吗啡对人胃癌MGC-803细胞caspase-3表达的影响

目的观察吗啡对人胃癌MGC-803细胞凋亡及caspase-3表达的影响。方法胃癌MGC-803细胞分为两组:对照组和吗啡组。对照组不加任何药物,吗啡组将吗啡加入细胞培养液中使吗啡终浓度为0.1μmol/L。孵育24h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测胃癌MGC-803细胞中caspase-3基因mRNA和蛋白的表达情况。结果吗啡组胃癌细胞凋亡率为(17.20±2.95)%,明显高于对照组的(11.40±2.86)%(P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示,吗啡组胃癌MGC-803细胞中caspase-3mRNA和蛋白表达增加。结论 0.1μmol/L吗啡通过增加caspase-3的表达而促进胃癌细胞的凋亡。     

大蒜素对人胃腺癌BGC-823细胞影响的研究

目的探讨大蒜素诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的作用及机制.方法传代培养人胃腺癌BGC-823细胞,使细胞浓度为5×105个/ml.分别加入10-5g/L(大蒜素1)和10-3g/L(大蒜素2)的大蒜素,另设对照组,培养时间分别为6 h、24 h、48h、72h.结果与对照组相比①大蒜素可明显提高胃癌细胞凋亡率、降低PI值(P＜0.01或P＜0.05),且表现出明显的细胞凋亡的形态学变化.②大蒜素可明显降低胃癌细胞CEA、GST-π的水平(P＜0.01或P＜0.05).③大蒜素可明显提高胃癌细胞的cAMP水平(P＜0.01),降低PKC水平(P＜0.01或P＜0.05).④大蒜素能够显著增加胃癌细胞fas基因及bax基因蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01);降低bcl-2基因蛋白的表达(P＜0.01).结论大蒜素可通过对第二信号系统cAMP、PKC的影响,增强细胞凋亡始动基因fas、凋亡促进基因bax的表达,抑制凋亡抑制基因bcl-2的表达,增加细胞凋亡率,并使胃癌细胞调亡,并抑制其增殖活性;并可导致胃癌细胞CEA、GST-π的合成减少,从而降低其水平.本研究为临床应用的中药大蒜素治疗胃癌提供了实验依据.     

吗啡对胃癌细胞Survivin和Caspase-9表达的影响

目的 观察吗啡对人胃癌MGC-803细胞Survivin和Caspase-9基因表达的影响.方法 胃癌MGC-803细胞分为两组:对照组和吗啡组.对照组不加任何药物,吗啡组将吗啡加入细胞培养液中使吗啡终质量浓度为0.1 μmol/L.孵育24h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测胃癌MGC-803细胞中Survivin和Caspase-9基因mRNA和蛋白的表达.结果 吗啡组胃癌细胞凋亡率为(17.20±2.95)％,明显高于对照组的凋亡率(11.40±2.86)％(P＜0.05);RT-PCR和Western blot结果显示,吗啡组胃癌细胞中Survivin mRNA和蛋白表达降低,而Caspase-9 mRNA和蛋白表达增高(P＜0.05).结论 0.1μmol/L吗啡通过抑制Survivin的表达、增强Caspase-9的活性而促进胃癌细胞的凋亡.     

二十二碳六烯酸联合5氟尿嘧啶对胃癌细胞生长及bcl-2、bcl 2l12和bax表达的影响

目的 评估二十二碳六烯酸(DHA)联合5氟尿嘧啶(5-Fu)对胃癌细胞SGC 7901生长以及bcl-2、bcl 2l12和bax基因表达的影响.方法 采用台盼蓝拒染方法检测两药物单用和联用对细胞活力的影响,用联合系数判断两药合用效果,倒置显微镜下观察细胞生长状况,PI染色流式细胞术检测亚二倍体峰比并拟合细胞周期曲线,Annexin-V/PI双标记方法检测早期细胞凋亡,RT-PCR方法检测bcl-2、bcl 2l12和bax基因的表达.结果 DHA可抑制胃癌SGC 7901细胞生长,且呈剂量和时间依赖性(P<0.05),24 h、48 h的半数抑制浓度分别为67.81 μg/ml、45.76 μg/ml;DHA联合5-FU对细胞生长的抑制具有协同作用(CI<1,P<0.01),倒置显微镜下可见两药联合处理后细胞稀疏;亚二倍体峰比、Annexin-V早期凋亡率示DHA、5-FU均能诱导细胞凋亡且联合用药后细胞凋亡更明显(DHA、5-FU、联合组的亚二倍体峰比分别为5.2%、6.2%、13.9%;早期细胞凋亡率分别为4.00%、5.37%、13.11%);细胞周期曲线在联合组停滞于G0/G1和S期;RT-PCR显示DHA、5-FU可下调bcl-2和bcl 2l12表达,两药联合表达时下调更显著,bax表达则无明显改变.结论 DHA能抑制胃癌SGC 7901细胞增殖,联合5-FU后对细胞生长抑制和周期阻滞具有协同作用,可能通过下调bcl-2和bcl 2l12基因诱导胃癌SGC 7901细胞发生凋亡.     

bcl-2 mRNA、baX mRNA表达在三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡中的意义

目的 分析三氧化二砷(As2O3)诱导肝癌细胞凋亡中凋亡相关基因bcl—2 mRNA、bax mRNA表达的意义。方法 采用电镜、流式细胞仪、电泳及半定量RT—PCR方法检测不同剂量三氧化二砷诱导人肝癌细胞株bel—7402后凋亡的出现及bcl-2mRNA、bax mRNA的表达。结果 0．5にmol/L As2O3处理肝癌细胞未见凋亡，8μmol/L As2O3诱导肝癌细胞出现明显凋亡。对照组和药物组未检测到bcl-2 mRNA的表达，随浓度增加，bax mRNA的表达上调。结论 As2O3通过诱导凋亡抑制肝癌细胞株bel-7402的增殖，凋亡诱导基因bax mRNA的表达上调与此过程有关。bcl—2mR—NA表达与此过程无关。     

2-脱氧-D-葡萄糖联合氟尿嘧啶对胃癌细胞MGC-803凋亡影响的实验研究

目的探讨糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG）与氟尿嘧啶（5-Fu）单独及联合应用对人胃癌细胞MGC-803增殖及凋亡的影响。方法实验设立2-DG组、5-Fu组、联合组（2-DG＋5一Fu）及空白对照组,将2-DG（10mmol／L）及5-Fu（5．0μg／L）单药及联合用药作用于人胃癌细胞MGC-803,MTT法检测各组MGC-803细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果2-DG和5-Fu均可使胃癌细胞增殖受到抑制并可诱导细胞凋亡,两药合用后其作用明显增强。结论2-DG能有效抑制人胃癌细胞MGC-803细胞生长增殖,并诱导其凋亡;2-DG与5-Fu联合应用抗肿瘤作用明显增强。     

芬太尼对胃癌MGC-803细胞E2F-1、p53基因表达的影响

目的观察芬太尼对人胃癌MGC-803细胞生长增殖及E2F-1、p53基因表达的影响。方法芬太尼10-4μmol/L与胃癌MGC-803细胞共同孵育为芬太尼组,未加入芬太尼的胃癌MGC-803细胞孵育为对照组。7d后检测胃癌MGC-803细胞生长增殖的变化,观察细胞超微结构的变化,检测细胞E2F-1、p53基因的表达。结果与对照组相比,芬太尼组MGC-803细胞生长增殖缓慢,细胞克隆形成率更低(P<0.05);细胞胞质深染、细胞核固缩、染色质碎裂,出现明显的凋亡表现;细胞E2F-1基因表达增加、p53基因表达减少。结论 10-4μmol/L芬太尼可抑制胃癌MGC-803细胞的生长增殖,促进细胞的凋亡,并改变E2F-1、p53基因的表达。     

Gastrin/CCK与胆管癌细胞bcl-2/bax蛋白表达的关系

目的 初步探讨Gastrin/CCK对胆管癌细胞bcl-2/bax蛋白表达的调节作用。方法 原位杂交和免疫组化分别检测Gastrin/CCK受体mRNA和bcl-2/bax蛋白在40例胆管癌组织标本中的表达、分析两者间关系,流式细胞术研究Gastrin/CCK及其受体拮抗剂对QBC939人胆管癌细胞系bcl-2/bax蛋白表达的影响。结果Gastrin/CCK受体 mRNA和bcl-2/bax蛋白在胆管癌组织和细胞系中均有表达;Gastrin/CCK-B受体阳性胆管癌标本bcl-2表达率高于其阴性者（P<0.01）;Gastrin-17或CCK-8S（10~（-8）mol·L~（-1）×48h）能刺激QBC939细胞bcl-2表达、同时加入L365,260或 L364,718（10~（-8）mol·L~（-1））可逆转,CCK-SS还能抑制bax表达、L364,718可逆转（P<0.01或P<0.05）。结论Gastrin/CCK可通过其受体后途径上调胆管癌细胞bcl-2表达,“CCK→CCK-A受体”信号还可能具有抑制bax表达的作用。     

活化因子TEPP-46对胃癌细胞MGC-803侵袭、增殖的影响及机制

目的:探讨活化因子TEPP-46对胃癌细胞MGC-803侵袭、增殖的影响及分子机制.方法:Western blot和细胞免疫荧光实验检测胃癌细胞株MGC-803及正常胃粘膜细胞GES-1中PKM2的表达;用TEPP-46预处理MGC-803细胞后,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,将MGC-803细胞种植于B...     

生长抑素类似物对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨生长抑素类似物SMS201－995（SMS）对人胆管癌细胞体外增殖和凋亡的调控作用。方法：采用人胆管癌细胞系SK-ChA-1，应用生长曲线，流式细胞仪，片段DNA琼脂糖凝胶电泳，ANNEXIN,V－FITC技术及流式细胞仪间接免疫荧光技术等方法进行检测和观察。结果：在SMS作用下，SK－ChA-1细胞生长受到抑制，短时使细胞阻滞于G0／G1期，SMS处理SK－ChA-1细胞后，Annexin V-FITC标记的凋亡细胞增多，DNA凝胶电泳显示典型的凋亡梯状图谱，同时SMS可使细胞bcl-2蛋白表达下降，使bax蛋白表达升高，结论：SMS可明显抑制SK－ChA-1细胞生长，并能诱导该细胞凋亡，该细胞凋亡机理可能与凋亡调控基因bax和bcl-2的表达有关。     

吗啡对胃癌细胞生物学性状的影响

目的 观察吗啡对人胃癌MGC-803细胞生物学性状的影响.方法 将吗啡加入细胞培养液中使吗啡浓度分别稀释至0.1、10、1000 μmol/L,分别与胃癌MGC-803细胞一同孵育,应用噻唑蓝(MTT)比色法绘制12、24、36、48、60、72h的细胞生长曲线并计算细胞增殖率,7d后应用克隆形成实验检测MGC-803细胞生长增殖的变化;应用流式细胞仪检测MGC-803细胞周期和细胞凋亡的变化,用透射电子显微镜观察MGC-803细胞超微结构的变化.结果 吗啡使胃癌细胞生长缓慢,0.1 μmol/L吗啡组、10 μmol/L吗啡组、1000 μmol/L吗啡组细胞增殖率分别为对照组的(81.89±6.44)%、(78.52±4.68)%和(78.53±5.68)%(P＜0.05),3组细胞的克隆形成率分别为(0.76±0.18)%、(0.72±0.17)%和(0.56±0.18)%,低于对照组的克隆形成率(1.19±0.29)%(P＜0.05);与对照组比较,各吗啡组细胞周期G2/M期比例上升,G0/G1期和S期比例下降(P＜0.05);0.1μmol/L吗啡组、10 μmol/L吗啡组、1000 μmol/L吗啡组细胞凋亡率分别为(17.20±2.95)%、(19.13±3.86)%、(24.38 ±4.94)%,明显高于对照组的凋亡率(11.40±2.86)%(P＜0.05);透射电镜显示吗啡使胃癌细胞出现明显的凋亡表现.结论 吗啡抑制胃癌MGC-803细胞的生长增殖,促进胃癌细胞的凋亡.     

柠檬酸钠促胃癌MGC-803细胞凋亡的作用及机制研究

目的:探讨柠檬酸钠(SCT)促进胃癌MGC-803细胞凋亡的作用及机制。方法:胃癌MGC-803细胞分别经SCT(5、10、20 mmol/L)和5-FU(0.5 mmol/L)作用,以未处理的MGC-803为阴性对照,用流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率;比色法检测细胞内乳酸含量、磷酸果糖激酶1(PFK-1)活性及三磷酸腺苷(ATP)水平;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、caspase-3及Cyt-c蛋白的相对表达量。结果:与阴性对照细胞比较,SCT处理的MGC-803细胞G2/M期阻滞与细胞凋亡明显增加;细胞内乳酸含量、PFK-1的活性和ATP水平均明显降低;细胞内Bcl-2的表达明显降低,而Bax、caspase-3和Cyt-c表达明显升高(均P0.05)。5-FU对MGC-803细胞乳酸含量、PFK-1的活性无明显影响(均P0.05),但其他作用与SCT相似。结论:SCT可促进MGC-803细胞凋亡,其作用可能与其抑制PFK-1的活性,降低糖酵解效率,并与线粒体凋亡通路的激活有关。     

多种化疗药物对胃癌细胞杀伤效应的研究

目的：探讨不同分化的胃癌细胞对不同化疗药物的敏感性。 方法：选择低分化的MGC-803和高分化的AGS两种胃癌细胞系,以及正常胃黏膜上皮细胞GES-1,分别加入不同浓度的5-氟尿嘧啶（5-FU）、奥沙利铂（L-OHP）、多西他赛（DXT）、顺铂（DDP）、伊立替康（CPT-11）作用48 h后,用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,并计算药物半数抑制浓度（IC50）。用IC50的5-FU、DDP、L-OHP作用于MGC-803和AGS细胞48 h后,检测细胞凋亡及细胞周期分布情况。 结果：5种化疗药物对MGC-803、AGS细胞以及GES-1细胞均有明显的抑制作用（均P<0.05）,其中5-FU、DDP、CPT-11对AGS细胞的作用较强;L-OHP、DXT对MGC-803细胞作用较强;DDP对GES-1细胞的抑制作用较强。5-FU、DDP、L-OHP均明显诱导两种胃癌细胞凋亡,其中5-FU组与L-OHP组凋亡率高于DDP组（均P<0.05）;细胞周期分析显示,L-OHP增加两种细胞的S期阻滞,DDP增加MGC-803细胞的S期阻滞,5-FU与DDP增加AGS细胞的G1阻滞（均P<0.05）,但5-FU对MGC-803细胞周期无明显影响（P>0.05）。 结论：化疗药物对胃癌细胞的抑制作用与其病理类型有关,且对胃癌细胞凋亡的诱导和细胞周期阻滞作用均不同。     

胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的 探讨胃液对膀胱癌生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。方法 采用细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。结果 高浓度胃液（19-38mmol/L）抑制膀胱癌细胞系的生长繁殖,低浓度胃液（0.594-9.500mmol/L)则促进膀胱癌细胞系的生长繁殖,胃液能诱导体外培养的膀胱癌细胞凋亡,膀胱癌细胞系BIU-87中bcl-2、bax均有表达（分别为63.5%和41.4%),经胃液、稀盐酸或阿霉素处理后,bcl-2表达下降（分别为34.8%、37.3%和29.6%),bax表达上升（分别为49.3%、47.1%和52.2%),bcl-2/bax比值小于1。结论 胃液能抑制膀胱癌的生长,诱导其凋亡。     

尾型同源盒基因2基因表达对胃癌细胞生长影响的研究

目的 观察尾型同源盒基因2(Cdx2)基因过表达对胃癌细胞生物学性状的影响.方法 构建人Cdx2真核表达载体,并转染胃癌细胞MGC-803.实验分为四组:未转染组、转染pCMVHA组、转染pCMV-GAPDH-HA组、转染pCMV-Cdx2-HA组.应用荧光定量PCR检测各组Cdx2基因的表达情况,Western blot法检测各组Cdx2蛋白的表达情况,MTT法观测细胞增殖,透射电镜观察转染细胞形态学的改变,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡.结果 成功构建了pCMV-Cdx2-HA真核表达载体,在瞬时转染pCMV-Cdx2-HA质粒48 h的MGC-803细胞有较高水平的Cdx2基因mRNA和蛋白的表达;与未转染组、转染pCMV-HA组、转染pCMV-GAPDH-HA组比较,转染pCMV-Cdx2-HA组的胃癌细胞在转染72 h时生长受到明显抑制,G0/G1期比例上升,S期比例下降,胃癌细胞的凋亡率也明显升高(P＜0.05);转染pCMV-Cdx2-HA的胃癌细胞胞核消失,核染色质固缩、解体,内质网、高尔基复合体膨大成泡状.结论 Cdx2基因可明显抑制胃癌细胞的生长,提示Cdx2参与了胃癌的生长调控.     

硫利达嗪对胃癌细胞生长的抑制作用与机制研究

目的:探讨硫利达嗪对胃癌细胞体外生长的抑制作用及其机制。方法:不同浓度的硫利达嗪作用于胃癌SGC-7901细胞24 h后,分别用MTT法与流式细胞仪检测胃癌细胞的增殖与凋亡情况,以及用Western blot检测凋亡相关蛋白bax、bcl-2、caspase-3的表达情况。结果:硫利达嗪作用后,SGC-7901细胞的增殖明显抑制,凋亡率明显增加,抗凋亡蛋白bcl-2表达下调、促凋亡蛋白bax表达上调、caspcase-3蛋白表达上调,且均呈浓度依赖性(均P0.05)。结论:硫利达嗪对人胃癌细胞体外的生长有明显抑制作用,该作用可能与其并活化caspase-3依赖的凋亡途径有关。