结核分枝杆菌IFN-γ酶联免疫斑点检测在结核诊断中的应用

目的采用结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点（简称Elispot）检测技术对不同的人群进行检测,评价其在结核诊断中的应用情况。方法290例结核病人（结核组）,其中肺结核221例中痰抗酸染色（AFB）阳性者89例,AFB阴性者132例;同时选取133例健康志愿者为健康组。采用自行建立的Elispot技术对2组外周血结核菌特异性IFN-γ水平进行检测;对11例结核病人和10例健康者同时采用T-SPOT.TB试剂盒进行平行检测。结果Elispot反应阳性率结核组为83.79%,显著高于健康组的16.54%（P〈0.001）;AFB（＋）肺结核病人阳性率为89.89%,AFB（—）肺结核病人阳性率为81.06%,两者差异无显著性意义（P〉0.05）。T-SPOT.TB与Elispot平行检测阳性率比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。结论结核菌特异性IFN-γElispot检测技术在结核诊断中显示出较好的特异性和敏感性,可作为临床结核病诊断的辅助手段。     

Sensitivity and specificity of T-SPOT·TB in diagnosing tuberculosis infection

应用T-SPOT·TB检测临床确诊的106例结核患者和24例健康体检者,与抗酸染色(AFB)、结核菌纯蛋白衍生物试验(PPD)、结核抗体检查结果 进行比较分析.结果 显示,T-SPOT·TB敏感性为93.4%,特异性为95.8%.AFB、PPD、结核抗体敏感性分别为36.8%、57.5%、39.6%,特异性分别为100.0%、83.3%、91.7%.T-SPOT·TB敏感性与三者相比,差异有统计学意义(P＜0.01),特异性与三者相比,差异无统计学意义.表明酶联免疫斑点T-SPOT·TB实验检测结核敏感性强、特异性高,是快速诊断结核感染的有效手段.     

酶联免疫斑点试验在骨关节结核中的辅助诊断价值

目的探讨评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在骨关节结核病中的辅助诊断价值。方法对骨关节结核病组30例和对照组21例患者,应用ELISPOT试验检测结核菌特异性6kD早期分泌靶向抗原(ESAT-6)和10kD培养滤过蛋白(CFP-10)刺激后外周血中释放γ-干扰素的特异性T细胞。同时对关节穿刺液或手术标本进行涂片、培养、聚合酶链反应(PCR)检测结核菌特异DNA以及病理检查诊断。结果骨关节结核病患者中ELISPOT检测敏感性为96.7%(29/30),特异性为76.2%(16/21),阳性预测值、阴性预测值和阳性似然比分别为85.3%、94.2%和2.86。抗酸杆菌涂片、结核菌培养、PCR和病理诊断的敏感性分别为23.3%(7/30),30.0%(9/30),46.7%(14/30)和93.3%(28/30)。结论 ELISPOT检测方法在骨关节结核病中具有一定的辅助诊断价值,其敏感性明显高于临床常规检测方法。     

Epidot-酶联免疫斑点检测方法应用于结核诊断的初步评价

目的:初步评价自行研发的结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素酶联免疫斑点(Epidot-ELISPOT)检测方法应用于结核病诊断的价值。方法:应用自行研发的Epidot-ELISPOT检测方法及进口T-SPOT.TB试剂盒,检测60份结核病例和75份健康人群的外周血结核特异性γ-干扰素释放水平[斑点形成细胞(spot forming cells,SFCs)]。结果:ELISPOT方法与T-SPOT.TB检测方法对结核感染人群中的敏感性分别为81.67%、90.00%,特异度分别为94.67%、94.67%,Epidot-ELISPOT的敏感度与T-SPOT.TB比较(χ2=1.313,P=0.252),特异性比较(χ2=0.000,P=1.000),差异均无统计学意义。分别用上述两种方法检测肺结核痰阳组和痰阴组形成的SFCs,组间差异均无统计学意义。结论:自行研发的结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素酶联免疫斑点技术的灵敏度和特异性与T-SPOT.TB检测方法类似,可用于结核感染的辅助诊断。     

酶联免疫斑点技术对结核分枝杆菌感染的诊断价值

目的评价酶联免疫斑点技术(ELISPOT)对结核分枝杆菌感染的诊断价值。方法选取2013—2016年我院传染科收治的结核分枝杆菌感染患者60例为观察组,同期于我院选取未感染结核分枝杆菌的住院治疗患者共60例作为对照组。2组均采用ELISPOT法、结核抗体(TBAb)法、结核分枝杆菌素皮试试验(TST)分别进行检测,比较3种方法的灵敏度、特异度及准确度。结果 ELISPOT法灵敏度、特异度及准确度均明显高于TBAb法及TST法,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论酶联免疫斑点技术有助于提高对结核分枝杆菌感染诊断的准确性和速度。     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验在结核病诊断中的价值分析

目的:分析结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病中的诊断价值。方法:回顾性分析59例疑似结核病患者的临床资料,患者均行结核菌素检测和T-SPOT.TB检测,比较两种诊断方法的诊断效率、灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值。结果:观察组阳性预测值、灵敏度和诊断效率均显著高于对照组(P<0.05)。结论:T-SPOT.TB可有效诊断结核疾病,且操作简单。     

诊断结核感染的新方法——酶联免疫斑点法技术

酶联免疫斑点法(ELISPOT)技术作为一种新的免疫学检测方法用于结核感染的诊断,其主要原理是应用结核分枝杆菌特异性抗原ESAT-6与CFP-10刺激患者外周血T淋巴细胞使T细胞活化释放干扰素γ,根据活化T细胞数来判定是否存在结核感染,此技术因不受机体免疫力及卡介苗接种的影响,而较皮肤结核菌素试验具有更高的特异性及敏感性,现就ELISPOT的技术原理、发展简史、操作步骤及应用进行综述。     

3例结核确诊病例的酶联免疫斑点实验分析

结核病是严重危害人类健康的慢性传染病,是我国重点控制的重大疾病之一,也是全球关注的公共卫生问题和社会问题。早发现,早诊断,早治疗是控制结核病漫延的最好方法。然而限于现在诊疗技术,早期发现结核感染成为控制结核病的瓶颈。     

酶联免疫斑点试验对肺结核诊断的临床价值

目的：探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在肺结核临床诊断中的应用价值。方法回顾性分析2013年12月至2014年12月入住新疆医科大学第一附属医院符合本研究条件的患者172例,根据诊断标准将其分为肺结核组96例(其中确诊组18例,临床诊断组78例),肺炎组76例,两组患者均进行ELISPOT、胸部CT检查,部分患者行TB-DNA、TB-Ab、痰涂片检查,分析和比较ELISPOT的诊断价值。结果96例肺结核患者中92例ELISPOT阳性,76例肺炎患者中67例ELISPOT阴性,其灵敏度95.83%,特异度88.16%,阳性似然比7.44,阴性似然比0.05,阳性预测值91.09%,阴性预测值94.37%,约登指数0.84,Kappa值0.85。肺结核组与肺炎组患者的ELISPOT比较差异有统计学意义(P<0.05)。ELISPOT检查结果显示,确诊组阳性率为94.44%,临床诊断组阳性率为96.15%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ELISPOT灵敏度均高于TB-DNA、TB-Ab、痰涂片、胸部CT,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISPOT特异度与TB-DNA、TB-Ab比较差异无统计学意义(P>0.05),但高于胸部CT,低于痰涂片,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ELISPOT较高的灵敏度及特异度可以成为临床诊断活动性肺结核的有效工具,较高的阴性预测值对排除活动性肺结核有重要参考价值。     

不同抗原酶联免疫斑点检测技术对结核性胸膜炎辅助诊断价值的比较

目的 探讨结核分枝杆菌不同抗原的酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)对结核性胸膜炎的辅助诊断价值.方法 分离55例结核性胸膜炎患者和43例恶性胸腔积液患者的胸腔积液单个核细胞(PEMCs),经早期分泌抗原靶6 kD(ESAT-6)、培养滤液蛋白10 kD (CFP-10)、ESAT-6/CFP-10融合蛋白(E/C)...     

酶联免疫斑点试验诊断结核性胸膜炎的临床应用价值

目的 探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）诊断结核性胸膜炎的临床应用价值.方法 选择2011年8月～2012年8月武汉市医疗救治中心住院21例结核性胸膜炎患者（结核组）和18例肺癌胸膜转移患者（恶性肿瘤组）,利用ELISPOT法检测两组患者胸水对结核特异性抗原刺激产生反应,分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞的阳性率.结果 ELISPOT结果显示结核组胸水中T淋巴细胞检测阳性率为85.7％（18/21）,明显高于恶性肿瘤组[16.7％（3/18）],差异有统计学意义（P＜0.05）.ELISPOT的敏感性与特异性分别为85.7％、83.3％.结论 ELISPOT灵敏性和特异性较高,对于结核性胸膜炎具有一定的临床诊断价值.     

酶联免疫斑点试验对活动性结核病的诊断价值

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在活动性结核病中的辅助诊断价值。方法选取活动性结核病患者36例(结核病组)和非结核病患者(对照组)38例,收集受试者外周血单核细胞进行ELISPOT检测,同时对部分受试者进行结核菌素皮肤试验(TST)。结果结核病组中ELISPOT的灵敏度为91.7%(33/36),特异度为81.6%(31/38)。TST的灵敏度为48.1%(13/27),特异度为57.9%(22/38)。同时完成ELISPOT和TST检测的27例结核病患者中,ELISPOT阳性检出率为88.9%(24/27),明显高于TST检出率的48.1%(13/27,P=0.021);对照组中,ELISPOT阳性检出率为18.4%(7/38),明显低于TST检出率的42.1%(16/38,P<0.05)。结论 ELISPOT诊断活动性结核病的准确性较高,可作为结核病的辅助诊断方法。     

酶联免疫斑点试验法在青春期少儿活动性结核病诊断中的应用

目的:评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在青春期少儿活动性结核病诊断中的应用价值。方法:收集青春期活动性结核病患者52例,进行ELISPOT检测,并与病理检测、结核PCR、痰涂片、结核抗体检查结果相对比。结果:结核病患者中ELISPOT敏感性94.9%,而病理诊断、PCR、痰涂片、结核抗体检查的阳性率分别为61.1%、12.1%、19.1%、12.0%,显著高于其它辅助检查方法。结论:ELISPOT检查灵敏、快速,适宜作为青春期少儿结核病诊断的重要辅助工具。     

γ-干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义

目的 探讨γ-干扰素释放试验(IGRA)对患者感染结核分枝杆菌的临床诊断意义。 方法 分别对活动性结核组、非活动性结核组、隐性结核组和健康对照组研究对象进行痰涂片分析、结核抗体检测、结核菌素皮肤试验和IGRA试验,比较分析不同方法的阳性率并进行统计学分析。 结果 在活动性结核组中,IGRA的敏感性为88.64%,特异性为96.67%,与其它三种检测方法比较具有显著性差异,且痰涂片检测与IGRA试验比较分析显示,镜检阳性与阴性标本中IGRA的阳性率分别为94.44%和78.57%。在非活动性结核组和隐性结核组中IGRA的检出率分别为25.93%和6.67%。 结论 IGRA对结核分枝杆菌感染的诊断具有重要的临床应用价值,且对潜伏性结核感染具有一定的提示作用。     

肺泡灌洗液GeneXpert联合结核酶联免疫斑点试验、结核抗体对菌阴肺结核的诊断效能

目的 探究支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert MTB/RIF）联合外周血结核酶联免疫斑点试验（T-SPOT）及结核抗体（TB-Ab）对菌阴肺结核的诊断效能。方法 回顾性分析中国科学技术大学附属第一医院2019年1月至2021年1月收治临床诊断菌阴肺结核患者114例、非结核性肺部其他疾病患者80例以及菌阳肺结核患者22例的临床资料,分析3组患者外周血T-SPOT、TB-Ab及BALF GeneXpert检测结果,对比3种检测方法的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、假阴性率、假阳性率以及约登指数等指标,对比3种方法单独检测与联合检测对菌阴肺结核的阳性检出率的差异,并作受试者工作曲线（ROC）,计算出曲线下面积（AUC）。结果 BALF GeneXpert、外周血T-SPOT和TB-Ab检测的灵敏度分别为66.91%、80.88%、90.44%;特异度分别为98.75%、73.75%、41.25%;诊断符合率分别为78.70%、78.24%、72.22%,均高于70.00%;在菌阴肺结核组中,这3种方法单项检测在菌阴肺结核组阳性检出率分别为63.15%、79.82%、90.35%,与非结核肺部疾病组相比,差异均有统计学意义（P<0.01）;3种方法联合检测在菌阴肺结核组中阳性检出率为96.49%,明显高于TB-GeneXpert法和T-SPOT,差异均有统计学意义（χ²=37.283,P<0.01;χ²=13.612,P<0.01）;联合检测在菌阴肺结核中约登指数明显高于单项检测,联合检测AUC为0.977,明显高于单项检测。结论 BALF GeneXpert 联合外周血T-SPOT、TB-Ab可显著提高菌阴肺结核诊断率,为指导临床治疗提供有力依据。     

酶联免疫斑点试验对活动性结核病的诊断价值研究

目的:研究并分析检测外周血特异性结核分枝杆菌抗体对活动性结核病的诊断价值.方法:收集该院结核科就诊的患者共95例,将结核潜伏感染者作为对照组,将活动性结核病患者作为观察组,所有患者均接受酶联免疫斑点试验检测,将两组患者的检测结果进行观察和对比.结果:观察组患者的抗体阳性率明显高于对照组(P<0.05).结论:在活动性结核病患者的诊断过程中,酶联免疫斑点试验检测具有较高的敏感性,效果肯定,值得推广应用.     

γ-干扰素释放试验在肺外结核病诊断中的临床意义

目的:评价γ-干扰素释放试验T-SPOT.TB检测外周血结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素水平在肺外结核病诊断中的临床意义。方法:选取肺外结核患者(肺外结核组,30例)和健康人(健康对照组,31例)外周血单个核细胞(PBMC),利用结核分枝杆菌特异抗原ESAT-6和CFP-10与PBMC共同培养,采用ELISPOT检测培养液中IFN-γ浓度。比较T-SPOT.TB与TST及相关指标TB-AB、ESR、ADA等的结果。结果:T-SPOT.TB检测在肺外结核病中的敏感性是93.3%,高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组间TST阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在健康对照组中,T-SPOT.TB检测特异性(93.5%)高于TST(54.8%),结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。肺外结核组TB-AB,ESR,ADA水平高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:T-SPOT.TB检测法对肺外结核病诊断特异性高,优于TST试验,其联合TB-AB、ESR、ADA等对于肺外结核病的诊断意义更大。     

干扰素γ释放试验在诊断血液透析患者结核分枝杆菌感染中的价值

【摘要】 目的 对结核菌素皮肤试验与干扰素-γ释放试验检测血液透析患者结核分枝杆菌感染的方法进行比较,评价不同方法检测血液透析患者结核分枝杆菌感染的临床应用价值。方法 回顾性分析2015年9月~2016年9月200例在医院行血液透析的疑似结核感染患者,用结核菌素皮肤试验（TST）与干扰素-γ释放试验（IGRA）分别检测200例患者,分析比较两种方法诊断血液透析患者结核分枝杆菌感染的阳性率、敏感性、特异性、假阳性率、假阴性率及与卡介苗接种和既往结核感染的相关性。结果 两种试验方法阳性检出患者年龄、血液透析时间、有卡介苗疤痕人数、性别等均无统计学差异（P＞005）;IGRA试验检测阳性率显著高于TST试验（P＜005）;IGRA检出阳性率与卡介苗接种史、结核病史均相关（P＜005）,TST检出阳性率与卡介苗接种史具有相关性（P＜005）,但与结核病史不相关（P＞005）。IGRA敏感性、特异性、假阳性率、假阴性率均优于TST。结论 相较于结核菌素皮肤试验,干扰素-γ释放试验检测血液透析患者结核分枝杆菌感染检出阳性率、敏感性、特异性高,假阳性、假阴性率低,可在临床推广应用。     

酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值

目的 比较酶联免疫斑点检测(ELISPOT)和结核菌素试验(TST),探讨ELISPOT在初治肺结核中的辅助诊断价值.方法 选取初治肺结核123例和非结核疾病病例102例作为结核组和对照组,应用6 kD早期分泌靶向抗原/10 kD培养滤过蛋白融合蛋白(ESAT-6/CFP-10)作为抗原对受试者外周血单个核细胞进行ELISPOT(即ESAT-6/CFP-10-ELISPOT),检测斑点形成细胞(SFCs)的数量;同时对受试者行TST.结果 结核组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成的SFCs数显著高于对照组(P=0.000).结核组中ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度91.1%(111/123)、特异度80.4%(82/102)、阳性似然比4.60、阴性似然比0.12、阳性预测值0.85、阴性预测值0.87,TST的敏感度65.6%(59/90)、特异度45.1%(46/102)、阳性似然比1.31、阴性似然比0.76、阳性预测值0.51、阴性预测值0.60.ESAT-6/CFP-10-ELLS-POT的敏感度和特异度显著高于TST(均P=0.000).菌阳肺结核组和菌阴肺结核组间ESAT-6/CFP-10-ELLSPOT形成SFCs数量差异无显著性(P=0.166),两组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度分别为91.8%(67/73)和88.0%(44/50),二者比较差异无显著性(P=0.448).结论 ESAT-6/CFP-10-ELISPOT有可能作为辅助诊断初治肺结核的较为准确方法,并为菌阴肺结核提供一定的诊断依据,但诊断的特异度可能受结核潜伏感染影响.TST对初治肺结核的诊断价值较小.     

结核感染T细胞斑点试验在结核性胸膜炎中的诊断价值

结核性胸膜炎是结核菌由近胸膜的原发病灶直接侵入胸膜,或经淋巴管血行播散至胸膜而引起的渗出性炎症.结核性胸膜炎是内科常见的疾病,其诊断可根据临床表现、胸水常规生化、胸水腺苷脱氨酶(ADA)、胸水抗酸杆菌涂片或胸水结核菌培养、胸水TB-DNA及T-SPOT.TB检测.笔者对患者采用T-SPOT.TB检测、胸水TB-DNA、