三种腺苷受体mRNA表达与哮喘发病及第1秒用力呼气值的相关性

目的:通过诱导痰技术检测3种腺苷受体mRNA的表达与哮喘发病及第1秒用力呼气值的相关性。方法:实验于2003-10/2004-06在南京大学医学院附属鼓楼医院中心实验室完成。选择该院呼吸科门诊及住院患者9例(哮喘组),女7例,男2例;均无吸烟史,至少1个月内未用过糖皮质激素类药物。选择南京大学医学院研究生和职工9例为正常组,皆为健康正常人,无吸烟及过敏性疾病史。实验经本院伦理委员会批准,并与受试者签定知情同意书。取两组对象的诱导痰;贴壁法分离和纯化巨噬细胞及炎性细胞,并计算相对构成计数的百分比;利用反转录-多聚酶链反应技术和图像分析半定量法检测诱导痰肺泡巨噬细胞腺苷受体mRNA的表达;计算第1秒用力呼气量占预测值百分比与腺苷受体mRNA的相关性。结果:按意向处理分析,18例均进入结果分析。①哮喘组诱导痰肺泡巨噬细胞表达A1及A2b和A3腺苷受体mRNA吸光度积分扫描相对比值均明显高于正常组(0.44±0.11,0.48±0.07,0.48±0.11;0.29±0.06,0.30±0.10,0.36±0.09,t=2.8,4.63,2.85,P<0.05～0.01)。②哮喘组嗜酸性粒细胞、淋巴细胞相对计数构成比明显高于正常组(P<0.01),而巨噬细胞相对计数构成比明显低于正常组(P<0.01)。③第1秒用力呼气量占预测值百分比在哮喘组与A2b腺苷受体mRNA呈正相关(r=0.49,P<0.05)。而与A1及A3腺苷受体mRNA表达无相关性(P>0.05)。结论:A1,A2b,A3腺苷受体可能参与哮喘发病过程,且在哮喘患者诱导痰巨噬细胞与外周血单核细胞表达均高于正常人。但腺苷受体亚型与第1秒用力呼气量占预测值百分比的相关性并不一致,对气道阻塞程度的影响可能不同,有待于进一步证实。     

高原地区慢性肺源性心脏病患者不同病期血液和痰中细胞因子变化与肺功能的关系

目的：探讨高原地区慢性肺源性心脏病(肺心病)患者急性期、缓解期血液和痰中白细胞介素8(白介素8)和肿瘤坏死因子α的变化与肺功能的关系。方法：选择2002-01／2004—06解放军第四医院兰州军区呼吸内科中心住院的慢性肺心病患者50例(急性期)，男32例，女18例，年龄55～76岁。纳入患者均确诊为急性加重期肺心病，均居住在海拔2260～3300m地区，并同意参加实验。另选2003—03／05同海拔本院健康查体自愿者20人作对照组，男13人，女7人，年龄54～74岁。入院当天检测血液中性粒细胞百分比；采取静脉血4mL制备血清，收集痰液，用酶联免疫吸附反应法检测痰上清液和外周血浆白介素8和肿瘤坏死因子α水平。然后给予常规综合治疗，其中住院期间死亡4例，其余46例病情缓解后3周重复上述检查。50例慢性肺心病患者在急性期和治疗3周病情缓解后(46例)作血常规及第1秒用力呼气量占预计值百分比测定。结果：最终进入结果分析急性期和缓解期肺心病患者分别为50和46例，健康人20人。①急性期患者外周血浆白介素8和肿瘤坏死因子水平明显高于缓解期[(286．55&;#177;52．14)，(45．67&;#177;7．34)ng／L，(133．39&;#177;35．13)，(31．58&;#177;5．23)ng／L，t=10．53，8．97，P&;lt;0．01]；而第1秒用力呼气量占预测值百分比明显低于缓解期[(35．98&;#177;6．22)％，(44．66&;#177;5．34)％，t=5．43，P&;lt;0．01]。急性期和缓解期患者外周血浆白介素8和肿瘤坏死因子水平明显高于对照组(t=9．12～25．14，P&;lt;0．01)，第1秒用力呼气量占预测值的百分比明显低于对照组(t=29．08，18．76，P&;lt;0．01)。②急性期患者痰液中白介素8和肿瘤坏死因子水平[(40．52&;#177;7．36)，(19．42&;#177;3．25)ng／L]明显高于缓解期[(16．42&;#177;2．16)，(9．30&;#177;2．64)ng／L，t=19．06，14．53，P&;lt;0．01]。③血液中白介素8与第1秒用力呼气量占预测值的百分比呈显著负相关(r=-0．633，P&;lt;0．01)；痰液中白介素8、肿瘤坏死因子与第1秒用力呼气量占预测值百分比呈显著负相关(r=-0．588，-0．607，-0．531，P&;lt;0．01)。结论：高原慢性肺心病患者缓解期血液和痰液中自介素8和肿瘤坏死因子水平明显低于急性期；血液和痰液中白介素8水平及痰液中肿瘤坏死因子水平越高，肺功能越差。     

适宜性电刺激膈神经的方法对高原慢性肺源性心脏病缓解期患者膈肌疲劳和肺功能的改善作用

目的：探讨体外膈肌起搏治疗高原慢性肺源性心脏病缓解期患者膈肌疲劳的效果，并比较不同脉冲幅度、治疗时间及次数的差异对呼吸功能的影响。方法：选择2001-02／2004-10解放军第四医院兰州军区呼吸内科中心住院的慢性肺源性心脏病缓解期患者84例，男52例，女32例。原发基础疾病为慢性阻塞性肺疾病且均知情同意。根据膈肌起搏治疗仪治疗情况随机分为2组，每组42例。脉冲幅度60V组：男26例，女16例；脉冲幅度100V组：男26例，女16例。①两组患者病情缓解1周后，停止所有治疗包括氧疗。采用膈肌起搏治疗仪进行治疗。脉冲幅度60V组为脉冲幅度60V，30min／次，1次／d；脉冲幅度100V组为脉冲幅度100V，40min／次，2次／d。2组均14d为1个疗程。(2)用电脑膈肌功能测定仪测定两组患者呼吸肌功能，包括最大吸气压，最大呼气压、最大跨膈压。用公式计算呼吸肌力量指数(呼吸肌力量指数=最大吸气压+最大呼气压／2。③采用血气分析仪测定动脉血氧分压和二氧化碳分压。用电脑肺功能仪测定第1秒用力呼气量占预计值百分比、用力肺活量、第1秒用力呼气量占用力肺活量百分比。④计量资料组间比较采用t检验，组内比较采用配对t检验。结果：慢性肺源性心脏病缓解期患者84例均进入结果分析。①脉冲幅度60V组患者：治疗后最大吸气压、最大呼气压、最大跨膈压、呼吸肌力量指数、第1秒用力呼气量占预计值百分比、用力肺活量，第1秒用力呼气量占用力肺活量百分比、氧分压明显高于治疗前[(5．04&;#177;0．62)，5．15&;#177;0．671，(5．38&;#177;0．671．(5．09&;#177;0．65)kPa．(46．5&;#177;5．8)％，（1．3&;#177;0．4)L，(47．9&;#177;5.3)％，(7．05&;#177;0．72)kPa；(4．12&;#177;0．66)．(4．32&;#177;0．64)．(4．28&;#177;0．51)，(4．34&;#177;0．56)kPa，(41．2&;#177;6．1)％，(0．9&;#177;0．4)L，(43．5&;#177;5．6)％，(6．22&;#177;0．76)kPa，τ=3.32～7．86，P&;lt;0．01]。②脉冲幅度100V组患者：治疗前后相近(P&;gt;0．05)。③最大吸气压、最大呼气压、最大跨膈压、呼吸肌力量指数、第1秒用力呼气量占预计值百分比、用力肺活量、第1秒用力呼气量占用力肺活量百分比及氧分压：治疗前两组差异不明显(P&;gt;0．05)。治疗后脉冲幅度60V组明显高于脉冲幅度100V组[(5．04&;#177;0．62)，(5．15&;#177;0．67)，(5．38&;#177;0．67)，(5．09&;#177;0．65)kPa．(46．5&;#177;5．8)％．(1．3&;#177;0．4)L，(47．9&;#177;5．3)%，(7．05&;#177;0．72)kPa；(4．19&;#177;6．60)，(4．58&;#177;0．56)，(4．51&;#177;6．00)，(4．39&;#177;0．58)kPa．(42．3&;#177;5．6)％，(1．0&;#177;0．3)L，(44．3&;#177;6．1)％，(6．32&;#177;6．90)kPa，τ=2．61～6．12,P&;lt;0．01]。治疗后二氧化碳分压脉冲幅度60V组明显低于脉冲幅度100V组[(5．64&;#177;0．73)，(6．33&;#177;0．76)kPa,τ=4．12，P&;lt;0．01]。结论：高原慢性肺心病患者存在着严重的呼吸肌疲劳。采用电刺激膈肌神经方法，适当地电刺激膈肌神经(脉冲幅度60V组)能够明显加强膈肌运动，改善肺通气功能，提高氧分压，降低二氧化碳分压，从而有效地改善呼吸功能。脉冲幅度100V组结果表明较大的脉冲幅度、较长的时间和短时间内多次刺激膈肌神经，不能增强膈肌运动和改善肺通气，反而会加重膈肌疲劳和呼吸功能障碍。因此，选择适宜电刺激方法对恢复膈肌疲劳性呼吸功能障碍患者很重要。     

高血压左室肥厚发病中细胞间黏附分子1的表达及丹参酮ⅡA的抑制效应

背景：细胞间黏附分子1作为炎症反应的可靠标志物在动脉粥样硬化发病中具有重要的作用。近年来研究认为其介导的慢性炎症反应可能参与高血压左室肥厚的发病过程，但也有报道持相反观点。丹参酮ⅡA是丹参的一种脂溶性提取性，动物实验证明其具有抑制高血压左室肥厚发生的作用。目的：探讨细胞间黏附分子1在高血压左室肥厚发生中的作用及丹参酮ⅡA对其表达的影响。设计：随机对照观察。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院。材料：实验于2002—10／2004—01在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成，选用12周龄雄性WKY大鼠10只、自发性高血压SHR大鼠20只，分为对照组(WKY大鼠10只)、高血压组(SHR大鼠10只)、丹参酮ⅡA组(SHR大鼠10只)。方法：丹参酮ⅡA组经尾静脉注射丹参酮ⅡA1．5mg／(kg&;#183;d)治疗，其他两组分别注射等量的蒸馏水。12周后断头处死所有大鼠留取心肌标本，应用苏木精-伊红染色、VG染色，免疫组化染色及心肌EDI标记检测心肌巨噬细胞浸润数，心肌细胞间黏附分子1mRNA及蛋白的表达应用反转录一聚合酶链反应及酶链免疫吸附实验等方法。主要观察指标：各组大鼠心肌巨噬细胞浸润数，心肌细胞间黏附分子1mRNA及蛋白表达。结果：20只SHR和10只WKY大鼠被纳入实验，并全部进入结果分析，无脱失值。①与对照组比较，高血压组大鼠肥厚心肌中细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达显著增加(0．176&;#177;0．087，0．537&;#177;0．195；0．104&;#177;0．011，0．173&;#177;0．027，P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，巨噬细胞浸润明显(0．62&;#177;0．07，1．85&;#177;0．23，P&;lt;0．01)。②与高血压组比较，丹参酮ⅡA组大鼠心肌细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达水平显著下调(0．537&;#177;0．195，0．291&;#177;0．106；0．173&;#177;0．027，0．125&;#177;0．014．P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，巨噬细胞浸润数减少(1．85&;#177;0．23。1．16&;#177;0．17，P&;lt;0．05)，心肌细胞肥大和间质纤维化程度明显减轻。结论：心肌细胞间黏附分子1的过度表达及其介导的炎性细胞浸润在高血压左室肥厚的发病过程中具有重要作用。丹参酮ⅡA抑制左室肥厚的效应可能与其下调细胞间黏附分子1表达，减少炎性细胞的心肌浸润有关。     

不同肺功能程度的稳定期慢性阻塞性肺疾病患者甲状腺激素水平比较

目的：观察不同肺功能状态的稳定期慢性阻塞性肺疾病患者甲状腺素变化情况，并与健康者比较。方法：选择2003-06／2004-09解放军总医院老年病房收治的稳定期慢性阻塞性肺疾病患者47例，均为老年男性。均自愿参加。①依据肺功能将患者分为轻中度慢性阻塞性肺疾病组25例(第1秒用力呼气量占用力肺活量的百分比&;lt;70％)，年龄72～91岁，平均(85&;#177;3)岁；重度慢性阻塞性肺疾病组22例(第1秒用力呼气量占用力肺活量的百分比&;lt;70％、第1秒用力呼气量占预测值百分比&;lt;30％或第1秒用力呼气量占预测值百分比&;lt;50％伴呼吸衰竭或右心衰竭的临床征象)，年龄73～91岁，平均(84&;#177;7)岁。②选择同期本院健康体检老年人的健康老年人20名作为对照组，年龄71～92岁，平均年龄(85&;#177;4)岁。均为男性。③人选慢性阻塞性肺疾病患者进行肺功能检查，采用肺功能仪完成。④反映甲状腺功能的血清三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、促甲状腺激素测定采用酶联免疫吸附法。结果：①稳定期慢性阻塞性肺疾病患者47例，健康老年人20名均进入结果分析。②血清游离三碘甲状腺原氨酸、三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、甲状腺素、促甲状腺激素：3组受试对象上述指标均在正常范围内，且3组之间差异不明显(P&;gt;0．05)。上述指标正常范围分别为3．5～6．5pmol/L，0．92～2．79nmol／L，11．5～22．7pmol／L，82．6～138．0nmol/L，0．35～5．50mU/L。轻中度慢性阻塞性肺疾病组上述指标测定结果分别为(3．98&;#177;0．89)pmol／L，(1．59&;#177;0．29)nmol／L，(13．39&;#177;4．23)pmol／L，(115.82&;#177;30．16)nmol／L，(2.21&;#177;1．12)mU／L；重度慢性阻塞性肺疾病组分别为(3．77&;#177;0．77)pmol／L，(1．48&;#177;0．32)nmol／L，(16．05&;#177;7．29)pmol／L，(123.21&;#177;31．25)nmol/L，(2．08&;#177;1．07)mU／L；对照组分别为(4．11&;#177;0．68)pmol／L，(1．64&;#177;0．35)nmol／L，(14．24&;#177;3．57)pmol／L，(125．35&;#177;27．95)nmol／L，(2．27&;#177;1．03)mU／L。结论：不同肺功能程度的慢性阻塞性肺疾病患者及健康人之间甲状腺功能无明显不同。     

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织基质金属蛋白酶2与细胞黏附因子的表达

目的：研究慢性阻塞性肺疾病患者肺组织基质金属蛋白酶2，细胞黏附因子蛋白及mRNA在肺内的分布和表达、相互作用及与气流阻塞的关系。 方法：收集2005-03／09哈尔滨医科大学附属第一医院和附属第三医院胸外科手术肺肿瘤患者边缘肺组织（距肿瘤组织〉5cm）标本28份。根据吸烟史．有无慢性阻塞性肺疾患病史、胸部X射线片、肺功能将标本来源患者分为两组，对照组9例，无吸烟史也无慢性阻塞性肺疾病；慢性阻塞性肺疾患组19例，吸烟伴有慢性阻塞性肺疾病：通过肺功能检测两组患者第一秒用力呼气容积百分比、用力肺活量百分比、第一秒用力呼气容积／用力肺活量百分比肺功能变化指标。采用免疫组织化学方法和反转录一聚合酶链反应法检测人肺组织基质金属蛋白酶2、细胞黏附因子蛋白和mRNA的表达，并进行相关性分析。 结果：纳入患者28例，均进入结果分析。①肺功能变化指标：两组比较第一秒用力呼气容积百分比、用力肺活量百分比、FEV1／FVC／％差异显著（P〈0．01）。②免疫组织化学染色结果：基质金属蛋白酶2高表达于慢性阻塞性肺疾患组肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、血管平滑肌细胞、肺泡巨噬细胞、间质细胞（积分值为2．47&;#177;0．70）。对照组表达非常弱（积分值为1．22&;#177;0．44），两组比较差异显著（P〈0．01）；细胞黏附因子高表达于慢性阻塞性肺疾患组肺泡上皮细胞（积分值2．58&;#177;0．51），对照组表达非常弱（积分值0．67&;#177;0．87），两组比较差异显著（P〈0．01）。③反转录-聚合酶链反应结果：基质金属蛋白酶2平均吸光度值（A）半定量分析，慢性阻塞性肺疾患组高于对照组，差异显著（0．54&;#177;0．14，0．19&;#177;0．08，P〈0．01）。细胞黏附因子平均吸光度值（A）半定量分析，慢性阻塞性肺疾患组高于对照组，差异显著（0．62&;#177;0．15，0．37&;#177;0．1l，P〈0．01）。④相关分析：基质金属蛋白酶2mRNA表达及免疫组织化学表达与第一秒用力呼气容积百分比．第一秒用力呼气容积／用力肺活量百分比呈直线负相关（r=-0．577，-0．768，-0．531，-0．591，P〈0．05）；肺组织细胞黏附因子mRNA及免疫组织化学与第一秒用力呼气容积百分比、FEVl／FVC／％呈直线负相关（r=-0．584，-0．529，-0．580，-0．721，P〈0．01）。慢性阻塞性肺疾患患者肺组织基质金属蛋白酶2、细胞黏附因子mRNA呈直线正相关（r=0.535，P〈0．01），慢性阻塞性肺疾患患者肺组织基质金属蛋白酶2、细胞黏附因子免疫组织化学分析呈直线正相关（r=0．664，P〈0．01）。 结论：慢性阻塞性肺疾患患者肺组织基质金属蛋白酶2增多使气道结构细胞失去正常的支持作用，通过细胞黏附因子促进炎症细胞的趋化、移行，聚集于血管壁，释放炎性因子，迁移进入细胞外基底膜及气道上皮细胞，参与气道壁的炎症反应，引起肺组织的重构，引起及加重慢性阻塞性肺疾患患者的气流阻塞。     

雌二醇对骨形态发生蛋白受体表达的影响

目的：研究骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中，雌二醇对其骨形态发生蛋白受体(BMPR)IA，IB mRNA表达的影响，探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用，试阐明绝经后高转换骨代谢始动环节的可能机制。方法：SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代培养后，用1，25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化，17β-雌二醇(E2)处理培养细胞，观察E2对骨髓基质细胞分化过程中骨形态发生蛋白受体IA、IB mRNA、碱性磷酸酶(ALP)活性和Ⅰ型胶原合成的影响，β-actin作内对照半定量RT-PCR分析骨形态发生蛋白受体IA，IB mRNA的表达，以α-磷酸奈酚为底物，测定细胞碱性磷酸酶的活性，Van Gieson染色法显示Ⅰ型腔原的含量。结果：E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中BMPR-IA mRNA的表达，且呈剂量依赖性，随E2浓度增加(0～1&;#215;10^3nmol／L)BMPR-IA mRNA从(27．0&;#177;3．4)％降至(17．0&;#177;1．8)％(t=5．2，P&;lt;0．01)和(9．3&;#177;1．6)％(t=9．2，P&;lt;0．01)；BMPR-IB mRNA随E2浓度增加而增加，从(2．0&;#177;0．8)％增至(4．8&;#177;1．5)％(t=3．3，P&;lt;0．05)和(17．2&;#177;2．2)％(t=13，P&;lt;0．01)。Northernblot结果显示在上述E2浓度时BMPR-IA mRNA的表达从4．21&;#177;0．36降至1．24&;#177;0．10(t=18．2，P&;lt;0．01)；BMPR-IB mRNA的表达从1．72&;#177;0．11增至3．73&;#177;0．31(t=12．2，P&;lt;0．01)。ALP活性随E2浓度增加而降低，从(42．6&;#177;2．5)U／g蛋白降至(17．9&;#177;2．0)U／g蛋白(t=15，P&;lt;0．01)，(10．8&;#177;1．5)U／g蛋白（t=22，P&;lt;0．01)和(3．6&;#177;0．7)U原蛋白(t=30，P&;lt;0．01)；细胞I型胶原的含量随E2浓度增加而减少。VanGieson染色由鲜红、淡红到黄色，红色越深，表明胶原越多。绪论：E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中BMPR-IA mRNA的表达，降低ALP的活性和Ⅰ型胶原含量，增加BMPR-IB mRNA的表达)。     

葛根总黄酮对实验性哮喘大鼠的预防效应

目的：探讨脾T淋巴细胞亚群在实验性大鼠哮喘模型中的表达，和葛根总黄酮对T淋巴细胞亚群及对实验性哮喘的预防作用。方法：实验于2003—03-01／04—02在解放军总医院实验动物中心完成。用卵蛋白致敏并激发建立了SD大鼠哮喘模型，32只大鼠随机分为4组，每组8只。为正常对照组、卵蛋白激发哮喘发作组、葛根总黄酮灌胃组、葛根总黄酮预防组，每组分别测定动脉血血气作为哮喘严重程度的缺氧评定指标，测定血液中白细胞介素4水平，同时采用流式细胞仪观察脾T细胞亚群的变化。结果：4组32只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠血气结果：卵蛋白激发哮喘发作组动脉血氧分压低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组【(4．24&;#177;2.20)．(10.04&;#177;13)，(9.68&;#177;1．35)kPa，P&;lt;0．01】；卵蛋白激发哮喘发作组剩余碱低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组【(1．82&;#177;1．31)，(2．77&;#177;2．18)，(2．67&;#177;2．18)mmol／L，P&;lt;0.01】；卵蛋白激发哮喘发作组血氧饱和度低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组【(51．8&;#177;35．9)，(64．55&;#177;29．87)，(62.51&;#177;40．31)％，P&;lt;0.05】。②各组大鼠脾T淋巴细胞亚群变化：葛根总黄酮预防组CD4^+低于卵蛋白激发哮喘发作组(13．19&;#177;3．33，18.37&;#177;1．98，P&;lt;0．01)，葛根总黄酮预防组CD8^+高于卵蛋白激发哮喘发作组(8．01&;#177;0．42，6．25&;#177;0．63，P&;lt;0．01)，葛根总黄酮预防组CD4^+／CD8^+低于卵蛋白激发哮喘发作组(1．61&;#177;0.35，2．94&;#177;0．32，P&;lt;0．01)。③白细胞介素4：卵蛋白激发哮喘发作组为(85．2&;#177;12．3)ng／L，比正常对照组和葛根总黄酮预防组大鼠显著增高【(3．3&;#177;0．7)。(7．74&;#177;1．0)ng／L，P&;lt;0．01】。结论：脾T淋巴细胞亚群的活化参与哮喘的发病过程，葛根总黄酮可以抑制免疫细胞T淋巴细胞的活化和过表达，可能通过恢复CD4^+／CD8^+比值，加强CD8^+T淋巴细胞对CD4^+T淋巴细胞的抑制作用，抑制嗜酸性粒细胞增生和IgE的合成从而阻断哮喘发病。     

沙美特罗替卡松干粉剂吸人对支气管哮喘患者肺功能的影响

目的：观察沙美特罗替卡松干粉剂吸入干预支气管哮喘的效果，探讨其对患者肺功能和生活质量的影响。方法：选择2002—06／2004—04湛江中心人民医院院呼吸内科门诊符合纳入标准的中、重度支气管哮喘患者64例为研究对象。随机将患者分为治疗组和对照组，每组32例。治疗组每日吸入沙美特罗替卡松干粉剂2次，共24周；对照组每日吸入替卡松气雾剂2次，共24周。治疗前及治疗第1，4，12，24周检查肺功能和治疗前后进行生活质量评估比较。结果：治疗组治疗后第1周哮喘症状日间评分、夜间评分和沙丁胺醇气雾剂用量[(1．69&;#177;0．14)分，(1．15&;#177;0．15)分，(2．23&;#177;0．23)喷／d]明显低于对照组[(1．80&;#177;0.15)分，(1.25&;#177;0．14)分，(2．40&;#177;0．25)喷／d][t=2．5～2．8，P&;lt;0．05)，第24周明显低于对照组(t=10.8～13．0，P&;lt;0．01)。治疗组治疗后第1秒用力呼气量和最大呼气峰速值(peak expiratory flow rates，PEFR)较对照组明显改善(t=2．4～14．0，P&;lt;0．05～0．01)，生活质量较对照组明显提高(t=3．1～8．0，P&;lt;0．01)。结论：沙美特罗替卡松干粉剂吸入可改善患者肺功能及提高生活质量。     

不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1和PPAR-γ2 mRNA表达的影响

背量：绝经后骨质疏松的病理生理机制尚未完全阐明，研究表明骨丢失与雌激素缺乏相关，后者可导致多种细胞因子生成增加，继而引起成骨细胞和破骨细胞生成增多。骨吸收增强。雌二醇能否改变骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1和PPAR-γ2 mRNA的表达进而影响其向成骨细胞分化尚不清楚。目的：研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中，17β-雌二醇对其核结合因子a1(Cbfa1)及过氧化物酶增殖活化受体γ2(PPAR-γ2)mRNA表达的影响，探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。设计：非随机对照研究。地点和对象：所有实验均在成都军区总医院检验科和成都百奥生物技术有限公司完成，分离骨髓基质细胞所需大鼠由成都中医药大学实验动物研究中心提供。干预：1，25(OH)2D3和地塞米松诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化，用不同浓度[(O-1)&;#215;10^-6mol／L]雌二醇对细胞分化过程进行干预。主要观察指标：应用半定量RT-PCR及Northern blot技术，观察不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1及PPAR-γ2 mRNA表达的影响。结果：雌二醇能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1 mRNA的表达，雌二醇浓度为[(O-1)&;#215;10^-6mol／L]时，Cbfa1 mRNA的表达量从(25．0&;#177;3．3)％降至(19．8&;#177;2．2)％(t=2．62，P&;lt;0．05)，(14．5&;#177;1．3)％(t=5．92,P&;lt;0．01)和(6．5&;#177;1．9)％(t=9．72，P&;lt;0．01)；雌二醇能明显促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR-γ2 mRNA的表达，在上述雌二醇浓度时。PPAR-γ2 mRNA的表达从(1．75&;#177;0．5)％增至(9．5&;#177;2．1)％(t=7．18，P&;lt;0．01)和(19．3&;#177;3．0)％(t=11．5，P&;lt;0．01)；Northern blot结果显示随着雌二醇浓度的增加，Cbfa1 mRNA的表达量从4．42&;#177;0．39降至1．88&;#177;0．16(t=12．0，P&;lt;0．01)和1．19&;#177;0．11(t=15．8，P&;lt;0．01)；PPAR-γ2 mRNA的表达量从1．31&;#177;0．12增至2．81&;#177;0．22(t=10．5,P&;lt;0．01)和4．02&;#177;0．36(t=14．2，P&;lt;0．01)。细胞ALP活性明显受雌二醇的抑制，在上述雌二醇浓度时ALP的活性从(42．6&;#177;2．5)降至(3．6&;#177;0．7)U／g蛋白(t=29，P&;lt;0．01)。Ⅰ型胶原含量均随雌二醇浓度增加而降低。结论：雌二醇抑制体外培养的骨髓基质细胞向成骨细胞分化而促进其向脂肪细胞分化。     

病毒感染小鼠心肌中内皮素及其A受体表达

目的：探讨病毒性心肌炎小鼠心肌组织中是否存在有血管收缩作用的内皮素及内皮素A受体mRNA。方法：实验于2003-10／2004-04在哈尔滨医科大学克山病研究所完成。选用雄性清洁级Balb／c小鼠40只，腹腔注射嗜心肌柯萨奇B组病毒3型制备病毒性心肌炎模型，用反转录-聚合酶链反应技术半定量检测病毒感染后即刻，9，14及21d小鼠心肌中的内皮素A受体-mRNA表达。用免疫组化方法测定病毒感染后即刻及感染后14d心肌中内皮素表达情况。结果：①病毒感染后14d心肌中内皮素A受体mRNA表达明显高于病毒感染后即刻(0．672&;#177;0．0828，0．501&;#177;0．085，q=4．888，P&;lt;0．05)。病毒感染后7，21d心肌中内皮素A受体mRNA的表达高于感染后即刻，但无明显差异(q=1．471，3．089，P&;gt;0．05)。②病毒感染14d后心肌中内皮素表达明显高于病毒感染后即刻(0．034477&;#177;0．017676，0．00288&;#177;0．001768．τ=4．3568，P&;lt;0．05)。结论：内皮素系统参与病毒性心肌炎的损伤过程。     

呼吸训练后老年慢性阻塞性肺疾病患者呼吸功能障碍分级的变化

目的：观察应用规范综合的呼吸训练疗法对老年慢性阻塞性肺疾病患者呼吸功能障碍分级的改善以及对肺功能的影响。方法：选择2002-01／2004-12沈阳市铁西区中心医院呼吸内科接受治疗的老年慢性阻塞性肺疾病患者34例，男20例，女14例，患者均知情同意参加本实验。34例患者在接受常规治疗同时进行呼吸操训练(以缩唇呼气配合肢体动作为主，吸气用鼻，呼气用嘴，第1节双手上举吸气，放下呼气，10～20次；第2节以手放于身体侧面。交替沿体侧上移下滑，上移吸气，下滑呼气，10～20次；第3节双肘屈曲握拳，交替向斜前方击拳，出拳吸气，还原呼气，10～20次；第4节双腿交替抬起，屈膝90&;#176;，抬起吸气，放下呼气；第5节吹悬挂的小纸球训练)和运动训练(根据患者的心肺功能不同，步行60～80步／min，10～15min／次，3次／d；上肢做双臂上举运动，2．0～3．0min／次，2次／d或用上肢拉力器训练，质量0．5～2．0kg，连续拉10～20次，训练时配合呼吸进行，拉起呼气)。各项指标分别于功能训练前和功能训练6个月后进行评定。活动受限主观呼吸障碍感受采用6级评定法(0级为无症状；1级为一般劳动后，有气促；2级为速度较快行走，上坡、上下楼有气促；3级为缓慢走不到百米就有所促；4级为说话、穿衣等轻微活动有气促；5级为安静状态下有气促，无法平卧)。肺功能采用用力肺活量，第1秒用力呼出量，第1秒用力呼气量占预测值百分比，第1秒用力呼气量占用力肺活量百分比，最大通气量，一氧化碳弥散量进行评定。结果：34例患者全部进入结果分析。①呼吸功能障碍分级的变化：功能训练前0级1例，1级3例，2级24例，3级3例，4级2例，5级1例。功能训练后分别为2，8，10，12，2，0例。②肺功能指标变化：功能训练后用力肺活量、第1秒用力呼出量、第1秒用力呼气量占预测值的百分比、第1秒用力呼气量占用力肺活量百分比、最大呼气量、一氧化碳弥散量与功能训练前基本一致[(2．61&;#177;0．13)L，(2．58&;#177;0．12)L；(1．67&;#177;0．11）L，(1．62&;#177;0．10)L；(73．26&;#177;4．54)％，(67．71&;#177;4．15)％；(61．44&;#177;2．43)％，(61．59&;#177;2．30）％；(62．91&;#177;3．39)L，(62．05&;#177;3．42)L；(13．31&;#177;0．72)mL／(min．mm Hg)，(13．75&;#177;0．82)mL／(min&;#183;mm Hg)，(τ=248～1．741，P&;gt;0．05)]。结论：通过半年呼吸康复训练，患者呼吸功能障碍明显减轻，但肺功能各项指标基本无改善。     

电针对脑缺血再灌注大鼠海马Fos蛋白的影响

目的：探讨脑缺血再灌注后电针对大鼠海马Fos蛋白表达的影响：方法：SD大鼠18只，体质量250～280g，雌雄不限。动物随机分为3组．对照组、模型组和治疗组。采用夹闭大鼠双侧颈总动脉造成的脑缺血再灌注损伤模型，电针百会、风池、大钟及足三里穴，频率2～20Hz，强度2．0A，持续30min，4h后观察海马Fos蛋白的表达。结果：电针能明显加强脑缺血再灌注后海马各区Fos蛋白的表达：治疗组与模型组相比海马各区阳性细胞数显著增加，CA1区（236&;#177;26．126&;#177;19.P&;lt;0.05)；CA3(328&;#177;80，212&;#177;55．P&;lt;0.05)：CA4(594&;#177;104．381&;#177;92、P&;lt;0．01)：DG(621&;#177;111，341&;#177;89．P&;lt;0.01)。结论：缺血再灌注可诱导海马Fos蛋白的显著表达，电针可增强Fos蛋白的表达。     

醒脑静对脑缺血大鼠神经保护作用与氨基酸受体表达的关系

目的：探讨醒脑静对局灶性脑缺血大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的影响。方法：采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断(MCAO)模型，分别观察醒脑静对MCAO大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积和海马NMDA受体的含量的影响。结果：缺血3和6h，醒脑静组神经功能缺损评分明显低于MCAO组(P&;lt;0．01)；且模型组梗死体积24h(197．60&;#177;34．03)mm^-3明显大于6h(140．60&;#177;14．81)mm^3，差别有统计学意义(P&;lt;0．05)；但治疗组梗死体积6h是(114．60&;#177;23．62)mm^3，24h是(125．60&;#177;20．51)mm^3．后者明显小于模型组(P&;lt;0．01)；缺血1，6，24h，模型组NMDA受体表达分别为(8．40&;#177;1．23)，(12．08&;#177;1．80)，(17．94&;#177;1．62)nmol／g，呈逐渐上调趋势(P&;lt;0．05)，24h时治疗组NMDA受体表达为(5．22&;#177;1．43)nmol／g，明显低于模型组(P&;lt;0．01)。结论：醒脑静对局灶性脑缺血大鼠具有明确的神经保护作用，其机制可能与拮抗兴奋性氨基酸受体表达上调有关。     

局灶性脑缺血再灌注后脑腺苷含量和烯醇化酶的动态变化

目的：研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织腺苷含量、烯醇化酶表达的动态变化及桂哌齐特对此的影响。方法：采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。应用反相离子对高效液相色谱法和免疫组织化学法分别检测脑腺苷含量及烯醇化酶表达的动态变化。并进行神经功能评分。结果：模型组大鼠脑缺血及再灌注后4个时间点脑腺苷含量均较基础水平(1．01&;#177;0．14)μmol／g增高(P&;lt;0．05)；桂哌齐特组缺血后20min为(3．26&;#177;0．30)μmol／g，60min时为(1．91&;#177;0．20)μmol／g，较模型组[分别为(2．40&;#177;0．38)μmol／g，F=92．572，P&;lt;0.05；(1．27&;#177;0．17)μmol／g]显著升高(F=92．572，43．051，P&;lt;0．05)，再灌注后15min及60min呈现增高的趋势(P&;gt;0．05)。烯醇化酶的表达在脑缺血再灌注后各时间点均明显降低(P&;lt;0．05)，桂哌齐特组均明显高于模型组(P&;lt;0.05)，且神经功能评分有明显改善。结论：脑缺血再灌注后脑组织腺苷含量急骤升高，但持续时间短暂。桂哌齐特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经元有保护作用，可能与其增加内源性腺苷含量从而增强腺苷的脑保护作用有关。     

实验性糖尿病大鼠胰岛素样生长因子—1基因表达异常与神经电生理及外周神经病变

目的：探讨糖尿病时肝组织胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因表达的异常及其与糖尿病外周神经病变的关系。方法：分离解剖出右侧坐骨神经，测定诱发电位出现的波幅(amplitude of eyoked potentials，AEP)、感觉及运动神经传导速度(sensoxy／motor nerve conduction velocity，SNCV／MNCV)，用四氧嘧啶诱发糖尿病SD大鼠模型。48只糖尿病大鼠按经(胰岛素)控制后血糖水平分成3组：ID—1，2,3组，16只正常大鼠用作对照组。反转录一多聚酶链扩增反应半定量分析坐骨神经IGF-1 mRNA含量；酶联免疫吸附法分析组织IGF-1肽含量；诱发肌电图测定坐骨神经电生理指标；观察坐骨神经形态学改变。结果：病程早期(2周，2个月)，正常对照组、ID-2组大鼠肝组织IGF-1 mRNA含量(1．15&;#177;0．090，0．79&;#177;0．048，P&;lt;0．001；1．17&;#177;0．069，0．53&;#177;0．023，P&;lt;0．001)、肽含量均下降[(196．66&;#177;14．9)，(128．2&;#177;11．25)μg／g，P&;lt;0．001；(196．66&;#177;14．9)，(74．43&;#177;5．33)μg/g，P&;lt;0．001]出现在相应糖尿病组大鼠坐骨神经电生理指标异常之前，程度均随糖尿病控制状态而异，且随病程进一步逐渐下降[IGF—1 mRNA(0．71&;#177;0．024)～(0．47&;#177;0．021)；IGF-1肽(114．35&;#177;8．09)～(64．58&;#177;3．89)μg／g,P&;lt;0．001]。血清IGF-1呈一致性下降(r=0．99，P&;lt;0．001)。其变化与坐骨神经功能改变(感觉神经：r=0．54,P&;lt;0．05，运动神经：r=0．49,P&;lt;0．05)、组织形态异常关系密切(神经纤维密度r=0．68，P&;lt;0．05)，血糖正常糖尿病组大鼠与正常对照组间上述指标差异无显著性意义。结论：糖尿病早期即出现肝组织IGF-1基因表达下降，程度依糖尿病严重状态而异并随疾病进程加重，血清IGF-1水平相应地出现变化，提示肝组织为血循环IGF—1的主要来源。这种表达异常可能导致外周神经病变发生和发展。     

丹参酮ⅡA抑制高血压状态下心脏醛固酮合成及其相关基因的表达

背景：醛固酮是左心室肥厚的主要致病因子，有效抑制其生物合成可防治高血压左室肥厚。目的：观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心肌醛固酮合成及其相关基因CYP11B1和CYP11B2表达的作用，以及其抑制高血压左室肥厚的可能途径。设计：以自发性高血压大鼠为实验对象，以正常血压的WKY大鼠为对照，完全分组设计，随机对照实验，各组问均数的比较用方差分析。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科和中西医结合研究所。材料：实验于2003-01／2004-02在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。选用12周龄雄性正常血压WKY大鼠10只为对照组，将12周龄雄性自发性高血压大鼠20只随机分为2组，每组10只，分别为高血压组和丹参酮ⅡA组。方法：丹参酮ⅡA组经腹腔每天注射1．5mg／kg丹参酮ⅡA，高血压组和对照组均腹腔注射相当容积的蒸馏水。实验12周后断头处死大鼠留取心肌标本，心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量采用放射免疫法测定。心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1和CYP11B 2mRNA表达水平采用反转录聚合酶链反应检测。主要观察指标：实验12周后各组大鼠心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量及CYP11B1和CYP11B2基因的mRNA表达量比较。结果：自发性高血压大鼠20只和正常血压WKY大鼠10只均进入结果分析。①实验12周后大鼠心肌组织醛固酮含量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组[(0.056&;#177;0．014)，(0．031&;#177;0．010)，(0．018&;#177;0.009)ng／g，P&;lt;0．0l，0．05]，丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P&;lt;0．05)。②实验12周后大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ含量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(0．093&;#177;0．016），(0．088&;#177;10．024)，（0．043&;#177;0．012)ng／L，P&;lt;0．01]。③实验12周后大鼠心肌组织CYP11B1基因的表达量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(2．774&;#177;0．138，2．533&;#177;0．127，1．973&;#177;0．102，P&;lt;0．05)。④实验12周后大鼠心肌组织CYP11B2基因的表达量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(1．573&;#177;0．106．1．024&;#177;0．113,0．786&;#177;0．121．P&;lt;0．01，0．05)，丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P&;lt;0．05)。⑤各组大鼠心肌组织CYP11B1和CYP11B2及参照基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的反转录聚合酶链反应产物电泳带的位置与理论值相符。结论：丹参酮ⅡA抑制高血压左室肥厚的效应可能与其下调心肌醛固酮合成相关基因CYP11B2的表达水平，减少心脏局部醛固酮的生物合成有关。     

预先电刺激小脑顶核对缺血心肌神经生长因子基因表达的影响

目的：观察预先电刺激小脑顶核对心肌梗死大鼠心脏神经生长因子mRNA表达的影响。方法：实验于2003—03／06在重庆医科大学附属第一医院心血管疾病研究所完成。选用Wistar大鼠98只。将其中90只随机分为3组，每组30只：①心肌梗死组。结扎左冠状动脉前降支。②电刺激小脑顶核组，预先电刺激小脑顶核1h再予以左冠状动脉前降支结扎。③毁损小脑顶核组，毁损小脑顶核5d后电刺激小脑顶核1h，再行左冠状动脉前降支结扎。又分左冠状动脉前降支结扎后1。7，21d3个时间点，各10只。另设假手术组(n=8)。各组于相应时间点处死大鼠后，取心肌梗死区和非梗死区组织标本，用反转录一聚合酶链反应技术检测标本神经生长因子mRNA表达。结果：去除死亡、心肌未梗死、小脑顶核电刺激或毁损失败的大鼠。最终54只大鼠资料完整。心肌梗死组、电刺激小脑顶核组、毁损小脑顶核组、假手术组分别为13。20，13，8只。①结扎左冠状动脉前降支后1，7，21d，梗死区神经生长因子mRNA表达量：心肌梗死组明显低于假手术组(q=10．047，13．869。7．044，P&;lt;0．01)；电刺激小脑顶核组明显高于心肌梗死组(0．42&;#177;0．07，0．46&;#177;0．07，0．51&;#177;0．08；0．26&;#177;0．08。0．19&;#177;0．06．0．36&;#177;0．07，q=5．358，9．888，4．822，P&;lt;0．01)；毁损小脑顶核组与心肌梗死组比较无明显差异(P&;gt;0．05)。②心肌非梗死区1，7，21d神经生长因子mRNA表达：心肌梗死组均明显低于假手术组和电刺激小脑顶核组(0．36&;#177;0．07，0．30&;#177;0．07，0．36&;#177;0．07；0，56&;#177;0．07。0．56&;#177;0．07．0．56&;#177;0．07；0．49&;#177;0．09，0．46&;#177;0．08，0．59&;#177;0．09，q：4．099～8．947，P&;lt;0．01)；毁损小脑顶核组神经生长因子mRNA的表达量与心肌梗死组比较无明显差异(P&;gt;0．05)。结论：大鼠心肌梗死后梗死区与非梗死区神经生长因子mRNA表达下调，电刺激小脑顶核可上调神经生长因子mRNA表达，起到神经保护作用。     

呼吸训练对肺癌患者放射治疗后肺功能和生活质量的影响

目的：探讨呼吸训练改善肺癌患者放射治疗(简称放疗)后肺功能和生活质量的价值，并研究其规律性。方法：选择2001—10／2003—10在广东省人民医院进行放射治疗的肺癌患者75例。纳入标准：经临床、影像学和病理检查确诊的肺癌患者；活动状态Kamfsky(KPS)评分≥60分。排除标准：放疗后出现严重并发症；原发病急剧恶化，各重要脏器出现转移者。符合上述标准患者52例，男37例，女15例。52例经临床、影像学和病理检查确诊的原发性肺癌患者放疗结束后接受了缩唇呼气法和深呼吸法的呼吸训练，放疗和呼吸训练前后分别进行了肺功能检查及生活质量评估。结果：52例肺癌患者放疗后1个月时的第1秒用力呼气量[（1．02&;#177;0．05)L]，用力肺活量[(2．31&;#177;0．41)L]、第1秒用力呼气量占预测值百分比[(46．7&;#177;18．0)％]和第1秒用力呼气量／用力肺活量(46．30&;#177;21．38)均显著低于治疗前(t=2．238～2．964；P&;lt;0．05～0．01)。肺癌放疗患者呼吸训练1个疗程后，肺功能各项指标均较训练前无明显变化(t=0．581～0．799；P均&;gt;0．05)。呼吸训练2个疗程后，除第1秒用力呼气量(1．11&;#177;0．04)均较训练前有显著改善(t=2．285；P&;lt;0．05)外，余项各肺功能指标无明显变化(P均&;gt;0．05)。肺癌放疗后患者呼吸训练后的日常生活能力、社会活动能力、抑郁症状和焦虑症状等指标明显低于呼吸训练前(t=2．258～3．382；P均&;gt;0．05～0．01)。结论：肺癌患者放疗后肺功能指标可出现明显下降，呼吸训练对其作用不明显，但可显著改善患者生活质量。     

阿片δ受体诱导大鼠心脏预处理延迟保护效应及其机制

目的：探讨以阿片δ受体激动剂诱导心脏缺血预处理的延迟保护效应及其保护机制。方法：健康成年雄性Wisfer大鼠40只，随机分4组，阿片8受体激动剂组(A组)、阿片δ受体激动剂+氯磺环己脲组(B组)以阿片δ受体激动剂DADLE预处理(2mg／kg)，缺血对照组(C组)、氯磺环己脲组(D组)注射生理盐水，24h后4组都制成离体心脏．低温缺血3h，复灌1h。观测心功能、三磷酸腺苷(ATP)和丙二醛含量。其中B、D组在缺血前以氯磺环己脲组阻止心肌ATP敏感性钾通道的开放：结果：A，B，C，D组左室压力上升最大速率恢复率分别为(76&;#177;18)％，(49&;#177;16)％，(51&;#177;14)％，(51&;#177;17)％，左室压力下降最大速率恢复率分别为(73&;#177;17)％，(57&;#177;13)％，(50&;#177;12)％，(46&;#177;9)％，A组高于其他3组，差异有显著性(t=2.650—4．307，P&;lt;0．05—0．01)；心肌ATP含量分别为(3．46&;#177;0．99)，(1．77&;#177;1．10)，(127&;#177;0．33)和(1，69&;#177;0．64)&;#215;10^-3μmol／g，A组高于B，C，D组，差异有显著性意义(t=3．304，6．648，4．149，P&;lt;0．05～0．01)，B，C，D组间差异无显著性。各组心肌丙二醛含量分别为(17．51&;#177;6．34)，(28．11&;#177;9．47)，(27．28&;#177;8．57)，和(31．66&;#177;9．83)nmol／g，A组明显低于其他3组，差异有显著性意义(t=2．897，2．898，3．705，P均&;lt;0．01)。结论：阿片δ受体可以诱导健康成年大鼠产生预处理延迟保护效应，而ATP敏感件钾涌道参与介导其效应的机制。