PI-3K在大鼠非酒精性脂肪性肝病发病中的作用

目的探讨磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病中的作用。方法30只SD大鼠随机分为3组：正常对照组、非酒精性脂肪肝模型：A组（高脂喂养8周）、B组（高脂喂养16周）。评价各组大鼠肝脂变程度和炎症活动度积分水平；免疫组化观察各组PI-3K（p85α）蛋白表达量；RT—PCR检测PI-3K（p85α）mRNA的表达水平。结果模型组脂肪变性明显，炎症活动度记分均显著高于正常对照组（P〈0．01），模型B组炎症活动度记分水平显著高于模型A组（P〈0．01）。模型A、B组PI-3K（p85α）蛋白表达量均明显低于正常对照组（P〈0．01），且模型B组PI-3K（p85α）蛋白表达量明显低于模型A组（P〈0．01）；模型A组PI-3K（p85α）mRNA表达水平与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）；模型B组PI-3K（p85d）mRNA表达水平显著低于模型A组及正常对照组（P〈0．01）。结论PI-3K可能是影响NAFLD发病的重要因素。     

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织AMPK信号通路的影响*

目的 研究甘草酸二铵脂质配位体（DGLL）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法 以高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,在造模成功后分别给予DGLL或多烯磷脂酰胆碱（PPC）灌胃16周。采用免疫组化法检测肝组织磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白激酶α（P-AMPKα）蛋白表达,采用Real-time PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-1）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）、酰基辅酶A氧化酶（ACO）、肝脏型脂肪酸结合蛋白（L-FABP）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）mRNA。结果 DGLL组血清瘦素为（3.87±0.38）ng/ml,显著低于模型组【（4.68±0.39）ng/ml,P<0.01】或PPC组【（4.55±0.24）ng/ml,P<0.01】;DGLL组脂联素为（12.27±0.64）μg/ml,显著高于模型组【（10.46±0.28）μg/ml,P<0.01】,但与PPC组【（12.13±0.56）μg/ml,P>0.05】比,无统计学差异;DGLL组大鼠肝组织P-AMPKα蛋白阳性表达面积为（8.38±3.27）%,显著高于模型组【（1.81±0.90）%,P<0.01】或PPC组【（5.50±0.73）%,P<0.05】;DGLL组肝组织PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平分别为（1.07±0.14、0.91±0.05、1.61±0.54）,显著高于模型组【分别为（0.26±0.12、0.14±0.01、0.10±0.03,P<0.05】,但ACO mRNA水平（0.23±0.09）与模型组比,无统计学差异【（0.24±0.02）,P>0.05】;PPC组PPAR-γ和CPT-1 mRNA水平分别为（0.65±0.16）和（0.22±0.05）,显著低于DGLL组（P<0.05）,而GLUT-4和ACO mRNA水平（1.32±0.12和0.14±0.05）与DGLL组比,无统计学差异（P>0.05）;DGLL组肝组织ACC mRNA水平为（1.67±0.23）,显著低于模型组【（3.31±0.02）,P<0.05】或PPC组【（2.69±0.14）,P<0.05】;DGLL组L-FABP mRNA水平为（1.06±0.04）,显著低于模型组【（1.26±0.02）,P<0.05】,而与PPC组【（1.06±0.09）,P>0.05】比,无统计学差异。结论 DGLL能降低NAFLD大鼠血脂、血糖、胰岛素、HOMA-IR、瘦素水平,升高脂联素,并增加肝组织P-AMPKα蛋白表达,上调PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平、下调L-FABP和ACC mRNA水平,这些作用可能与其激活AMPK通路和改善NAFLD糖脂代谢紊乱有关。     

丹栀逍遥散对非酒精性脂肪性肝病大鼠LKB1/AMPK/ACC通路及肝脂肪变性的影响

目的:探讨丹栀逍遥散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏激酶B1(LKB1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(ACC)通路及肝脂肪变性的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、水飞蓟宾组(26.25 mg·kg^-1)、丹栀逍遥散高、中、低剂量组(38.0、19.0、9.5 g·kg^-1),每组13只。采用高脂饲料连续喂养8周复制非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型。模型复制成功后水飞蓟宾组和丹栀逍遥散各剂量组大鼠开始灌胃给予相应的药物,连续给药4周,给药结束后进行取材和相关指标的检测。给药期间,观察各组大鼠的精神状况、毛色、饮食、活动等一般状态,记录给药前后大鼠体重变化;取大鼠肝、肾、脾脏并称重,计算脏器指数;生化法检测肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(NEFA)含量;苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠肝组织病理变化;Western blot检测肝组织中LKB1、AMPKα1、AMPKα2、ACC及其磷酸化水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠毛色发黄暗淡,精神萎靡;体重增量、肝脏指数、肝组织中ALT、AST、TG、TC、NEFA水平均显著升高(P<0.05),肝细胞排列紊乱,胞界不清晰,较多的脂肪空泡;肝细胞中LKB1、p-LKB1、AMPKα1、p-AMPKα1、AMPKα2、p-AMPKα2、p-ACC蛋白表达水平明显降低,ACC蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,水飞蓟宾组和丹栀逍遥散高、中剂量组大鼠一般状态有不同程度的改善,体重增量、肝脏指数、肝组织中ALT、AST、TG、TC、NEFA水平均显著降低(P<0.05),病理损伤程度减轻;肝细胞中LKB1、p-LKB1、AMPKα1、p-AMPKα1、AMPKα2、p-AMPKα2、p-ACC蛋白表达水平明显升高,ACC蛋白表达降低(P<0.05)。结论:丹栀逍遥散可能通过LKB1/AMPK/ACC信号通路,降低脂肪的合成,改善肝功能,减轻NAFLD模型大鼠肝脂肪变性。     

肌肉生长抑制素前肽基因干预对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂代谢的影响

目的 探讨肌肉生长抑制素前肽(MPRO)基因对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂代谢的影响及其分子机制.方法 60只雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为4组(每组15只):正常对照组(NC组),高脂饮食组(HF组),高脂饮食+绿色荧光蛋白组(HF+ GFP组)及高脂饮食+MPRO组(HF+ MPRO组).高脂饮食诱导肥胖小鼠模型,以重组腺相关病毒(rAAV)为载体介导MPRO基因或对照基因GFP在小鼠体内表达,观察并检测小鼠体重、皮下及内脏脂肪、血及肝脏甘油三酯水平的变化.Western印迹法检测肝脏AMP活化蛋白激酶α(AMPKα)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)的表达情况.结果 HF组体重、皮下及内脏脂肪、血及肝脏甘油三酯水平较NC组显著升高(t=9.033 ～ 35.459,P均＜0.05),HF+ MPRO组体重、皮下及内脏脂肪、血及肝脏甘油三酯水平较HF组显著降低(t=5.233～21.500,P均＜0.05).Western印迹法显示HF组肝脏AMPKα、ACC磷酸化水平及CPT-1的表达较NC组显著降低(t=16.630～ 23.671,P均＜0.05);HF+ MPRO组肝脏AMPKα、ACC磷酸化水平、CPT-1的表达较HF组显著升高(t=8.143 ～ 10.314,P均＜0.05).结论 MPRO基因可能通过激活AMPK通路,明显改善肥胖小鼠的脂代谢紊乱.     

化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠ADPN/AMPK/ACC通路的影响

目的研究化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠脂联素(ADPN)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(ACC)通路的影响。方法 72只SD大鼠随机分为空白组、模型组、对照组及高、中、低剂量组,除空白组外,其余5组以高脂饲料联合四环素腹腔注射建立NASH模型,造模第2周分别给予化痰祛湿活血方高、中、低剂量和多烯磷脂酰胆碱(易善复)胶囊对照治疗。实验结束时,观察肝匀浆游离脂肪酸(FFA)含量,ELISA及RT-q PCR法测肝组织ADPN、脂联素受体2(AdipoR2)、AMPK、ACC、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT-1)的基因与蛋白表达。多组间数据比较采用方差分析,方差齐者进一步两组间比较采用LSD-t检验,方差不齐者采用Dunnett's T3法。结果与对照组比较,高剂量组能明显降低肝匀浆FFA[(229.07±46.62)μmol/gprot vs(382.75±30.93)μmol/gprot]、肝组织ACC的基因(1.66±0.04 vs 2.40±0.37)、蛋白[(512.20±60.70)pg/g vs(756.72±61.21)pg/g]表达(P值均0.01),升高ADPN、AdipoR2、AMPK、CPT-1的基因[1.53±0.31 vs 0.75±0.11,1.38±0.33 vs 0.61±0.09,1.43±0.39 vs 0.78±0.04,1.39±0.31 vs 0.52±0.04]、蛋白[(22.23±2.75)μg/g vs(14.01±2.17)μg/g,(128.41±10.46)ng/g vs(94.62±6.88)ng/g,(1353.79±59.52)μg/g vs(1107.19±56.78)μg/g,(175.54±9.91)U/g vs(128.74±12.74)U/g]表达(P值均0.01)。结论化痰祛湿活血方能够有效激活ADPN/AMPK/ACC信号通路,影响脂肪酸的β氧化及合成,减少肝细胞脂肪沉积。     

多烯磷脂酰胆碱对大鼠非酒精性脂肪性肝病的防治作用观察

目的观察多烯磷脂酰胆碱对大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的预防作用.方法选用Wistar大鼠48只,随机分为正常组（14只）、模型组（14只）、预防组（10只）和治疗组（10只）.模型组大鼠在高脂饮食喂养12周成功诱导出NAFLD模型.预防组提前应用多烯磷脂酰胆碱胶囊干预4周,再加用高脂饮食处理12周;治疗组给予模型动物多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗12周.采用Western Bloting法检测肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和固醇调节元件结合蛋白1-c（SREBP-1c）表达.结果在12周时,与模型组比较,预防组和治疗组大鼠肝脏脂肪变程度减轻,血清ALT、AST、TG、FFA水平显著下降（P〈0.01）;正常组肝组织GRP78和SREBP-1c表达量分别为12.35±0.50和10.09±0.52,而模型组分别为40.67±1.72和34.67±1.54,预防组分别为17.97±0.89和15.73±0.58,治疗组分别为18.07±0.81和17.82±3.28（P〈0.01）;预防组与治疗组间以上各个指标比较,差异无统计学意义.结论多烯磷脂酰胆碱胶囊对单纯高脂饮食诱导的NAFLD大鼠有治疗作用,但预防性用药无明显效果.     

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织AMPK信号通路的影响

目的研究甘草酸二铵脂质配位体(DGLL)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法以高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,在造模成功后分别给予DGLL或多烯磷脂酰胆碱(PPC)灌胃16周。采用免疫组化法检测肝组织磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白激酶α(P-AMPKα)蛋白表达,采用Real-time PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)、酰基辅酶A氧化酶(ACO)、肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)m RNA。结果 DGLL组血清瘦素为(3.87±0.38)ng/ml,显著低于模型组【(4.68±0.39)ng/ml,P0.01】或PPC组【(4.55±0.24)ng/ml,P0.01】;DGLL组脂联素为(12.27±0.64)μg/ml,显著高于模型组【(10.46±0.28)μg/ml,P0.01】,但与PPC组【(12.13±0.56)μg/ml,P0.05】比,无统计学差异;DGLL组大鼠肝组织P-AMPKα蛋白阳性表达面积为(8.38±3.27)%,显著高于模型组【(1.81±0.90)%,P0.01】或PPC组【(5.50±0.73)%,P0.05】;DGLL组肝组织PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 m RNA水平分别为(1.07±0.14、0.91±0.05、1.61±0.54),显著高于模型组【分别为(0.26±0.12、0.14±0.01、0.10±0.03,P0.05】,但ACO m RNA水平(0.23±0.09)与模型组比,无统计学差异【(0.24±0.02),P0.05】;PPC组PPAR-γ和CPT-1 m RNA水平分别为(0.65±0.16)和(0.22±0.05),显著低于DGLL组(P0.05),而GLUT-4和ACO m RNA水平(1.32±0.12和0.14±0.05)与DGLL组比,无统计学差异(P0.05);DGLL组肝组织ACC m RNA水平为(1.67±0.23),显著低于模型组【(3.31±0.02),P0.05】或PPC组【(2.69±0.14),P0.05】;DGLL组L-FABP m RNA水平为(1.06±0.04),显著低于模型组【(1.26±0.02),P0.05】,而与PPC组【(1.06±0.09),P0.05】比,无统计学差异。结论 DGLL能降低NAFLD大鼠血脂、血糖、胰岛素、HOMA-IR、瘦素水平,升高脂联素,并增加肝组织P-AMPKα蛋白表达,上调PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 m RNA水平、下调L-FABP和ACC m RNA水平,这些作用可能与其激活AMPK通路和改善NAFLD糖脂代谢紊乱有关。     

柴苓调肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病胰岛素抵抗机制的探讨

[目的]探讨柴苓调肝颗粒治疗非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用机制.[方法]将造模成功的63只雄性Wistar大鼠随机分成7组,每组9只,分别为模型组,饮食控制组,甘乐对照组,三七脂肝丸对照组,柴苓调肝颗粒高、中、低剂量组,未造模的9只大鼠为正常对照组;检测各组的血糖、血胰岛素、肝脏SOCS-3mRNA和SREBP-1c mRNA表达.[结果]与正常对照组相比,模型组血糖、血胰岛素、肝组织S)CS-3mRNA、SREBP-1c mRNA表达显著上调;柴苓调肝颗粒高、中、低剂量组SOCS-3mRNA、SREBP-1cmRNA表达较模型组下调,且血糖、血胰岛素水平下降;用药各组间比较,差异无统计学意义.SOC-3mRNA表达水平与胰岛素抵抗指数、SREBP-1c mRNA表达水平呈显著正相关.[结论]SO)C-3可能通过胰岛素抵抗及上调肝组织SREBP-1c mRNA表达参与NAFLD发病,柴苓调肝颗粒能抑制肝脏SO)C-3 mRNA及的SREBP-1c mRNA表达,对NAFLD有一定治疗作用.     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核转录因子-kB／IkB的影响

目的 观察非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝组织P65（NF-kB亚型）、核转录因子-kB抑制因子（IkB）-α（IkB亚型）蛋白和mRNA表达情况及杞蓟制剂对其影响。方法 采用高脂饮食复制大鼠NASH模型。实验分正常组对照、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片组。测定肝组织P65、IkB—α蛋白和mRNA的表达。结果与正常组相比，模型组大鼠肝组织P65、IkB—蛋白和mRNA表达明显增强（P〈0．01），且P65蛋白主要在胞核分布；与模型组相比，杞蓟制剂组大鼠肝组织P65、IkB—α蛋白和mRNA的表达明显降低（P〈0．05）。复方蛋氨酸胆碱片组大鼠肝组织P65、IkB-α蛋白和mRNA的表达虽有所降低，但与模型组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 NF—kB蛋白和mRNA表达增强及NF-kB蛋白活化增强参与了NASH的发病。杞蓟制剂能够抑制NF-kB（P65）蛋白和mRNA的表达，从而能防治NASH。     

AcSDKP对非酒精性脂肪性肝病细胞模型炎症、凋亡的影响及机制

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline, AcSDKP)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)细胞模型炎症反应、凋亡的影响及机制。方法 选取LO2肝细胞(对照组),以0.5 mmol/L的游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)处理并建立NAFLD细胞模型(模型组),并采用不同浓度AcSDKP处理细胞，分为低剂量组、中剂量组及高剂量组。油红O染色实验检测细胞内脂肪沉积，ELISA检测ALT、AST、TG、TC、MAD、TNF-α及IL-6水平，TUNEL染色、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡，Western blotting检测细胞Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、AMPK、SREBP-1c、FAS的表达水平。结果 与对照组比较，模型组细胞内脂滴沉积增加，ALT、AST、TG、TC及MDA表达水平增加；细胞上清液TNF-α含量升高，IL-10含量降低；细胞凋亡率升高，cleav...     

HIF-1α对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织的影响*

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展中的作用。方法 将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、高脂饮食模型组和蛋氨酸-胆碱缺乏饮食(MCD)模型组,每组10只,建立非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,分别取肝组织行组织病理学检查,采用缺氧探针检测肝组织缺氧程度,采用Real-time PCR法检测肝组织HIF-1α mRNA水平,采用Western blot法检测肝组织HIF-1α蛋白表达。另取小鼠肝星状细胞JS-1细胞,分为对照组、腺病毒载体组和HIF-1α ShRNA腺病毒载体感染组,采用MTT法检测细胞活性,采用Real-time PCR法检测细胞1型胶原(COL1)和3型胶原(COL3)、TNF-α、IL-1β和TGF-β1 mRNA水平。结果 缺氧探针染色显示高脂饮食模型组和MCD模型组小鼠肝组织染色阳性率分别为85%和78%,显著高于对照组的7%(P<0.05);高脂饮食模型组和MCD模型组小鼠肝组织HIF-1α mRNA水平分别为对照组小鼠的2.1倍和1.6倍(P<0.05),HIF-1α蛋白表达水平也相应地增强;HIF-1α ShRNA腺病毒载体感染细胞活力仅为对照组的37%(P<0.05),细胞COL1、COL3、TNF-α、IL-1β、TGF-β1 mRNA水平也显著降低(P<0.05)。结论 HIF-1α能够促进小鼠NAFLD进展,抑制HIF-1α表达可能能延缓NAFLD进展,值得进一步研究。     

柴苓调肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织肿瘤坏死因子-α及瘦素基因表达的影响

目的:通过实验研究观察柴苓调肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、瘦素(LP)基因表达的影响,探讨其治疗作用机制。方法:以喂高脂饲料的方法制备大鼠NAFLD模型,造模成功后,随机分为8组,柴苓调肝颗粒高、中、低剂量组,甘乐对照组、三七脂肝丸对照组、模型对照组、饮食控制组和正常对照组。观察实验大鼠治疗前后一般状态及病理改变;采用免疫组化二步法检测肝组织中的TNF-α,CYP2E1蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Real Time-PCR,RT-PCR)法检测肝组织中的TNF-αmRNA和LPmRNA表达水平。结果:柴苓调肝颗粒高剂量组大鼠各项指标与模型对照组和饮食控制组比较差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论:柴苓调肝颗粒可以减轻大鼠体重,降低肝组织中TNF-α、CYP2E1含量及蛋白表达量,降低肝组织中的TNF-α和LP mRNA表达水平,使肝组织病理学改变减轻并且趋于正常。其作用机制可能与柴苓调肝颗粒能够调节脂代谢相关的TNF-α和LP有关。     

游泳耐力运动对小鼠骨骼肌AMPK/SIRT1信号通路的影响

目的探讨游泳耐力运动对小鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子2相关酶(SIRT)1信号通路的影响。方法选取SPF级雄性小鼠24只,按照随机数字表法分为对照组和模型组各12只。采用皮下注射5 mg/kg的地塞米松磷酸钠注射液建造肌肉衰减综合征小鼠模型,每天0.1 ml/10 g,连续注射6 w。建模成功后再根据随机数字表法将对照组分为正常对照组和耐力运动对照组各6只,模型组分为正常模型组和耐力运动模型组各6只,耐力运动对照组和耐力运动模型组进行相应的游泳耐力运动训练。评价模型组小鼠建模情况。对比小鼠骨骼肌中AMPK mRNA、AMPK蛋白和SIRT1 mRNA、SIRT1蛋白表达情况。结果模型组小鼠建模成功,小鼠跑台掉下次数显著多于对照组,游泳速度和筋肉含量显著低于对照组(P<0.05)。耐力运动模型组小鼠的AMPKα1 mRNA、AMPKα2 mRNA、SIRT1 mRNA均显著高于正常对照组、耐力运动对照组、正常模型组(P<0.05),耐力运动对照组AMPKα2 mRNA高于正常对照组和正常模型组(P<0.05)。耐力运动对照组和耐力运动模型组AMPK蛋白均显著高于正常对照组和正常模型组(P<0.05)。结论肌肉衰减综合征小鼠筋肉含量减少,运动能力下降,同时游泳耐力训练可增加肌肉衰减综合征小鼠的AMPKα1 mRNA、AMPKα2 mRNA、SIRT1 mRNA水平,同时增加AMPK蛋白水平,其具体机制还有待进一步研究。     

越鞠丸对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏PPARα表达的影响

目的 观察越鞠丸对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARα)表达的影响.方法 采用喂饲高脂饲料的方法复制NAFLD大鼠模型,实验分组为正常对照组、模型组、东宝肝泰对照组和越鞠丸高、低剂量组.提取肝脏总RNA,运用半定量RT-PCR方法观察各组大鼠肝脏PPARα mRNA的表达情况,同时测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆TC、TG的含量,并做病理切片.结果 模型组大鼠PPARα mRNA的含量明显降低,血脂和肝脏脂质含量明显升高,肝脏呈明显脂肪变性,经药物治疗后,各治疗组大鼠肝脏PPARα mRNA表达明显增强,血脂和肝脏脂质含量显著降低,肝脂变程度明显减轻.结论 越鞠丸能增强NAFLD大鼠肝脏PPARα mRNA的表达,可能是其治疗NAFLD的分子机制之一.     

山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病大鼠糖脂代谢作用的研究

目的：观察山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠糖脂代谢的影响。方法：用高脂饲料诱导建立大鼠NAFLD模型,分为正常组、模型组、阳性药物对照组、山楂叶提取物组、自然恢复组和节食组,观察各组大鼠血清中甘油三酯（TC）,总胆固醇（TG）,游离脂肪酸（FFA）,脂蛋白酯酶（LPL）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（INS）和胰岛素抵抗指数（IRI）以及大鼠肝脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）mRNA的表达情况及其肝组织病理学改变情况。结果：与模型组和自然恢复组相比,山楂叶提取物组大鼠体重明显降低,血清TC、FFA、FPG、INS、IRI明显降低（P〈0．05）,同时LPL升高以及PPARαmRNA表达量升高亦有统计学意义（P〈0．05）。结论：山楂叶提取物能够改善NAFLD大鼠的糖脂代谢异常,这可能与提高LPL的含量和增加PPARctmRNA表达有关。     

脂肪分存的顺序及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨高脂饲养SD大鼠脂肪分存的顺序及其与胰岛素抵抗的关系。方法将8周龄雄性SD大鼠随机分为2组：正常饲养组（NC，n=40）、高脂饲养组（HF，n=40）。在不同周龄测定血清、肝脏、肌肉组织中甘油三酯（TG）含量；进行正常血糖高胰岛素钳夹试验评估胰岛素的敏感性；并用定量PCR方法分析肝脏和肌肉中脂代谢调控基因mRNA表达的变化。结果（1）与NC组比较，高脂饲养4周、8周时血TG无明显变化，12周时明显增高[0．52（0．15-1．00）mmol／L vs 0．31（0．09-0．53）mmol／L，P〈0．01]，持续至20周。（2）HF组肝脏TG含量从高脂饲养4周始便明显增高[（34．38±11．12）mg／g vs（1．65±0．37）mg／g，P〈0．01]，一直持续至20周；肌肉TG在高脂饲养4、8、12周均无明显变化，高脂饲养20周时明显增高[（32．24±7．24）mg／g vs （2．77±0．76）mg／g，P〈0．01]。（3）正常血糖高胰岛素钳夹试验表明，HF组高脂饲养4周始葡萄糖输注率（GIR）呈下降趋势，高脂饲养8周时明显下降[（21．81±7．20）mg·kg^-1·min^-1 vs （8．44±1．77）mg·kg^-1·min^-1，P〈0．01]，一直持续至20周。（4）脂代谢调控基因的检测表明，高脂饲养4周时肝脏中合成基因乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）的表达无明显增高而氧化基因肉毒碱酰基转移酶（CPT-1）的表达下降20．3％（P〈0．05），肌肉组织ACC2、CPT-1的表达均无明显变化（P〉0．05）；高脂饲养8周时肝脏中ACC1的表达增高20．6％、CPT-1的表达下降27．1％（P〈0．05），肌肉组织ACC2的表达增高18．6％、CPT-1的表达下降19．2％（P〈0．05）；高脂饲养20周时肝脏ACC1表达增高48．3％（P〈0．05）、CPT-1表达无明显变化（P〉0．05），肌肉ACC2表达增高101．1％、CPT-1的表达下降71％（P〈0．05）。结论高脂饲养SD大鼠脂肪分存过程中，肝脏早于肌肉，肝脏TG含量增加可能是胰岛素抵抗的早期标志之一。脂代谢调控基因的表达可能在其中起了重要作用。     

罗格列酮和二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪肝病的预防及机制研究

目的观察罗格列酮和二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的预防作用,并探讨其可能作用机理。方法32只雄性SD大鼠分为4组:正常对照组、NAFLD对照组、罗格列酮干预组、二甲双胍干预组。以高脂饲料饲养诱发脂肪肝大鼠模型。12周末,处死所有动物,检测血脂、肝功能、肝脂质含量、肝组织病理学等,并检测血肿瘤坏死因子α(TNF-α)及肝组织TNF-α、肉毒碱软脂酰转移酶Ⅰ(CPT-Ⅰ)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达等指标。结果与NAFLD对照组比较,罗格列酮干预组及二甲双胍干预组的血TG(0.55±0.08,0.71±0.15 vs 0.85±0.15)mmol/L、ALT(49.1±7.4,56.0±33.6 vs 110.6±44.2)U/L及肝组织TG含量(33.7±8.2,37.2±7.8 vs 54.8±7.6)mg/g均显著下降(P均<0.05),其肝脂肪变性及炎症程度亦显著减轻,其血清TNF-α(187.5±20.3,211.9±26.6 vs 324.2±34.2)pg/ml及肝组织TNF-α(0.35±0.12,0.49±0.18 vs 0.85±0.20)、FAS mRNA表达水平(0.34±0.13,0.45±0.15 vs 0.68±0.19)亦显著下降(P均<0.05)。结论罗格列酮和二甲双胍,可对高脂饲料饲养诱发的大鼠NAFLD产生保护作用;其保护作用与减少TNF-α和FAS表达有关。     

健脾清化饮对非酒精性脂肪性肝病大鼠TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的影响

目的:探讨健脾清化饮对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的治疗作用及其对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子(NF)-κB/肿瘤坏死因子(TNF)-α信号通路的影响。方法:24只SPF级雄性大鼠随机分为正常对照组(6只)和造模组(18只)。造模组大鼠前4周给予高脂饲料喂养,建立NAFLD大鼠模型。确认造模成功后,将造模组大鼠随机分为模型组、中药低剂量组、中药高剂量组,中药低剂量组、中药高剂量组分别给予3.3 g/kg、6.6 g/kg健脾清化饮(原液剂量)灌胃,模型组及正常对照组给予生理盐水(10 ml/kg)灌胃,均1次/d,给药8周。观察各组大鼠的血脂、肝酶及肝脏组织的病理学变化,以及TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB、TNF-α表达的变化。结果:与正常对照组比较,模型组、中药低、高剂量组中TC、TG、LDL-C含量及ALT、AST活性均显著提高(P0.01),HDL-C含量降低(P0.01),肝细胞排列紊乱、炎性细胞浸润、并呈现大小不一的脂滴,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白、mRNA表达以及TNF-α含量均显著上调(P0.01);与模型组比较,中药低、高剂量组中TC、TG、LDL-C含量及ALT、AST活性均显著降低(P0.01),HDL-C含量上升(P0.01),肝细胞排列较为整齐、炎性细胞浸润减轻、脂滴数量减少,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白、mRNA表达及TNF-α含量均显著下调(P0.01),其中以中药高剂量组疗效更为显著。结论:健脾清化饮对NAFLD大鼠的肝组织病理改变有明显的改善作用,其可能通过阻断TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路达到治疗NAFLD大鼠的作用。     

雷公藤甲素对高糖刺激足细胞转分化的影响

目的 探讨雷公藤甲素（TP）对高糖刺激的足细胞转分化的影响及可能机制.方法 将体外培养的小鼠永生化足细胞分为正常组（加入D-葡萄糖5.5 mmol/L）、高糖组（加入D-葡萄糖30 mmol/L）、TP低剂量组（加入D-葡萄糖30mmol/L＋ TP 3 ng/mL）、TP高剂量组（加入D-葡萄糖30 mmol/L＋ TP 10 ng/mL）及甘露醇组（加入D-葡萄糖5.5 mmol/L＋甘露醇24.5 mmol/L）,采用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测各组足细胞Smad3、Smad7、Ssynaptopodin、Ddesmin mRNA及蛋白的表达量.结果 TP低剂量组、TP高剂量组Smad3、Desmin mRNA及蛋白表达均低于高糖组（P＜0.05）,Smad7、Synaptopodin mRNA及蛋白表达均高于高糖组（P＜0.05）.结论 TP可抑制高糖刺激引起的足细胞转分化,其机制可能为在转录水平和蛋白水平调节足细胞Smad3、Smad7表达异常.     

SIRT3与非酒精性脂肪性肝病肝细胞脂肪变性关系的临床研究

背景：非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指在多种因素的共同作用下,肝细胞逐渐发生脂肪变性的临床病理过程。SIRT3与棕色脂肪的产热有关,肝细胞内可检测到其表达。目的：通过检测NAFLD患者肝活检标本中SIRT3、AMP活化蛋白激酶（AMPK）、乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）和同醇调节元件结合蛋白-1（SREBP—1）的表达,探讨SIRT3与NAFLD肝细胞脂肪变性的关系。方法：从体检人员和部分行肝胆外科手术者中纳入56例NAFLD患者,12例健康体检者作为对照组。受试者先以超声检查初步诊断脂肪肝程度,然后行肝穿刺活检,确定组织病理学肝细胞脂肪变性程度,以免疫组化方法检测SIRT3、AMPK、ACC1、SREBP-1表达。结果：超声诊断的脂肪肝分级与组织病理学肝细胞脂肪变性程度一致。脂肪肝患者肝细胞内SIRT3和AMPK表达量显著低于对照组（P〈0．05）,并随脂肪肝程度的加重而减低;ACC1和SREBP．1表达量显著高于对照组（P〈0．05）,并随脂肪肝程度的加重而增加。结论：SIRT3与NAFLD的肝细胞脂肪变性呈负相关．其表达降低可能通过下调AMPK表达,使脂肪合成基因ACC1和SREBP-1表达增加,导致肝细胞发生脂肪变性。