寒冷应激对小鼠脑内一氧化氮及一氧化氮合酶的影响研究

目的探讨寒冷应激(-10℃、10h)对小鼠脑内一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的影响及意义.方法将40只雄性昆明品系小鼠随机分为对照组和实验组,每组20只.寒冷应激实验结束后取脑组织检测一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性.结果对照组NO及NOS分别为21.12±8.68μmol/gprot、2.21±0.57U/mgprot.实验组为16.03±6.98μmol/gprot、2.84±0.79U/mgprot.寒冷应激后NO水平降低并有统计学意义(t=2.58,P<0.05),NOS活性增高并有统计学意义(t=-2.72,P<0.05).应激后NO与NOS呈显著性负相关(r=-0.461,P<0.05).结论神经递质NO及NOS参与了中枢神经寒冷应激反应,且NO水平降低、NOS活性增高,可能对中枢神经细胞主要起保护作用.在寒冷应激后期吸入适量NO可能增强脑神经元对寒冷应激的耐受性.     

急性应激时大鼠脑内一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的：探讨急性应激状态下脑内一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（NOS）活性的变化及意义。方法：采用放免法测定强迫游泳应激后1、3小时的大鼠额叶、海马、中脑和下丘脑内NO含量和NOS活性。结果：应激结束后1小时，海马和下丘脑内NO含量和NOS活性均显著增高（t分别为2．32、2．61，P均＜0．05）。应激结束后3小时，额叶、海马、中脑和下丘脑内NO含量均显著增高（t分别为3．57、4．26、3．88、4．93，P均＜0．01），NOS活性均显著性增高（t分别为2．32、2．61，P均＜0．05）。结论：急性应激状态下，各脑区的NOS活性增加，产生的NO可能介导了神经毒性作用。     

应激性防御反应过程中脑内一氧化氮合酶

本实验采用NADPH-d方法研究发现在应激的早期(1～6d),一氧化氮合酶阳性神经元在大脑皮质、基底前脑、纹状体、间脑和脑干内出现的部位增多,一氧化氮合酶阳性神经元的数量也增多;而在应激的晚期(9d以后),一氧化氮合酶阳性神经元出现的部位及数量明显减少．提示在慢性应激的早期一氧化氮合酶活性增高,合成一氧化氮的能力增强;而在应激的晚期一氧化氮合酶活性降低,合成一氧化氮的能力降低。     

脑挫伤后一氧化氮合酶阳性细胞及一氧化氮含量的变化

目的　探讨脑挫伤后一氧化氮合酶 (NOS)阳性细胞和一氧化氮 (NO)的变化和意义。方法　采用自由落体法致Wistar大鼠顶叶皮质挫裂伤动物模型。伤后 2 4h、72h和 7d取脑 ,制作冰冻切片 ,采用NADPH组织化学染色 ,显示脑挫伤区NOS阳性细胞。用硝酸还原酶法测定血液和脑组织中NO含量。结果　脑挫伤后 72h ,NOS阳性细胞数密度 (Nv)和面密度(Sv)明显增高 (P <0 0 5 ) ,而且 7d时仍无明显下降。血液和脑中NO含量也增高 ,并与NOS细胞呈平行关系。结论　脑挫伤后不同时间NOS细胞数目和NO含量有明显改变 ,提示NOS和NO参与了脑挫伤的病理过程     

应激性防御反应过程中脑内一氧化氮合酶阳性神经元分布的变化

本实验采用 NADPH-d方法研究发现 :在应激的早期 ( 1～ 6d) ,一氧化氮合酶阳性神经元在大脑皮质、基底前脑、纹状体、间脑和脑干内出现的部位增多 ,一氧化氮合酶阳性神经元的数量也增多 ;而在应激的晚期 ( 9d以后 ) ,一氧化氮合酶阳性神经元出现的部位及数量明显减少。提示在慢性应激的早期一氧化氮合酶活性增高 ,合成一氧化氮的能力增强 ;而在应激的晚期一氧化氮合酶活性降低 ,合成一氧化氮的能力降低     

神经系统中的一氧化氮和一氧化氮合酶

<正> 80年代初Funchgott等发现许多血管扩张剂(如ACh)的扩张血管作用是由于血管内皮受到刺激释放血管舒张因子,此因子引起血管平滑肌松弛,从而引起血管扩张;而并非由于激动其受体而直接产生者。后来的研究表明,血管舒张因子就是一氧化氮(NO)。近年来,业已从多种组织中提取了一氧化氮合酶(NOS)。在脑组织,已证实NOS就是依赖还原型辅酶Ⅱ的硫辛酸脱氢酶(NADPH Diaphorase,ND)。本文对NOS和NO的一些基本问题做一综述。     

一氧化氮及其合酶

对生物体内ＮＯ的研究，已成为当今医学界最为活跃的研究领域。目前已知有三类ＮＯ合酶，分别由内皮细胞、神经细胞及巨噬细胞产生。但新的研究结果显示这三种酶并非仅仅局限于这些部位。在其它部位亦可存在。如骨骼肌中的神经性ＮＯ合酶，它产生的ＮＯ以两种不同方式分别调节骨骼肌的收缩和舒张。     

睡眠剥夺对大鼠一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的：探讨睡眠剥夺对大鼠脑组织一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）影响。方法：采用小平台水环境法（Flower Pot)制作大鼠睡眠剥夺模型，采用化学法和酶法观察不同时间睡眠剥夺后大鼠额叶、海马、中脑和下丘脑NO含量及NOS活性变化。结果：与正常对照组及大平台组比较，大鼠在SD后额叶和海马的NO含量及NOS活性增高，有显著性差异（P＜0．01－0．05），其余脑区无显著性差异（P＞0．05）。随着剥夺时间的延长，额叶和海马NO含量及NOS活性增高更加明显。结论：睡眠剥夺可致NO及NOS升高，可能与其学习障碍有关，NO可能参与大鼠的睡眠调节。     

一氧化氮合酶及其调节

一氧化氮合酶（ＮＯＳ）包括内皮细胞性、神经原性和诱生性三种，其基因分别位于人第７、１２和１７号染色体上。ＮＯＳ是高度保守性蛋白，种属间同一ＮＯＳ的氨基酸同源性大于８０％，但不同ＮＯＳ间仅５０％左右。业已证明ＮＯＳ是非均一性酶，同一酶可存在于不同细胞，而一种细胞可有一种以上的酶。ＮＯＳ的活性受基因转录、翻译、翻译后修饰等多环节调控。对ＮＯＳ的调控研究可指导ＮＯ介导的疾病进行针对性防治     

狗视网膜内一氧化氮合酶的表达

目的：探索狗视网膜内ＮＯＳ阳性细胞的分布和类型。方法：应用ＮＡＤＰＨ－黄递酶组化方法。结果：视网膜内含两种ＮＯＳ阳性细胞,一种胞体较大,圆形成三角形,着色深,直径为１２～１５μｍ,大闰地节细胞层,由胞体发出２～３支突起伸向内网层,另一种胞体上,圆形成卵圆形,着色浅,直径为６～８μｍ、胞突短,伸向内网层,胞体主要位于内核层近内网层处,少数位于内核层中部。两种ＮＯＳ阳性细胞分布和反应度均不同。结论：大     

不同应激方式对大鼠血清一氧化氮合酶活性影响的差异性

目的 :研究不同应激方式对大鼠血清一氧化氮合酶 (NOS)活性影响的差异。方法 :采用强迫游泳和心理社会应激建立应激动物模型 ,于应激后 2小时测定两组血清NOS活性。结果 :强迫游泳应激后 ,NOS活性高于正常大鼠 (P <0 0 1) ;心理社会应激后 ,NOS活性显著降低 (P <0 0 5 )。结论 :不同的应激方式对NOS活性影响不一致 ,强迫游泳可能具有更多躯体方面的效应。     

一氧化氮合酶与主动脉瘤

一氧化氮合酶(NOS)通过催化L-Arg生成NO参与动脉瘤的变化。本文通过一氧化氮合酶在调节基质金属蛋白酶(MMPs)活性、调节平滑肌细胞凋亡以及动脉壁的氧化损伤中的作用对其与主动脉瘤形成的关系作一综述,若针对一氧化氮合酶在主动脉瘤形成中的关键环节进行干预,有可能为主动脉瘤的治疗提供新的途径。     

2型糖尿病模型db/db小鼠海马NOS阳性神经元变化

目的　观察人类 2型糖尿病模型———C5 7BL/KsJdb/db(db/db)小鼠海马NOS阳性神经元变化。方法　糖尿病组 :6周龄C5 7BL/KsJ(db +db +)小鼠 5只 ,尾静脉空腹血糖高于 11.1mmol/L且肥胖。对照组 :非糖尿病小鼠C5 7BL/KsJ(?+) 5只 ,尾静脉空腹血糖低于 6 .0mmol/L体重正常 ,于 30周龄 (成模第 6月末 )时 ,灌注固定取脑 ,以NADPH d组化法显示海马NOS阳性神经元。结果　与正常对照组相比 ,糖尿病组小鼠海马齿状回NOS阳性神经元密度显著减少 (P <0 0 1)。结论　糖尿病时NOS阳性神经元数量减少 ,NO的合成降低表明NO可能参与糖尿病中枢神经系统功能障碍     

睾丸一氧化氮合酶与雄性生殖

一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)在NADPH(还原型辅酶Ⅱ )存在下催化L -精氨酸分解生成一氧化氮(nitricoxide,NO)。NOS有以下几种形式 :神经型NOS(nNOS) ,诱导型NOS(iNOS) ,内皮型NOS(eNOS)。NO是目前研究最多的体内信息分子和效应分子 ,广泛存在于人体的心血管系统、神经系统、消化系统、免疫系统、生殖系统等。NOS和NO对生殖活动的作用已被广泛研究 ,如对睾丸微循环的调解 ,参与睾酮分泌 ,调解精子活动等。本文对睾丸NOS/NO与雄性哺乳动物生殖关系的研究进展作一概述。     

低剂量γ射线辐照对血清一氧化氮及一氧化氮合酶水平的影响

目的：观察低剂量γ射线照射人离体外周血对血清中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平的影响。方法：采集10份健康献血员全血，肝素抗凝，然后采用γ射线照射，照射剂量率为17Gy／min，总吸收剂量为1Gy，分别于照射前及照射后1h，2h采用分光光度法检测血清中NO含量和NOS活性。结果：经γ射线照射1h后，血清中NO及NOS水平与照射前比较明显升高（P〈0.01）；照射后2h，血清中NOS水平与照射后1h比较无统计学差异（P〉0、05），但是还明显高于照射前的水平（P〈0．01）；在照射后2h，血清中NO含量与照射后1h比较明显降低（P〈0.01），但仍明显高于照射前水平（P〈0．01）。结论：采用剂量为1Gy的γ射线照射外周血，可引起血清中NO水平及NOS活性的显著升高．从而为低剂量辐照自体血回输对肿瘤的辅助治疗提供了理论支持。     

An Inhibitor of Inducible Nitric Oxide Synthase and Scavenger of Peroxynitrite Prevents Diabetes Development in NOD Mice

Peroxynitrite (ONOO(-)) is a highly reactive oxidant produced by the interaction of the free radicals superoxide (O*-2) and nitric oxide (NO(*)). In a previous study, we found that peroxynitrite is formed in islet beta-cells of nonobese diabetic (NOD) mice. Here, we report that guanidinoethyldisulphide (GED), a selective inhibitor of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and scavenger of peroxynitrite prevents diabetes in NOD mice. GED treatment of female NOD mice, starting at age 5 weeks, delayed diabetes onset (from age 12 to 22 weeks) and significantly decreased diabetes incidence at 30 weeks (from 80% to 17%). GED did not prevent pancreatic islet infiltration by leukocytes; however, beta-cells that stained positive for nitrotyrosine (a marker of peroxynitrite) were significantly decreased in islets of GED-treated mice (1+/-1%) compared with vehicle-treated mice (30+/-9%). In addition, GED significantly inhibited nitric oxide and nitrotyrosine formation and decreased destruction of beta-cells in NOD mouse islets incubated in vitro with the combination of proinflammatory cytokines interleukin 1-beta (IL-1beta), tumour necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and interferon-gamma (IFN-gamma). These findings indicate that both superoxide and nitric oxide radicals contribute to islet beta-cell destruction in autoimmune diabetes via peroxynitrite formation in the beta-cells.     

NO及NO合成酶与感染性休克

感染性休克病理生理学过程十分复杂。NO在其中的作用既具有有害的一面，同时也存在有利的一面。受内毒素、细胞因子等诱导，iNOS表达上调并产生大量NO，引起循环衰竭、组织细胞损伤以及通过调节炎症介质基因表达扩大全身炎症反应。另一方面，eNOS所产生的NO对机体具有保护作用。然而，感染性休克时，eNOS蛋白质合成及其功能受到损害，反而成为血管内皮功能失常、诱发多器官功能障碍的重要原因。     

豚鼠耳蜗一氧化氮合酶组织化学反应的定量观察

应用ＮＡＤＰＨ—ｄ酶组化方法结合显微图像分析技术，定量观察了正常豚鼠耳蜗ＮＯＳ的分布及活性。结果表明：ＮＯＳ存在于豚鼠外周听觉系统，分布部位依其活性强弱依次为血管纹、内毛细胞、螺旋神经节、外毛细胞、听神经纤维，其相应部位的ＮＯＳ阳性反应物的平均密度值为９３．９２％、９１．１７％、８４．２５％、７８．７５％、３２．９２％，平均灰度值为６６．１８、７３．４２、７６．６７、８５．１７、１１１．３３。结果提示：ＮＯ可能对耳蜗的生理及病理过程起重要作用