内皮细胞表达CD137分子介导对T细胞的抑制效应

目的研究内皮细胞表达的CD137分子与活化的T细胞表达的CD137L交联后对T细胞的刺激效应.方法将活化的内皮细胞与活化的T细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-2、IL-10和IFN-γ的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面标志分子CD25、CD69的表达变化;CCK-8试剂盒检测T细胞存活率,并观察用融合蛋白抗-CD137阻断CD137-CD137L共刺激通路后T细胞分泌细胞因子的变化.结果采用细胞共培养后,T细胞分泌IL-2、IL-10和IFN-γ的水平下降,而且CD25、CD69的表达水平降低,T细胞存活率下降,应用抗-CD137单克隆抗体阻断CD137-CD137L相互作用后,IL-2、IL-10和IFN-γ的分泌水平升高,CD25、CD69的表达上调,T细胞存活率上升.结论活化的内皮细胞诱导表达CD137蛋白分子与活化的T细胞上诱导表达的CD137L相互作用,通过CD137L向T细胞内传递抑制信号,抑制了T细胞合成和分泌细胞因子的功能.表明CD137-CD137L信号通路在内皮细胞与T细胞的信号作用中有着重要的地位.     

T细胞表达CD137L分子介导对血管内皮细胞的活化刺激效应

目的探讨活化T细胞表面表达的CD137L分子对内皮细胞功能的影响.方法将活化的T细胞与内皮细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-1、IL-8的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达变化,并观察用融合蛋白CD137-Fc阻断CD137-CD137L共刺激通路后内皮细胞分泌细胞因子的变化.结果活化的T细胞刺激了内皮细胞活化,诱导了内皮细胞合成和分泌细胞因子IL-1、IL-8以及粘附分子ICAM-1的表达;可溶性融合蛋白CD137-Fc成功地阻断了CD137-CD137L的相互作用,内皮细胞合成和分泌细胞因子的能力降低.结论证明CD137-CD137L的相互作用在内皮细胞与T细胞的相互作用中发挥了重要的作用,提示CD137与其配体交联具有刺激内皮细胞活化的生物学功能.     

哮喘患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的表达及临床意义

目的探讨哮喘患者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的变化及意义。方法采用流式细胞技术检测40例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的表达水平,同时测定20例急性发作期哮喘患者肺功能。结果哮喘患者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比为3.02±1.85%,明显低于健康对照组(P<0.01);急性发作期哮喘患者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞明显低于非急性发作期(P<0.01);急性发作期患者外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞百分率与FEV1呈显著正相关(r=0.5874,P<0.01)。结论CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在哮喘的疾病活动中起着重要作用,是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因。     

非小细胞肺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测70例NSCLC患者和30例健康人外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平,并进行2组水平比较和分层分析。结果NSCLC组外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平(29±5)%,明显高于健康对照组(11±5)%(P<0.01);外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平与NSCLC病理类型无相关性(P>0.05);与临床分期密切相关,I+II期亚组(16±5)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而与III期亚组(26±6)%、IV期亚组(35±6)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论NSCLC患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标。     

急性白血病外周血T细胞CD28和CD137的表达

目的 :研究共刺激分子CD2 8和CD137(4 1BB)在人急性白血病 (AL)治疗前后外周血T细胞上的表达特点 ,探讨其与临床疗效的关系 .方法 :应用免疫荧光标记及流式细胞术 (FACS)检测了 38例AL患者治疗前后外周血T细胞表面共刺激分子CD2 8和CD137的表达 ,并分析了T淋巴细胞亚群变化情况 .结果 :①治疗前AL患者CD2 8,CD3,CD4 ,CD4 /CD8较对照组显著降低 ,而CD137显著增高 (P <0 .0 5 ) ;②治疗后完全缓解 (CR)和部分缓解 (PR)患者CD2 8,CD3,CD4 ,CD4 /CD8均较其治疗前显著增高 ,而CD137显著降低 (P <0 .0 5 ) ,CR患者接近对照者 ,而未缓解 (NR)患者以上指标无显著变化 (P >0 .0 5 ) .结论 :CD2 8和CD137是参与急性白血病发病和抗白血病免疫反应的重要共刺激分子 ,其表达异常可能是急性白血病发病机制之一且与临床疗效密切相关 ;调节T细胞上CD2 8和CD137的表达 ,纠正白血病患者细胞免疫功能缺陷 ,可能是免疫基因治疗人类急性白血病的重要手段之一 ,具有一定的临床应用价值     

肺癌细胞粘附分子CD_(15)的表达及其意义

对60例肺癌组织进行了细胞粘附分子CD_(15)表达的免疫组化研究。结果发现,CD_(15)在癌旁正常组织的4/10例支气管粘膜上皮和3/10例肺泡上皮游离面弱阳性表达;在肺癌组织中明显增强表达,总阳性率66.7％,其中腺癌(85.3％)显著高于鳞癌(50％),P<0.05,大细胞癌1/4例阳性,小细胞癌2例均阴性,其阳性物质主要位于细胞浆、细胞膜或腺腔缘。CD_(15)表达随肺癌分化程度减低、淋巴结转移和分期增高而明显增高(P<0.05)。结果表明,CD_(15)对判断肺癌发生、发展、预测淋巴结转移和预后是一种良好指标。     

CD_(40)/CD_(40)L在单核巨噬细胞上表达及其在类风湿关节炎中的作用

单核巨噬细胞在启动天然免疫和获得性免疫中均具有关键作用,是调控免疫应答的主要细胞。CD40/CD40L是免疫细胞间的重要信号转导途径,单核巨噬细胞表达CD40与CD40L,分泌许多促炎性因子,参与类风湿关节炎滑膜炎形成、骨和软骨破坏。在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎和其他自身免疫病中已检测出高水平表达的CD40与CD40L。本文就CD40、CD40L在单核巨噬细胞上表达及在类风湿关节炎中的作用机制做一综述。     

肿瘤负荷对大肠癌患者外周血T细胞分化的影响

目的 探讨肿瘤负荷对于大肠癌患者外周血T1（分泌Ⅰ类因子T细胞）、T2（分泌Ⅱ类因子T细胞）分化的影响及其临床意义。方法 连续采集20例大肠癌患者（17例行根治术、3例行姑息切除术）初诊时及去除瘤负荷后第7天外周血,同期年龄、性别匹配的20例良性疾病患者外周血作为对照。应用胞内因子检测法检测T1、T2;应用流式细胞术检测淋巴细胞亚群（T、CD4^＋T、CD8^＋T、B、NK）。结果 大肠癌患者外周血T1、12明显低于对照组（P=0．006,0．017）;淋巴细胞亚群无明显改变。去除肿瘤负荷后7dT1升高（P〉0．05）,T2明显升高（P=O．020）。肿瘤直径≥5cm及低分化癌患者的T1分别低于肿瘤直径〈5cm及高、中分化癌患者（P=0．064,0．072）;有淋巴结转移患者的T1明显低于无淋巴结转移患者（P=0．033）;Ⅲ＋Ⅳ期患者的T1明显低于Ⅰ＋Ⅱ期患者（P=0．033）。结论肿瘤负荷可以显著抑制大肠癌患者外周血T1、12的分化,这是导致机体抗肿瘤免疫功能低下的机制之一;去除肿瘤负荷后短时间内T1、12即开始升高,免疫功能得到一定的改善;T1可能是一种新的大肠癌预后指标。     

CD_(134)(OX40)对CD_4~+T细胞增殖和分化的作用

人类生存依赖于ＣＤ+ 4 Ｔ淋巴细胞的克隆增殖及对效应细胞的辅助作用。保护性免疫反应要求两种分泌不同细胞因子的ＣＤ+ 4 Ｔ辅助细胞 ,称Ｔｈ1和Ｔｈ2细胞。Ｔｈ1细胞主要参与细胞内免疫和迟发性超敏反应 ,协助Ｂ细胞产生ＩｇＧ2α ,在抗细胞内微生物感染和细胞免疫所引起的炎症反应中发挥作用。如结核病依赖于ＩＦＮ γＣＤ+ 4 Ｔ炎症细胞激活和增殖 ,并转移至组织 ,激活巨噬细胞 ,杀灭受感染的细胞。相反 ,Ｔｈ2细胞能协助Ｂ细胞产生ＩｇＥ和ＩｇＧ4 ,在抗细胞外微生物或寄生虫免疫以及变态反应的发生中有一定的作用。如由白喉、伤寒产…     

细胞因子对IL－2产生和IL－2受体表达的影响

本研究实验结果表明：ＩＬ－１、６、８、ＧＭ－ＣＳＦ对ＩＬ－２产生有显著的促进作用，同时对ＩＬ－２Ｒα和ＩＬ－２Ｒβ表达有明显促进作用；而ＩＬ－３在本实验浓度下对ＩＬ－２及ＩＬ－２Ｒ表达均无明显影响；ＩＬ－２对ＩＬ－２Ｒα表达有明显促进作用，对ＩＬ－２Ｒβ则无明显作用。利用ＹＴ细胞株进行的实验表明：ＩＬ－１、６、８和ＧＭ～ＣＳＦ能促进ＹＴ细胞的ＩＬ－２Ｒα和ＩＬ－２Ｒβ表达，ＩＬ－３则无明显作用，ＩＬ－２对ＹＴ细胞的ＩＬ－２Ｒβ表达有促进作用，对ＩＬ－－２Ｒα无明显影响。实验中发现，ＩＬ－１对ＩＬ－２Ｒα表达的作用和ＩＬ－１Ｒ有密切的关系。     

人胎胸腺细胞异质性荧光及其膜抗原CD_3、CD_4和CD_8表达的形态学观察

取４０例不同胎龄胎儿胸腺，制成细胞悬液，行７６９０－ｘｕ荧光染色，部分标本运用我们自己建立的ＷｕＴ_３、ＷｕＴ_４和ＷｕＴ_８致敏红细胞花环实验结合７６９０－ｘｕ荧光染色的方法。荧光镜检可见８种胞核和胞质呈现异质性荧光的胸腺细胞。花环实验结果提示：不同胎龄胎儿胸膜细胞中，数量占优势的深蓝核细胞，大部分是中期胸腺细胞，少数是成熟胸腺细胞；部分灰蓝核一灰黄核－桔黄核蓝绿质细胞为中期胸腺细胞；墨黑核细胞可能是Ｔ淋巴细胞的干细胞。     

银屑病病人外周血及皮损组织T细胞亚群及IL—2R的变化

①目的　观察银屑病病人外周血与皮损组织中T淋巴细胞亚群及白细胞介素 2受体 (IL 2R)的变化 ,以探讨其与银屑病皮损形成的关系。②方法　采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法 (APAAP)和双抗体夹心ELISA法 ,检测了 5 7例银屑病病人外周血T淋巴细胞亚群和可溶性IL 2R(sIL 2R)的变化 ;采用免疫组化ABC法 ,检测37例银屑病病人皮损组织和非皮损组织及 2 0例正常皮肤组织的T细胞亚群CD+ 4,CD+ 8,CD+ 2 5的原位表达。③结果　银屑病病人外周血CD+ 4,CD+ 4/CD+ 8水平明显下降 ,sIL 2R ,CD+ 8水平上升 ,与对照组比较差异有显著性 (t =7.92～ 2 2 .16 ,P <0 .0 1) ;进行期CD+ 4,CD+ 4/CD+ 8,sIL 2R较静止期变化更明显 (t =5 .476 .95 ,P <0 .0 1)。银屑病皮损组织表皮及真皮CD+ 4,CD+ 8,CD+ 2 5细胞原位表达均显著高于正常组织及非皮损组织 (t =7.1117.36 ,P <0 .0 1) ;且进行期各指标表达较静止期明显 (t=2 .2 2 4.5 1,P <0 .0 5 )。④结论　银屑病皮损的形成可能与局部T淋巴细胞的活化有关。     

乙酰胆碱及其受体在调节T细胞增殖中的作用

本文研究不同浓度乙酰胆碱（ＡＣｈ）对Ｔ淋巴细胞增殖的影响，并初步探讨Ｍ型胆碱能受体在ＡＣｈ调节Ｔ细胞增殖中的作用，结果表明：１０－１０ｍｏｌ／Ｌ浓度ＡＣｈ对Ｔ细胞增殖无明显影响，而１０－９～１０－４／ｍｏｌ／Ｌ浓度ＡＣｈ均可显著增强Ｔ细胞对刀豆素Ａ的增殖反应；其中以１０－７ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ两个ＡＣｈ浓度的作用最强。１０－６ｍｏｌ／Ｌ的阿托品可阻断１０－７ｍｏｌ／Ｌ的ＡＣｈ对Ｔ细胞增殖的影响。结果提示：ＡＣｈ在较大的浓度范围内均可促进细胞免疫功能，ＡＣｈ增强细胞免疫的作用可能是通过Ｍ型胆碱能受体实现的。     

免疫胶体金试剂的制备及淋巴细胞膜抗原的检测

本文报道采用国产试剂,将胶体金标记在葡萄球菌蛋白A(SPA)和纯化免抗鼠IgG抗体(RAM)上,制备了数批免疫胶体金探针试刺,并建立了免疫金银染色法,用于人T、B细胞膜表面抗原的光镜水平检测。阳性细胞膜上出现的免疫金银颗粒有三种类型:均匀分布的细小颗粒、局部粗大颗粒、以及帽状聚集的颗粒。次外,T、B细胞膜抗原的检出阳性率与以往报道的免疫荧光法相符合。因此,免疫金银法是一种敏感、可靠、方便和值得推广的方法,为研究细胞表面标记提供了一个新的技术途径。     

PHA胸导管来源诱生的LAK细胞的作用

利用胸导管引流治疗哮喘病的机会,研究了PHA在rIL-2诱导胸导管淋巴细胞成为LAK细胞中的作用。结果表明:PHA和rIL-2共同诱导TDL2周,细胞数量扩增约34倍。同时明显促进了DL的~3H-TdR和~3H-Leucine的参入,较对照组有明显差异(P<0.01)。其中rIL-2 100～1000U/ml和PHA组作用最佳,但PHA和rIL-2的协同作用持续时间短,第6d即开始下降,而且PHA参与诱导的TDL-LAK细胞的杀伤活性有所下降。     

儿童自身免疫甲状腺病细胞因子失衡与T细胞亚群失衡的关系

目的：探讨儿童免疫甲状腺病（ＡＩＴＤ）细胞因子失衡与Ｔ细胞亚群失衡的关系。方法：采用Ｅ花地和ＥＬＩＳＡ法同步分别检测初诊的ＡＩＴＤ患儿和正常儿童外周血ＴＸ业群和单个核细胞在丝裂原诱导下产生的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值。结果：与正常组相比,ＣＬＴ和ＧＤ病儿ＩＦＮ－γ水平和ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显升高,ＩＬ－４水平明显降低,ＣＤ３、ＣＤ８明显降低,ＣＤ４／ＣＤ８比值明显升高。且     

异基因干细胞移植后T细胞重建及与慢性移植物抗宿主病关系的研究

目的:探讨恶性血液病异基因干细胞移植后T细胞免疫重建的特点及与慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的关系.方法:采用流式细胞仪动态检测42例恶性血液病患者异基因干细胞移植前、后不同时期T淋巴细胞亚群的变化,并对其中18例白血病患者检测其移植前、后不同时期的CD3 CD5 、CD3 CD45RA 、CD4 CD45RA 细胞的变化情况.结果:42例患者均重建造血.移植后CD4 T细胞恢复较慢,而CD8 T细胞则恢复较快,导致CD4 /CD8 细胞比值在移植后1年内持续倒置.回输CD 34细胞数量分别与移植后30 d时的CD3 、CD4 、CD8 T细胞数呈正相关.cGVHD组患者的CD3 CD45RA 、CD4 CD45RA 细胞均明显低于无GVHD组患者(均P<0.05).结论:异基因干细胞移植后CD4 T细胞恢复慢,而CD8 T细胞恢复较快.回输CD 34细胞数与移植后早期患者T细胞重建的快慢密切相关.cGVHD可引起初始T细胞亚群(CD45RA 细胞)减少.     

抗癌活性肽对人肿瘤细胞株增殖的影响及其机理探讨

目的:探讨由山羊内脏提取制备的抗癌活性肽(Anti -cancer active peptide,ACBP)对人胃癌细胞株BGC - 823、MGC - 803、人鼻咽癌细胞株CNE增殖的影响及作用机理.方法:应用MTT法和流式细胞术观察不同剂量ACBP在不同时间对体外培养的BGC - 823、MGC - 803及CNE细胞增殖的影响,并对细胞周期及凋亡进行了检测.结果:MTT结果显示ACBP对BGC - 823、MGC - 803及CNE的增殖有抑制作用且呈现剂量依赖效应,在ACBP 20ug/mL时,对三种细胞株的抑制率分别达到38.3％、29.79％和42.02％ (P ＜0.01)).流式细胞术检测细胞周期结果显示,3种对照组细胞大部分处于G0/G1期和S期,培养24h后,S期细胞数开始减少,G0/G1期细胞数增加,48h和72h后呈现显著性变化(P＜0.01).流式细胞术检测细胞凋亡结果显示ACBP作用早期,凋亡细胞(AV+/PI -)增多,在48h和72h后更加明显.结论:ACBP对分化不同的胃癌细胞BGC - 823、MGC - 803及鼻咽癌CNE细胞的增殖有抑制作用,其作用机制可能为诱导细胞凋亡,抑制DNA合成.     

槲皮素对培养人视网膜色素上皮细胞细胞周期的影响

研究槲皮素对培养人视网膜色素上皮细胞增殖周期的影响。方法：用流式细胞仪测定细胞周期,观察不同浓度（２００、１００、５０、１μｍｏｌ／Ｌ）的ＱＵＥ作用于ＲＰＥ细胞４８小时;以及ＱＵＥ２００μｍｏｌ／Ｌ在不同作用时间,分别单独或与ＥＧＦ共同对ＲＰＥ细胞周期的影响;