局部亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后血清S100B蛋白的影响

目的探讨局部亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后血清S100B蛋白的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为3组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、亚低温组（H组）,每组8只。采用双侧颈总动脉夹闭＋基底动脉丝线提拉法制备全脑缺血再灌注损伤模型,全脑缺血10min再灌注6h。实验过程中监测大鼠脑血流图并测定动脉血气。H组再灌注前即刻经股静脉缓慢注射10℃0.9%氯化钠溶液3.5ml,冰块包绕头部,60W白炽灯照射身体。控制鼓膜温度在32～34℃,直肠温度同时降低,20min左右升至并维持在37.5～38.3℃。低温维持3h,3h后60W白炽灯照射身体缓慢复温。实验结束后测定大鼠血清S100B蛋白浓度;用干（110℃24h烘干）、湿重法计算左侧大脑半球脑水含量。结果与S组比较,IR组S100B蛋白浓度、脑含水量升高（P〈0.05）;与IR组比较,H组S100B蛋白浓度、脑含水量降低（P〈0.05）。结论局部亚低温降低大鼠全脑缺血再灌注后血清S100B蛋白的表达量,对全脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用。     

不同时间吗啡预处理对小鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的观察吗啡预处理对小鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用并寻找有效预处理的产生时间。方法健康雄性BALB/c小鼠56只,随机分为假手术组（Sham组,n=8）、脑中动脉栓塞组（MCAO组,n=8）和吗啡预处理组（MP组,n=40）,吗啡预处理组又分为5个亚组,分别于预处理后0.5、12、24、48、72h行脑中动脉栓塞,每组8只。缺血后6h,通过神经功能评分、测定脑梗死面积及脑水肿率,观察吗啡预处理对小鼠局灶性脑缺血损伤的作用。结果与MCAO组比较,吗啡预处理能明显改善12h及24h组小鼠神经功能评分,减少脑梗死面积及水肿率（P〈0.05）,而0.5、48、72h时点则未见明显变化（P〉0.05）。结论吗啡预处理能减轻小鼠局灶性脑缺血损伤,其保护作用可能存在时间效应。     

三七总皂苷对大鼠局灶燃血再灌注损伤TGF－β1表达的影响

目的：观察三七总皂苷（PNs）对局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑组织TGF－β1表达的影响,探讨PNS的脑保护机制。方法：采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注损伤模型,将30只成年雄性Sprague－Darley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和PNS治疗组,每组10只,各组分别于再灌注24h后做神经功能缺陷评估,并断头取脑,用免疫组织化学法和半定量RT－PCR法检测各组缺血区脑组织TGF－β1表达的变化。结果：与缺血再灌注组相比,PNS治疗组术后大鼠神经功能缺陷评分显著降低,脑组织中TGF－β1的表达水平明显增高。结论：三七总皂苷对脑缺血再灌注大鼠有保护作用,其作用机制可能与促进TGF－β1的表达有关。     

龙眼参多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的：研究龙眼参（LYS）多糖对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响。方法：180只Wistar♂性大鼠随机分为脑缺血再灌注组，LYS多糖高、中、低剂量组，阳性对照组，假手术组。给药组术前连续灌胃7d，于末次给药60min后行手术，采用大脑中动脉局灶性缺血再灌注模型，观察缺血2h再灌注24h后，LYS多糖对各组大鼠脑梗死体积、脑含水量及脑组织中Bcb2、Bax蛋白表达的影响，并在光镜下观察各组大鼠皮层区细胞损伤程度。结果：与脑缺血再灌注模型组相比，LYS多糖能够降低大鼠脑梗死体积和脑含水量，增加脑组织中Bcl-2蛋白表达，减少Bax蛋白表达（P〈0．01或P〈0．05），并减轻皮层神经细胞水肿。结论：龙眼参多糖对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与其上调Bcl-2蛋白表达，下调Bax蛋白表达，通过调节凋亡相关基因表达抑制凋亡有关。     

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤脑组织ERK信号转导通路影响的研究

目的探讨DADLE对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中ERK信号转导通路的影响及其与脑保护作用的关系。方法将健康雌性SD大鼠50只（1800220g）随机分为5组：假手术组（Sham,n=10）：只暴露血管而不夹闭;缺血再灌注组（I／R,n=10）：采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型,缺血15min后再灌注120min;DADLE处理组分为DADLE2mg／kg组（A,n=10）、DADLE3mg／kg组（B,n=10）和DADLE5mg／kg组（C,n=10）：在FR组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE。HE染色观察各组海马CAl区神经元病理变化情况,westernblot测其脑组织内非磷酸化ERK与磷酸化ERK（P-ERK）的表达状况。结果Sham组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著低于其他各组（P〈0．05）;DADLE处理组与I／R组相比,ERK、P-ERK蛋白的表达水平上调（P〈0．05）,其中B组、C组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著高于A组（P〈0．05）,而B组、C组之间ERK、P-ERK表达则无显著性差异（P〉0．05）。结论在急性大鼠全脑缺血再灌注损伤中,ERK信号转导通路的活性明显上调,DADLE可以通过增加ERK的活化而达到降低神经元细胞的损伤,发挥脑保护的作用;同时,该作用呈剂量相关性和有“天花板效应”。     

低氧预适应对大鼠脑缺血再灌注诱导内质网应激的影响

目的探讨低氧预适应对大鼠脑缺血再灌注诱导内质网应激的影响。方法健康雄性SD大鼠36只,采用随机数字表法随机分为假手术（S）组、缺血再灌注（I/R）组和低氧预适应（HPC）组,每组12只。采用右侧大脑中动脉阻闭1 h后再灌注24 h,制备局灶性脑I/R模型。HPC组吸入8%O23 h,制备HPC模型;S组只分离血管不置入线栓。于再灌注24 h时,行神经功能缺陷评分后断头取脑,免疫组化染色测定缺血皮质周围生长停止和DNA损伤诱导基因153（GADD153）蛋白表达,TUNEL法检测并计算细胞凋亡指数。结果与S组比较,I/R组和HPC组神经功能缺陷评分和凋亡指数升高,GADD153蛋白表达上调;与I/R组比较,HPC组神经功能缺陷评分和凋亡指数降低, GADD153蛋白表达下调（均P＜0.05）。结论低氧预适应可通过抑制内质网应激介导的细胞凋亡途径,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,其机制可能与下调GADD153蛋白表达有关。     

重组人骨形态发生蛋白-7对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的影响

为探讨骨形态发生蛋白-7（BMP-7）对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响,采用线栓法建立局灶脑缺血再灌注模型,观察BMP-7对局灶脑缺血再灌注损伤的影响。结果表明,BMP-7预处理组神经功能缺陷评分（3.12±0.73）明显低于单纯缺血再灌注组（（5.22±0.81）,P〈0.01;梗死体积减少（90.53±11.67 mm^3比121.24±14.36 mm^3）,P〈0.01;BMP-7预处理降低脑含水量（76.65±3.04%比80.59±3.31%,P〈0.01）,并改善了脑超微结构。结论：BMP-7对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

脑脉泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤NOS和氧自由基的影响

目的研究脑脉泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤NOS和氧自由基的影响。方法大脑中动脉线拴法（MCAO）制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组（sham）、脑缺血再灌注模型组（MCAO）、脑脉泰大、中、小（2．24、1．12、0．56g／kg）剂量组和尼莫地平组（10mg‘kg）,每组10只大鼠。术后取梗死侧脑组织做成匀浆,检测脑组织中丙二醛（MDA）、乳酸（LA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）含量。免疫组化染色检测缺血半暗带iNOS和eNOS蛋白表达。结果脑组织匀浆生化指标检测发现缺血脑脉泰能显著降低脑组织中MDA和IA含量;升高SOD和GSH含量,脑缺血半暗带的eNOS蛋白表达明显增加,iNOS表达显著减少,与MCAO模型组比较,有显著性差异（P〈0．05）。结论脑脉泰能减少脑缺血／再灌注损伤,其保护作用与增加脑组织的抗氧化能力和eNOS／iNOS有关。     

蝙蝠葛酚性碱调节p-NR1和NR2A对脑缺血再灌注大鼠发挥神经保护作用

目的：探讨蝙蝠葛酚性碱（phenolic alkaloids of Menispermum dauricum,PAMD）对脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及其机制。方法：大鼠局灶性脑缺血模型采用大脑中动脉线栓法制作。动物随机分为假手术组,缺血再灌注组,PAMD低（25 mg·kg^-1）、中（50 mg·kg^-1）、高（75 mg·kg^-1）剂量治疗组。持续栓塞2 h拔出线栓,再灌注4 h,然后断头取脑。干湿重法求出脑组织含水量,伊文思蓝含量测定法观察血脑屏障通透性。分离皮层组织,免疫印迹方法检测NR1和NR2A及各自对应的磷酸化蛋白。结果：（1）PAMD可以减少脑缺血再灌注大鼠脑组织含水量（P<0.05）,降低脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性（P<0.05）;（2）与假手术组比较,缺血再灌注组NR1,NR2A,p-NR2A表达无明显变化,p-NR1表达减少（P<0.05）;与缺血再灌注组比较,PAMD使p-NR1表达增多（P<0.05）,NR2A表达减少（P<0.05）。结论：PAMD可通过调节p-NR1和NR2A对脑缺血再灌注大鼠发挥神经保护作用。     

黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Apaf-1表达的影响

【摘要】目的观察黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Apaf-1表达的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组（再灌注组）和黄芪注射液处理组（实验组）。采用Pulsinelli四血管阻断法建立大鼠脑缺血再灌注模型,实验组于术前30min腹腔注射黄芪注射液6mL/kg,每24h注射1次,各组于再灌注后24h断头取脑。采用HE染色,光镜下观察海马组织病理学改变;透射电镜下观察海马神经元超微结构变化;免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠海马组织凋亡蛋白酶激活因子-1（Apaf-1）蛋白表达的变化。结果与假手术组比较,再灌注组大鼠海马神经元出现胞核及线粒体损伤,并且Apaf-1蛋白的表达明显升高（免疫组化：0.024±0.001vs0.109±0.011;Western blot法：0.270±0.018vs0.894±0.072,均P＜0.01）,与再灌注组比较,实验组大鼠海马神经元胞核及线粒体损伤明显减轻,而Apaf-1蛋白的表达明显降低（免疫组化：0.048±0.005;Western blot法0.392±0.046,均P＜0.01）。结论黄芪注射液可减轻脑缺血再灌注大鼠海马神经元的损伤,其作用机制可能与抑制Apaf-1蛋白表达有关     

丹参和川芎嗪联合应用对大鼠脑缺血再灌注氧化损伤的保护作用研究

目的:研究丹参和川芎嗪联合应用对大鼠脑缺血再灌注氧化损伤的保护作用。方法:将Wistar大鼠200只随机分5组,即假手术、模型、丹参、川芎嗪、丹参+川芎嗪组。采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,观察大鼠缺血再灌注后缺血脑梗死面积,脑水分、脑钙、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:模型组脑梗死面积比假手术组显著增大(P<0.01);各用药组与模型组比脑梗死面积显著减小(P<0.01),且丹参+川芎嗪组效果更好;与假手术组比较,模型组MDA、脑钙和脑水分含量显著增高(P<0.01),而SOD活性显著降低(P<0.01);与模型组比较,各用药组脑钙和脑水分含量显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05),且丹参+川芎嗪组效果更好。结论:丹参和川芎嗪联合应用比单用对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑细胞保护作用更有效。     

不同剂量纳洛酮后处理对大鼠脑微管相关蛋白的影响

目的评价不同剂量纳洛酮后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑微管相关蛋白(MAP2)蛋白的影响。方法成年SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,生理盐水对照组(P组),纳洛酮1mg/kg后处理组(N1组),纳洛酮5mg/kg后处理组(N2组),纳洛酮10mg/kg后处理组(N3组)。4组均采用阻断右侧大脑中动脉90min,再灌注24h的方法制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型。在再灌注初始,腹腔注射生理盐水或不同剂量纳洛酮。实验过程中连续监测心率(HR)和平均动脉压(MAP);再灌注24h后,各组大鼠用1%戊巴比妥钠(90mg/kg)腹腔注射麻醉后,迅速断头取脑,测定缺血侧和健侧脑组织MAP2表达。结果缺血前和缺血再灌注期间各时间点的心率和MAP在4组之间差异无统计学意义(P>0.05)。对于缺血侧,与P组比较,N1、N2组再灌注24h后脑组织MAP2表达无明显改变(P>0.05);与P组、N1、N2组相比,N3组的上述指标显著增高(P<0.05)。对于健侧,4组间MAP2表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量纳洛酮后处理可增强大鼠脑MAP2蛋白的表达,从而减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。     

依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Fas及细胞凋亡的影响

目的观察依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Fas及细胞凋亡的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为三组：假手术组（SH组）、缺血再灌注组（IR组）、依达拉奉治疗组（EDA组）,每组8只。IR组和EDA组线栓法制备脑缺血再灌注模型;SH组栓线只进入颈外动脉。EDA组于再灌注前30min和再灌注12h经腹腔注射依达拉奉3mg/kg,SH组和IR组在相同时间点注射等容量生理盐水。再灌注24h取血清测超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量;取脑组织检测缺血半暗带Fas的表达及细胞凋亡情况;于再灌注3h和24h,参照Zealonga五级神经功能缺损评分标准评价神经功能损伤情况。结果与SH组比较,IR组和EDA组再灌注24h血清SOD活力降低（P〈0.01）,IR组SOD活力低于EDA组（P〈0.01）。与SH组比较,IR组和EDA组再灌注24h时血清MDA含量升高（P〈0.01）;IR组MDA含量高于EDA组（P〈0.05）。SH组脑组织无或仅有少量细胞Fas表达呈阳性,IR组与EDA组缺血半暗带均有大量Fas表达;EDA组平均灰度值较IR组大（P〈0.01）。SH组脑组织仅有少量凋亡细胞,IR组与EDA组缺血半暗带可见大量凋亡神经细胞;EDA组凋亡细胞数较IR组少（P〈0.01）。SH组各时点无神经损伤症状,再灌注3h,IR组与EDA组大鼠神经功能损伤差异无显著性（P〉0.05）;再灌注24h,与IR组比较EDA组大鼠神经功能损伤减轻（P〈0.05）。结论脑缺血再灌注后,大鼠血清SOD活力降低、MDA含量升高、大脑皮层半暗带Fas表达及凋亡细胞数明显增多。依达拉奉可保护SOD活力,降低MDA含量,减少缺血再灌注大脑皮层半暗带Fas的表达及细胞凋亡,从而减轻神经功能损伤,对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。     

脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡及c—fos蛋白表达研究

目的：观察脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡及c-fos蛋白的表达。方法：采用大脑中动脉阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型,取海马组织,用免疫组织化学方法检测海马神经元c-fos蛋白表达及TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果：脑缺血再灌注损伤大鼠与对照组比较海马区c-fos蛋白阳性细胞表达增强（P〈0．05）,凋亡细胞表达增多（P〈0．05）。结论：脑缺血再灌注损伤大鼠海马区c-fos蛋白阳性细胞表达增强,凋亡细胞表达增多。     

白细胞介素-32在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用及其机制

目的:探讨白细胞介素-32(Interleukin,IL-32)在大鼠肾缺血再灌注(ischemia-reperfusion injury,IRI)损伤中的作用及其机制。方法:80只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(S组,n=20)、缺血再灌注组(I/R组,n=20)、缺血前IgG抗体预处理组(IgG+I/R组,n=20)和缺血前IL-32抗体预处理组(Anti-IL-32+I/R组,n=20)。采用夹闭双侧肾蒂30min后恢复血供的方法制备肾脏缺血再灌注损伤模型,再灌注3h、6h、12h、24h分别处死大鼠收集血样和肾脏样本,自动生化分析仪测定血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IL-32、TNF-α、IL-1β的表达,化学比色法检测肾组织髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果:与S组比较:1、血清Cr、BUN浓度,I/R、IgG+I/R组均显著升高(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05);2、血清IL-32、TNF-α、IL-1β水平,I/R、IgG+I/R组均显著升高(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05);3、肾组织MPO活性,I/R、IgG+I/R组显著增强(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05)。结论:IL-32在肾脏缺血再灌注损伤后的大鼠血清中高表达,阻断IL-32能减少炎症因子释放、抑制中性粒细胞聚集,减轻肾功能损害。     

抑肽酶对脑缺血再灌注大鼠脑组织CD4~+、CD8~+T淋巴细胞表达的影响

目的:探讨抑肽酶在细胞免疫应答的干预下对脑缺血再灌注后继发性脑损伤的保护作用。方法:105只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抑肽酶组(n=35),采用大鼠大脑中动脉闭塞法制作局灶性脑缺血再灌注模型。抑肽酶组在大鼠脑缺血前24h及再灌注即刻、24h、4d、6d、8d、10d、12d、14d分别尾静脉给予抑肽酶,其余组给予生理盐水。应用免疫组织化学方法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间段CD4+、CD8+T淋巴细胞的浸润情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠在缺血再灌注损伤后各时间点脑组织内CD4+、CD8+T淋巴细胞计数均明显增加,10d达高峰;与模型组比较,抑肽酶组大鼠脑组织内CD4+、CD8+T淋巴细胞计数在缺血再灌注损伤后各时间点均更低(P<0.05),8d达高峰。结论:抑肽酶可能通过抑制CD4+、CD8+T淋巴细胞在缺血再灌注损伤后脑组织内的浸润而减少细胞免疫应答介导的神经元凋亡,从而减轻脑组织继发性损伤。     

褐藻多糖硫酸酯对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用

目的探讨褐藻多糖硫酸酯（FPS）对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及可能机制。方法将48只大鼠按照随机数字表法分为假手术组、大脑中动脉栓塞（MCAO）组、FPS低剂量组（MCAO＋FPS 50 mg/kg）、FPS高剂量组（MCAO＋FPS 100 mg/kg）,每组12只。假手术组大鼠只分离右侧颈总动脉及颈内外动脉,MCAO组、FPS低剂量组、FPS高剂量组采用线栓法制作大脑中动脉栓塞模型,缺血2 h后再灌注后FPS低、高剂量组予鼠尾静脉注射FPS50、100 mg/kg。对所有大鼠按照Longa标准进行神经功能评分;采用TTC法测量脑梗死体积;蛋白印迹法测定Nrf2蛋白的表达。结果与MCAO组比较,FPS低、高剂量组大鼠神经功能评分明显降低、转录因子NF-E2相关因子2（NF-E2-related factor 2,Nrf2）蛋白表达明显增高,FPS高剂量组神经功能评分、Nrf2蛋白表达改变得更为显著（P〈0.05,P〈0.01）;FPS高剂量组大鼠脑梗死体积明显减小（P〈0.01）。结论 FPS通过提高Nrf2的表达缩小脑梗死体积,对脑缺血再灌注损伤大鼠起到神经保护作用。     

欧亚旋覆花总黄酮提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:研究欧亚旋覆花总黄酮提取物(TFIB)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:实验分为6组,即假手术、模型、金纳多及TFIB高、中、低剂量组。对各组大鼠进行神经功能评分,采用TTC染色法测定脑梗死体积、HE染色法观察脑组织形态学变化、黄嘌呤氧化酶法测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥法测定丙二醛(MDA)含量、双波长荧光分光光度法检测大鼠大脑皮层和纹状体神经细胞胞浆Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化。结果:与模型组比较,TFIB高、中剂量组神经功能评分显著降低(P<0.01);TFIB高、中剂量组缺血再灌注损伤后脑梗死体积显著减小(P<0.01);TFIB高、中剂量组神经细胞变性坏死的病理变化显著改善;TFIB高、中剂量组大鼠血清SOD活力显著增强,MDA含量显著降低(P<0.01);TFIB高、中剂量组胞浆Ca2+浓度显著降低(P<0.01)。结论:TFIB对脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用,其作用机制与抑制并减少体内脂质过氧化物的产生、增强机体抗氧化活性有关。