免疫荧光技术在皮肤活检组织真菌染色中的应用

目的：评价免疫荧光染色法在皮肤活检组织真菌染色中的应用价值。方法：经组织病理和组织培养确诊的43例皮肤真菌病患者对其石蜡包埋切片分别进行免疫荧光染色、PAS染色。结果：43例皮肤真菌病中PAS染色阳性27例（62.8%）,免疫荧光染色阳性30例（69.7%）,免疫荧光染色法较PAS染色阳性率有所提高,两者差异无统计学意义（P>0.05）。同时两种方法均阴性患者5例,两种方法联合真菌检出阳性率为88.4%。结论：免疫荧光染色是提高皮肤活检组织中真菌检出的重要补充。     

荧光原位杂交法观察小鼠皮肤组织切片中型无绿藻感染的研究

目的 探讨荧光原位杂交技术用于诊断小鼠皮肤中型无绿藻感染模型的可行性。 方法 制作小鼠皮肤中型无绿藻感染模型,制备皮肤组织石蜡切片,用人工合成的探针PZ-probe进行荧光原位杂交检测,以过碘酸锡夫（PAS）染色、HE染色做阳性对照;取正常及其他真菌感染的皮肤组织石蜡切片做阴性对照,以同样的方法进行荧光原位杂交检测,将各种检测方法的结果进行对比分析。 结果 小鼠临床体征、病理检测及病原体培养结果均证实皮肤无绿藻感染模型建立成功。通过荧光原位杂交法成功检测出了小鼠皮肤中型无绿藻感染模型皮肤组织中的无绿藻病原体,结果与PAS染色和HE染色一致;而在正常及其他真菌感染的皮肤组织石蜡切片中均未能检测出无绿藻。 结论 荧光原位杂交法可以检测出小鼠皮肤中型无绿藻感染模型组织石蜡切片中的无绿藻病原体。     

荧光染色法和KOH湿片法检测浅部真菌感染的效果比较

目的 对比荧光染色法和KOH湿片法检测浅部真菌感染的效果。方法 收集2017年7月至2018年2月同济大学附属第十人民医院皮肤科门诊600例临床拟诊为浅部真菌感染及102例拟诊为马拉色菌感染（包括花斑糠疹54例,马拉色菌毛囊炎48例）的标本,分别采用荧光染色法和KOH湿片法直接镜检,比较检出阳性率及平均阅片时间。以培养为金标准,比较两种方法的漏诊情况。计数资料的比较采用卡方检验或Fisher精确检验,计量资料的比较采用配对t检验。结果 荧光染色法与KOH湿片法检测600例浅部真菌感染标本时检出阳性分别为546例（91.00%）和489例（81.50%）,阳性率差异有统计学意义（χ2 = 22.83,P < 0.05）,平均阅片时间分别为（73.67 ± 13.56） s和（87.12 ± 15.83） s（t = 14.60,P < 0.05）;54例花斑糠疹标本检出阳性分别为51例（94.44%）、50例（92.59%）（校正χ2 ＝ 0,P > 0.05）,平均阅片时间分别为（38.36 ± 8.79） s、（41.25 ± 15.67） s（t = 1.14,P > 0.05）;48例马拉色菌毛囊炎检出阳性分别为43例（89.58%）、11例（22.92%）（χ2 = 43.34,P < 0.05）,平均阅片时间分别为（42.14 ± 12.61） s、（103.56 ± 9.48） s（t = 17.83,P < 0.05）。600例浅部真菌感染标本中,479例培养阳性,其中荧光染色法检测阳性476例,阴性3例（0.63%）,KOH湿片法检测阳性465例,阴性14例（2.92%）,漏诊率差异有统计学意义（χ2 = 7.25,P < 0.05）。结论 荧光染色法相比于KOH湿片法可以提高检出阳性率,减少漏诊,缩短阅片时间。     

荧光染色法和KOH湿片法、真菌培养法在皮肤浅部真菌感染诊断中的应用比较

目的： 评估荧光染色法在皮肤浅部真菌感染诊断中的价值。方法： 收集我院皮肤门诊疑似皮肤浅部真菌感染标本，同时采用荧光染色法、KOH湿片法和真菌培养法进行检测，比较检测结果。结果： 在236例标本中荧光染色法、KOH湿片法、真菌培养法总阳性率分别为90.6%、67.4%、60.2%，在179例皮屑标本中阳性率分别为92.1%，69.3%，64.2%，52例甲真菌病标本中阳性率分别为84.6%，57.7%，44.2%，荧光染色法与其他两种方法相比，差异均有统计学意义（均P<0.01）。5例毛发标本中阳性率分别为100%，100%，80%,三种方法阳性率无统计学差异（均P>0.05）。结论： 荧光染色法简单有效，可以降低假阴性率。     

儿童浅部真菌病1586例荧光染色法和KOH湿片法镜检效果比较

目的 分析荧光染色法和KOH湿片法检测儿童浅部真菌病的效果。方法 收集2019年5月-2021年5月徐州医科大学附属徐州市儿童医院皮肤科门诊1 586例拟诊为儿童浅部真菌病的标本,分别采用荧光染色法和KOH湿片法直接镜检,比较阳性率检出结果。计数资料的比较采用卡方检验、Fisher精确检验。结果 荧光染色法和KOH湿片法检出阳性分别为1 168例(73.64%)和926例(58.39%),阳性率差异有统计学意义(P<0.05);431例念珠菌病标本检出阳性分别为317例(73.55%)和218例(50.58%);800例体癣标本检出阳性分别为664例(83.00%)和561例(70.13%);290例头癣标本检出阳性分别为138例(47.59%)和102例(35.17%);65例甲真菌病标本检出阳性分别为49例(75.38%)和45例(69.23%)。KOH湿片法检出阴性的660例标本中荧光染色法检出阳性264例(40.00%),而荧光染色法检出阴性的418例标本中KOH湿片法检出阳性22例(5.26%),阳性率差异有统计学意义。结论 儿童浅部真菌病临床表现不典型,荧光染色法的应...     

荧光染色、PAS染色和美蓝染色在马拉色菌毛囊炎诊断中的比较

目的比较真菌荧光染色、过碘酸雪夫染色(PAS)和美蓝染色在马拉色菌毛囊炎诊断中的价值。方法皮肤科门诊马拉色菌毛囊炎患者100例,每例患者均于皮损处取3份标本,同时行荧光染色、PAS染色和美蓝染色进行比较。结果 100例患者中,荧光染色阳性98例,PAS染色阳性91例,美蓝染色阳性93例,三者间阳性率无显著性差异。结论荧光染色、PAS染色和美蓝染色在马拉色菌毛囊炎诊断中均具有良好的染色效果。美蓝染色法操作简单,对于初学者易于常握,且成本较低,适用于临床。     

荧光染色法与KOH湿片法在皮肤浅表真菌感染中的应用比较

目的:比较荧光染色法与KOH湿片法在皮肤浅表真菌感染中的应用价值。方法:收集我科门诊疑似皮肤浅表真菌感染患者192例,其中体股部98例,手足部52例,指(趾)甲42例,标本均分为2份,分别行荧光染色法与KOH湿片法,比较其检测结果。结果:荧光染色法阳性141例,阴性51例,阳性率为73.4%;其中体股部阳性77例,阴性21例,阳性率为78.6%;手足部阳性39例,阴性13例,阳性率为75.0%;指(趾)甲部阳性25例,阴性17例,阳性率为59.5%。KOH湿片法阳性103例,阴性89例,阳性率为53.6%;其中体股部阳性59例,阴性39例,阳性率为60.2%;手足部阳性28例,阴性24例,阳性率为53.8%;指(趾)甲部阳性16例,阴性26例,阳性率为38.1%。荧光染色法真菌检测阳性率明显高于KOH湿片法(2=16.23,P<0.05)。荧光染色法检测体股部、手足部及指(趾)甲部相对KOH湿片法的特异度分别为53.8%、54.2%、65.4%,灵敏度均为100%。结论:荧光染色法对初学者操作简单、准确性高、患者可分辨真菌形态,治疗依从性高,适合临床应用。     

甲真菌病临床疑诊病例荧光染色、直接镜检、真菌培养检出率的比较

目的评估荧光染色法在甲真菌病诊断中的价值。方法收集2016年1月-2018年12月到本院皮肤科就诊,经临床拟诊为甲真菌病的患者,共924例。收集甲屑,将取得的甲屑均分3份,1份加10%KOH后盖上盖玻片镜检,1份做真菌培养,一份用荧光染色法镜检。结果 924份病甲标本中有712例荧光染色法阳性,占77.06%;455例培养阳性,占49.24%;297例直接镜检阳性,占32.14%。荧光染色法与培养法和直接镜检法阳性率差异均有统计学意义(P0.01)。培养法与直接镜检法阳性率差异有统计学意义(P0.01)。结论荧光染色法是一种检出率高、简单、快速有效的适合甲真菌病的诊断方法。     

荧光染色法与KOH湿片法在浅部真菌感染直接镜检中的应用比较

目的比较荧光染色法和KOH湿片法在真菌直接镜检中的应用。方法采集皮肤科门诊105例疑为浅表真菌感染的患者皮损标本,每例同时行荧光染色法及KOH湿片法检测,并对检测结果进行比较。结果 105份标本中荧光染色法检出85例阳性,KOH湿片法检出58例阳性,荧光染色法阳性率(80.95%)明显高于KOH湿片法(55.23%)。结论荧光染色法较KOH湿片法结果更快速、准确,可用于浅部真菌感染的快速诊断。     

非感染性肉芽肿

20140871皮下结节病一例／费良阅（北京中日友好医院皮肤科）,陈杨鑫,张晓艳∥实用皮肤病学杂志．-2013,6（5）．-303～304 患者女,52岁。四肢皮下结节反复发作4年余,有轻触痛,2～3月后皮损可自行消退,不留痕迹,反复发作。皮损组织病理：皮下脂肪中散在肉芽肿性结节,由上皮样细胞构成,无干酪样坏死,可见多核巨细胞,PAS染色（-）,抗酸染色（-）。诊断为皮下结节病,患者拒绝治疗。半年后随访,原有结节部分消退,未见遗留痕迹,有少量新疹,但前明显减轻,后失访。本病须与转移性Crohn病、皮肤结核、非典型分枝杆菌感染和深部真菌病鉴别。通常认为本病易伴发系统损害,但不发生骨损害、肺纤维化等严重系统病。预后相对较好。     

地奈德乳膏与丁酸氢化可的松乳膏治疗婴幼儿特应性皮炎的多中心、随机、平行对照临床研究

目的 评价0.05%地奈德乳膏治疗婴幼儿轻中度特应性皮炎的有效性及安全性。方法 2016年12月至2017年11月,首都医科大学附属北京儿童医院皮肤科联合重庆市儿童医院、复旦大学附属儿科医院皮肤科,采用随机、开放、阳性药物平行对照的多中心研究方法,以0.1%丁酸氢化可的松乳膏为阳性对照,入组特应性皮炎患儿120例,试验组61例,对照组59例。分别评估两组治疗后1周、2周及3周时有效率、湿疹面积及严重程度指数（EASI）、婴儿生活质量调查量表（IDQOL）改善情况及不良事件和不良反应的发生情况。采用SAS 9.4统计分析软件。有效率比较采用可信区间法进行非劣效检验,比较试验组是否非劣效于对照组;两组间计量资料比较采用独立样本t检验,与入组时基础值的比较采用配对t检验,若资料不服从正态分布或方差不齐,采用Wilcoxon秩和检验;组间无序分类资料比较采用χ2检验。结果 治疗第1周、2周及3周时（全分析集）,试验组分别为有效46例（86.79%）、49例（92.45%）及51例（96.23%）,对照组分别为36例（83.72%）、35例（81.40%）及41例（95.35%）,经非劣效分析（非劣效界值为-0.15）,试验组有效率与对照组相当。试验组基线、1周、2周及3周时EASI评分分别为4.57 ± 3.19、0.72 ± 0.89、0.45 ± 0.87、0.18 ± 0.40,对照组分别为4.50 ± 3.29、1.03 ± 1.81、0.62 ± 0.85及0.28 ± 0.82,经配对秩和检验,两组组内治疗后EASI值均低于基线,试验组T值分别为-715.5、-9.4、-715.5,对照组分别为-437.5、-473.0、-472.0,均P < 0.001;经秩和检验,各观察点两组间EASI值差异均无统计学意义（P > 0.05）。经配对秩和检验,治疗后试验组IDQOL评分与基线差异均有统计学意义（P < 0.001）,两组间经独立样本秩和检验,差异均无统计学意义（P > 0.05）。试验组发生不良事件12例（19.7%）、对照组10例（16.9%）,两组差异无统计学意义（χ2 = 0.029,P > 0.05）。结论 0.05%地奈德乳膏治疗轻中度婴儿期特应性皮炎与0.1%丁酸氢化可的松乳膏疗效相当,可为轻中度婴儿期特应性皮炎患儿治疗选择方案之一。     

不同底物间接免疫荧光对自身免疫性表皮下水疱病诊断的评价

【摘要】 目的 评价以正常人皮肤、猴食管及盐裂皮肤为底物的间接免疫荧光对自身免疫性表皮下水疱病的诊断价值。方法 选取2015年1月至2016年12月在中国医学科学院皮肤病研究所诊断的自身免疫性表皮下水疱病56例,其中大疱性类天疱疮（BP）47例,获得性大疱性表皮松解症（EBA）6例,线状IgA大疱性皮病2例,P200类天疱疮1例。对照组为70例天疱疮、15例慢性湿疹和15例健康成人。分别以正常人皮肤、猴食管及盐裂皮肤为底物行间接免疫荧光,观察荧光沉积情况,比较不同表皮下水疱病间接免疫荧光检测的敏感性和特异性。采用SPSS 13.0软件,计数资料比较采用χ2检验。结果 BP患者血清以正常人皮肤、猴食管为底物间接免疫荧光可见到荧光物质沿基底膜带线性沉积,盐裂皮肤间接免疫荧光可见BP患者荧光线性沉积于表皮侧,EBA和P200类天疱疮线性沉积于真皮侧。以正常人皮肤、猴食管及盐裂皮肤为底物间接免疫荧光对表皮下水疱病诊断的敏感性分别为73.2%、60.7%、94.6%,差异有统计学意义（χ2 = 18.2,P < 0.05）,特异性分别为98.0%、100%、97.1%,差异无统计学意义（P > 0.05）,以盐裂皮肤为底物时诊断的敏感性高于以正常人皮肤、猴食管为底物（χ2值分别为8.0、16.7,均P < 0.05）。结论 对于自身免疫性表皮下水疱病的诊断,盐裂皮肤为底物行间接免疫荧光检查优于以猴食管和正常人皮肤为底物。     

头皮病理活检在脱发疾病诊疗中的相关应用

【摘要】 脱发是皮肤科门诊中常见的疾病。尽管一些毛发疾病并不依赖病理检查,随着科技水平的发展,许多新型无创毛发及头皮检测仪器,如皮肤镜、毛发扫描仪、皮肤CT等,它们在毛发疾病的诊疗中的作用日益被重视,但病理检查的作用仍然无可替代。考虑到毛发疾病的特殊性,毛发病理不同于普通的皮肤病理,其主要表现在头皮活检时的取材部位、活检方式、切片方式、读片内容等方面。本文就头皮病理活检如何在脱发疾病中的诊疗中发挥作用作一综述。     

微小RNA-373表达下调对皮肤鳞状细胞癌A431细胞周期和凋亡的影响

【摘要】 目的 探讨微小RNA-373（miR-373）表达下调对皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）A431细胞周期和凋亡的影响。方法 将对数生长期A431细胞分为3组,miR-373抑制剂组和阴性对照组分别转染miR-373抑制剂和阴性对照miRNA,未处理组不做任何处理。转染后48 h,采用实时PCR检测各组miR-373的表达水平;采用CCK-8试剂分析miR-373表达下调对A431细胞增殖的影响,流式细胞仪检测不同处理组A431细胞周期分布和凋亡的变化,最后采用比色法检测各组胱天蛋白酶3（caspase-3）活性的变化。两组之间数据比较采用t检验,3组及以上采用单因素方差分析,两两组间比较采用LSD-t检验。结果 miR-373抑制剂组miR-373表达水平为0.120 ± 0.036,显著低于未处理组（1.002 ± 0.022）和阴性对照组（1.037 ± 0.028）,t值分别为36.21、34.83,均P < 0.001。miR-373抑制剂组在48、72和96 h细胞增殖活性均显著低于未处理组和阴性对照组,F值分别为10.805、13.720和30.907,P值分别为0.038、0.010和0.001）。miR-373抑制剂组G0/G1期比例为64.69% ± 1.18%,显著高于未处理组（52.74% ± 0.66%）和阴性对照组（53.80% ± 0.80%）,t值分别为15.51和13.24,均P < 0.001;总凋亡细胞比例为22.69% ± 1.24%,显著高于未处理组（9.62% ± 1.14%）和阴性对照组（9.66% ± 0.97%）,均P < 0.001;caspase-3活性为1.238 ± 0.057,显著高于未处理组（0.413 ± 0.028）和阴性对照组（0.437 ± 0.036）（均P < 0.001）。结论 miR-373可能在皮肤鳞癌细胞周期调控和凋亡诱导中发挥重要作用。     

残疾基因同源物2相互作用蛋白在皮肤基底细胞癌中的表达及临床意义

【摘要】 目的 探讨残疾基因同源物2相互作用蛋白（DAB2IP）基因在皮肤基底细胞癌组织中的表达及临床意义。方法 采用回顾性分析方法,选择2012年1月至2017年11月在广东省第二人民医院皮肤科以及广州市皮肤病防治所门诊或住院接受皮肤肿物切除且资料完整的患者105例,其中病理证实为皮肤基底细胞癌患者79例作为病例组,除皮损外无其他明显临床症状、且病理证实为良性皮赘患者26例作为对照组。免疫组化法检测两组中DAB2IP的表达,分析DAB2IP表达水平与皮肤基底细胞癌临床表型及病理的相关性。采用SPSS21.0统计软件进行统计分析,计数资料比较采用χ2检验。结果 DAB2IP蛋白在对照组26例中阳性11例（42.3%）,病例组79例中阳性74例（93.7%）,两组比较,差异有统计学意义（χ2 = 33.50,P < 0.05）。DAB2IP表达与皮肤基底细胞癌患者性别、年龄、肿瘤大小无关（均P > 0.05）,浅表性组（5/7）浸润性组（95.8%）DAB2IP阳性表达率差异有统计学意义（χ2 = 6.47,P < 0.05）。79例皮肤基底细胞癌中,Ki?67蛋白阳性31例（39.2%）,且表达Ki?67的癌细胞都表达DAB2IP。结论 DAB2IP在皮肤基底细胞癌中表达增加,可能与皮肤基底细胞癌的发生和浸润有关。     

以皮肤损害为首要表现的巨细胞病毒感染一例

【摘要】 报道1例以皮肤损害为首要表现的巨细胞病毒（CMV）感染。患者女,46岁,因口周水疱、糜烂、痛3个月,左臂红斑、水疱、糜烂6周就诊。既往有系统性红斑狼疮、狼疮性肾炎病史12年, 5个月前狼疮活动,予糖皮质激素及吗替麦考酚酯治疗。皮肤科检查：口周见不规则水疱,部分糜烂结痂;左前臂屈侧见一片状红斑,中央糜烂;左上臂见红斑水疱;腹部多发瘀点、瘀斑。皮损组织病理（左上臂）：表皮松解坏死,内可见病毒包涵体样结构;免疫组化：表皮松解处大细胞内CMV抗原染色阳性。皮损分泌物CMV DNA阳性,血清CMV DNA初次检测阴性,1周后为8.04 × 103拷贝/ml;血清CMV IgG阳性。诊断：皮肤CMV感染。予口服更昔洛韦及外用后皮疹逐渐好转,但随后出现重症肺部感染,最终患者因多脏器功能衰竭死亡。     

手湿疹中外诊疗指南概述

【摘要】 手湿疹是一类发生在手部的皮炎湿疹类疾病,其病因复杂、病程长、易复发,治疗较为困难。按病因可分为过敏性接触性皮炎、刺激性接触性皮炎、特应性手部湿疹三大类;按形态学可分为角化型、水疱型、指头炎、钱币状湿疹等类型。手湿疹的治疗应以防护和修复为主,在此基础上使用外用激素药膏及钙调磷酸酶抑制剂治疗。本病为皮肤科常见病,但目前国内相关研究较为缺乏。本文综述了多项国外手湿疹指南及国内诊疗标准,重点讨论临床分型、诊断以及治疗原则,旨在为国内手部湿疹诊疗工作提供参考。     

儿童下肢隆突性皮肤纤维肉瘤一例

患儿女,6岁,因左小腿外侧结节2年就诊。患儿家长2年前发现患儿左小腿外侧出现1个淡红色绿豆大小皮肤结节,无明显痛痒感觉,结节逐渐增大。半年前结节直径增至1 cm左右,周边新发2个绿豆至黄豆大小淡红色结节,近半年结节体积逐渐变大……     

胱天蛋白酶14在慢性光化性皮炎患者皮损中的表达及中波紫外线对其mRNA和蛋白在HaCaT细胞中表达的影响

【摘要】 目的 观察胱天蛋白酶14（caspase-14）在慢性光化性皮炎（CAD）患者皮损中的表达以及中波紫外线（UVB）对HaCaT细胞caspase-14 mRNA和蛋白表达的影响。方法 2016年在昆明医科大学第一附属医院皮肤科门诊收集慢性光化性皮炎、湿疹患者皮损各10份作为试验组和阳性对照组,以10例健康人整形手术后的正常皮肤组织作为阴性对照。免疫组化染色检测caspase-14在正常皮肤、CAD及湿疹皮损中的表达。培养HaCaT细胞,分别给予0、30、60、90 mJ/cm2 UVB照射,加或不加甲基化酶抑制剂（5-AzaC）培养24 h后提取细胞,实时荧光定量PCR、Western印迹法检测UVB照射及加入5-AzaC 前后HaCaT细胞caspase-14 mRNA和蛋白表达水平。采用SPSS22.0软件,率的比较采用卡方检验,组间均数比较采用t检验和双因素方差分析。结果 在CAD和湿疹皮损内,caspase-14主要表达于棘层和颗粒层,角质层不表达;正常皮肤组织角质层中caspase-14表达显著。10例CAD患者中5例皮损caspase-14阳性,10例健康人中9例阳性,两组阳性比例差异有统计学意义（χ2 = 7.30,P < 0.05）。实时荧光定量PCR及Western印迹检测显示,不同剂量UVB照射后caspase-14 mRNA、蛋白的表达差异均有统计学意义（F值分别为87.54、23.46,均P < 0.05）,caspase-14 mRNA、蛋白的表达随UVB剂量升高有下降趋势。UVB剂量为0、30、60、90 mJ/cm2时,5-AzaC组的caspase-14 mRNA、蛋白的表达均高于UVB照射不加5-AzaC的对照组（均P < 0.05）。结论 CAD皮损中caspase-14表达降低,角质层不表达;UVB照射可下调HaCaT细胞caspase-14 mRNA及蛋白表达水平。     

膝关节浅表脂肪瘤样痣合并纤维毛囊瘤一例

患者女,50 岁,因左膝关节丘疹、结节并斑块35年于2018年6月20日就诊。患者35年前发现左膝关节一蚕豆大小肤色结节,质软,无自觉症状,之后类似皮损逐渐增多、增大,部分融合成脑回样斑块,未予诊治。既往史：高血压史,目前口服降压药物血压控制在130/90 mmHg（1 mmHg = 0.133 kPa）;5年前于外院行甲状腺腺瘤手术切除……