｎｇＧＰＳＤＳ非着床侧则明显高于着床侧，４．分子量为９７．３Ｋｄ和ｇｏ．６ＫｄＲＣＡ－ｂｉｎｄｉｎｇＧＰＳＤＳ着床例明显高于非着床侧，而３７．２ＫｄＲＣＡ－ｂｉｎｄｉｎｇＧＰＳＤＳ非着床例明显高于着床侧．显示在同一激素状态下，胚泡着床与否影响到子宫内膜糖蛋白出现了不同变化。     

单克隆抗体阻断Le~Y寡糖对小鼠胚泡细胞外基质与基质金属蛋白酶的影响

目的:探讨着床前阶段表达的LeY寡糖对小鼠胚泡细胞外基质(ECM)与基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法:应用半定量RT-PCR及免疫印迹法观察体外培养的着床前表面LeY寡糖被封闭的胚泡ECM主要成分纤维粘连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)和其水解酶类MMP-2,MMP-9的表达和分泌水平的变化。结果:体外培养表面被封闭胚泡6 h,其FN及LN的分泌明显升高(P<0.01),但随着培养时间延长,其增高水平有下降趋势,而其基因的转录变化不明显。在同一时期内,胚泡MMP-2、MMP-9的分泌明显被抑制,其抑制程度随培养时间延长减弱,其基因表达也被抑制,与其分泌水平的变化趋势一致。结论:LeY寡糖抗原被封闭使MMPs的分泌和基因表达被抑制的同时,FN、LN的分泌增加,提示可能与LeY寡糖封闭引起MMPs的活性下降,使其底物FN、LN分解减少,从而引起含量增加有关。     

小鼠子宫内膜上皮细胞表面肝素受体及性甾体激素对它的影响

取5～6周龄ICR 小鼠子宫,用酶消化,分离出上皮细胞,并接种于24孔培养碟中,待细胞长成片后,加入不同剂量[~3H]标记的肝素孵化。实验结果表明,上皮细胞表面肝素受体量,随[~3H]肝素含量增加而增加,直至饱和为止。另外,上皮细胞上肝素受体量也与[~3H]标记肝素孵化时间相关。随着孵化时间增加,其表面受体含量也增加,30min 基本饱和。在培养液内加入0.045μmol/L 及0.09μmol/L 雌二醇,其结果表明,雌二醇可增加小鼠子宫内膜上皮细胞表面肝素受体的含量,但两种剂量组间未见明显差异。     

小鼠胚泡黏附时子宫内膜Galectin-1的变化

目的：探讨小鼠胚胎黏附时子宫内膜Galectin-1的变化。方法：双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析妊娠d5小鼠胚泡黏附时着床点、着床旁子宫内膜总蛋白，以同龄未交配鼠子宫内膜为对照，差异蛋白质组学显示pⅠ约5．1、分子量约15ku的蛋白点在着床点、着床旁子宫内膜表达上调，且在着床点更明显。对此蛋白点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其胶内酶解后的肽质量指纹谱(peptidemassfingerprint，PMF)。结果：Mascot：PMF在SWISS．PROT数据库查询为鼠源性Galectin．1。RT．PCR．~果显示d5孕小鼠子宫内膜Galectin．1mRNA水平也明显增加。结论：Galectil9．1可能参与胚泡着床这一重要生命活动过程。     

宫内节育器对大鼠胚泡形成和植入的影响

为了研究宫内节育器对胚泡形成及着床的影响,将节育器放入大鼠左侧子宫内,以右侧子宫作对照。56只大鼠分为5组,分别在妊娠的不同时期处死。第一组于妊娠2—3天处死,两侧输卵管内都有正常发育的胚泡,两侧子宫都没有胚泡;第二组于妊娠4天处死,两侧输卵管内都有正常发育的胚泡,两侧子宫都没有胚泡;第三组于妊娠5天处死,实验子宫内没有一个胚泡,对照子宫内有正常发育的胚泡,两侧输卵管内都没有胚泡;第四组为子宫阴道端结扎组,结果和第三组相同;第五组于妊娠6—7天处死,实验子宫内没有一个植入斑,对照子宫都有植入斑,胚发育正常。本研究提示:宫内节育器不影响大鼠的受精、卵裂,也不加速孕卵的运行。宫内节育器的主要作用可能是改变宫腔环境而致胚毒效应。     

甾体激素对人卵巢癌细胞增殖分化的影响及其临床应用

卵巢是分泌雌激素、孕激素、雄激素等许多甾体激素的主要器官,而甾体激素在机体组织细胞生长、分化、发育、免疫等几乎所有生理过程中都有重要作用。同时大量的实验证实;卵巢癌标本中含有糖皮质激素、雌激素、雄激素等甾体激素受体。本文扼要介绍甾体激素对卵巢癌细胞增殖分化的影响及其临床应用的研究进展。     

雷公藤多甙对大鼠甾体激素的影响

<正> 雷公藤多甙(GTW)是一种常用中成药。临床上已广泛应用于治疗类风湿关节炎、银屑病等多种疾病,常用剂量为60mg/日。其副作用之一是精子数减少和精子活率降低。已有文章指出,在雄性Wistar和SD大鼠,灌服无毒剂量的GTW(10mg/kg/日,共8周)可以导致可逆性不育,在雄性BALB/c小鼠,GTW也使生殖功能受到显著影响。回顾性研究表明,临床用量1/3(20mg/日)的GTW对成年男子也有抗生育作用,从而引起了国内外广泛兴趣,认为该药可望成为一个有效的男用口服避孕药。但GTW对下丘脑—垂体—性腺轴是否有影响,它的抗生精机理与睾丸间质细胞是否有关,尚未见报道。本研究观察了抗生育剂量的GTW对大鼠甾体激素水平及睾丸间质细胞对hCG反应的影响。     

抗孕激素RU486和ZK98734对双池培养的颗粒细胞和内泡膜细胞分泌功能的影响

本文观察了RU486和ZK98734对培养在羊膜双池培养系统中的猪卵巢颗粒细胞和内泡膜细胞在甾体激素生成过程中的影响。生长在羊膜两书侧的颗粒细胞和内泡膜细胞在加入或不加FSH、LH及不同浓度RU486或ZK98734的条件下培养48h。用RIA测定内、外池培养液中的孕酮（P）和雌二醇（E2）的浓度并与单独培养的结果相比较，同时亦与大鼠颗粒细胞的结果作比较。结果表明：1．有FSH刺激时，两种抗孕激素均明显抑制双池培养中颗粒细胞的P和E2产量；2．不论有或无LH刺激，两种抗孕激素均显著抑制双池培养中内泡膜细胞的P产量；3．双池培养系统模拟了两种卵巢细胞在体内的旁分泌调节关系，比单独培养更加合理；4与大鼠相比，猪卵巢细胞体外培养是研究避孕药对卵巢功能影响的适合模型。     

表皮生长因子受体特异的酪氨酸激酶抑制剂对小鼠胚泡体外发育和胚胎着床的影响

胚胎着床是一个极为复杂的过程。其中，胚胎接受来自子宫内环境或自身信息的调节，是着床成功的必要前提。EGF受体可能是参予这一调节的分子之一，该受体早在4-细胞鼠胚即有表达，随后表达呈进行性增加直至着床前的胚泡[1，2]。同时，着床期的子宫内膜能表达多种EGF家族生长因子［3～6]，有实验表明这些因子的靶作用位点是胚泡而不是子宫内膜，因而，EGF受体被认为是着床过程中胚泡与子宫内膜间双向信息交流的分子[7]。EGF受体是位于细胞膜上的Ⅰ型信号传导分子，其信号的传递有赖于其细胞内段的蛋白酪氨酸激酶活性的活化（即磷酸化）…     

甾体避孕药长期应用的安全性问题

五十年代后期研制了甾体避孕药,对人类生育的控制是个重大突破,也是本世纪对人类贡献最大的科技成果之一。目前全世界估计有八千多万妇女应用此法作为节育措施。因为用药人数多,时间长,因而提出其安全性问题。部分服药者以及少数医务人员,由于对这方面缺乏全面认识,而产生一些不必要的顾虑。为了澄清思想、消除顾虑,本文对有关甾体避孕药安全性的资料进行了复习。