002 以填充胶原、白蛋白和丝蛋白的硅橡胶管引导周围神经组织再生[英]

'Chen Yueh-Sheng…//Biomaterials.-2000,21 (15).-1541～1547 对于较小的神经缺损可以采用直接缝合的方法进行修复,但较大的缺损就需进行神经移植或使用导管连接神经断端.由于神经移植存在供体不足的问题,使用导管连接神经断端受到较多重视.已有许多种材料被研究用于制备导管,硅橡胶是研究较多的材料.为了能修复更大的神经缺损,多种神经营养因子和促进神经再生的因子被使用,如何使这些因子能较长时间发挥作用是很重要的研究课题.本工作在鼠坐骨神经上形成1cm的缺损,用硅橡胶导管连接神经断端,并注入含有胶原、白蛋白和丝蛋白的凝胶.凝胶是由胶原溶液、白蛋白溶液和丝蛋白溶液按一定比例混合后在低温下形成的.以未填充凝胶的硅橡胶导管连接作为对照.在手术6周后,所用填充的凝胶均全部分解吸收,导管无明显的膨胀.实验组中90%的动物显示了穿越缺损的神经再生,而对照组只有60%.定性和定量组织学分析显示实验组再生神经截面较对照组大28%,神经元数量也大.结合其他研究者实验结果表明使用此类凝胶可以促进周围神经缺损再生.(陈晓东摘朴东旭校)     

静电纺丝聚乳酸聚乙醇酸共聚物-丝素-胶原神经导管修复大鼠周围神经缺损

背景：周围神经缺损修复是临床上一大难题,由于自体神经移植有一定的局限性,人工神经修复材料是一种很有前途的选择。 目的：探讨静电纺丝聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)-丝素-胶原纳米神经导管修复大鼠坐骨神经缺损的可能性。 方法：雌性SD大鼠36只,制备约10 mm的坐骨神经缺损,分别采用倒转自体神经、静电纺丝PLGA-丝素-胶原神经导管、单纯PLGA神经导管桥接,术后12周进行大体观察、神经电生理测定、光镜观察、透射电镜观察和图像分析对比,了解神经再生的情况。 结果与结论：静电纺丝法制备成的纳米神经导管管壁疏松多孔,能够模拟细胞外基质的结构。静电纺丝PLGA-丝 素-胶原神经导管组在促进坐骨神经再生、提高再生神经髓鞘化、加速再生神经功能重建等方面均优于单纯PLGA导管组,比自体神经移植组略差。     

合成材料神经导管与自体神经移植修复周围神经缺损的比较

背景：生物可降解材料制成的神经导管可在体内降解,避免出现的神经卡压等问题,因而受到越来越多的关注。 目的：比较自体神经移植与3种合成可生物降解材料神经导管在修复周围神经损伤的效果差异。 方法：通过电生理学检测,形态学观察等神经恢复效果评价方法,对比分析近年来常用的胶原神经导管、DL-乳酸-ε-己内酯神经导管、聚乙醇酸神经导管与自体神经移植修复周围神经缺损的效果。 结果与结论：虽然神经导管与自体神经移植相比在理论上有其优势的一面,但不同合成材料的神经导管之间在神经功能恢复中存在明显差异性,DL-乳酸-ε-己内酯神经导管修复效果与自体神经移植无明显差异,是较为理想的神经导管材料,聚乙醇酸神经导管因自身的因素影响其降解性能,在3种神经导管中的修复周围神经损伤效果最差,胶原神经导管需要交联剂改善其机械性能,其修复周围神经损伤效果居于前两者之间,因此,这3种神经导管在神经功能再生方面还有潜在的缺陷,不能完全替代自体神经移植,而且3者之间的性价比,还缺少足够的大样本长期随机对照实验结果来验证,还需要进一步的实验观察。     

胶原神经导管对外周神经缺损修复的实验研究

目的探讨组织工程化胶原神经导管的构建及对外周神经缺损的修复。方法分别取10g胶原蛋白利用自制模具分别制备含0.25g川芎嗪和无川芎嗪的胶原神经导管(2%京尼平交联);对交联前后的胶原神经导管进行拉伸实验并评价其力学特性;用扫描电子显微镜观察胶原神经导管交联前后的空间结构;将大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)与细胞外基质(ECM)混合后接种于导管内腔,用扫描电子显微镜观察细胞与材料的复合情况;质量浓度10g/L的川芎嗪诱导MSC7d后,荧光免疫化学方法鉴定MSC分化为神经元细胞;用8只Wister大鼠复制坐骨神经10mm缺损模型,复合MSC的神经导管连接缺损神经,其中4只为无中药导管作为对照,90d后处死大鼠观察再生神经形态,免疫组织化学鉴定其功能。结果京尼平交联前后胶原纤维结构发生明显改变,交联后胶原纤维排列致密,胶原纤维之间形成不规则孔隙且韧性增强;力学实验结果表明:交联前后的胶原神经导管的最大载荷和断裂载荷分别为(0.23±0.09)、(0.20±0.12)N和(0.76±0.15)、(0.69±0.17)N,两者差异具有显著统计学意义(P﹤0.01);川芎嗪能促进MSC表达神经元特异性烯醇酶并向神经细胞分化;神经导管与MSC复合培养两者具有良好的组织相容性;复合川芎嗪的胶原神经导管能促进缺损神经的修复。结论构建的组织工程化胶原神经导管能有效修复外周神经缺损。     

化学去细胞同种异体神经移植修复大鼠骶1神经缺损

背景：自体神经移植是修复周围神经损伤中最常用的方法。 目的：探讨化学去细胞神经修复大鼠骶1神经缺损的效果,以期寻找修复周围神经缺损较为理想的方法和材料。 方法：取SD大鼠骶1神经,采用化学去细胞法处理大鼠骶1神经的免疫原性成分,使其成为去细胞神经。将Wistar大鼠右侧骶1神经制成1 cm缺损模型,用SD大鼠去细胞同种异体神经移植修复大鼠骶1神经的缺损。 结果与结论：与术前相比,术后8周逼尿肌漏尿点降低,膀胱最大容积和膀胱顺应性升高(P < 0.05)。神经纤维细丝蛋白染色结果显示,右侧经同种异体神经移植修复的神经吻合口断端被染成绿色,神经纤维排列整齐分布均一,再生神经轴突长入远端神经。左侧正常神经形态均一,神经纤维排列整齐分布均一未见轴突长入远端神经。结果表明,化学去细胞同种异体神经的抗原性明显降低,可修复高等哺乳类动物的周围神经损伤。     

骨形态发生蛋白12诱导骨髓间充质干细胞构建组织工程肌腱

背景：以往肌腱损伤的修复方法有端端吻合、自体肌腱移植、同种异体肌腱或人工肌腱移植等,但均有其各自缺点。 目的：探讨以家兔骨髓间充质干细胞为种子细胞,骨形态发生蛋白12诱导,聚羟基乙酸复合材料作为支架材料,预构组织工程化肌腱重建家兔跟腱缺损的可能性。 方法：家兔抽取股骨近端骨髓,分离所得细胞传代至第2代,加入10 μg/L骨形态发生蛋白12诱导分化,并与Ⅰ型胶原溶液按一定比例移植于预张的聚羟基乙酸缝线上预制组织工程化肌腱备用。将家兔制备成跟腱缺损模型,分别采用不同方法修复跟腱缺损：组织工程化肌腱修复,Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸缝线修复,丝线行端端修复。修复12周对各组肌腱行形态学、力学及组织病理学观察。 结果与结论：修复12周家兔肌腱组织病理切片：组织工程化肌腱组可见大量梭形纤维母细胞顺应力学方向排列均匀分布于胶原中,纤维细胞明显增多,胶原致密;Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸缝线组可见部分纤维组织增生伴少许肉芽组织形成,胶原纤维呈松散网丝状,细胞排列紊乱分布不均;丝线组可见纤维组织旁见大量肉芽组织形成。修复12周家兔肌腱生物力学强度：骨形态发生蛋白12+聚羟基乙酸重建肌腱的力学强度明显优于Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸组,与丝线缝合组差异无显著性意义;但骨形态发生蛋白12+聚羟基乙酸重建肌腱的力学强度低于正常肌腱。提示以自体骨髓间充质干细胞作为种子细胞,骨形态发生蛋白12诱导,以聚羟基乙酸为支架,可望构建组织工程化肌腱。构建的组织工程肌腱具有一定的生物力学特性,能用于修复跟腱缺损。     

生物材料构建神经导管修复周围神经损伤的临床应用

背景：显微外科技术及周围神经损伤修复技术的发展与神经导管材料密切相关。神经导管的构建特别是生物材料构建神经导管材料还有待进一步开发研究。 目的：探讨生物材料构建的神经导管在周围神经损伤修复中的应用及数据分析。 方法：SCI数据库中2001/2010检索有关神经导管在周围神经损伤修复中的应用的文献,检索词为“神经导管(nerve conduit);生物材料(biomaterials);周围神经损伤(peripheral nerve injury);神经再生(nerve regeneration);壳聚糖神经导管(chitosan/chitin nerve conduit);高分子神经导管(polymer/macromolecule nerve conduit);胶原神经导管(collagen nerve conduit)”,共检索文献183篇。 结果与结论：神经导管修复法是在神经断端之间留有一段间隙,利用神经导管在神经的远端和近端之间桥接,并创造相对密闭的环境,以充分发挥远端神经的趋化作用,同时阻隔外部的影响,减少瘢痕的产生。目前,已被用于制备神经导管材料分为非神经组织、非生物降解材料、可生物降解材料。随着分子生物学及其他相关技术的发展,探索寻找理想的材料构建神经导管来治疗周围神经损伤研究始终在进行中。     

组织工程神经支架材料的临床应用

背景：神经损伤后没有自我修复的能力,因此,神经组织工程支架材料应用于神经修复、促进神经再生成为研究的热点。 目的：分析目前常用的神经组织工程支架材料的应用范围及效果。 方法：分别对胶原、壳聚糖、凝胶以及透明质酸与人工合成材料形成的聚合物用于神经损伤修复进行动物模型分析,应用免疫染色、生化检测等方法观察评估再生神经的结构和生理功能,确定不同神经组织工程支架材料的应用效果。 结果与结论：神经组织工程支架材料胶原、壳聚糖、凝胶、透明质酸以及人工合成材料均可以通过不同的方式用于损伤神经的再生修复,既可以联合细胞进行生物聚合,也可以联合神经片段移植形成损伤神经桥状联接导管,应用于动物模型实验均显示较好的治疗效果。     

聚乳酸聚羟基乙酸共聚物三维神经导管修复周围神经缺损

背景:异体神经移植由于存在难以消除的宿主免疫排斥反应,限制了其使用,许多学者试图用其他组织替代来弥补以上不足,但效果均不满意。目前,尚没有研制出公认的效果满意的人工神经,自体神经移植至今仍被认为是最佳选择。目的:观察聚乳酸聚羟基乙酸共聚物(PLGA,85:15)三维神经导管修复大鼠周围神经缺损的可行性,及神经导管内微丝支架的作用和不同数量微丝对神经再生的影响。方法:40只成年SD大鼠随机数字表法分为4组,制作大鼠12mm的左侧坐骨神经缺损模型,用该导管桥接大鼠12mm的坐骨神经缺损。A组:PLGA神经导管组;B组:PLGA神经导管内纵形放入20根PLGA微丝;C组:PLGA神经导管内纵形放入40根PLGA微丝;D组:自体神经移植组。A、B、C组神经导管内均注入层粘蛋白+神经生长因子混合液。造模后动态观察大鼠肌肉萎缩、跛行情况,测量神经导管内再生神经的传导速度、小腿三头肌湿质量恢复率。对再生神经中1/3段行组织学观察及图像分析以评价神经修复的效果。结果与结论:造模后各组再生神经均已通过神经导管长入远端,B、D组再生神经较A、C组粗大;再生神经的运动神经传导速度B组和D组明显快于A组和C组(P0.05);A组、C组肌肉萎缩最明显,而B组、D组肌肉萎缩较轻且肌肉萎缩程度基本相当。病理图像分析神经纤维计数以D组最多,B组次之,而与A组、C组相比差异均有显著性意义(P0.05),B组与D组的再生神经纤维数量及成熟程度均要明显优于A组和C组。提示新型的PLGA三维神经导管能有效引导SD大鼠坐骨神经长过12mm的神经缺损,是一种较理想的神经导管;神经导管内微丝支架能有效引导神经再生,数量过多反而可能抑制神经再生。     

神经导管修复周围神经损伤的研究进展

随着神经修复技术特别是显微外科的发展，神经损伤修复的质量有了进一步的提高；利用神经导管桥接神经断端以实现修复周围神经损伤是目前的一个研究热点。本综述了神经导管修复周围神经损伤的发展历史，分析比较了非神经组织、非生物降解材料、可生物降解材料神经导管在神经损伤修复中的效果，讨论了导管的形态及导管内微环境对神经再生的影响。     

干细胞及神经导管支架修复神经缺损

背景：组织工程的发展为神经缺损的修复提供了可能,种子细胞与导管支架制成的复合体是构建组织工程神经的核心。 目的：从干细胞的组织工程应用及构建具有良好生物相容性的导管支架材料角度,探索如何更好的修复神经损伤。 方法：以“干细胞,神经损伤,修复,神经导管,神经支架材料”为中文关键词,以“stem cells,nerve damage,repair,nerve guide conduit material,scaffold materials,nerve tissue engineering”为英文关键词,采用计算机检索CNKI和Medline数据库1996-01/2011-01有关不同来源干细胞和导管支架材料修复神经缺损的相关文章,排除重复研究或Meta分析类文章,筛选纳入30篇文献进行评价。 结果与结论：移植神经干细胞可以在神经系统存活、增殖、迁移,在不同部位分化为相应的细胞,因此给神经修复领域带来新的希望。另外,随着生物材料的发展,神经导管材料修复神经缺损也取得了优良的效果,具有良好的应用前景。将神经干细胞复合导管可降解生物材料有望能更好的满足神经支架的要求,达到修复和重建的目的。     

组织工程神经用生物材料研究进展

交通事故、战争、地震等自然灾害频发,神经损伤患者日趋增多,但周围神经缺损后的修复与功能恢复仍不尽人意.组织工程与干细胞的研究进展为临床神经缺损后的修复和功能重建提供了新的思路.组织工程化神经由支架材料、种子细胞、诱导和促进生长的因子等几部分组成.其中支架材料是重要组成部分,它在神经断端之间架起一座桥梁,在支持神经再生、引导和促进轴突生长等方面起着重要作用[1].     

复合他克莫司聚乳酸-乙醇酸缓释导管修复大鼠胫神经缺损

背景：虽然单纯聚乳酸-乙醇酸导管修复大鼠神经缺损可部分恢复大鼠神经功能,但神经直径、再生纤维数量、髓鞘成熟度及功能恢复上均较自体神经移植差。 目的：观察复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管修复大鼠胫神经缺损的可行性。 方法：制作SD大鼠右侧胫神经缺损模型,随机分为3组,分别植入自体胫神经、单纯聚乳酸-乙醇酸导管及复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管修复。植入后3,6,12周行坐骨神经功能指数检查、电生理检查、组织学观测、腓肠肌湿质量测量。 结果与结论：植入后第6,12周复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管组、自体胫神经组坐骨神经功能指数检查、电生理检查、组织学观测、腓肠肌湿质量测量结果优于单纯聚乳酸-乙醇酸导管组(P < 0.05),自体胫神经组、复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管组比较差异无显著性意义。说明复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管桥接修复大鼠胫神经缺损可明显促进断端神经的再生,在晚期功能恢复上取得接近自体神经移植的效果。 关键词：聚乳酸-乙醇酸;他克莫司;神经导管;大鼠;坐骨神经 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.12.003     

周围神经组织工程研究进展

组织工程化的有生物活性的神经替代物称为“人工神经”,当前正被尝试用来替代来源有限的自体神经移植修复周围神经缺损。“人工神经”由支架材料和细胞外基质、种子细胞以及诱导和促进生长的因子等几部分组成。近年来人们使用各种材料,并以不同的模式构建人工神经支架。施万细胞仍是最常使用的种子细胞,但干细胞已开始被用作种子细胞。人们不但研究可促进神经再生的各种因子的作用,也研究了一些抑制因子对神经再生的影响。     

载NGF海藻酸凝胶-聚乳酸复合导管修复兔面神经缺损实验研究

目的    观察载神经生长因子（nerve growth factors, NGF）海藻酸凝胶-聚乳酸复合导管修复面神经缺损的作用。  方法    建立白兔面神经缺损模型,将面神经断端植入制备好的载NGF海藻酸凝胶-聚乳酸复合导管内2 mm,使面神经两断端之间距离为10 mm,将导管两端与神经固定缝合皮肤。再随机将12只大白兔分为术后4、8、12周组。实验结束后切开大白兔面神经吻合部位,选取神经导管近、中和远端组织进行HE染色,观察神经生长及导管降解情况。  结果    实验白兔手术伤口Ⅰ期愈合,无局部坏死、移植物排出及全身不良反应。术后4周导管壁有巨噬细胞浸润,导管近端雪旺细胞、成纤维细胞增生,新生小血管丰富;8周可见导管壁变薄,有成纤维细胞附着,巨噬细胞浸润,导管内有神经束样结构,束间纤维分隔,外层纤维包膜增厚,新生小血管减少;12周可见神经导管壁进一步分解,胶原纤维增生,导管内神经纤维结构接近正常,轴突样结构增粗,外层纤维包膜变薄。  结论    载NGF海藻酸凝胶-聚乳酸复合导管能较好的引导面神经再生,具有良好的组织相容性。     

静脉血营养的腓肠神经游离移植

<正> 作者为1例左上臂桡神经缺损长达13.5cm的患者采用了静脉供血的带小隐静脉蒂的腓肠神经游离移植修复,把蒂小隐静脉蒂的腓肠的神经游离移植于上臂,把腓肠经神嵌于桡神经缺损之间,两端作束膜外缝合,小隐静脉蒂两端分别与头静脉的两断端作端端吻合。作者认为吻合静脉的神经移植,其营养供给主要依靠静脉—筋膜蒂内静脉血维持,这样可以避免在移植中牲牺肢体     

周围神经组织工程研究进展

组织工程化的有生物活性的神经替代物称为“人工神经”，当前正被尝试用来替代来源有限的自体神经移植修复周围神经缺损。“人工神经”由支架材料和细胞外基质、种子细胞以及诱导和促进生长的因子等几部分组成。近年来人们使用各种材料，并以不同的模式构建人工神经支架。施万细胞仍是最常使用的种子细胞，但干细胞已开始被用作种子细胞。人们不但研究可促进神经再生的各种因子的作用，也研究了一些抑制因子对神经再生的影响。     

新型组织工程化改性胶原-壳聚糖复合支架制备与神经细胞的相容性北大核心

背景:周围神经缺损的治疗在再生医学领域仍然具有挑战性,支架材料的应用被认为是有前途的探索方向之一,理想的支架材料应是安全、耐用和缺乏抗原性的。目的:探讨制备一种新型的组织工程化改性胶原-壳聚糖支架,并探索其在大鼠横断坐骨神经模型中用作桥梁修复神经损伤的可能。方法:先制备出胶原-壳聚糖复合支架,然后用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺,N-羟基琥珀酰亚胺对支架进行化学改性即交联。接着将神经干细胞种植于支架上,之后连同支架-种子细胞在体内植入坐骨神经缺损部位。结果与结论:制得的变性交联胶原-壳聚糖复合支架具有三维立体网状结构。将支架-种子细胞移植4周后,可在损伤的坐骨神经中发现S-100神经丝蛋白200表达。结果表明这种组织工程化改性交联胶原-壳聚糖复合支架具有良好的细胞相容性。     

骨骼肌桥接神经缺损研究的进展

战伤或创伤引起的周围神经断裂性损伤,当缺损的长度过大时,一般不宜采用直接拉拢缝合的方法进行修复。因为过份勉强的拉拢缝合,对神经牵拉的张力增大,容易出现神经干内的血循环障碍,再生神经在血供不良的环境中通过不顺利。超长段的神经缺损,两个断端无法接触,如果不用移植体进行桥接,近端神经发出的再生神经纤维到达缺损部位时,受阻于疤痕结缔组织,形成断端神经瘤,不能到达神经的远端,不能恢复神经通路的连续性,神     

神经导管内支架修复周围神经缺损的研究应用与进展北大核心

背景:在周围神经修复方面,神经导管已由传统的无内支架结构逐步走向内部结构的创新,以构建更加有利于周围神经再生的具有内支架结构的神经导管。因此对于神经导管内部支架结构的全面了解是十分必要的。目的:综述近年来神经导管内支架在修复周围神经缺损方面的应用。方法:以"nerve conduit/conduits/scaffolds/scaffold/channel/channels,internal scaffolds/scaffold,nerve regeneration/repair,hydrogel,acellularized/decellularized nerve"或"神经导管,内支架,周围神经修复,凝胶,去细胞神经"为检索词,应用计算机分别在PubMed数据库和中国知网、万方数据库、中国生物医学文献数据库,检索2009年1月至2015年12月与神经导管内支架相关的文章,对纳入的47篇符合标准的文献进行综述。结果与结论:具有内支架结构的神经导管相较于传统的无内支架结构的神经导管在修复周围神经缺损方面有明显优势,可以更加有效的支持、引导和促进周围神经的再生与功能的恢复,有些神经导管内支架复合种子细胞、神经营养因子、细胞外基质后修复效果更佳,甚至与自体神经移植具有相似的修复效果。