112株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析

目的了解临床分离的112株鲍曼不动杆菌的分布特点及耐药情况。方法用K-B纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌的耐药率,以超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确证试验和三维试验检测鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC酶产酶情况与变化。结果临床感染鲍曼不动杆菌对13种抗生素耐药严重,ESBLs与AmpC酶检出率分别为1.8%和71.4%,对亚胺培南耐药率最低,为9.8%。结论邢台市人民医院临床分离的鲍曼不动杆菌流行株主要是产AmpC酶,且呈多重耐药性,应重视合理使用抗生素,减少多重耐药菌株的产生。     

鲍曼不动杆菌产AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解临床分离鲍曼不动杆菌的感染分布及耐药特点,以指导临床合理用药。方法采用K-B纸片扩散法对鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）及多种抗生素的耐药性进行检测;用酶提取物三维试验法检测AmpC酶;用聚合酶链反应（PcR）法对鲍曼不动杆菌染色体DNA的ampC基因进行扩增。结果鲍曼不动杆菌临床分布以ICU病房最多,其次是呼吸内科。分离标本痰最多,其次是血液和尿液。239株鲍曼不动杆菌有16产株ESBLs;有44株细菌在AmpC酶三维试验中呈阳性;细菌DNA的PCR扩增,有65株菌为阳性,产酶菌对头孢菌素类高度耐药,但对亚胺培南较敏感。结论不动杆菌产AmpC酶检出率高于ESBLs,产AmpC酶是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,应加强对AmpC酶的检测及其感染者的治疗。     

多重耐药鲍曼不动杆菌表型及耐药基因型的研究

目的 对我院临床分离的31株多重耐药鲍曼不动杆菌表型和耐药基因进行分析。方法 用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌的药敏结果，用三维试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBL）、头孢菌素酶（AmpC酶），用协同法检测金属β-内酰胺酶（MBL），用聚合酶链反应（PCR）检测耐药基因。结果 31株多重耐药鲍曼不动杆菌中，90％对亚胺培南敏感；22％对头孢哌酮-舒巴坦耐药，74％中介；其他抗菌药物的敏感率均在6％以下。2株菌（6％）单产ESBL；93％菌株高产AmpC酶，其中19％菌株同时产ESBL。所有菌株blaTEM、aacA4和gyrA基因均为阳性；96％菌株ampC基因为阳性；2株菌同时携带blaFER和blaOXA-23，型基因，另有1株菌blaOXA-23，基因阳性。结论 同时携带blaTEM、ampC、aacA4和gyrA突变以及blaFEM、blaOA-23等多种耐药基因是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。     

产超广谱β内酰胺酶和高产AmpC酶革兰阴性杆菌耐药性检测

目的了解铜陵地区产ESBLs和高产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性.方法2003年10月至2004年9月铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌270株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NCCLS 2002年判断标准分析结果.结果270株革兰阴性杆菌中检出产ESBLs或（和）高产AmpC酶68株,检出率25.2%,其中单产ESBLs 49株,以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中检出率最高,分别为31.6%和31.0%：单产AmpC酶3株,均为阴沟肠杆菌,同时产AmpC酶和ESBLs16株,其中鲍曼不动杆菌8株.产酶株对头孢菌素耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs菌株对替卡西林-克拉维酸、头孢哌酮-舒巴坦等含酶抑制剂的抗菌药物耐药率在50%以上,对亚胺培南敏感性好.结论ESBLs和高产AmpC酶是导致革兰阴性杆菌耐药的主要两类酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南敏感.     

鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药机制研究

目的了解鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药性及耐药机制。方法琼脂稀释法对62株鲍曼不动杆菌进行药敏检测,对其中20株亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌进行耐药机制研究。酶三维试验检测ESBLs和AmpC酶,PCR扩增和测序分析检测碳青霉烯酶VIM、IMP、OXA-23和OXA-24,SDS-PAGE方法研究外膜蛋白表达情况,利血平协同抑制试验检测膜外排机制。结果62株鲍曼不动杆菌中,亚胺培南耐药25株,占41%;20株亚胺培南耐药菌中,ESBLs和AmpC酶阳性株分别为10株(50%)和20株(100%),PCR扩增VIM、IMP和OXA-24均阴性;OXA-23基因扩增显示19株(95%)阳性,PCR产物并经序列分析证实为OXA-23;与敏感株相比,部分菌株存在22、29、33kD的外膜蛋白缺失;利血平不能降低亚胺培南对鲍曼不动杆菌的MIC值。结论产OXA-23型β-内酰胺酶是本院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要原因,产AmpC酶合并外膜蛋白缺失与鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药有密切关系。     

鲍曼不动杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶检测和耐药性分析

目的 分析医院感染菌鲍曼不动杆菌(ABA)临床分离株头孢菌素酶(AmpC酶)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生及其耐药特点.方法 应用纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感试验,用三维试验法检测不动杆菌属产生的AmpC酶和ESBLs.结果 69株鲍曼不动杆菌,产ESBLs 18株(26.1%),产AmpC酶17株(24.6%),同时产AmpC酶和ESBLs 4株(5.8%);产AmpC酶菌株对各种抗菌药物的耐药比产ESBLs菌株多.结论 鲍曼不动杆菌产AmpC酶和ESBLs的比例较高,临床应加强与微生物室的联系,科学用药,才能有效控制感染.     

产酶的革兰阴性杆菌对抗生素的耐药性分析

目的：探讨G^-杆菌的产酶情况与耐药模式,并比较产酶菌与非产酶菌对9种抗生素的耐药率。方法：应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）表型筛选和确认试验检测超广谱酶β内酰胺酶（ESBLs）菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验。结果：在149株G^-杆菌中,16株（10.7%）产AmpC酶,32株（21.1%）产ESBLs,2株（2.0%）同时产AmpC酶和ESBLs。产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低。结论：产AmpC酶和产ESBLs的G^-杆菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一。     

鲍曼不动杆菌临床分布及耐药表型检测分析

目的了解鲍曼不动杆菌在本院临床各病区的分布及耐药表型的流行特点,指导临床合理使用抗菌药物。方法对临床标本进行分离鉴定,采用K—B法对常规药物进行耐药检测,用NCCLS推荐的双纸片扩散法检测ESBLs酶、协同法检测金属酶,三维法检测AMPC酶。结果临床共分离出71株鲍曼不动杆菌,主要来源于痰标本（内三呼吸科占77．3％）,占分离菌株的74．6％,其次是伤口分泌物,该菌对临床常规药物有不同程度耐药,对青霉素类、第1、2、3代头孢菌素类抗生素以及氨曲南均高度耐药,耐药率达71．0％～100％,其次是丁胺卡那、头孢吡肟、头孢哌酮／舒巴坦、环丙沙星,分别是12．6％、25．4％、40．8％、43．6％,对泰能、多粘菌素B、利福平耐药率最低。产酶菌株38株,不产酶菌株33株,产酶率为53．5％,产酶菌株中,单产ESBLs酶9株,占产酶株23．7％,产AMPC酶26株,占产酶株68．4％,产SSBL酶11株,占产酶株28．9％,产MBL酶3株,占产酶株7．89％。结论本院鲍曼不动杆菌呈现多重耐药,产酶菌株主要以产AMPC酶、ESBLs酶为主。     

四联药敏纸片同步检测ESBLs和AmpC β-内酰胺酶

目的建立一种简便、实用的方法，同步检测临床分离菌株的ESBLs和AmpC β-内酰胺酶，为临床选择抗生素提供依据。方法用亚胺培南、阿莫西林，棒酸、头孢他定、头孢噻肟（或头孢曲松、氨曲南）四纸片琼脂扩散法，根据各纸片间抑菌的协同、拮抗作用及耐药谱判断结果。结果200株革兰阴性杆菌巾有55株单产ESBLs（27．5％），33株诱导高产AmpC酶（16．5％）。19株同时产ESBLs和诱导高产AmpC（9．5％），有20株去阻遏突变高产AmpC酶（10．0％）。四纸片同步法分别与双纸片增效法、头孢西丁三维试验比较，检测ESBLa、高产AmpC酶的总符合率分别为94．7％和93．6％。增加头孢曲松和氨曲南两种基质，ESBLs、诱导高产AmpC、ESBIM诱导高产AmpC的检出率分别提高了16．3％、12．1％、15．8％。结论此方法不需任何特殊设备，能准确、简便、快速检测革兰阴性杆菌的ESBLs或AmpC酶。并能检测出同时携楷两种酶的菌株．     

VITEK2筛选鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶可靠性评价

目的验证和评价VITEK2高级专家系统(AES)判定鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶AmpC的可靠性。方法首先收集2009年1~8月经VITEK2的AES判定为产AmpC酶鲍曼不动杆菌,用AmpC纸片法进行确证试验,最后用聚合酶链反应验证阳性株是否存在AmpC基因。结果 15株AES判断为产AmpC酶的菌株,经AmpC纸片法确证试验为阳性,其中12株阳性产酶株可以检测到AmpC基因。132株AES判断为不产AmpC酶的菌株中,经AmpC纸片法验证均为阴性。结论 VITEK2AES可以很好地预测鲍曼不动杆菌产AmpC酶情况,有助于快速、准确地检测鲍曼不动杆菌这一相关耐药机制,为临床治疗多重耐药鲍曼不动杆菌提供更有力的支持。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药机制研究

目的了解阴沟肠杆菌临床分离株AmpC酶和ESBLs的产生情况并分析其耐药特性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用改良的酶提出物三维试验法对186株阴沟肠杆菌进行AmpC酶和ESBLs检测,用K-B法对14种常用抗菌药物进行药物敏感试验。结果186株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶的菌株63株,占33．9％;产ESBI_s的菌株有28株,占15．1％;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有18株,占9．7％。药敏结果显示,186株阴沟肠杆菌对头孢唑林、氨苄西林、头孢西丁等抗菌药物的耐药率较高,对亚胺培南、舒普深的耐药率较低。结论阴沟肠杆菌已呈现出多重耐药性,其耐药机制较为复杂,可表现为阻遏高产AmpC酶、产ESBLs,也可表现为同时产AmpC酶和ESBLs等多种耐药表型。     

多重耐药鲍曼不动杆菌表型及耐药基因型的研究

目的对我院临床分离的31株多重耐药鲍曼不动杆菌表型和耐药基因进行分析。方法用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌的药敏结果,用三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL)、头孢菌素酶(AmpC酶),用协同法检测金属β-内酰胺酶(MBL),用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果31株多重耐药鲍曼不动杆菌中,90%对亚胺培南敏感;22%对头孢哌酮-舒巴坦耐药,74%中介;其他抗菌药物的敏感率均在6%以下。2株菌(6%)单产ESBL;93%菌株高产AmpC酶,其中19%菌株同时产ESBL。所有菌株b laTEM、aacA4和gyrA基因均为阳性;96%菌株ampC基因为阳性;2株菌同时携带b laPER和b laOXA-23型基因,另有1株菌b laOXA-23基因阳性。结论同时携带b laTEM、ampC、aacA4和gyrA突变以及b laPER、b laOXA-23等多种耐药基因是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。     

产新型广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的筛选和耐药性研究

目的研究我院产新型肛内酰胺酶肺炎克雷伯菌（KP）的耐药现状，为临床用药提供合理依据。方法614株临床分离的无重复肺炎克雷伯菌，采用NCCLS表型筛选和确证试验检测ESBLs，酶提取物改良三维试验检测AmpC酶株，纸片协同试验检测金属p内酰胺酶；KB纸片法检测产酶株对11种抗菌药的体外抗菌活性；琼脂二倍稀释法测定9种抗生素对同时产AmpC酶和ESBLs菌株的最低抑菌浓度（MIC）。结果单产ESBLs的检出率为31．8％，单产AmpC酶的检出率为2．6％，同时产ESBLs和AmpC酶的检出率为1．1％，未检出产金属肛内酰胺酶的肺炎克雷伯菌。产ESBLs菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显著升高；产AmpC酶菌对含酶抑制剂抗生素耐药率比产ESBLs菌高；同时产ESBLs和AmpC酶株对多种抗生素耐药；三种酶型均未见亚胺培南耐药株。结论亚胺培南可作为治疗产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌引起重症感染的首选药物；但产新型肛内酰胺酶菌株的多重耐药和交叉耐药现象十分严重，应高度重视产酶株的监测与控制。     

产酸克雷伯菌超广谱β内酰胺酶与AmpC酶耐药表型及基因型分析

目的了解呼吸道感染患儿产酸克雷伯菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）与AmpC酶的耐药表型和基因型。方法采用API及VITEK32鉴定菌株；琼脂稀释法检测MIC值；CLSI纸片确认实验检测ESBLs，3-氨基苯酚硼酸（APB）纸片增强法检测AmpC酶；基因芯片技术检测ESBLs与AmpC酶的基因型；并进行肠杆菌基因间共有重复序列（Enterobacterial repetitive intergenic consensus，ERIC）分型。结果165株产酸克雷伯菌ESBLs阳性129株（78．2％），ESBLs与AmpC酶同时阳性16株（9．7％），表型及基因型均未检出AmpC单独阳性株；CTX-M型是其主要基因型（89／109），产AmpC酶株的基因型仅见DHA型；ERIC分型显示多数耐药产酸克雷伯菌具有相同的分子型。产酸克雷伯菌的产酶株及非产酶株对碳青霉烯类100％敏感，但产酶株（尤其是同时产ESBLs与AmpC酶）比非产酶株耐药率高，多重耐药性更常见。结论儿童患者中产酸克雷伯菌产ESBLs分离率较高；ESBLs与AmpC酶的耐药基因型分别主要是CTX-M型和DHA型。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌金属β内酰胺酶表型及基因型检测

目的研究华西医院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌产金属酶的情况。方法采用亚胺培南和亚胺培南加EDTA纸片,筛选出金属酶表型阳性的菌株,再用PCR技术扩增耐药基因blaIMP和blaVIM。结果49株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌中,有30株菌（61．2％）金属酶表型阳性。PCR法检测到10株携带金属酶基因,6株（20％）携带blaIMP,4株（13．3％）携带blaVIM。结论华西医院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌要产金属酶。其基因型为IMP型和VIM型。     

Carba NP法快速检测鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的研究

目的了解泛耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶表型及酶基因型,为临床合理使用抗生素,监控医院感染提供依据。方法收集117株鲍曼不动杆菌临床分离株进行常规微生物学检测,K-B纸片法筛选多重耐药鲍曼不动杆菌,通过Carba NP试验及改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶表型检测,利用PCR对多重耐药不动杆菌耐药基因型进行确证。结果临床分离的117株鲍曼不动杆菌株有64株属多重耐药鲍曼不动杆菌,其中33株碳青霉烯酶阳性,检出碳青霉烯酶OXA-23耐药基因型,未检出IMP、VIM、NDM-1耐药基因。结论 Carba NP法可以快速检测产碳青霉烯酶菌株,且敏感性强,操作简单,有助于提高产碳青霉烯酶菌株检出率,利于监控医院感染。     

鲍曼不动杆菌ESBLs和金属酶的基因型分析

目的了解天津地区鲍曼不动杆菌中超广谱β-内酰胺酶和金属酶基因的分布情况。方法对天津地区6所三级甲等医院临床分离的72株鲍曼不动杆菌,以K—B法进行抗生素敏感试验;用双纸片增效法对亚胺培南耐药菌株进行金属酶表型筛选,并以PCR方法检测IMP-1、IMP-2、VIM-2型金属酶基因;用三维试验对第三代头孢菌株进行ESBLs表型初筛,并以PCR方法检测ESBLs基因。结果8株（8／72）耐药亚胺培南鲍曼不动杆菌中,4株金属酶表型阳性。以PCR方法检测,1株IMP1阳性,3株出现IMP-1＋IMP2＋VIM-2型金属酶基因同时阳性;30株（30／72）耐第三代头孢鲍曼不动杆菌中,11株产TEM型ESBLs,4株产PER型ESBLs,1株产VEB-1型ESBLs。结论天津地区鲍曼不动杆菌主要以携带TEM型ESBLs为主,在耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中发现IMP—1、IMP-2和VIM-2型金属酶,并且VEB-1型ESBLs和VIM-2型金属酶为天津地区首次报道。     

产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β lactamases,ESBLs）及AmpC酶的阴沟肠杆菌的分布情况及耐药特征.方法 选择49株阴沟肠杆菌,采用纸片扩散法进行药物敏感试验,按美国临床实验室标准化协会推荐的确证试验检测产ESBLs阳性菌株;头孢西丁纸片扩散法初步筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因.结果 抗生素敏感试验结果显示阴沟肠杆菌对头孢西丁、替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、氨曲南的耐药率均达79.6％以上,对美罗培南敏感率较高,达91.8％.49株阴沟肠杆菌中对头孢西丁耐药的菌株46株（93.9％）;产ESBLs菌株29株（59.2％）,PCR 扩增产AmpC酶的阴沟肠杆菌36株（73.5％）,同时产两种酶的菌株为13株（26.5％）.结论 产ESBLs 及AmpC酶阴沟肠杆菌普遍且耐药现象严重.     

三维试验检测革兰阴性杆菌ESBLs及AmpC酶

目的了解革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、染色体头孢菌素酶（AmpC）的分布及分离率。方法准确鉴定菌株,采用底物为头孢噻肟的三维试验,测定菌株中ESBLs及AmpC酶。结果临床分离175株革兰阴性杆菌中产ESBLs 49株,阳性率28.0%,包括阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、克雷伯菌属、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和弗劳地枸橼酸菌。产AmpC酶22株,阳性率12.6%,包括阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、产酸克雷伯菌。其中阴沟肠杆菌产ESBLs及AmpC酶分离率均居首位（分别为55.6%、33.3%）。3株铜绿假单胞菌同时产AmpC酶和ESBLs。结论我院产ESBLs菌以阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主。产AmpC酶以阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主。超超广谱β-内酰胺酶（SSBLs）菌株在医院有流行。     

下呼吸道感染细菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测

目的：了解临床下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检出情况。方法：通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株；采用美国国家临床实验室标准委员会(NC—CLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株。结果：从临床下呼吸道标本分离对第一、二代及一种以上第三代头孢菌素耐药的226株常见革兰阴性杆菌，包括阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中，分别检出单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs及单产ESBLs细菌34株、15株、109株，总检出率分别为15．0％、6．6％、48．2％。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高，为57．9％；ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高，其次为大肠埃希菌，分别为78．5％、77．8％。结论：下呼吸道产AmpC酶和ESBLs细胞感染常见，前以阴沟肠杆菌为主，后多见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。