流式细胞术及DNA倍体分析在胃肿瘤研究中的新进展

消化道肿瘤及癌前病变的诊断和分级由于以病理学家借助光学显微镜观察这一认识过程中有一定的主观性，流式细胞术在肿瘤研究方面已成为重要的手段之一，近年来已引起肿瘤研究者的极大关注，本文对流式细胞术的应用及进展综述如下：     

流式细胞术分析DNA倍型在肝细胞癌诊治中的应用

目的 探讨肝细胞癌的DNA倍型分析在评估肝细胞癌转移、复发的风险中的临床应用价值。方法 采用流式细胞术(FCM)对25例肝细胞癌组织进行DNA倍型分析并与病理检查结果进行比较。结果 17例异倍体肝细胞癌中12例有癌拴和域浸润，2例肝内转移；2例DNA二倍体、S期细胞比值(SPF)＞19．6％的肝细胞癌组织病理检查1例有癌拴，另1例有包膜浸润；转移浸润率达84．2％(16／19)。6例DNA二倍体、SPlF＜19．6％的肝细胞癌组织均末发现癌拴和转移，仅2例有包膜浸润，浸润率为33．3％(2／6)。两者差异具有显著性意义(x2＝5．855，P＜0．05)。结论 DNA倍型分析可用于评估肝细胞癌转移、复发的风险，为临床制定有效的治疗方案，提供实验依据。     

用DNA倍体分析乳腺肿瘤细胞的临床意义

目的　评价DNA倍体及细胞周期分析在乳腺肿瘤诊断上的价值。　方法　采用流式细胞术检测 5 0例乳腺肿瘤的细胞DNA含量和细胞周期。　结果　 10例纤维瘤都为二倍体、且CV <4 .0 % ;4 0例乳腺癌的二倍体发生率占 35 % ,CV >5 .0 % ,异倍体占 6 5 % ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1)。乳腺癌组DNA指数 (DI)、S期细胞比率 (SPF)、细胞增殖指数 (PI)、DNA量值分布、G0 / 1峰值 (CV)均高于正常组 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1) ,乳腺癌DI值随肿瘤组织学分级的增高而增高。　结论　异倍体、SPF、PI、DI、G0 / 1峰值 (CV)的增高在乳腺良恶性肿瘤鉴别诊断中具有重要意义。     

胃癌细胞DNA流式细胞计分析在胃癌预后中的意义

对60例手术后随访超过5年以上的进展期胃癌病人的存档石蜡包埋组织按Hedey的方法进行细胞核DNA含量的FCM测定,分析DNA倍体类型与胃癌病人预后的关系。结果为DNA异倍体型胃癌的预后明显较二倍体型胃癌差,与影响胃癌病人预后的其他主要病理形态学因素进行比较发现低分化腺癌、浸润性生长、有淋巴管侵犯及淋巴结转移的胃癌预后分别较高分化腺癌、膨胀型生长、无淋巴管侵犯及无淋巴结转移的胃癌差。胃癌细胞的DNA倍体类型是另一种影响胃癌预后的独立因素。     

DNA倍体分析在恶性胸腔积液诊断中的应用

目的 :应用流式细胞术 (FCM)测定胸腔积液细胞 DNA倍体 ,以探讨其在恶性胸腔积液诊断中的价值。　方法 :35例胸水分为恶性、良性两组。用 FCM检测胸水中 DNA倍体 ,同时测定 CEA、Cyfra2 1- 1。　结果 :用 FCM检测恶性胸水 ,其敏感性、特异性、准确性与 CEA、Cyfra2 1- 1相比 ,均有显著差异 (P<0 .0 5 )。若三种方式合用 ,则诊断恶性胸水的敏感性达 95 .7% ,特异性达 10 0 %。　结论 :FCM进行 DNA倍体分析是良、恶性胸水鉴别的一项指标 ,对诊断恶性胸水有重要价值。     

DNA倍体分析在诊断恶性腹水中的价值研究

目的：探讨DNA倍体分析在诊断良、恶性腹水中的价值。方法：采用流式细胞仪对37例恶性腹水组及31例良性腹水组进行DNA倍体分析,同时检测2组患者腹水CEA、CA19-9的含量。结果：DNA倍体分析结果显示,恶性腹水中可出现异倍体,且异倍体阳性检出率、DNA指数（DI）、增殖系数（PI）和S期细胞数（SPF）均明显高于良性腹水组（P〈0.05）。同时,DNA倍体诊断恶性腹水的敏感性明显高于良性腹水CEA及CA19-9（P〈0.05）。结论：腹水DNA倍体分析对恶性腹水的诊断具有重要价值。     

流式细胞术检测DNA倍体数对鉴别良恶性肿瘤价值的Meta分析

目的探讨流式细胞术(FCM)检测DNA倍体数在良恶性肿瘤鉴别中的应用价值,为临床恶性肿瘤诊断手段的选择提供理论依据。方法由2位研究者独立完成文献筛选,并依据纳入和排除标准,对检索到的所有文献进行二次筛选。使用Meta-Di Sc 1.4对纳入研究的文献数据进行分析,包括异质性检验、敏感度、特异度、诊断比值比(DOR)及受试者工作特征曲线(SROC)等。结果经初筛、补充及二次筛选,共12篇文献纳入研究,包括1 340例研究对象,其中恶性肿瘤组516例,良性对照组824例。异质性检验结果显示:灵敏度对数与(1-特异度)对数的Spearman相关系数为-0.343,P=0.275,不存在阈值效应。DOR曲线提示:Cochran-Q=26.49,P=0.005 5,表明存在非阈值效应引起的异质性。采用随机效应模型计算合并统计量:敏感度为0.72(95%CI:0.68~0.76,I2=50.1%);特异度为0.84(95%CI:0.81~0.86,I2=65.5%)。绘制DNA倍体数检测良恶性肿瘤的SROC曲线,结果显示:AUC=0.845 3,Q*=0.776 8。结论 FCM检测DNA异倍体对诊断恶性肿瘤具有较高的准确性,可作为临床良恶性肿瘤鉴别的一项重要辅助手段。     

大肠癌DNA倍体分析的临床意义

目的 分析大肠癌DNA倍体含量与临床病理学特征间的关系.方法 用流式细胞术进行DNA倍体含量测定,分析其变化与患者性别、年龄、肿瘤的解剖部位,淋巴结转移、分化程度的关系.结果 大肠癌DNA倍体类型与患者的性别、年龄无明显的关系(p＞0.05),远端大肠、有淋巴结转移及分化程度低的肿瘤异倍体发生率比近端大肠、无淋巴结转移及分化程度高的大肠癌更多见(p＜0.05).结论 DNA倍体分析可为分析肿瘤是否扩散,治疗方案的选择及预后判断提供客观可靠的依据.     

DNA倍体分析在大肠癌临床诊断中的应用

用流工细胞仪（ＦＣＭ）检测４０例大肠癌新鲜标本的ＤＮＡ倍体类型发现ＤＮＡ倍体类型与患者性别，年龄，大肠癌部位，组织分化及Ｄｕｋｅｓ分期无关，淋巴结转移及肿瘤穿透肠壁患者癌细胞的ＤＮＡ异倍体明显高于二倍体（Ｐ〈０．０５）。     

DNA倍体分析在大肠癌临床诊断中的应用

用流式细胞仪（FCM）检测40例大肠癌新鲜标本的DNA倍体类型，发现DNA倍体类型与患者性别、年龄、大肠癌部位、组织分化及Dukes分期无关；淋巴结转移及肿瘤穿透肠壁患者癌细胞的DNA异倍体明显高于二倍体（P＜0．05）。     

细胞凋亡：流式细胞术DNA含量分析中的第三类信息

喜树碱(CAM)诱导人类急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)细胞,以高渗磷酸-柠檬酸盐缓冲液(PC)处理,并同时用线性放大和对数放大进行DNA含量分析。结果显示,在DNA直方图上,可将亚G1凋亡峰和坏死细胞碎片峰有效地分开,并且不影响G1期细胞与G2期细胞DNA含量间的线性关系。提示流式细胞术DNA含量分析是细胞生物学和临床分析的重要手段。     

Analysis of DNA Content of Various Types of Spermatogenic Cells in Rat after Testicular Heating with Flow Cytometry

To measure DNA contents of spermatogenic cells and analyze the efficiency of spermatogenesis after testicular heating in rat Methods Eighty adult male Sprague-Dawley rats were randomly divided into experimental group （43 ℃, 30 min） and control group （22 ℃, 30 min）. According to day 0.5, 1, 3, 6, 10, 25, 35 and 50 after local testicular heating, every group was divided into 8 subgroups： experimental subgroups （n=6） and control subgroups （n=4）. DNA contents of various types of germ cells were observed with flow cytometry （FCM） in all groups. Results Compared with control groups, percentages of 4C cell （primary spermatocyte） in 0.5-35 d groups and percentages of 1C cell （spermatid and sperm） in 6-50 d groups significantly decreased in experimental groups （P〈0.05）, and percentages of 2C cell （spermatogonium and second spermatocyte） in 3 -35 d experimental groups increased significantly after heating （P〈0.05）. 4C：2C in all of 8 experimental groups and 1C：2C in 3-35 d experimental groups were down （P〈0. 05）, and in 1 d experimental group 1C：4C was up after heating （P〈0.05）. Conclusions After being heated, the number of spermatocyte firstly decreased, and then that of spermatid and sperm decreased too. Heat influences several stages in spermatogenesis and results in suppression of spermatogenesis. Flow cytometry is an effective method for researching on the change of spermatogenesis and has significance on mechanism about changing of spermatogenic cells induced by heat.     

胃癌乙酰肝素酶表达和DNA含量流式细胞定量研究

目的 探讨胃癌中乙酰肝素酶(heparanase)的表达及DNA含量与胃癌临床病理特征的关系.方法 应用流式细胞术检测50例胃癌组织、25例癌旁组织和10例正常组织中乙酰肝素酶的表达和DNA含量.结果 heparanase在胃癌组、癌旁组、正常组中表达量(FI值)分别为1.86±0.44,1.22±0.45,1.00±0.21,3组间差别有显著性(P＜0.05),heparanase在胃癌中的阳性表达率为96%,明显高于癌旁和正常胃黏膜(P＜0.01),且与胃癌的浸润深度(P＜0.05)、TNM分期(P＜0.01)和淋巴结转移相关(P＜0.01).3组的DI值分别为1.26±0.14,1.05±0.14,1.00±0.11,3组间差别有显著性(p＜0.05),且与肿瘤的分化程度和淋巴结转移相关(P＜0.01).Heparanase表达的FI值与DI值呈正相关关系(r=0.536,P＜0.01).结论 Heparanase在肿瘤的浸润和转移中扮演重要的角色,DNA含量与肿瘤的恶性程度密切相关.heparanase和DNA含量可能是评价胃癌恶性程度和预后预测的重要指标.     

喉鳞状细胞癌细胞核DNA定量及其与预后的关系(流式细胞测定法的应用)

作者对41例行手术治疗并随访2年以上的喉鳞癌患者用流式细胞测定法测定癌细胞核DNA量。结果:异倍体率为65.85％。异倍体肿瘤细胞的S％,分裂增殖指数和肿瘤患者的复发和(或)转移率显著高于二倍体肿瘤者(P<0.025);患者的生存率显著低于二倍体肿瘤者(P<0.025)。表明:肿瘤细胞核DNA测定能提供重要的预后信息,有助于改进治疗,提高患者生存率。     

结肠直肠癌细胞DNA及CD44含量与肿瘤形成和转移的关系

目的 :探讨结肠直肠癌细胞DNA含量及CD4 4的定量检测与癌形成和转移的关系。方法 :采用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM)对手术切除的结肠直肠癌组织及癌旁周围正常组织细胞进行DNA含量及倍体测定、CD4 4定量检测。结果 :DNA含量在结直肠癌组明显增高 ,二倍体细胞明显减少 ,而异倍体明显增多 ,在结直肠癌组异倍体率为 6 6 6 % ;同时CD4 4在结直肠癌组明显高于癌旁周围正常组织组 (P <0 0 1) ,CD4 4在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组中有极显著差异 (P <0 0 1)。结论 :癌细胞DNA含量及异倍体率增加 ,CD4 4的表达与结肠直肠癌形成、转移有关。     

胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体分析的临床诊断价值

目的 探讨胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体分析对诊断良恶性胸腹水的临床价值.方法 应用流式细胞仪(FCM)对84例患者(恶性肿瘤组35例,非恶性肿瘤组49例)的胸腹水脱落细胞进行DNA倍体分析;以检出异倍体为恶性肿瘤判断标准,并与胸腹水常规脱落细胞学涂片检查结果比较.结果 (1)恶性肿瘤组25例检出异倍体,阳性检出率为71.4%;常规细胞学法20例检出癌细胞,阳性检出率为57.1%;FCM法与细胞学检查法联合检测28例阳性,检出率为80%.(2)在恶性肿瘤组的25例异倍体中,17例病理检查检出癌细胞,8例未检出;而在20例常规细胞学检出癌细胞的患者中,3例DNA倍体分析无异常.(3)非恶性肿瘤组8例DNA表现为异倍体峰,但病理检查示间皮细胞活跃增殖,或未检出癌细胞.结论 FCM法的灵敏度较脱落细胞法高,但2种方法的检测结果存在一定的差异;FCM-DNA倍体分析在良恶性胸腹水的鉴别诊断上尤其当临床高度可疑而病理无法定性时,可作为诊断的重要参考与补充.     

子宫平滑肌瘤细胞的DNA含量分析

目的分析子宫平滑肌瘤细胞的DNA含量,并与同源的正常肌细胞相比较。方法采用流式细胞术(FCM)对50例子宫肌瘤患者的肌瘤组织和正常肌组织进行DNA含量及细胞周期时相的测定。结果子宫肌瘤组织的DNA指数(DI)和正常肌组织的DI间无显著差异(P＞0.05),但肌瘤组织的S期细胞的百分比(SPF)和细胞分裂增殖指数(PI)显著高于正常肌组织(P＜0.05),肌瘤组织的SPF和PI与肌瘤的大小和患者的年龄无相关性。结论肌瘤组织的增殖活性高于正常肌组织。     

流式细胞仪与鼻咽癌石蜡包埋组织DNA含量分析

应用流式细胞仪对６３全石蜡包埋组织的鼻咽癌ＤＮＡ含量进行分析，结果显示：自角化型鳞癌和梭形细胞癌，非角化型鳞癌至泡状核细胞癌，ＤＮＡ指数和非整倍体率逐渐啬。结果表明泡状核细胞癌分化最低，梭形细胞癌介于角化型和非角化型鳞癌之间，并初步探讨ＤＮＡ与临床预后的联系。本文还简单介绍流式细胞仪应用于石蜡包埋组织的一些分析细胞技术。