荔枝核对小鼠S180、EAC肿瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响研究

目的:研究荔枝核对小鼠S180、EAC肿瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法:采用小鼠腋下接种瘤株的方法,复制EAC、S180及肝癌荷瘤动物模型。小鼠EAC、S180细胞与肝癌细胞混悬液分别用生理盐水按1∶1进行稀释,制成含瘤腹水混悬液。小鼠在给药前24h进行腋窝皮下接种,每只0·2mL,整个操作在无菌条件下60min内完成。连续给药10d,观察EAC、S180肿瘤和肝癌肿瘤细胞的生长情况。结果:荔枝核能够显著抑制EAC、S180肿瘤和肝癌肿瘤细胞的生长。结论:荔枝核具有抑制小鼠EAC、S180、肝癌细胞的作用;具有抑制小鼠S180、EAC体内、外细胞生长的作用;并能促进肿瘤细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤的作用。     

肝乐康抗肿瘤作用的研究

目的 研究肝乐康对肝癌细胞株BeL-7402增殖的抑制作用和对S180实体瘤型小鼠的抗肿瘤作用.方法 以MTT法测定含药复方肝乐康血清对肝癌细胞株BBL-7402的增殖情况;将小鼠接种S180实体瘤后检测肝乐康对小鼠S180实体瘤生长的抑制作用以及对荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响.结果 不同剂量的肝乐康显著抑制肝癌细胞株BBL-7402的增殖,对S180实体瘤的抑瘤率分别为33.72%、41.36%、54.21%.结论 肝乐康具有较强的抗肿瘤作用.     

Toll样受体在S180肿瘤细胞上的表达及意义

目的通过比较S180肿瘤细胞体内、体外TLRs表达的变化,探讨TLRs在肿瘤发生、发展中的作用和意义。方法①将传代培养的S180腹水癌细胞接种于ICR小鼠腹腔左侧,建立S180腹水癌模型;②采用密度梯度离心法分离纯净肿瘤细胞;③采用半定量RT-PCR方法检测S180腹水癌体外传代培养细胞与荷瘤鼠体内瘤细胞TLR1-9 mRNA表达水平。结果TLR1、2、4、6在S180腹水癌体外传代培养细胞中表达水平高于荷瘤鼠体内瘤细胞;TLR7体外传代培养细胞中表达水平低于荷瘤鼠体内瘤细胞;TLR5、9体外传代培养细胞中有表达,荷瘤鼠体内瘤细胞无表达;TLR3、8体外传代培养细胞与荷瘤鼠体内瘤细胞均无表达。结论S180肿瘤细胞可表达TLRs,并且不同的TLRs在体内、体外的表达有所差异,提示TLRs在肿瘤的免疫逃逸中发挥一定的作用。     

中药仙鹤复方水提取物对S180肉瘤和H22肝癌细胞在小鼠体内的抗肿瘤作用研究

目的观察中药仙鹤复方水提取物对移植型鼠源S180肉瘤和H22肝癌细胞在荷瘤动物体内抗肿瘤作用。方法昆明种受试小鼠,接种S180肉瘤和H22肝癌细胞后随机分为空白对照组、阳性对照组及中药仙鹤复方水提取物高、中、低3个剂量组。观察中药仙鹤复方水提取物对肿瘤的抑制作用及动物体质量、免疫器官重量的影响。结果中药仙鹤复方水提取物对鼠源移植型S180肉瘤细胞和H22肝癌细胞在荷瘤小鼠体内的增殖均有明显的抑制作用;且对两种荷瘤小鼠的免疫器官脾脏及胸腺均有显著性的保护作用影响。结论中药仙鹤复方水提取物在动物体内具有较好的抑瘤作用,且对荷瘤小鼠免疫器官有保护作用,具备减毒的功效。     

磷脂型DHA对肿瘤细胞凋亡的影响

目的探讨磷脂型DHA(DHA-PC)的抗肿瘤生长作用。方法应用超临界CO2萃取脱除胆固醇技术从鸢乌贼卵中提取DHA-PC。采用MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞术研究DHA-PC对人肝癌HepG-2细胞增殖、凋亡的影响,并进一步利用小鼠S180移植性肿瘤模型,验证DHA-PC的体内抑瘤效应。结果 DHA-PC能够抑制HepG-2细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),诱导细胞凋亡,干扰细胞周期,使细胞停滞在G0/G1期;明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,其平均抑瘤率达40.94%。结论 DHA-PC在体内和体外都对肿瘤的生长具有抑制作用。     

旱莲草水提物对荷S180实体瘤小鼠抗肿瘤作用

［摘要］目的研究旱莲草水提物对S180 实体瘤的抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠免疫系统的影响。方法将小鼠S180实体瘤模型随机分为5组：0.9%氯化钠溶液组，环磷酰胺0.02 g&#8226;kg 1组和旱莲草水提物低、中、高剂量 （10.00，15.00，20.00 g&#8226;kg 1）组。旱莲草水提物各剂量组灌胃给予旱莲草水提物，qd，连续10 d；环磷酰胺组与0.9%氯化钠溶液组腹腔注射（ip）给药，qod。观察小鼠肿瘤生长情况、体重及免疫器官变化。结果旱莲草水提物低、中、高剂量组荷瘤小鼠肿瘤生长均受到显著抑制，抑瘤率分别为42.94%（P＜0.01）,55.91%（P＜0.01）和52.06%（P＜0.01）；旱莲草水提物低、中、高剂量组小鼠胸腺指数均高于0.9%氯化钠溶液组和环磷酰胺组，环磷酰胺组脾指数和胸腺指数均显著降低（均P＜0.05）。结论旱莲草水提物对荷瘤小鼠的肿瘤生长有抑制作用，并对小鼠的免疫系统有增强作用。     

鲜壁虎醇提物与水提物体内、外对肿瘤活性的影响

目的:研究鲜壁虎水提物与醇提物体内、外的抗肿瘤活性。方法:体外采取MTT法测定鲜壁虎水提物、醇提物对BEL-7402细胞和HepG2细胞生长的抑制作用。体内复制移植瘤小鼠H22模型,给药后计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数。结果:0.0625mg·mL-1壁虎水提物对HepG2细胞生长有显著抑制作用(P<0.05),1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎水提物对BEL-7402细胞的生长均有显著抑制作用(P<0.05)。1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎醇提物对2种细胞有促进增殖的趋势。1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎水提物与1.0000、0.0625mg·mL-1壁虎醇提物均可显著抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长活性(P<0.05)。结论:鲜壁虎水提物体外有抑制肿瘤细胞生长的作用,醇提物有促进细胞增殖的趋势。鲜壁虎水提物、醇提物体内均有抗肿瘤活性,水提物抑瘤率高于醇提物。     

白花蛇舌草水提物通过抑制MAPK通路致肺癌细胞的凋亡

目的：研究白花蛇舌草（BHSSC）水提物对肺癌细胞增殖、凋亡的影响以及体内抑制肿瘤活性,进一步通过研究其对凋亡关键通路MAPK信号通路的影响,以阐明白花蛇舌草抗肺癌分子机制。方法：制备BHSSC水提取物,采用MTT法研究其对人肺癌细胞株A549和PC-9细胞体外增殖的抑制活性,并进一步构建人肺癌的裸鼠移植瘤模型,研究BHSSC水提物的体内抗肿瘤活性;通过Western blot技术研究BHSSC水提取物对MAPK通路中关键蛋白 Erk、JNK、p38的表达水平和磷酸化水平的影响,进而阐明白花蛇舌草诱导肺癌细胞凋亡机制。结果：BHSSC水提取物可以剂量依赖性地促进肺癌细胞的凋亡,从而抑制肺癌细胞的增殖。当剂量达到600 μg·mL-1 时,肺癌细胞抑制率达到95%（P<0.01）。荷瘤裸鼠模型结果显示,在给药21天后,给药组与肺癌模型组相比,肿瘤体积显著减小,平均抑瘤率达到70%（P<0.01）。Western blot结果提示,BHSSC水提物能够显著抑制MAPK通路中关键蛋白p38、Erk、JNK的磷酸化水平。结论：BHSSC水提物能够通过抑制肺癌细胞MAPK通路的活化,促进肺癌细胞凋亡,从而抑制肺癌的体内体外增殖。     

黄芩素对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

目的:研究黄芩素对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法:以H22肝癌细胞接种于正常小鼠左前肢腋窝皮下复制肝癌H22荷瘤模型。实验分为模型对照、环磷酰胺(30mg·kg-1)和黄芩素高、中、低剂量(80、40、20mg·kg-1)组。灌胃给药,每天1次,连续15d。末次给药后处死小鼠,剥离完整的肿瘤组织称重,并计算肿瘤抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布和凋亡率;按试剂盒说明书测定肿瘤组织中半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3的活性;RT-PCR测定瘤组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA表达水平。结果:高、中剂量黄芩素可显著抑制模型小鼠体内肿瘤生长(P<0.01或P<0.05),抑制率分别为61.63%和44.65%;可显著提高G0/G1期细胞百分比(P<0.05),并减少S期细胞(P<0.01或P<0.05)。与模型对照组比较,黄芩素高、中、低剂量组细胞凋亡率显著提高(P<0.01或P<0.05)。高、中剂量黄芩素可显著增强肿瘤组织中Capcase-3活性(P<0.01或P<0.05),抑制Bcl-2mRNA表达(P<0.01或P<0.05);高剂量黄芩素可显著提高肿瘤组织中BaxmRNA表达(P<0.05)。结论:黄芩素可促进肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤细胞的凋亡,其机制可能与增强Capcase-3活性、提高Bax表达,并抑制Bcl-2表达有关。     

阳离子脂质体介导反义寡核苷酸肿瘤治疗的初步探索

目的：探讨阳离子脂质体（CL）介导反义寡核苷酸（ASODN）肿瘤治疗的效果。方法：以CL／ASODN复合物处理7721肝癌细胞，观察肝癌细胞的生长增殖和凋亡情况以及在体荷瘤小鼠治疗情况的考察。结果：CL／ASODN对7721肝癌细胞的抑制作用具有剂量和时间依赖性；荷瘤小鼠的实体瘤体积明显减小。结论：阳离子脂质体（CL）有望成为肿瘤治疗的理想载体。     

蟾蜍灵对小鼠S_(180)肉瘤bcl-2基因表达的影响

目的检测蟾蜍灵对小鼠S180肉瘤bcl-2基因表达的影响,探讨蟾蜍灵对肿瘤的抑制作用。方法建立小鼠S180肉瘤模型,从瘤组织中提取总RNA,设计目的基因引物和内参照甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPD)引物。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,分别检测实验组及对照组小鼠瘤体bcl-2基因的表达,应用Bio-RAD凝胶成像系统及在QuantityOne软件辅助下分析测定表达结果。结果实验组小鼠瘤bcl-2表达低于对照组,差异有统计学意义。结论蟾蜍灵对小鼠S180肉瘤有抑制作用。     

c-myc、bcl-2基因表达和蝌蚪提取液抗早幼粒细胞白血病作用的研究

目的 研究蝌蚪提取液(T871)抗早幼粒细胞白血病(APL)的作用及其过程中c-myc、bcl-2癌基因表达的变化。方法 利用细胞生长曲线、形态学观察、流式细胞仪、TUNEL法及原位mRNA杂交和完整细胞原位斑点印迹技术，观察T871抗人APL细胞系(HL-60)细胞的作用及其过程中c-myc、bcl-2癌基因表达的变化。结果 T871能抑制HL-60细胞增殖，并出现细胞凋亡的形态学特征，流式细胞仪及TUNEL法检测结果显示凋亡细胞百分数比对照组显增加，并伴有癌基因c-myc、bel-2mRNA表达的下调。结论 T871可抑制HL-60细胞的增殖同时诱导其凋亡，且c-myc、bcl-2癌基因可能参与了此过程。     

The anticancer activities of wogonin in murine sarcoma S180 both in vitro and in vivo

The anticancer effects of wogonin on murine sarcoma S180 both in vitro and in vivo were investigated, and its pro-apoptotic molecular mechanism was further studied. Wogonin treatment resulted in significant inhibition of S180 cells in a concentration-dependent manner detected by MTT assay. The IC(50) value for 48 h was (7.37+/-1.53)x10(-5) M. Typical morphological changes and apoptosis bleb phenomenon in S180 cells exposed to wogonin were distinctly observed by the inverted light microscope and the fluorescence microscope, respectively. According to protocols of transplanted tumor research,(1)) mice were transplanted with tumor cells S180. The weight of tumor and the peripheral leucocyte count were observed after the treatment of wogonin. The significant suppression of tumor growth was observed, and the peripheral leucocyte count of S180-bearing mice remained no significant changes compared with control group. After the treatment of 40 mg/kg wogonin, the inhibitory rate of tumor weight was 53.01%. Additional DNA fragmentation assay showed that wogonin induced apoptosis on murine sarcoma S180 tissue. RT-PCR results indicated that the increasing mRNA levels of bax and p53 and the decreasing mRNA level of bcl-2 were induced by wogonin. Western-blot assay showed that the increasing protein level of bax and the decreasing protein level of bcl-2 were induced by wogonin. Collectively, wogonin could induce apoptosis in murine sarcoma S180 thereby inhibiting the tumor growth both in vitro and in vivo. The pro-apoptotic effects might be related to the improvement of mRNA level of p53, the improvement of mRNA and protein levels of bax, and the reduction of mRNA and protein levels of bcl-2.     

顺铂对人卵巢黄素化颗粒细胞的毒性及凋亡的影响

目的研究顺铂(cisplatin,CDDP)对人卵巢黄素化颗粒细胞的毒性及凋亡的影响。方法收集体外受精—胚胎移植(IVF-ET)时的人黄素化颗粒细胞进行体外培养,采用MTT法检测不同浓度的CDDP(0、0.5、1、2.5、5mg.L-1)对人黄素化颗粒细胞生长的抑制作用;采用Hochest33258荧光染色检测细胞凋亡,流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测bcl-2和bax基因蛋白的表达。结果CDDP浓度≥1mg.L-1可抑制颗粒细胞的生长;1、2.5、5mg.L-1CDPP处理人黄素化颗粒细胞24h后,荧光染色可观察到明显的核浓缩、核碎裂形态。FCM检测bcl-2蛋白表达逐渐减少(P<0.05),各组间比较差别有统计学意义;bax蛋白表达逐渐增加(P<0.05),各组间比较差别有统计学意义。结论CD-DP可抑制人黄素化颗粒细胞生长,促进凋亡,其作用机制可能是通过上调bax和下调bcl-2基因表达实现的。     

曲古抑菌素A对肾癌细胞系GRC-1生长的抑制作用

目的 研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制药曲古抑菌素A(TSA)对肾癌GRC-1细胞生长的影响及其作用机制. 方法使用TSA处理GRC-1细胞. 噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长;流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期;Western blot免疫印迹分析p53,p21和bcl-2表达. 结果 TSA能明显抑制GRC-1细胞的增殖,且具有明显的剂量依赖性;TSA处理72 h的GRC-1细胞早期凋亡率明显提高,G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低. TSA能够明显下调bcl-2的表达,上调p21的表达,而对p53的没有显著影响. 结论TSA可以通过诱导肾肿瘤细胞的凋亡和周期阻滞而抑制癌细胞生长;其发生机制可能与下调抗凋亡基因bcl-2和上调肿瘤抑制基因p21的表达有关,TSA可能依赖非p53途径调控p21的表达.     

端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸对子宫内膜癌细胞株的影响

目的观察端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸对癌细子宫内膜癌细胞株的作用。方法用端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸与子宫内膜细胞株共同温育一定时间后,观察细胞形态变化,检测细胞Bcl-2蛋白表达情况,测定端粒酶活性。结果端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸能诱导子宫内膜癌细胞凋亡,抑制端粒酶活性,在形态学上表现为出现细胞质浓缩,变圆,核染色不均匀,核物质边聚成新月形或块壮;电泳呈凋亡特征性Ladder带;流式细胞仪分析显示,反义寡核苷酸在细胞进入DNA合成期前引起DNA损伤,使细胞停滞在G0～G1期,并诱导细胞凋亡。结论端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸能抑制端粒酶活性,诱导子宫内膜癌细胞凋亡,从而抑制子宫内膜癌的增殖。     

Antiproliferative Activity of the Chinese Medicinal Compound,Delisheng, Compared With Rg3 and Gemcitabine in HepG2 Cells

Delisheng consists of radix ginseng, radix astragali, venenum bufonis and mylabris. It has been reported that delisheng inhibits the proliferation of adenocarcinoma cells and stimulates their apoptosis. Delisheng can also enhance the body''s immunity and induce the redifferentiation of carcinoma cells. Delisheng inhibited the proliferation of HepG2 cells in MTT assay and promoted apoptosis more effectively in contrast to the active components of ginseng extract, Rg3 and gemcitabine. It is possible that Rg3 has an important role in delisheng because they all could regulate the cell cycle, apoptosis and expression of endostatin and VEGFR-2. Delisheng caused the cell cycle to arrest at the S phase, while gemcitabine blocked the cells at the G0/G1 phase in cell cycle analysis. Consequently, the apoptosis rate of the HepG2 cell line can be increased significantly by delisheng in combination with gemcitabine, compared with the single drug. The expression of the procaspase proteins, caspase protein, and dr5 detected by Western blot were increased while bcl-2 and survivin decreased in the delisheng group, compared with controls. The observations suggest that the delisheng induced apoptotic effect might be closely related to the mitochondrial apoptosis pathway, and the death receptor signaling pathway.     

干扰素-γ对HT29结肠癌细胞株癌基因表达的影响

目的观察干扰素(IFN)-γ对结肠癌细胞HT29增殖的影响,并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测凋亡,并定量检测对癌基因蛋白表达的影响。结果浓度≥100U/ml的IFN-γ能抑制HT29细胞增殖,作用呈时间依赖性,在24、48、72h抑制率分别为13%、32%、44%;流式细胞仪检测表明IFN-γ可诱导细胞凋亡,降低癌基因蛋白c-myc、bcl-2表达而促进bax表达(P<0.01)。结论IFN-γ对HT29细胞的抑制作用可能是通过抑制癌基因蛋白c-myc、bcl-2表达,促进bax表达而诱导了凋亡,及产生细胞周期阻滞。     

三氧化二砷对人骨髓瘤细胞株U266作用的研究

目的研究三氧化二砷（As2O3）对多发性骨髓瘤细胞株U266的作用。方法应用不同浓度的As2O3处理U266,采用细胞培养、流式细胞测定、原位杂交和酶联免疫吸附测定技术检测As2O3对U266的细胞活力、细胞凋亡、癌基因bcl-2表达和血管内皮细胞生长因子（VEGF）分泌的影响。结果As2O3可抑制U266的细胞活力,诱导细胞凋亡,抑制细胞bcl-2表达和VEGF的合成,VEGF可部分阻断As2O3的作用。结论As2O3可以通过多种机制发挥抗肿瘤作用。