柴胡总皂苷粗提取物对小鼠急性毒性实验研究

目的探讨柴胡总皂苷提取物对小鼠急性毒性的影响。方法采用经典的小鼠急性毒性试验方法,进行柴胡总皂苷粗提取物对小鼠的急性毒性研究。结果按含生药量计算,柴胡总皂苷粗提取物对小鼠的半数致死量（LD50）为94.974g·kg-1·d-1,相当于临床70kg成人每公斤人日用量的422.8倍;95%可信限为88.742～103.76g·kg-1·d-1,相当于临床70kg成人每公斤人日用量的414.1～484.2倍;按含总皂苷含量计算,LD50为5231.5mg·kg-1·d-1,95%可信限为4886.1～5721.2mg·kg-1·d-1。死亡小鼠急性毒性主要表现为安静怠动,即而出现走路不稳、腹卧昏睡、心率加快、呼吸急促、连续性抽搐、神经抑制而死亡。存活小鼠在14天观察期内体重增长缓慢,余未见明显异常。结论柴胡药材具有一定的毒性,与临床报道相一致。柴胡总皂苷既是其发挥功效的主要化学成分,又是其产生毒性的主要物质基础。其毒性部位以及体内蓄积毒性的＂量-时-毒＂关系有待进一步研究。     

柴胡总皂苷粗提取物对大鼠急性毒性实验研究

目的探讨柴胡总皂苷粗提取物对大鼠急性毒性的影响。方法采用经典的急性毒性试验方法,进行柴胡总皂苷粗提取物对大鼠的急性毒性研究。结果按含柴胡总皂苷含量计算,柴胡总皂苷粗提取物对大鼠的半数致死量（LD50）为2255.6mg·kg-1·d-1,95%可信限为2057.2～2452.9mg·kg-1·d-1。死亡大鼠急性毒性主要表现为安静怠动,继而出现步态不稳、腹卧昏睡、心率加快、呼吸急促、连续性抽搐、神经抑制而死亡。存活小鼠在14天观察期内体重增长缓慢,余未见明显异常。结论柴胡总皂苷粗提取物可致大鼠全部死亡,且其毒性比小鼠毒性小。其产生毒性的部位及毒性机制有待于深入研究。     

柴胡总皂苷粗提取物对大鼠肝毒性损伤作用研究

目的观察长期、大量给予柴胡总皂苷粗提取物致大鼠肝毒性损伤的作用和程度。方法按45天毒性实验方法,除观察一般状况、肝毒性相关指标外,检测血和肝组织内脂质代谢情况、糖代谢、胆红素（TBIL）水平和肝组织病理检查。结果柴胡总皂苷粗提取物可导致血中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性增高,肝脏重量和肝体比值增大,血和肝内甘油三酯（TG）含量增加,对血中胆固醇（CHO）和肝内糖原（Gn）影响不明显,仅高剂量组对TBIL有影响;上述变化随剂量的增加而逐渐加重,病理组织学检查可见肝细胞损伤,与蒸馏水对照组相比有明显差异。结论长期给柴胡总皂苷粗提取物可致大鼠明显的肝毒性损伤,既可致肝功能指标的改变,又可致肝细胞器质性病变。     

柴胡总皂苷分离工艺的研究

目的：从北柴胡中分离出柴胡总皂苷。方法：用60％的乙醇在低于55℃下提取柴胡粉末，滤液去溶剂后所得的浆状液加入正丁醇，在低于55℃去除溶剂得皂苷粉末。结果：柴胡总皂苷的收率 1.1%，富含柴胡皂苷d、a、c成分。结论：本法可以从柴胡中分离出柴胡总皂苷，并可以保持柴胡皂苷d、a、c不发生明显降解。     

柴胡总皂苷醇洗脱精制品对小鼠急性毒性实验研究

目的探讨柴胡总皂苷醇洗脱精制品对小鼠急性毒性的影响。方法采用经典的小鼠急性毒性试验方法,进行柴胡总皂苷醇洗脱精制品对小鼠的急性毒性研究。结果按含柴胡总皂苷含量计算,柴胡总皂苷醇洗脱精制品对小鼠的半数致死量（LD50）为446.7mg·kg-1·d-1,95%可信限为386.13～513.66mg·kg-1·d-1。死亡小鼠急性毒性主要表现为安静怠动,即而出现走路不稳、腹卧昏睡、心率加快、呼吸急促、连续性抽搐、神经抑制而死亡。存活小鼠在14天观察期内体重增长缓慢,余未见明显异常。结论柴胡总皂苷醇洗脱精制样品的小鼠急性毒性比柴胡总皂苷粗提取物的急性毒性大,进一步证实了柴胡总皂苷是柴胡产生毒性的主要物质基础。其体内蓄积毒性的＂量-时-毒＂关系有待进一步研究。     

柴胡总皂苷精制品大鼠肝毒性病理学研究

目的观察连续15d给予大鼠不同剂量的柴胡总皂苷醇洗脱精制样品导致大鼠肝毒性病理学损伤程度。方法分别给大鼠灌胃高、中、低剂量的柴胡总皂苷醇洗脱精制样品,按柴胡总皂苷计算,高、中、低剂量组分别为300,150,50mg.kg-1,除观察一般状况外,剖杀大鼠,精密称取心、肝、脾、肺、肾脏重量,计算脏体比值;进行肝脏病理组织学检查。结果不同剂量的柴胡总皂苷醇洗脱精制样品可导致大鼠体重下降,肝脏重量和肝体比值增大,病理学检查可见不同程度的肝组织损伤;上述变化随剂量的增加而逐渐加重,与空白组比较有明显差异。结论柴胡对大鼠肝毒性损伤程度与柴胡用药剂量、柴胡总皂苷含量呈剂量依赖关系。柴胡总皂苷是柴胡导致肝毒性的毒效部位,柴胡总皂苷醇洗脱精制品(81.9%)在一定剂量下,连续给药15d即可导致大鼠明显的肝脏器质性病变,其细胞损伤乃至坏死是主要病理改变。     

柴胡总皂苷醇洗脱精制品对大鼠急性毒性实验研究

目的探讨柴胡总皂苷醇洗脱精制品对大鼠急性毒性的影响。方法采用经典的急性毒性试验方法,进行柴胡总皂苷醇洗脱精制品对大鼠的急性毒性实验研究。结果按含柴胡总皂苷含量计算,柴胡总皂苷醇洗脱精制品对小鼠的半数致死量（LD50）为591.95mg·kg-1·d-1,95%可信限为490.96～713.7mg·kg-1·d-1。死亡大鼠急性毒性主要表现为安静怠动,即而出现步态不稳、腹卧昏睡、心率加快、呼吸急促、连续性抽搐、神经抑制而死亡。存活大鼠在14天观察期内体重增长缓慢,余未见明显异常。柴胡总皂苷醇洗脱精制样品的大鼠急性毒性比柴胡总皂苷粗提取物的急性毒性大,但比小鼠急性毒性小。结论柴胡总皂苷是柴胡产生毒性的主要物质基础,其产生毒性的部位及毒性机制有待于深入研究。     

柴胡总皂苷提取工艺的优化

目的 考察柴胡中总皂苷的最佳提取工艺。方法 以柴胡总皂苷提取率为评价指标，采用单因素实验与正交实验设计优选出柴胡中柴胡总皂苷的提取工艺。结果 柴胡总皂苷的最优提取工艺为：粉碎粒径＜180 μm的柴胡粉末在80 ℃条件下以70%乙醇回流提取3次，每次1 h，每次加乙醇量为柴胡粉末量的8倍。结论 验证实验表明优选出的提取工艺稳定可行，适用于柴胡总皂苷的提取。     

柴胡总皂苷胶囊的制备工艺考察

目的:优选出柴胡总皂苷胶囊剂的最佳处方工艺。方法:采用饱和水溶液法制备柴胡总皂苷-β-环糊精包合物,以包合率为评价指标,采用正交试验优选包合物的最佳制备条件;以体外溶出度为评价指标,采用单因素法考察各种辅料包括崩解剂和粘合剂的种类和用量、表面活性剂的用量;以颗粒外观和体外溶出度为评价指标,考察颗粒干燥温度。结果:优选出最佳包合工艺为柴胡总皂苷和β-环糊精的重量比为1:2,包合温度为55℃,包合时间为1.5 h;最佳处方中交联羧甲基纤维素钠为崩解剂,用量为处方量的10%;以3%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液(70%乙醇)为粘合剂;表面活性剂的用量为处方量的1.5%;颗粒干燥温度为60℃。结论:本制剂处方合理,制备工艺简单。     

柴胡总皂苷肝毒性肝纤维化损伤机制研究

目的探讨柴胡总皂苷肝毒性损伤与肝脏纤维化的相关性,为阐明其肝毒性机制提供依据。方法大鼠连续15天灌胃高、中、低不同剂量,按等生药量计算,高、中、低剂量分别为300、150、50 mg.kg-1,末次药后取血和肝组织,检测血清及肝组织匀浆中羟脯氨酸含量的变化;并作大鼠肝脏组织Masson’s病理学检查。结果 15天给药结束后药物组大鼠血清和肝组织羟脯氨酸含量均明显升高,随给药剂量增加羟脯氨酸含量升高幅度增大,与正常对照组比较呈现不同程度的显著性差异;马松染色肝组织病理改变可见胶原纤维延伸明显,并互相连接包绕整个肝小叶,导致正常肝小叶结构破坏,假小叶形成。药物高、中、低剂量之间的肝毒性损伤程度有一定的剂量依赖关系,与空白组相比有明显差异。结论连续15天灌服一定剂量的柴胡总皂苷可导致大鼠明显的肝纤维化,柴胡总皂苷是其肝毒性主要物质基础,为柴胡总皂苷的肝毒性评价提供了实验依据,为其毒性预警和临床安全应用提供对策及科学依据。     

不同精制工艺对柴胡皂苷类物质含量及急性毒性影响研究

目的通过对树脂类型、洗脱溶剂种类和浓度的比较研究,探讨不同精制工艺对柴胡皂苷类物质基础含量高低及急性毒性大小的影响,以确定柴胡的毒性物质基础。方法采用HPLC法、经典急性毒性实验法,进行不同精制工艺的柴胡皂苷a的含量测定及急性毒性比较研究。结果以柴胡皂苷a含量为指标,确定D101大孔树脂比AB-8更优于皂苷类物质的分离纯化,洗脱溶剂为70%乙醇可以达到更为理想的洗脱效果;对小鼠急性毒性的影响大小为:70%乙醇洗脱液>50%乙醇洗脱液>30%乙醇洗脱液>80%乙醇洗脱液>水洗脱液>95%乙醇洗脱液。结论不同精制工艺对柴胡皂苷a含量和毒性大小存在显著差异,且柴胡毒性大小与皂苷类物质含量高低有一定的相关性,故确定采用D101大孔树脂吸附,洗脱液为70%乙醇为富集柴胡皂苷的最佳精制工艺。     

大孔吸附树脂分离纯化柴胡总皂苷工艺研究

目的以柴胡皂苷a含量为指标,考察柴胡总皂苷的最佳分离纯化工艺。方法建立柴胡皂苷a的HPLC测定法,色谱柱为ODS-C18柱(150×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(70:30),流速为1mL.min-1,检测波长为210nm。以柴胡皂苷a为指标,比较不同型号大孔树脂对于柴胡总皂苷的分离纯化能力,对吸附流速、洗脱溶剂及用量、洗脱流速进行考察。结果柴胡皂苷a在50～250μg.mL-1的范围内,浓度与其峰面积具有良好的线性关系(r=0.9991),平均加样回收率为99.22%,RSD=1.07%(n=6)。确定D101大孔树脂为柴胡总皂苷的纯化材料,其最佳工艺条件是吸附流速为1BV.h-1,洗脱溶剂为70%乙醇,用量为5BV,洗脱流速为2BV.h-1。柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a含量可达到3%左右。结论该含量测定方法操作简便、重复性好,可用于测定柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a的含量。D101大孔树脂分离柴胡总皂苷工艺稳定可行,树脂可重复利用,对于柴胡总皂苷的分离精制具有良好的应用前景。     

南柴胡不同炮制品皂苷类物质含量及急性毒性实验比较研究

目的对南柴胡不同炮制品中皂苷类物质的含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨炮制对南柴胡皂苷类物质含量与毒性的影响。方法运用HPLC法、经典急性毒性实验法,进行南柴胡不同炮制品中柴胡皂苷a的含量测定及急性毒性比较研究。结果南柴胡生品、清炒品、醋炙品、酒炙品和蜜炙品不同炮制品中柴胡皂苷a的百分含量依次为0.46%、0.16%、0.22%、0.22%、0.32%。南柴胡生品,清炒品,醋炙品,酒炙品和蜜炙品没有出现死亡,测得最大给药量（MLD）值按含生药量计算分别为25.2、28.8、26.4、26.0、32.4g·kg-1,分别相当于临床70kg人每公斤体重日用量的196、224、205、233、252倍,连续观察14天,小鼠一般状况良好,无一死亡。结论南柴胡不同炮制品中柴胡皂苷a含量和毒性各不相同,且各样品均未出现死亡,其最大给药量显示南柴胡的各炮制品基本安全低毒,提示炮制对南柴胡药材柴胡皂苷类物质含量和安全剂量范围大小有一定影响。     

不同提取工艺对北柴胡不同炮制品皂苷a含量及急性毒性实验比较研究

目的探讨不同提取工艺对北柴胡不同炮制品皂苷a含量的变化及对小鼠急性毒性的影响。方法分别采用水提取、60%乙醇提取和60%乙醇-水提取3种方法,制备北柴胡不同炮制品的提取物浸膏,运用HPLC法和经典急性毒性实验法,分别进行北柴胡不同炮制品中柴胡皂苷a的含量测定及小鼠急性毒性比较研究。结果北柴胡生品、清炒品、醋炙品、酒炙品和蜜炙品不同炮制品水提取物中柴胡皂苷a的百分含量依次为0.08%0,.07%,0.00%0,.04%,0.00%,测得其最大给药量(MLD)值按含生药量计算分别为181.6,244.0,118.8,122.4和170.4 g.kg-1.d-1;60%乙醇提取物中柴胡皂苷a的百分含量依次为0.15%,0.06%,0.16%,0.09%,0.08%,测得其最小致死量(MTD)值按含生药量计算分别为94.0,93.6,50.8,60.4和48.4 g.kg-1.d-1;60%乙醇-水提取物中柴胡皂苷a的百分含量依次为0.20%,0.19%,0.30%,0.13%,0.20%,测得其MTD值按含生药量计算分别为46.4,54.2,62.4,53.6和32.0 g.kg-1.d-1。上述小鼠连续观察14天,死亡小鼠立即解剖未见明显的病理学变化,存活小鼠的体重、行为等变化可逐渐恢复。结论不同提取工艺对北柴胡不同炮制品柴胡皂苷a含量和毒性大小有不同的影响,以60%乙醇-水提取工艺样品柴胡皂苷a含量最高和毒性最大,提示柴胡的毒性大小与柴胡皂苷a含量高低有一定关系。     

产地对北柴胡皂苷类物质含量及急性毒性影响的实验研究

目的对不同产地北柴胡药材全组分、醇-水提取物中皂苷类物质的含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨产地对柴胡皂苷类物质含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、经典急性毒性实验法,进行北柴胡药材全组分、醇-水提取物柴胡总皂苷和皂苷a的含量测定及急性毒性比较研究。结果不同产地北柴胡药材全组分柴胡总皂苷含量大小依次为：河北柴胡〉内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡,皂苷a的含量为：河北柴胡〉内蒙柴胡、山西柴胡〉河南柴胡,其最大给药量（MLD）大小为：河南柴胡〉山西柴胡〉内蒙柴胡〉河北柴胡;不同产地北柴胡药材醇-水提取物总皂苷含量大小依次为：河北柴胡〉内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡,皂苷a的含量为：河北柴胡〉山西柴胡〉内蒙柴胡〉河南柴胡,其最小致死量（MTD）为：内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡〉河北柴胡。河北产地的北柴胡药材全组分、醇-水提取物中柴胡总皂苷及皂苷a含量均较其他产地北柴胡药材含量高,其对应的全组分MLD、醇-水提取物MTD均较其他产地北柴胡药材的小,毒性最大。结论产地对柴胡皂苷类物质含量与毒性有一定的影响,且柴胡毒性大小与皂苷类物质含量有一定的相关性。     

基原对柴胡急性毒性和皂苷类物质含量影响的实验研究

目的对不同基原柴胡的皂苷类物质含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨基原对柴胡皂苷类化学成分含量与急性毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、经典急毒实验法,进行南、北柴胡药材中柴胡总皂苷和皂苷a含量测定及急性毒性比较研究。结果北柴胡药材中总皂苷含量4．61％,柴胡皂苷a的含量0．60％,南柴胡药材中总皂苷含量3．53％,柴胡皂苷a的含量0．46％。1日内给小鼠灌胃南、北柴胡药材分别为25．2g／kg、26．4g／kg（按含生药量计算）,分别相当于临床70kg的成人每公斤体重日用量的196倍和205倍以上,观察14天,小鼠一般状况良好,无一死亡。结论北柴胡药材毒性大于南柴胡药材,其毒性的大小与柴胡皂苷类物质含量有一定相关性。