乳腺癌中bcl-2蛋白表达的意义

为探讨抑凋亡基因ｂｃｌ－２蛋白表达在乳腺癌中的意义,应用免疫组织化学的方法,对１２５例浸润性乳腺癌患者的石蜡包埋组织切片中ｂｃｌ－２,雌激素受体,孕激素受体及ｐ＾５３基因的表达产物进行检测。结果：ｂｃｌ－２蛋白在浸润性导管癌中的表达为６３．３％,而在浸润性小叶癌中为８８．９％,二者间菜显著性间谍;在浸润性导管癌中,ｂｃｌ－２蛋白的表达与原发癌大小及肿瘤分级呈负相关,与ＥＲ,ＰＲ的表达呈正相关,与ｐ     

bcl-2 mRNA、baX mRNA表达在三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡中的意义

目的 分析三氧化二砷(As2O3)诱导肝癌细胞凋亡中凋亡相关基因bcl—2 mRNA、bax mRNA表达的意义。方法 采用电镜、流式细胞仪、电泳及半定量RT—PCR方法检测不同剂量三氧化二砷诱导人肝癌细胞株bel—7402后凋亡的出现及bcl-2mRNA、bax mRNA的表达。结果 0．5にmol/L As2O3处理肝癌细胞未见凋亡，8μmol/L As2O3诱导肝癌细胞出现明显凋亡。对照组和药物组未检测到bcl-2 mRNA的表达，随浓度增加，bax mRNA的表达上调。结论 As2O3通过诱导凋亡抑制肝癌细胞株bel-7402的增殖，凋亡诱导基因bax mRNA的表达上调与此过程有关。bcl—2mR—NA表达与此过程无关。     

p53和bcl-2在人前列腺癌和高分级前列腺上皮内瘤细胞中的表达及意义

研究发现前列腺上皮内瘤 (ＰＩＮ)可能为人前列腺癌 (ＰＣａ)的前趋病变[1] 。我们采用免疫组织化学方法检测并比较ＰＣａ和高分级ＰＩＮ细胞中ｐ5 3和ｂｃｌ 2蛋白的表达 ,探讨人ＰＣａ的发生机制 ,报告如下。材料与方法　经病理证实的 12例高分级ＰＩＮ及 2 3例ＰＣａ石蜡包埋标本。两组患者年龄分别为 5 3～ 6 7岁和 5 7～78岁。ｐ5 3和ｂｃｌ 2蛋白表达的免疫组化分析方法参照文献 [2 ]。结果　 12例ＰＩＮ标本组织细胞中均有较强的ｂｃｌ 2蛋白表达而无ｐ5 3蛋白表达 ,2 3例ＰＣａ标本细胞中ｐ5 3和ｂｃｌ 2蛋白表达者分别为 6例和 5例…     

肝缺血再灌注细胞凋亡现象及Fas蛋白、PCNA 、p53、bcl-2 mRNA表达

目的：探讨肝缺血再灌注肝细胞凋亡发生的时空分布、基因表达特点及意义。方法：在观察SD大鼠（n=40）肝缺血0,30,45,60min再灌注3,6,24h存活率及病理形态基础上,重点观察大鼠（n=100)全肝血流阻断30min再灌注0,0.5,1,3,6,12,24,48,72,96h凋亡细胞分布（原位末端标记术,TUNEL）,G0-G1期细胞、凋亡细胞、增殖细胞指数分布（流式细胞术）,肝细胞显微及超微结构（光镜、电镜技术）,Fas蛋白、PCNA蛋白（免疫组化）及p53、bcl-2基因mRNA表达（原位杂交）。结果：缺血30min组多见细胞凋亡,细胞应答反应主要为三期：①急性期：再灌注0.5h Fas蛋白首先在血管周围高表达;②亚急期（3-24h):TUNEL阳性细胞在血管周围高分布,并向周围扩展;病理形态可见严重变性、细胞皱缩、细胞增殖三种变化;G1期细胞数大量减少,凋亡峰逐渐升高,12h后出现增殖峰,相关基因表达增强;③恢复早期（24-96h)：G1期细胞指数回升,凋亡峰和增殖峰持续并缓慢下降;相关基因表达陆续减弱。结论：肝缺血30min再灌注期机体可能通过下述基因调控途径影响细胞损伤应答反应：①Fas死亡基因与bcl-2存活基因的双重调控;②细胞凋亡与增殖双重调控;③经p53基因实现的细胞周期调控。     

胰腺癌中bcl-2的表达与细胞凋亡及癌基因c-myc表达的关系

目的：探讨人胰腺癌中bcl-2的变化情况与细胞凋亡及c-myc表达的关系。方法：采用免疫组织化学（SP法）和分子原位杂交法检测bcl-2及c-myc在胰腺癌病人癌组织（50例）和胰腺癌转移灶组织（15例）中的表达。采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果：细胞凋亡的变化规律与胰腺癌的发生发展和临床病理特征有着内在联系。在mRNA和蛋白水平上bcl-2基因和c-myc基因分布一致。bcl-2蛋白的表达影响胰腺癌中细胞凋亡,并与c-myc蛋白在胰腺癌和胰腺癌转移灶组中的表达协同关系。结论：bcl-2和c-myc基因在胰腺癌发生和发展过程中发挥着重要作用。     

胰腺癌细胞凋亡与bcl-2,bax基因的表达

目的探讨胰腺癌组织中的bcl-2和bax的表达及bcl-2/bax比值与胰腺癌细胞凋亡的关系.方法对30例胰腺癌标本应用免疫组化SP方法测定胰腺癌切片中的凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因bax的表达;同时应用TUNEL法测定胰腺癌细胞原位凋亡情况.结果高分化腺癌的凋亡指数(AI)为(5.70±1.21)%;中低分化腺癌为(6.80±2.01)%.AI与bcl-2/bax比值呈负相关关系(r=- 0.5583,P<0.05 ).结论 bcl-2和bax在胰腺癌细胞凋亡调节过程中起着重要作用.     

人脑星形细胞瘤细胞凋亡及其相关基因bcl-2、Bax表达的研究

我们以常规福马林固定、石蜡包埋的人脑星形细胞瘤组织为材料 ,采用原位末端标记 (ＴＵＮＥＬ)技术及免疫组织化学链酶卵白素 过氧化物酶 (ＳＰ)法对30例星形细胞瘤手术标本进行检测 ,分别观察肿瘤组织中凋亡细胞密度及ｂｃｌ 2、Ｂａｘ基因的表达状况。一、材料与方法1.材料 :取自我院 1997年 4月～1998年 3月间手术切除的人脑星形细胞瘤石蜡包埋标本 30例。其中男 18例 ,女 12例 ,年龄 2 8～ 5 7岁 ,术前未接受过任何放疗、化疗及免疫治疗。按ＷＨＯ分类Ⅰ级 9例 ,Ⅱ级 12例 ,Ⅲ～Ⅳ级 9例。石蜡包埋组织作 4μｍ厚连续切片备用。抗ｂｃ…     

生长抑素类似物诱导胆管癌细胞凋亡和bcl-2/bax表达的研究

目的探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995 (SMS)对人胆管癌SK ChA 1细胞凋亡和凋亡调控基因bcl 2和bax的影响。方法用DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测AnnexinV标记凋亡细胞、免疫组化和原位杂交方法研究SMS(10 0ng/ml)处理 6、12和 2 4h后人胆管癌SK ChA 1细胞凋亡和bcl 2 /bax表达的变化。结果SMS作用SK ChA 1细胞 6h对DNA无明显影响 ,作用 12和 2 4h后DNA凝胶电泳出现呈典型梯状条带。SMS作用 6、12和 2 4h后 ,AnnexinV标记的凋亡细胞分别为 (2 2±5 ) % ,(39± 7) %和 (5 8± 10 ) %。同时 ,SMS可使细胞bcl 2蛋白表达下降 ,使bax蛋白和mRNA表达升高。结论SMS能诱导SK ChA 1细胞发生凋亡 ,bax和bcl 2凋亡基因介导了SMS对SK ChA 1细胞凋亡的发生     

胰腺癌组织中bcl-2、NDPK/nm23和p16蛋白表达的意义

目的 探讨ｂｃｌ－２、ＮＤＰＫ／ｎｍ２３和ｐ１６蛋白在胰腺癌组织中的表达及其意义。方法 应用免疫组织化学方法检测ｂｃｌ－２、ＮＤＰＫ／ｎｍ２３和ｐ１６蛋白在３４例胰腺癌组织中的表达。结果 本组３４例胰腺癌组织中ｂｃｌ－２、ＮＤＰＫ／ｎｍ２３和ｐ１６蛋白阳性表达率分别为６５％、６１％和５０％,其表达与肿瘤的临床分期及病理分化程度有较好的对应关系。淋巴结转移组ｂｃｌ－２、ＮＤＰＫ／ｎｍ２３和ｐ１６蛋白     

烧伤后中性粒细胞体外凋亡时bcl-2蛋白的表达

近年来有研究报道，烧伤患血浆能抑制中性粒细胞(PMNs)凋亡。bcl—2是目前最受关注的与细胞凋亡密切相关的基因之一。本观察了烧伤血清和焦痂下组织液体外抑制PMNs凋亡时，bcl—2蛋白的表达情况，初步探讨烧伤后PMNs凋亡受抑的机制。     

Immunohistochemical expression of bcl-2 protein in squamous cell carcinoma and basaloid carcinoma of the esophagus

In the present study, the expression of bcl-2 protein in esophageal squamous cell carcinoma (SCC) and basaloid carcinoma (BC) was immunohistochemically examined, and its relation to tumor progression and postoperative survival was determined in SCC.A total of 42 SCC and 4 BC tumor samples were fixed with formalin, embedded in paraffin, and stained using monoclonal bcl-2 protein antibody, clone 124. Immunoreactivity was semiquantitatively scored, and the staining results were compared with the pathologic features and survival rates. The cytoplasm of basal cells from the normal esophageal epithelium was stained. In some well- and moderately differentiated SCCs, bcl-2 protein-positive reaction was observed in the peripheral part of the tumor cord, but in poorly differentiated SCC, the cells were weakly or hardly stained. However, in BC, the cells were strongly stained. The immunoreactivity was positive in 45.2% of the SCCs and all of the BCs. There were no significant differences in pathological features or patient survival between the bcl-2 protein-positive and protein-negative SCCs. In conclusion, the expression was not related to tumor progression and had no prognostic significance in SCC. Conversely, BC had strong immuno-histochemical expression, probably associated with the differentiation of carcinoma cells simulating the basal cells of the esophagus.     

bcl-2和Fas/FasL系统在肝癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨ｂｃｌ－２和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统在肝癌细胞凋亡过程中的作用。方法 应用免疫组织化学方法检测３６例肝癌和４９例肝硬化组织中ｂｃｌ－２、Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达,用ＴＵＮＥＬ法检测肝中的细胞凋亡。结果 肝癌组织与肝硬化组织比较, 细胞明显减少;肝癌和肝硬化组织中ｂｃｌ－２的表达率分别为１６．６６％和６７．３４％;Ｆａｓ的表达率分别为５２．７７％和７３．４７％;ＦａｓＬ的表达率分别为７２．２２％     

番茄红素促进前列腺癌LnCaP细胞早期凋亡

目的 观察类胡萝卜素中番茄红素对前列腺癌LnCaP细胞早期凋亡的影响。方法 采用磷脂结合蛋白荧光素标记法,结合流式细胞仪检测技术,分别测定不同浓度(0.5、5.0、10.0、15.0 μmol/L)番茄红素对前列腺癌LnCap细胞早期凋亡的影响,测量细胞早期凋亡的数目,比较不同浓度番茄红素与溶剂对照组早期凋亡细胞的差异。结果 加入不同浓度番茄红素的细胞组与溶剂对照组比较,LnCap细胞早期凋亡的比例分别是番茄红素组2.08％、1.10％、32.20％、9.61％,溶剂对照组0.65％、0.48％、13.10％、6.75％,可见加入番茄红素可使LnCap细胞早期凋亡率增加。结论 番茄红素有促进前列腺癌LnCaP细胞早期凋亡的作用。     

化疗药物诱导胰腺癌细胞凋亡过程中p53和bcl—2基因表达量？…

目的 本文通过观察化疗药物话导胰腺癌细胞凋亡过程中,Ｐ５３和ＢＣＬ－２基因表达量的变化,探讨化疗药物诱导胰腺癌细胞发生凋亡过程与相关基因表达的关系。方法 采用斑点杂交及激光密度扫描技术对化疗药物配伍;５－氟尿嘧喧（５－ＦＵ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）和表柔比星（Ｅ－ＡＤＭ）诱导胰腺癌细胞株细胞发生凋亡过程中Ｐ５３和ＢＣＬ－２基因表达量的变化进行了检测分析。结果 化疗药物诱导胰腺癌细胞株细胞发生凋亡过程中     

胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的 探讨胃液对膀胱癌生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。方法 采用细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。结果 高浓度胃液（19-38mmol/L）抑制膀胱癌细胞系的生长繁殖,低浓度胃液（0.594-9.500mmol/L)则促进膀胱癌细胞系的生长繁殖,胃液能诱导体外培养的膀胱癌细胞凋亡,膀胱癌细胞系BIU-87中bcl-2、bax均有表达（分别为63.5%和41.4%),经胃液、稀盐酸或阿霉素处理后,bcl-2表达下降（分别为34.8%、37.3%和29.6%),bax表达上升（分别为49.3%、47.1%和52.2%),bcl-2/bax比值小于1。结论 胃液能抑制膀胱癌的生长,诱导其凋亡。     

Omi/HtrA2对前列腺癌细胞的促凋亡作用

目的检测人前列腺癌细胞（PC-3M）中Omi／HtrA2的表达情况，并构建其小干扰RNA（siRNA）表达载体。探讨Omi／HtrA2对PC-3M凋亡的影响。方法以细胞免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测Omi／HtrA2在前列腺癌细胞系（PC-3M）和正常前列腺细胞中的表达。利用软件辅助设计Omi／HtrA2特异性siRNA序列。体外合成后将其克隆入真核表达载体psiRNA-hHlneo。以脂质体法转染psiRNA-Omi／HtrA2载体至PC-3M中，以RToPCR和Western blot法检测psiRNA-Omi／HtrA2对Omi／HtrA2转录和表达的沉默效应。用噻唑蓝（MTT）比色法和流式细胞法检测siRNA导致Omi／HtrA2基因沉默后。PC-3M细胞凋亡的变化。结果细胞免疫组织化学和RT-PCR均显示Omi／HtrA2在PC3M细胞中高表达。酶切和DNA测序证实合成的siR-NA基因序列正确。并已被准确克隆入psiRNA-hHlneo载体中。psiRNA-Omi／HtrA2载体可特异性抑制PC3M细胞中Omi／HtrA2的表达。转染psiRNA-Omi／HtrA2载体的PC-3M细胞凋亡下调。结论促凋亡因子Omi／HtrA2可导致前列腺癌细胞凋亡，Omi／HtrA2的表达对前列腺癌的发展有重要作用。     

D2期前列腺癌中雄激素受体的表达及意义

应用免疫组化SABC法，检测29例D_2期前列腺癌组织中雄激素受体的含量，并观察患者治疗前生活状态、骨转移程度、血浆前列腺特异性抗原、血浆睾酮和血红蛋白浓度等参数与患者预后之间的关系。结果发现：11例雄激素依赖性前列腺癌组中雄激素受体含量、血红蛋白、睾酮浓度分别为（51．0±14．8）％，（119．0±19．0）g/l，（9．8±7．9）ng／ml。而在18例雄激素非依赖性前列腺癌组中则分别为（32．2±118）％，（97．9±18．2）g/l，（4．0±6．4）ng／ml。雄激素受体含量、血红蛋白、睾酮浓度两组相比较，有显著性差异。（2）前列腺特异性抗原、生活状态、骨转移程度在雄激素依赖性前列腺癌组中分别为（122．8±70．5）ng／ml，1．5±0．7，1．4±0．5，在雄激素非依赖性前列腺癌组中则分别为（123．3±52．9）ng／ml，1．8±0.6，1．88±0.7，统计学分析两组没有差异（P＞0．05）。以上结果提示：D_2期前列腺癌组织中雄激素受体含量越高，治疗效果越好。雄激素受体含量的高低是预测晚期前列腺癌患者雄激素阻断治疗效果的良好指标。     

反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl-2基因的表达并增强凋亡的研究

目的　观察反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl 2基因的表达并诱导凋亡和增强化疗的敏感性。方法　应用反义硫代寡核苷酸 (bcl 2SON)和顺铂共同处理结肠癌细胞系SW62 0 ,通过流式细胞仪观察其bcl 2蛋白表达的变化 ,并通过原位末端标记法 (TUNEL)染色和流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果　用bcl 2SON处理过的SW62 0细胞其bcl 2蛋白平均荧光强度 (MFI)为(40 .3± 8.7) %与空白对照及随机链对照组相比 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ,表明导入反义bcl 2后可明显抑制结肠癌细胞的bcl 2蛋白的表达。经bcl 2SON和 1 0mg/L顺铂共同处理的SW62 0细胞凋亡指数为 (64 .7± 8.4) % ,显著高于单纯顺铂处理组的 (2 3 .6± 6 .3) % (n =5 ,P <0 .0 1 )以及单纯bcl 2SON处理组的 (2 7.5± 5 .1 ) % (n =5 ,P <0 .0 1 )。而未经处理的对照组SW62 0细胞凋亡指数则为 (8.5± 1 .2 ) % ,显著低于后两组 (n =5 ,P <0 .0 5)。结论　bcl 2SON可通过抑制结肠癌细胞 (SW 62 0 )bcl 2蛋白的表达 ,诱导其凋亡 ,增强对化疗药物的敏感性     

睾丸肿瘤bax和bcl-2蛋白的流式细胞定量研究

目的研究bax和bcl-2蛋白表达在睾丸肿瘤发生发展中的作用。方法应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测56例睾丸肿瘤bax和bcl-2蛋白的表达。结果bax阳性48例(85.7%),bcl-2阳性40例(71.4%);bax和bcl-2蛋白表达与肿瘤的病理类型、临床分期和淋巴结转移无明显相关(P>0.05)。结论bax和bcl-2蛋白的异常表达尚不能成为睾丸肿瘤发生发展的预后参数。     

SLP-2对前列腺癌PC-3细胞增殖和早期凋亡的影响

目的探讨SLP-2（stomatin-like protein2）基因对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法合成和构建SLP-2沉默和过表达载体,用Lipofectamine TM2000分别转染5组人前列腺癌PC-3细胞：pcDNA3．1-SLP-2组,空质粒pcDNA3-1组,siRNA—SLP-2组,siRNA阴性对照组以及空白对照组。采用Q-PCR和Western-Blot分别检测PC-3细胞中SLP-2的mRNA和蛋白表达量;用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测PC-3细胞增殖;采用细胞线粒体膜电位JC-1试剂盒检测PC-3细胞的早期凋亡情况。结果转染pcDNA3．1-SLP-2质粒和siRNA-SLP-2后PC-3细胞SLP．2基因mRNA表达水平分别为（324．884±16．508）和（0．195±0．016）,蛋白表达水平分别为（5．013±0．284）和（0．296±0．011）,与空白对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）;转染pcDNA3-1-SLP-2基因48h、72h、96h后Pc。3细胞增殖吸光度值（OD值）分别为（0．714±0．007）、（1．103±0．018）、（1．348±0．018）,均显著高于空白对照组（P〈0．05）。采用siRNA沉默SLP．2基因48h、72h、96h后PC-3细胞增殖率分别为（0．571±0．004）、（0．875±0．010）、（1．044±0．008）,均显著低于空白对照组（P〈0．05）;细胞凋亡结果显示,转染pcDNA3．1-SLP．2和siRNA-SLP-2的PC-3细胞早期凋亡率分别为（2．433±0．577）和（9．197±0．602）,与空白对照组（4．993±0．710）相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论SLP-2可促进人前列腺癌PC-3细胞的增殖,并抑制细胞的早期凋亡。