鼻咽癌p53与bcl-2基因表达的相互关系

目的　研究鼻咽癌 p5 3与 bcl- 2基因表达的相互关系。方法　对 38例鼻咽癌和 16例非癌样本中 p5 3和 bcl- 2 m RNA进行逆转录聚合酶链反应定量分析及单链构象多态性分析。结果　 (1)鼻咽癌组p5 3m RNA的水平较高 ,差异有显著性 (t=2 .14,P<0 .0 5 )。 bcl- 2 m RNA水平亦较高 ,单侧 t检验有显著性。 (2 )非癌组 p5 3m RNA随 bcl- 2 m RNA水平的升高而升高 ,相关具有高度显著性 (r=0 .819,P<0 .0 0 1)。在鼻咽癌组虽然也观察到类似的相关关系 ,但 r值比非癌组小 (r=0 .46 6 ,P<0 .0 0 5 )。 (3)鼻咽癌组及非癌组 p5 3- bcl- 2回归系数 b的 t检验均有显著性。 (4 )逆转录聚合酶链反应 -单链构象多态性分析未发现所检查的基因片段有点突变。结论　鼻咽癌中 ,p5 3和 bcl- 2的表达均增高 ,p5 3的失活可能是导致bcl- 2 m RNA过度表达的原因。     

鼻咽癌中p53蛋白积聚的生物学特征和临床意义

收集３４７例鼻咽癌组织，全部或部分进行了ＣＭ－１、ｐＡｂ２４０、ｐＡｂ１８０１和ｐＡｂ４２１四种ｐ５３蛋白抗体以及ＰＣＮＡ和Ｋｉ６７抗体的染色。综合分析染色结果并结合组织学特征，临床分期以及预后等资料，得出以下结论：①鼻咽癌中ｐ５３蛋白的积聚率为４４．３％，积聚的ｐ５３蛋白其抗原性不完全一样；②ｐ５３积聚的癌细胞具有增殖活性较强和侵袭性较弱的特点；③ｐ５３蛋白积聚的百分率在无颈淋巴结转移的原发瘤中比有颈淋巴结转移者高；在早期原发瘤中比晚期原发瘤中高；在放疗后存活５年以上者中比放疗后１．５年内死亡者中高。     

53BP1和53BP2基因在鼻咽癌

目的:研究p53的两个结合蛋白53BP1和53BP2在鼻咽癌及对照组织中的表达。方法:①用RT-PCR检测53BP1和53BP2在鼻咽癌及对照组织中的表达。②用原位杂交术检测鼻咽癌及对照组织石蜡切片中,53BP1和53BP2的表达。结果:①21例鼻咽癌组织及4例对照组织标本53BP1均未表达。②53BP2mRNA表达在鼻咽癌组织中为17/21,在对照组织中为3/4,两者无显著差异。③原位杂交显示,53BP2mRNA在鼻咽癌组织中的表达高于对照组织。结论:53BP2mRNA在鼻咽癌中的表达高于对照组织,而53BP1在鼻咽癌组织及对照组织中无表达。     

鼻咽癌中hTERT和p53的表达及其相关性

目的　研究人端粒酶逆转录酶 (hTERT)和 p5 3在鼻咽癌中的表达及其对预后的影响 ,并分析hTERT与抑癌基因p5 3的相关性。 方法　用免疫组化S P法分别检测hTERT及 p5 3在 84例鼻咽癌组织、8例癌旁黏膜上皮非典型增生组织和16例鼻咽黏膜慢性炎组织中的表达。结果　 (1)hTERT在鼻咽癌组织 癌旁黏膜上皮非典型增生组织和鼻咽黏膜慢性炎组织中的阳性表达率分别为 83 4 % (70 / 84 )、0 (0 / 8)和 0 (0 / 16 ) ;p5 3在上述 3种组织中的阳性表达率分别为 5 6 % (4 7/ 84 )、5 0 %(4 / 8)和 0 (0 / 16 ) ;两种基因表达在癌与非癌组间差异均有显著性 (P <0 0 0 1)。 (2 )hTERT阳性表达患者的平均生存期、5年生存率和中位生存期均低于hTERT阴性者 ,且差异有显著性 (P <0 0 5 )。p5 3阳性和阴性表达患者的预后组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。 (3)鼻咽癌组织中hTERT与 p5 3的表达一致率为 6 3% (5 3/ 84 ) ,存在显著相关性 (P <0 0 5 )。 结论　hTERT可作为临床诊断鼻咽癌的一个潜在指标 ,且对临床判断预后有重要意义。p5 3的表达对鼻咽癌的临床诊断具有一定价值 ,但其特异性不强 ,对判断预后也无显著意义 ;p5 3很可能参与了对hTERT表达的调控 ,但可能以不同方式出现     

p53基因突变与食管癌生物学行为的关系

目的为了探讨ｐ５３基因突变与食管癌生物学行为及预后的关系。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ结合ＤＮＡ直接银染测序，对３０例散发性食管癌组织ｐ５３基因第５～８外显子进行检测。结果检出１１例阳性，突变检出率为３６．７％。９例为点突变，其中错义突变４例、无义突变２例、同义突变３例，其余２例为碱基插入和缺失导致的移码突变。统计学分析显示：中低分化食管癌的ｐ５３突变率为５６．３％，高分化组为１４．３％，两组相比有非常显著性差异（Ｐ＝０．０２５）；癌组织浸润累及食管壁全层的ｐ５３突变率５２．６％显著高于未累及全层组９．１％（Ｐ＝０．０２４）；有淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比，ｐ５３突变率分别为６１．５％和１７．６％也具有非常显著性差异（Ｐ＝０．０２４）。结论ｐ５３基因突变与食管癌多种生物学行为如组织分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移有明显相关性。因此检测食管癌组织中是否存在ｐ５３基因突变有助于判断食管癌的恶性程度和患者的预后。还讨论了ｐ５３基因的“显性负效应”及同义突变的遗传学效应。     

p21WAF1／CIPI基因导入对p53突变人肺癌细胞系生长特性的影响

目的 探讨含突变ｐ５３基因癌细胞系ｐ２１基因的抗肿瘤作用。方法 构建人ｐ２１表达重组子,导入ｐ５３基因突变的人肺癌ＰＧ细胞每当增产同表达ｐ２１的细胞系;然后观察其形态太生长特性的改变;ＣＤＫ４,ＰＣＮＡ水平;对基因毒性物的反应性。结果 在含ｐ５３基因突变的ＰＧ细胞内导入的性ｐ２１基因,其高表达ｐ２１约是ＰＧ细胞的６倍,转谬为薄等异型性降低;生长速度下降（５０％）,叠落生长不明显;在０．５％血甭条件     

p53研究的新进展

ｐ５３研究的新进展郑杰吴秉铨近年来ｐ５３研究已成为医学生物学研究的中心课题之一，仅１９９１～１９９５年有关论文已超过４０００篇。ｐ５３被Ｓｃｉｅｎｃｅ杂志评为１９９３年的明星分子［１］。一、ｐ５３基因产物的结构和功能１．ｐ５３蛋白的结构：ｐ５３蛋白可...     

miR-129抑制鼻咽癌细胞系CNE2增殖

目的检测miR-129对鼻咽癌细胞系CNE2细胞生物学功能的影响。方法人工合成miR-129模拟物(mimics)和抑制物(inhibitor),转染至鼻咽癌CNE2细胞中,RT-qPCR检测细胞miR-129表达;CCK8法检测细胞增殖;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡能力。结果与对照组相比,转染miR-129 mimics组的miR-129表达水平明显升高(P0.05);转染miR-129 inhibitor组的miR-129表达水平均明显降低(P0.05);与对照组相比,转染miR-129 mimics组CNE2细胞增殖能力、侵袭能力显著下降(P0.05),凋亡显著增多(P0.05);与对照组相比,转染miR-129 inhibitor组CNE2细胞增殖能力、侵袭能力显著升高(P0.05),凋亡显著下降(P0.05)。结论 miR-129抑制鼻咽癌细胞系CNE2的增殖和迁移能力,促进细胞凋亡。     

Western印迹杂交分析p53蛋白在人鼻咽癌中的表达及其意义

目的：检测１０４例鼻咽癌活检组织和８例鼻咽粘膜慢性炎症组织中Ｐ５３蛋白的表达。方法;采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法结合免疫沉淀技术。结果：１０４例鼻咽癌活检组织中有１２例出现突变型Ｐ５３蛋白表达,突变检出率为１１．５４％（１２／１０４）。８例鼻咽慢必琰症活检组织中未见,Ｐ５３蛋白的异常表达（０／８）;鼻咽癌病人中人ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体滴度≥１：１６０者,Ｐ５３蛋白突变检出率为１１．８０％（１１／９３）,Ｉ     

p53的两种结合蛋白:53BP1和53BP2

p53基因是一种广谱的肿瘤抑制基因,其产物p53为一多功能的转录调节因子,可以发挥调节细胞生长、细胞凋亡和DNA修复的作用。在人类肿瘤已发现多种p53基因的点突变,但突变并不是p53蛋白质丧失功能的唯一途径。胞内蛋白可能影响其活性和功能。53BP1和53BP2是p53在胞浆中的两种结合蛋白。本文阐述了有关这两种蛋白质的研究进展。     

人鼻咽癌细胞系CNE2分泌蛋白质谱的初步建立

目的：建立鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）细胞系CNE2细胞的分泌蛋白质谱。方法：采用无血清培养法培养CNE2细胞,超滤法脱盐并浓缩细胞培养上清制备分泌蛋白质,采用双向凝胶电泳技术（two-dimensional electrophoresis,2-DE)分离蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质,利用生物信息学资源对所鉴定的蛋白质的功能和亚细胞定位进行分析。结果：建立了CNE2细胞分泌蛋白质的2-DE图谱,鉴定了52种非冗余的CNE2细胞分泌蛋白质,并对52种蛋白质按功能和亚细胞分布进行了初步分类。结论：初步建立CNE2细胞的分泌蛋白质谱,为研究鼻咽癌分泌蛋白质在鼻咽癌发生发展中的作用提供了有意义的资料。     

华蟾素抑制人鼻咽癌细胞系CNE2和HONE1增殖

目的 评估华蟾素(Cin)对人鼻咽癌(NPC)细胞系(CNE2和HONE1)的生物学作用以及发挥功效的机制.方法 用不同浓度梯度(0、5、15和45 mg/L)Cin分别处理CNE2和HONE1细胞24、48和72 h后,用CCK-8法检测细胞活性.48 h后,用相差显微镜观察细胞形态;TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡...     

Association of Epstein-Barr virus infection with p53 protein accumulation but not bcl-2 protein in nasopharyngeal carcinoma

AIMS: The aim of this study was to investigate the association of Epstein-Barr virus (EBV) infection with status of p53 protein expression in nasopharyngeal carcinoma (NPC). The expression of EBV gene and gene product, p53 protein and bcl-2 protein in NPC was histopathologically studied. METHODS AND RESULTS: In-situ hybridization using oligonucleotide probe to EBV-encoded small RNAs (EBERs) and immunohistochemistry using monoclonal antibodies against EBV latent membrane protein 1 (LMP1), p53 protein and bcl-2 proteins were performed in 56 primary NPCs. EBERs were detected in 46 (82%) cases and LMP1 in 17 (30%) cases. While 30 of 32 (94%) cases in differentiated nonkeratinizing carcinoma (NKC, WHO type 2) and 16 of 17 (94%) cases in undifferentiated carcinoma (UC, WHO type 3) showed EBERs expression, neither five cases of keratinizing squamous cell carcinoma (KSCC, WHO type 1) nor two cases of adenocarcinoma showed EBERs. bcl-2 protein was detected in 50 (89%) cases, but its expression did not depend on expression of LMP1. p53 protein was detected in 31 (55%) cases, and there was a correlation between expression of EBERs and p53 protein (P < 0.05) but not between LMP1 and p53 protein. CONCLUSION: In this study, close association of NKC and UC but not KSCC with the latent infection with EBV was demonstrated. The induction of bcl-2 protein by LMP1, as shown in vitro, was not demonstrated. The association between overexpression of p53 protein and the presence of EBV suggests that some EBV-encoded protein, which may be different from LMP1, may play a role for nuclear accumulation of p53 protein.     

Down regulation of bcl-2 by p53 in nasopharyngeal carcinoma and lack of detection of its specific t(14;18) chromosomal translocation in fixed tissues

High levels of bcl-2 protein have been found in a wide variety of human cancers. Since p53 gene inactivation occurs in over half of human cancers, it is possible that loss of p53-mediated repression of bcl-2 gene expression accounts, at least in part, for the frequent abnormalities in bcl-2 protein production seen in tumours. By using immunohistochemical methods, we have analysed thirty-three nasopharyngeal carcinomas for p53 and bcl-2 expression. We found an inverse correlation between the expression of these two proteins ( P  < 0.001). Moreover, we utilized universal oligonucelotide primers of a region 5' to the bcl-2 MBR and at the 3' end of J_H segments to initiate a DNA polymerase chain reaction that amplified these bcl-2-J_H junctures. Of the twelve nasopharyngeal carcinomas expressing bcl-2, none showed a t(14;18) chromosome translocation. These findings may indicate potential mechanisms by which bcl-2 regulates apoptosis.     

Cooperative interactions among p53, bcl-2 and Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 in nasopharyngeal carcinoma cells

Interactions among p53, bcl-2 and Epstein-Barr virus (EBV) latent membrane protein 1 (LMP1) in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells were evaluated by gene cotransfections. The data showed that bcl-2 expression was not only able to prevent the growth suppression induced by wild-type p53 but was also paradoxically able to inhibit the growth enhancement induced by mutant p53. Latent membrane protein 1 was shown to be capable of overcoming the growth inhibition induced by wild-type p53 and the synergistic cooperation with bcl-2 to enhance cellular growth. Latent membrane protein 1 could also cooperate with mutant p53 to provide a growth advantage for NPC cells. Most NPC revealed detectable overexpression of p53, and the majority of those were a wild type possibly responding to EBV infection. The coexpression of bcl-2 and LMP1 was thought to inhibit the growth suppression induced by wild-type p53 in NPC. But there was no associated expression between LMP1 and bcl-2 because we demonstrated that transfected LMP1 failed to induce bcl-2 expression in NPC cells in contrast to the findings in B cells. It is theorized that the cooperative expression of bcl-2 and LMP1 exists in the majority of NPC, while a minority of NPC have cooperative expression of LMP1 and mutant p53. Each cooperative interaction could play an important role in the development and progression of NPC.     

细胞周期调节蛋白在复发鼻咽癌中的表达及意义

目的通过对68例鼻咽癌复发患者癌组织中细胞周期调节蛋白水平的检测,进行鼻咽癌复发的趋势预测和探讨可能的机制。方法采取免疫组织化学法对所有研究对象的组织标本进行p53、MDM2、p21WAF1、p21ras、VEGF的检测。结果 68例患者平均复发间期为（31.65±24.52）月。未发现不同分期的复发间期差异有统计学意义（P=0.361）。单因素分析发现高表达的MDM2水平会缩短复发间期（P=0.016）。多因素分析显示年龄（≥50岁）、高表达MDM2和低表达或阴性p21WAF1是复发间期的影响因素。结论年龄较大、高表达MDM2、低表达或阴性p21WAF1的鼻咽癌患者易较早出现复发。