杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽对内毒素休克模型家兔动脉血压影响的研究

杀菌性／通透性增加蛋白(Bactericidal/permeability increasing protein,BPI)是一种存在于人及哺乳动物中性粒细胞嗜天青颗粒中带正电荷的蛋白质，具有较强的杀灭革兰阴性菌(Gramnegative bacteria，GNB)及中和内毒素(Lipopolysaeeharide,LPS)的能力，对严重GNB感染具有一定疗效。通过多年的研究，本室采用计算机分子模拟技术设计合成了BP1模拟肽，本研究拟通过观察BP1模拟肽对平均动脉压、脉压的影响，以了解其抗内毒素休克功效。     

重组人补体C3片段抑制小鼠内毒素休克

目的 利用补体灭活片段ｉＣ３ｂ上含精氨酸－甘氨酸－天冬酰胺（ＲＧＤ）序列的重组蛋白，探索其抗炎治疗的应用价值。方法 利用基因重组技术构建表达载体，在大肠杆菌中表达了含ＲＧＤ序列的重组蛋白（简称Ｃ３３），并进行体内外活性分析。结果 电泳分析Ｃ３３分子量约１５０００，纯化后纯度可达９５％以上，氨基酸组成分析与理论计算值相符。低剂量醋酸苯汞刺激Ｕ９３７细胞可粘附于包被的Ｃ３３，抗ＣＤ１１ｂ的单克隆抗体可     

杀菌/通透性增加蛋白的研究现状及展望

杀菌/通透性增加蛋白(BPI)是一种主要存在于中性粒细胞内的阳离子抗菌蛋白,具有杀菌及中和内毒素作用,在革兰阴性菌感染的治疗方面有很好的应用前景。本文主要对BPI分子结构、生物学功能、作用机制及临床应用等方面的研究进展进行综述。     

内毒素及杀菌／通透性增加蛋白水平变化规律与外科感染的程度及预后的关联性

目的：研究严重外科感染的患者血清内毒素及杀菌／通透性增加蛋白水平与疾病严重程度的关联性及疾病预后的关系。方法：选取我院2013年1月至2014年12月外科住院部收治的腹腔感染患者50例,作为本次试验的研究对象。随机选取相同时间段来院体检的健康人为正常对照组。检测血清杀菌／通透性增加蛋白、内毒素水平,统计患者预后。结果：三组患者的BPI水平在感染1d后显著升高,在第5d达到峰值,随后降低,A组患者第15dBPI水平降低到正常范围内。 B组、C组第15dBPI高于正常水平。三组患者的LBP水平在感染后第1d显著升高,在第5d达到峰值,最后开始降低,A组患者第15dLBP水平和对照组没有差异,B组、C组LBP 水平显著高于对照组。三组患者的BPI／LBP 比值在感染后1d显著低于对照组的,随后逐渐上升,第15天上升至峰值。 A组患者第15d恢复至正常水平,B组、C组的显著低于正常水平。三组患者内毒素水平感染后1d显著升高,随后下降,A组在第15d降低至正常范围内,B组和对照组没有差异,C组高于对照组的。 A组患者经对症治疗后21例全部恢复,B组患者经对症治疗后17例恢复,1例死于感染复发,C组患者经对症治疗后6例恢复,5例死亡,其中2例死于感染复发,3例死于脓毒血症。结论：外科感染患者体内的BPI、LBP以及内毒素水平与患者的病情以及预后有关,在临床治疗中可以结合实验检查数据来判断患者病情程度和预后。     

脂多糖结合蛋白和杀菌/通透性增加蛋白：脓毒症的潜在治疗靶点

脓毒症是严重感染、创伤、烧伤和休克等损伤的常见并发症和主要死因。革兰氏阴性菌细胞壁成分脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)导致的内毒素血症是导致脓毒症的主要原因之一。包括脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide-binding protein, LBP)和杀菌/通透性增加蛋白(bactericidal permeability increasing protein, BPI)在内的多种血浆蛋白参与调控LPS激活的信号通路。两种蛋白属于同类蛋白家族,结构相似但生物学效应差异很大：LBP能协助LPS与靶细胞CD14受体结合增加宿主对LPS的敏感性,而BPI可中和LPS致炎作用并加速LPS从循环内清除。本文就LBP与BPI的结构、功能、治疗脓毒症的潜力及基因多态性与脓毒症的相关性等方面的研究进展进行综述。     

杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)研究和进展

杀菌性 通透性增加蛋白 (ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＰＩ)是一个分子量介于 5 0～ 6 0ｋＤ之间的阳性蛋白。人类最初注意该蛋白是因其具有杀菌性 ,但随后发现它还具有较强的拮抗内毒素的作用。近年来国外对其研究颇多 ,称其为未来的“超级抗生素”。我国对ＢＰＩ研究起步较晚 ,90年代中后期才见到相关报道 ,但研究工作进展很快。现将国内外有关ＢＰＩ研究工作及进展综述如下。1　ＢＰＩ概述ＢＰＩ是脂质转移 脂多糖结合蛋白家族的成员[1 ] ,是对细菌高度稳定的非催化蛋白。…     

杀菌性／通透性增加蛋白模拟肽小鼠体内拮抗内毒素作用的研究

目的：观察杀菌性／通透性增加蛋白（ＢＰＩ）模拟肽对内毒素（ＬＰＳ）攻击所致小鼠死亡的保护作用。方法：以一个ＬＤ５０的ＬＰＳ（２０ｍｇ·ｋｇ－１）静脉注射攻击小鼠，分别于ＬＰＳ攻击后２０ｓ内静脉注射不同剂量的ＢＰＩ模拟肽；于ＬＰＳ攻击前及攻击后不同时间内分别静脉注射５ｍｇ·ｋｇ－１和１０ｍｇ·ｋｇ－１的ＢＰＩ模拟肽，以观察ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ攻击所致小鼠死亡的保护作用、ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ攻击小鼠死亡保护作用的时效关系及ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ攻击小鼠死亡的预防作用。结果：ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ所致小鼠死亡有明显的保护作用及预防作用，并有一定的量效关系及时效关系。结论：ＢＰＩ模拟肽，不仅保留了ＢＰＩ特异性中和ＬＰＳ的特性，而且对ＬＰＳ攻击小鼠具有更强的保护作用     

天然内毒素结合蛋白衍生肽拮抗内毒素的研究进展

内毒素是脓毒症最主要的致病因子,其可通过激活Toll样受体4跨膜信号通路,活化宿主免疫细胞,促进细胞因子和炎性介质的过度释放,导致组织损伤、多器官衰竭甚至死亡,因此,拮抗内毒素活性是提高脓毒症治疗效果的关键。从天然存在的内毒素结合蛋白中提取或者人工合成具有拮抗内毒素活性的蛋白/多肽类制剂是内毒素拮抗研究的主要方向之一。现对天然内毒素结合蛋白衍生肽拮抗内毒素的研究进展予以综述。     

内毒素休克后家兔血管低反应性的变化规律及其与血流动力学变化的关系

目的 了解内毒素休克后血管反应性的变化规律及其与血流动力学变化的关系.方法 将10只家兔用于测定内毒素休克后的血流动力学变化,另外48只随机分为6组,依次为正常对照组、给LPS后0.5、1、2、4、6h组,分别测定各组肠系膜上动脉(SMA)离体血管环对NE、Ach的收缩和舒张反应性.结果 家兔LPS(1mg/kg)静注后,MAP在静注LPS后早期就迅速下降,继而保持平缓的下降趋势;反映心肌收缩功能的左室最大收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率( dp/dt max)及下降速率(-dp/dt max)等指标先迅速下降然后有一定的回升继而再平稳下降,而左室舒张末压(LVEDP)则没有明显变化;SMA血管环对NE的反应性在早期无显著变化,晚期显著降低;SMA血管环对Ach的反应性在早期升高,晚期下降.结论 内毒素休克血管反应性呈现早期高舒张反应、晚期低收缩反应的规律.早期心肌收缩功能的显著下降和血管的高舒张反应可能共同参与了早期MAP的迅速下降;晚期的低收缩反应可能参与了晚期持续性低血压的发生.     

抗内毒素治疗研究进展

内毒素是革兰阴性菌(GNB)生长时释放或死亡时裂解出来的细胞壁脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)成分.内毒素进入机体后可引起发热、血管扩张和通透性增强、中性粒细胞(PMN)增多、补体激活等病理生理反应.LPS还可直接或间接诱导免疫细胞凋亡,抑制机体免疫功能,可导致全身炎症反应综合征(SIRS)、弥漫性血管内凝血(DIC)、多器官障碍功能综合征(MODS)的发生.本文将综述抗LPS治疗的研究进展.     

Screening of Anti-endotoxin Components from Radix Isatidis

The control of endotoxin-associated diseasesisone of the most active fields in the recent years .For the infection of with Gram-negative bacteria ,antibiotics can kill bacteria but cannot decomposethe endotoxin released from destroyed bacterialstructure . The problemis that the more bacteriaare killed, the more endotoxin will be release ,which tends to lead to fetal endotoxemia .RadixIsatidishas the action of anti-O111B4-endotox-in[1 -3], and so far 31 monomer compounds havebeenisolated[4 -8…     

鸡抗内毒素卵黄抗体IgY的制备

目的：研究分别应用内毒素（LPS）、类脂A(LipidA)和大肠杆菌突变株15免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量、纯度、效价并筛选最佳免疫抗原。方法：分别应用内毒素（LPS）、类脂A(LipidA)和大肠杆菌J5突变株作为抗原免疫25周龄Leghom鸡，水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-PSGE电泳检测抗体纯度，细胞酶联染色和ELISA检测抗体特异性、效价及筛选最佳免疫抗原。结果：3种抗内毒素IgY含量和效价分别为14.4mg/ml和1：12 800（J5）、10.61mg/ml和1：12 800（LPS）、9.26mg/ml和1：3200（LipidA），抗体纯度均为95％左右。结论：大肠杆菌突变株J5和内毒素（LPS）为最佳免疫抗原，免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量和效价最高。     

多粘菌素B拮抗内毒素的体外作用研究

目的探讨多粘菌素B(PMB)对内毒素(LPS)的亲合、中和能力,以及体外抑制LPS作用的时效和量效关系.方法应用鲎试剂动态浊度法测定PMB对LPS的中和能力;应用生物传感器技术测定PMB与Lipid A的亲和力;并测定PMB对LPS刺激的人PBMC释放TNF-α、IL-6的抑制作用.结果PMB具有较强的LPS中和能力,其IG50约为4.35±0.91μmol/L;与Lipid A具有很高的亲和力,其解离平衡数(kinetic dissociation constant,KD)=1.11×10-8mol/L;10μg/ml的PMB能够明显抑制100ng/ml LPS刺激的人PBMC释放TNF-α、IL-6的释放(P＜0.05),并具有明显的量效关系;在LPS刺激PBMC前应用PMB,细胞因子释放的抑制率达95%以上,但在LPS刺激后10min,PMB即失去了对细胞因子的抑制作用(P＞0.05).结论PMB具有较强的内毒素结合及中和能力,并呈剂量和时间依赖性地抑制内毒素刺激的人PBMC释放炎性介质.     

诃子抗内毒素活性组分的分离及活性评价

目的从诃子中分离制备具有拮抗内毒素作用的活性组分.方法应用离子色谱技术等方法,从诃子水提物中分离制备具有拮抗内毒素活性的组分;并应用生物传感器技术,对所得到的组分进行与Lipid A结合活性的筛选;利用鲎试剂动态浊度法,对筛选出的活性组分在体外进行中和内毒素活性的测定;观察其对LPS刺激的小鼠RAW 264.7细胞释放炎症介质的抑制作用;观察其对致死剂量(20 mg/kg)内毒素攻击小鼠的保护作用.结果应用离子色谱技术从诃子中分离出4个组分,其中有3个组分具有一定的结合Lipid A的活性,以3#组分结合活性最强;在体外实验中3#组分对内毒素具有直接的中和作用(P＜0.01);对LPS刺激的小鼠RAW 264.7细胞释放TNF-α具有显著的抑制作用(P＜0.01);并对致死剂量内毒素攻击的小鼠具有明显的保护作用(P＜0.01).结论从诃子中分离出的3#组分具有显著的拮抗内毒素活性.     

8种中药注射剂体外抗内毒素作用的观察

目的：观察板蓝根、双黄连、清开灵等8种中药注射剂的体外抗内毒素作用。方法：注射剂经稀释后取0．2mL与内毒素0．2mL(1EU/mL）温孵，然后利用鲎试剂定量测定内毒素含量，计算各注射剂对内毒素的清除率，比较不同注射剂的抗内毒素作用。结果：双黄连粉针剂、清开灵注射液、板蓝根注射液、穿琥宁注射液和鱼腥草注射液都有明显的体外抗内毒素作用，其中双黄连、清开灵和板蓝根的抗内毒素作用最强，稀释2500倍仍能够清除70％以上的内毒素；穿琥宁、鱼腥草和鱼金注射液其次；复方大青叶注射液和抗腮腺炎注射液的体外抗内毒素作用较弱。结论：在清热解毒中药中寻找抗内毒素作用的制剂将有一定的发展前景。     

以类脂A为靶点应用生物传感器技术筛选抗内毒素中草药

目的以细菌内毒素活性中心类脂A(Lipid A)为靶点,应用生物传感器技术,从42种中草药水煎液中筛选拮抗内毒素作用的中药。方法将Lipid A包被于生物传感器的疏水性样品池,通过生物传感器测定中药与Lipid A的结合能力;对具有高亲和力的中药与内毒素作用,再次测定其与Lipid A的结合能力,并通过定量的内毒素中和实验进一步的对生物传感器的测定结果进行验证。结果在筛选的42种中草药中,观察到赤芍、大黄、青果、栀子等中药能与Lipid A高亲和力结合;通过与内毒素作用后的二次检测,发现赤芍、大黄、青果等中草药含有较高Lipid A结合的有效成分,定量内毒素中和实验的测定结果与生物传感器的定性检测结果一致。结论以Lipid A为靶点,应用生物传感器技术,筛选拮抗内毒素中草药的方法,具有快速、高效、直观、准确的优点。     

The Anti-Endotoxin and Anti-Inflammatory Mediator Effects of Traditional Chinese Herbs: Experimental Researches

Ｔｈｅ　Ａｎｔｉ－Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ　ａｎｄ　Ａｎｔｉ－Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　Ｍｅｄｉａｔｏｒ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｈｅｒｂｓ：　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ＲｅｓｅａｒｃｈｅｓＷＡＮＧＪｉｎ－ｄａ（Ｉｎｓ...     

阻塞性黄疸病人抗内毒素治疗对一氧化氮的影响

目的 观察阻塞性黄疸患者术前采用抗内毒素治疗对内毒素血症抑制及一氧化氮（NO）水平的影响。方法 随机选择阻塞性黄疸病人分3组在术前分别给予一般治疗（OJ组），口服胆盐（OJT1组）和静脉注射抗类脂A单克隆抗体（OJT2组），观察血浆内毒素（ET）及NO含量变化。结果 3组术前ET和NO水平无明显差异。OJT1组和OJT2组用药后血浆ET水平均有明显降低。与OJ组比较（P＜0．01），术后进一步降低。OJT1组和OJT2组NO在术后3d天与术前比较显著降低。结论 术前应用胆盐及抗内毒素抗体可有效降低阻塞性黄疸病人围手术期血浆ET及NO水平。